白细胞介素-17的表达与狼疮肾炎关系初探

目的　了解狼疮肾炎 (LN)病人白细胞介素 17(IL 17)在血浆、尿液及肾组织中表达水平与LN发病相关性。方法　建立正常对照、活动期和非活动期LN组 ,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定其血浆和尿液IL 17水平 ;制备正常对照、WHOⅣ型和非Ⅳ型肾组织标本 ,采用微波免疫组织化学染色法 ,光镜观察IL 17在肾组织中的表达。结果　血浆IL 17均测不出 (<5 pg/ml) ;尿液IL 17水平 ,活动期LN病人 (2 9± 5 ) pg/ml较正常对照 (3 3± 0 8)pg/ml和非活动期LN病人(9 6± 0 9) pg/ml明显升高 (P <0 0 0 1) ,且非活动期LN病人较正常对照亦明显升高 (P <0 0 0 1) ;免疫组织化学显示 ,WHOⅣ型LN较非Ⅳ型和正常对照组 ,单位肾小球细胞数 [(117± 31) / gcs(肾小球横向联合切面 )较 (4 3± 8) /gcs和 (34± 7) / gcs]明显升高 (P <0 0 1) ,单位肾小球IL 17+ 细胞数(Ng) [(33± 8) /gcs较 (8 2± 1 6 ) / gcs和 0 ]明显增多 (P <0 0 1) ,每平方毫米肾小管、间质IL 17+ 细胞数 (Nt) [(2 9± 9) /mm2 较 (8 8± 1 5 ) /mm2 和 0 ]亦明显增多 (P <0 0 1)。相关分析显示Ng与肾小球细胞增多、肾组织活动指数、尿蛋白、尿N 乙酰 β 氨基葡萄糖苷酶 (NAG)、血肌酐及尿IL 17亦呈正相关 ;Nt与肾组织活动指数、肾小管间质损害程度、尿     

白细胞介素-17在系统性硬化病小鼠模型中的表达及与转化生长因子-β1的相关性

目的 研究白细胞介素(IL)-17在系统性硬化病(SSc)小鼠模型中的表达、意义及与转化生长因子(TGF)-β1的相关性.方法 30只雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组:对照组、博莱霉素注射4周(模型组1)和模型组1停止注射博莱霉素4周(模型组2).观察小鼠皮肤、肺部的炎症和胶原沉积的情况,荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测小鼠皮肤和肺部维甲酸相关孤核受体(RORγt)、IL-17A、TGF-β1mRNA的表达,酶联免疫吸附法检测血清和支气管肺泡灌洗(BALF)中IL-17、TGF-β1水平,采用方差分析进行统计分析.结果 ①模型组小鼠皮肤和肺部明显炎症细胞浸润,胶原纤维增生,皮肤炎症评分和肺部纤维化评分模型组1(2.5±0.8和3.0±1.8),模型组2(2.4±0.8和3.1±1.2)比对照组(0.9±0.7和0.9±1.0)明显增加,模型组皮肤和肺羟脯氨酸的含量较对照组明显增多(F值分别12.19,8.367,25.11,4.641;P均＜0.05).②与对照组比较,模型组1皮肤和肺部IL-17A mRNA(21±8和20±9)、RORγt mRNA(20±9和19±9)、TGF-β1mRNA(23±6和21±7)的表达量明显增高,模型组1外周血及BALF中IL-17含量明显增高,TGF-β1在BALF中含量增加,但在外周血中的含量明显减少,P均＜0.05.③IL-17A mRNA在皮肤的表达量与皮肤TGF-β1mRNA的表达量、皮肤炎症评分、皮肤羟脯氨酸的含量呈正相关(r值分别为0.514、0.555、0.632,均P＜0.01);IL-17A mRNA在肺部的表达量与肺部TGF-β1mRNA的表达量、肺部纤维化评分呈正相关(r值分别为0.620和0.437、P＜0.05);血清IL-17的含量与皮肤和肺羟脯氨酸的含量呈正相关(P＜0.05).结论 IL-17参与SSc全身免疫炎症及局部皮肤、肺部的纤维化病变,可能与TGF-β1有一定的联系,共同作用于SSc皮肤及肺部的纤维化病变.     

