非那西丁和对乙酰氨基酚浓度评估肝脏储备功能

目的对非那西丁和对乙酰氨基酚浓度分析进行方法学研究,并进行应用性验证,以评估肝脏储备功能。方法建立高效液相色谱法(HPLC)测定非那西丁与对乙酰氨基酚浓度,进行标准曲线建立、精密度试验及方法回收率试验,并用健康人血浆进行应用性验证。结果非那西丁与对乙酰氨基酚在浓度为0.8~40.0μg/mL的范围内均呈现良好的线性关系。在5、15、25μg/mL样品浓度下,非那西丁测定的日内精密度分别为0.84%、1.09%和0.53%,日间精密度分别为1.51%、1.10%和1.38%;对乙酰氨基酚测定的日内精密度分别为0.76%、0.89%和0.67%,日间精密度分别为1.02%、1.46%和1.21%,在浓度为1~20μg/mL浓度范围内,利用所建立的分光光度技术测定,相对标准差(RSD)小于10%,当浓度超过5μg/mL,RSD5%。结论 HPLC简便快捷、灵敏度和准确度高,为评估肝脏储备功能提供了一种快捷、准确的方法。     

氯吡格雷及其羧酸代谢物高效液相色谱-串联质谱法快速检测

目的建立高效液相色谱-串联质谱法快速定量检测人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物的方法。方法氯吡格雷样本用乙腈沉淀蛋白后,选用Eclipse XDB-C18柱(150.0 mm×4.6 mm×5.0μm),以乙腈-1mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱。氯吡格雷羧酸代谢物样本用乙腈沉淀蛋白后,选用Kromasil-C18色谱柱(50.0mm×4.6mm×5.0μm),以乙腈-1 mmol/L乙酸铵溶液(60∶40v/v)为流动相等度洗脱。选用3200QTrap型液相色谱-串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。结果氯吡格雷线性范围为:0.01~5.00ng/mL,定量下限为0.01ng/mL。氯吡格雷羧酸代谢物线性范围为:10.0~5 000ng/mL,定量下限为10.0ng/mL。准确度与精密度结果显示方法日间、日内变异系数均小于15%,相对偏差-2.00%~2.65%,稳定性较好。结论本研究建立了快速、灵敏、专属性强、重复性好的方法,适用于临床药代动力学和生物等效性研究。     

HPLC法测定杯苋甾酮的血药浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定杯苋甾酮在家兔血浆中的药物浓度。方法血浆样品用乙腈提取,流动相为乙腈20g、水80g、磷酸二氢钠1.20g,流速1mL/min,检测波长243nm。结果家兔口服给药后血浆中可检出杯苋甾酮,杯苋甾酮在0.565～9.040μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9990(n=5),日内RSD为±3.9%,日间RSD为±7.3%;血浆最低检测浓度为0.28μg/mL。结论本法快速、准确、重现性好,为该药物的药代动力学研究提供依据。     

肠镜检查不同剂量芬太尼对靶控异丙酚半数有效血浆靶浓度的影响

目的:测定行无痛纤维肠镜检查术患者在不同剂量的芬太尼复合下靶控输注异丙酚的半数有效血浆靶浓度(EC50)。方法:行无痛纤维结肠镜检查术患者64例,分为F1、F2两组,每组各32例。于检查前缓慢推注芬太尼,F1组剂量为 0.6μg/kg,F2组为1μg/kg。患者按序贯法进行试验,异丙酚初始血浆靶浓度设为3.5μg/mL,根据上一个患者体动情况,下一患者血浆靶浓度进行增减的调整,变化幅度为0.5μg/mL。计算两组病例异丙酚EC50及其95%的可信区间。结果:复合0.6μg/kg芬太尼时无痛纤维结肠镜检查术患者靶控输注异丙酚的EC50为(3.89±0.16)μg/mL,95%的可信区间为3.58～4.20μg/mL;复合1μg/kg芬太尼时异丙酚的EC50为(3.75±0.11)μg/mL,95%的可信区间为3.52～3.97μg/mL。结论:靶控输注异丙酚复合0.6μg/kg芬太尼用于纤维结肠镜检查术安全有效,其EC50为(3.89±0.16)μg/mL。     

同位素内标-液相色谱-串联质谱法测定动物性食品中氟虫腈及其代谢物残留

采用通过式固相萃取技术,建立动物性食品中氟虫腈及其代谢物的同位素内标-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的检测方法。样品采用含1%(体积分数)甲酸的乙腈提取,加入同位素内标,PRiME HLB柱净化,以BEH C18为分