转化生长因子-β与狼疮肾炎

1978年，Deleno和Todaeo在被mohmey肿瘤病毒转化的小鼠3T3细胞培养上清液中发现一种称为肉瘤生因子(sarcoma growth factor，SGF)的多肽，后来在其他肿瘤细胞的酸乙醇提取液中也发现有同样的活性物，更名为转化生长因子(transforming growth factor，TGF)。该生长因子有α、β两种类型。目前对TGF-β的研究较多，它是一大类多效能细胞因     

狼疮肾炎患者肾组织白细胞介素-18表达的研究

目的　初步探讨白细胞介素 18(IL 18)在人类狼疮肾炎 (LN)肾组织炎症损伤中的作用。方法　应用免疫组织化学和原位杂交技术观察 6例正常肾组织和 18例LN患者肾组织IL 18的蛋白和基因表达量 ,并用酶联免疫吸附测定 (ELISA)法对该组患者尿IL 18水平进行检测。结果　正常肾组织有弱的IL 18mRNA及蛋白表达 ;LN患者肾组织IL 18mRNA及蛋白表达量均较正常肾组织显著增高 (IL 18mRNA :8 9± 3 4比 2 2± 0 6 ;IL 18蛋白 :8 8± 3 7比 1 4± 0 4 ) ,而且WHOⅣ型LN患者肾组织IL 18表达量显著高于非WHOⅣ型LN患者 (IL 18mRNA :10 8± 3 2比6 6± 1 7;IL 18蛋白 :11 2± 2 7比 5 6± 2 0 ) ;Spearman相关分析提示肾组织IL 18蛋白表达量与狼疮肾炎肾组织活动指数 (AI)、尿IL 18水平及肾组织损伤程度均呈正相关 (P均 <0 0 5 )。结论　肾内IL 18表达上调参与LN肾组织炎症损伤过程 ,尿IL 18水平可能作为衡量LN肾组织炎症活动程度的评估指标。     

狼疮肾炎患者外周血淋巴细胞凋亡调控因子和血清尿白细胞介素-8的变化

目的探讨外周血淋巴细胞(PBL)凋亡调控因子和白细胞介素-8(IL-8)在活动性狼疮肾炎(LN)患者中的作用及其临床意义。方法对36例活动性LN患者PBL细胞凋亡调控因子Fas抗原、Fas配体、bcl-2和IL-8进行检测分析,并以15名正常自愿者为对照。Fas、FasL、bcl-2的表达水平运用免疫组织化学法测定。血清、尿IL-8用放射免疫法检测。结果活动性LN患者Fas、FasL、bcl-2表达均显著高于正常人(P<0.001),Fas、FasL表达与临床活动指数呈正相关(r=0.473、P<0.005;r=0.493,P<0.05),bcl-2表达与临床活动指数无显著相关性(r=0.063,P>0.05);血清、尿IL-8水平明显低于正常组(P<0.01),但与临床活动指数无关(r=0.038,P>0.05;(r=0.272,P>0.05),与Fas、FasL、bcl-2无明显相关关系。结论Fas、FasL、bcl-2的表达升高导致外周血淋巴细胞凋亡异常,可能为系统性红斑狼疮(SLE)、LN发病机制之一,PBL中Fas、FasL表达水平可作为病情活动的指标;血、尿IL-8水平低下,可能与免疫功能紊乱有关,有待进一步研究。     

环磷酰胺和激素对重症狼疮肾炎血及尿白细胞介素-8的影响

目的探讨血、尿白细胞介素-8(IL-8)在重症狼疮肾炎(LN)发病中的作用及环磷酰胺(CTX)和激素治疗对血、尿IL-8的影响。方法对23例重症LN患者用CTX和激素治疗前后采用ELISA夹心法检测血、尿IL-8水平。结果治疗前血、尿IL-8水平明显高于健康对照组(P<0.01),血、尿IL-8水平与SLE活动指数(SLEDAl)和肾脏病理活动性指数(AI)呈显著正相关(n=23,r=0.690和0.700,P<0.01)。治疗后,血、尿IL-8水平比治疗前显著降低(P<0.01),与健康对照组比效差异无统计学意义(P>0.05)。结论CTX、糖皮质激素可能通过抑制IL-8产生,从而减轻免疫炎症损害。动态观测LN患者血、尿中IL-8水平,有助于了解LN活动性病变的情况和肾脏损害程度、治疗效果及为判断预后提供依据。     

狼疮样肾炎鼠白细胞介素-17的表达及其作用研究初探

目的　了解狼疮样肾炎鼠白细胞介素 17(IL 17)的表达及其作用。方法　建立一种狼疮样肾炎动物模型即鼠慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)模型 ,用放射免疫法测定尿白蛋白水平 ;用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法测定血、尿IL 17水平 ;用免疫组织化学方法检测IL 17蛋白在肾组织的表达 ;用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)分析肾组织IL 17mRNA的表达。结果　模型鼠组较对照鼠组血IL 17水平不高 ,尿IL 17水平明显升高 [(2 2± 6 7) pg/ml比 (3 1± 2 1)pg/ml];肾小球毛细血管襻、部分系膜细胞、肾小管和间质浸润的单个核细胞均有IL 17蛋白表达 ;肾组织IL 17mRNA水平明显升高 (0 34± 0 15比 0 ) ,且肾组织IL 17+ 细胞数明显增多 [Ng :(2 5± 8)cell/gcs比 0 ;Nt:(2 3± 8)cell/mm2 比 0 ];模型鼠肾组织中IL 17+ 细胞数与尿白蛋白和尿IL 17水平呈明显正相关。结论　IL 17在狼疮样肾炎鼠肾组织表达明显增加 ,并在其发病中可能起重要作用。     

间充质干细胞对狼疮肾炎T淋巴细胞的免疫调节作用

目的 探讨间充质干细胞(MSCs)在体外对狼疮肾炎(LN)外周血T淋巴细胞的免疫调节作用.方法 从人骨髓中分离培养MSCs,采用流式细胞仪(FCM)分析鉴定MSCs的纯度.在植物血凝素(PHA)刺激下,LN外周血T淋巴细胞与不同数量的MSCs共培养.分组:A组:T淋巴细胞;B组:MSCsI+T淋巴细胞(MSCsl:T=1:5);C组:MSCs2+T淋巴细胞(MSCs2:T=1:20);D组:MSCs3+T淋巴细胞(MSCs3:T=1:100).用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组T淋巴细胞的增殖情况,FCM分析各组T淋巴细胞CD28和CD152的表达及T淋巴细胞调亡情况,实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组T淋巴细胞的干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β1基因的水平.结果 在体外,MSCs对由PHA诱导的LNT淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用,且抑制作用与MSCs呈剂量依赖性.MSCs抑制T淋巴细胞CD28表达,对CD152的表达无明显影响.MSCs能促进LN患者T淋巴细胞TGF-β1基因的表达,抑制IL-10、IFN-γ基因的表达.结论 MSCs可能通过抑制T淋巴细胞增殖、减少T淋巴细胞凋亡、抑制T淋巴细胞CD28表达和促进T淋巴细胞TGF-β1,基因表达及抑制IL-10、IFN-γ基因表达来下调LN的免疫反应.     

吸烟对肺癌患者血清转化生长因子-β、白细胞介素-6水平及肺功能的影响

目的探讨肺癌患者血清转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-6水平及肺功能的影响。方法该院收治的肺癌患者170例,根据是否吸烟分为吸烟组和对照组,每组85例,应用酶联免疫吸附法检测两组患者血清TGF-β和IL-6水平,并比较两组肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、最大呼气中期流量(MMEF)以及用力呼气50%肺活量(FEF50%)。结果吸烟组患者血清TGF-β水平显著高于对照组(P<0.05),而两组IL-6水平比较无统计学意义(P>0.05);吸烟组FVC、FEV1、MMEF以及FEF50%均显著低于对照组(P<0.05)。结论吸烟的肺癌患者血清TGF-β水平明显高于非吸烟患者,且患者的肺功能明显降低,但其对患者血清IL-6水平则无明显影响。     

非重型再生障碍性贫血患者Th17/Treg比例及相关细胞因子白细胞介素-6、-17和转化生长因子β1水平的临床意义

目的 探讨非重型再生障碍性贫血（NSAA）患者外周血的Th17和调节性T（Treg）细胞比例异常变化及其与白细胞介素（IL）-6、IL-17、转化生长因子（TGF）-β1水平的相关性.方法 根据诊断标准收集NSAA患者78例,应用流式细胞术（FCM）检测其外周血Th17和Treg细胞比例,用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测IL-6、IL-17和TGF-β1水平,选取20例健康者为对照组,并比较其差异及其相关性.结果 NSAA患者的Th17细胞比例高于对照组（P＜0.01）,Treg细胞比例低于对照组（P＜0.01）,Th17/Treg比例明显高于对照组（P＜0.01）.NSAA组IL-6水平明显高于对照组（P＜0.01）,NSAA组IL-17水平与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）,NSAA组TGF-β1水平较对照组明显降低（P＜0.05）.Treg与Th17细胞无相关,Th17与IL-17水平有相关性.结论 Th17/Treg异常与非重型再生障碍性贫血发病有关.相关细胞因子TGF-β1、IL-6与Th17与Treg细胞比例的变化有关,可能是导致NSAA发生及发展的重要因素.     

Expression of T helper 17 cells and interleukin 17 in lupus nephritis patients

Background

Modern data suggest that interleukin 17 (Il-17) and Il-17 producing cells play an important role in the pathogenesis of lupus nephritis (LN). It was reported that T helper 17 migrate to the kidney and contribute to inflammatory processes.

狼疮性肾炎患者白细胞介素-13的表达及其临床意义

目的 探讨狼疮性肾炎(LN)患者血浆及肾组织白细胞介素-13(IL-13)的表达及其临床意义。方法 采用ELISA法检测血浆IL-13水平，采用免疫组化ABC法检测肾组织IL-13的表达。结果 LN患者血浆IL-13水平、肾小球及肾小管间质区IL-13表达较对照组和非LN肾脏病对照组增高，以Ⅳ型LN患者肾小球区IL-13表达最高，而不同病理类型的LN肾小管间质区IL-13表达无显著性差异。LN患者血浆及肾小管间质区IL-13表达与Ccr和血清C3呈负相关，与肾小管间质病变活动指数和肾小球病变活动指数呈正相关。结论 IL-13参与LN的分子病理机制，血浆及肾组织IL-13水平可能有助于判断狼疮活动程度。     

转化生长因子βⅡ型受体在狼疮肾炎患者外周血单个核细胞表达的意义

目的 探讨狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMCs)转化生长因子βⅡ型受体(TβR Ⅱ) mRNA表达水平及其与疾病活动性的关系.方法 应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测44=例LN患者(均为活动期患者)、21例其他非LN患者和40名健康对照组PBMCs中TβRⅡ mRNA的表达水平,LN患者中未使用与使用激素和(或)免疫抑制剂患者分别为16例和28例.结果 LN患者PBMC中T13R H mRNA水平1.7±1.0显著低于非LN组4.0±3.1及健康对照组4.1±2.5(P<0.01);LN患者中未使用激素和(或)免疫抑制剂组T13R H mRNA的表达水平1.3±1.0低于用药组2.0+0.9(P<0.05);LN患者PBMCs中的T13RII mRNA表达水平与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评分标准(r-0.309,P<0.05)及抗双链DNA抗体(r-0.401,P<0.01)呈显著负相关,与补体C3呈显著正相关(r=0.621,P<0.01).结论 LN患者PBMCs中的TβRⅡmRNA表达水平降低,TβRⅡ参与了LN的发病过程,并与疾病的活动性显著相关;应用激素和(或)免疫抑制剂可以提高TTβRⅡ mRNA的表达,减轻炎症损害.     

系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞Foxp3的表达和转化生长因子-β1水平与病情的相关性

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性T淋巴细胞Foxp3 mRNA和转化生长因子(TGF)-β1的水平与SLE病情活动的关系.方法 对SLE患者采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测外周血单个核细胞Foxp3 mRNA的表达.对病情活动组患者进行随访,在疾病稳定期再次检测Foxp3 mRNA水平并用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测疾病缓解前后血浆TGF-β1的浓度.结果 病情活动组Foxp3 mRNA水平明显低于非活动组(P<0.01)和健康对照组(P<0.01).在疾病稳定期Foxp3 mRNA水平和血浆TGF-β1浓度较活动期明显升高.结论 Foxp3表达及TGF-β1浓度与SLE疾病活动呈负相关,提示调节性T淋巴细胞在SLE发病中有重要作用.     

肥大细胞与狼疮肾炎肾间质纤维化关系的初步探讨

目的初步探讨狼疮肾炎(LN)患者肾间质中肥大细胞(MCs)与肾间质纤维化之间的关系。方法随机选取Ⅲ、Ⅳ、V型LN患者各10例作为研究对象,微小病变病(MCD)患者11例作为对照组。采用免疫组织化学、免疫荧光双重染色方法观察肾组织中类胰蛋白酶(Try)染色阳性MCs、蛋白酶活化受体-2(PAR-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及I型胶原(Col I)表达的变化。结果 3个LN组肾间质MCs数量、肾小管上皮细胞PAR-2和TGF-β1及肾间质Col I表达面积均较MCD对照组明显升高,其中Ⅳ型LN组上述4项指标增加最明显,Ⅲ型LN组次之。MCs数量与肾小管上皮细胞PAR-2、TGF-β1及肾间质Col I阳性染色面积呈显著正相关;肾小管上皮细胞PAR-2与TGF-β1阳性染色面积间呈显著正相关;MCs数量与肾间质PAR-2和TGF-β1阳性染色细胞数量分别呈显著正相关;PAR-2阳性染色细胞数量和TGF-β1阳性染色细胞数量间也呈显著正相关;肾间质中Try阳性染色细胞与PAR-2或TGF-β1 阳性染色细胞存在部分重叠。结论 MCs可能参与LN肾间质细胞外基质蓄积,推测可能与释放Try、活化PAR-2、增加TGF-β1表达相关。     

系统性红斑狼疮患者外周血白细胞介素-17与辅助T细胞17的检测及其意义

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞介素(IL)-17蛋白和mRNA水平、辅助T细胞(Th17)细胞表达比例,探讨其临床意义.方法 用酶联免疫吸附试验检测SLE患者及对照者血浆中IL-17的蛋白水平;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测2组外周血中IL-17 mRNA表达水平;运用流式细胞术检测SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞比例,进一步分析IL-17/Th17细胞与SLE临床实验室指标的相关性.计量资料组间比较采用t检验,相关性分析采用Spearman秩和相关分析.结果 SLE组患者血浆IL-17含量明显高于健康对照组,SLE组患者外周血IL-17 mRNA表达水平[(28.3±11.7)×10-5]高于对照组[(9.8±2.2)×10-5](P均＜0.01).SLE患者PBMCs中Th17细胞比例(2.5±1.5)%及IL-17荧光强度(1937±1022)显著高于对照组[(1.5±0.7)%,(1245±413)],且SLE活动期患者Th17细胞百分比高于非活动组,SLE肾病组Th17细胞比例较无肾病组明显升高(P均＜0.05).SLE患者血浆IL-17水平、Th17细胞数与SLE疾病活动性指数(SLEDAI)呈正相关(r=0.681,P＜0.01;r=0.426,P=0.034).结论 SLE患者体内IL-17蛋白分泌及基因表达水平存在明显异常,外周血Th17细胞比例亦显著升高,且与疾病活动性有明显相关,提示IL-17/Th17细胞可能在SLE发病中起着重要作用.     

转化生长因子β1-509C／T基因多态性与大肠癌的关系

目的研究转化生长因子β1（TGF—β1）基因-509位点C／T的多态性,并探讨其与大肠癌易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,检测70例大肠癌组和102例对照组TGF—β1基因-509位点C／T等位基因及基因型分布,并对该基因多态性与大肠癌临床病理特征之间的关系进行分析。同时采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大肠癌组和对照组血清TGF—β1水平。结果TGF—β1等位基因频率及基因型频率在大肠癌组和对照组的总体分布比较无显著性差异。大肠癌组按Dukes分期后,发现DukesC＋D期大肠癌患者-509CT／TT基因型频率明显高于DukesA＋B期患者（64．9％比39．4％,P=0．033,OR=2．840,95％CI：1．075～7．501）。DukesC＋D期大肠癌患者与DukesA＋B期相比,-509T等位基因频率有增高趋势（41．9％比27．3％,P=0．07,OR=1．922,95％CI：0．943～3．917）,但差异无显著性。大肠癌患者血清TGF—β1水平显著高于对照组。结论TGF—β1-509位点基因多态性与大肠癌无关,可能与大肠癌临床分期有关。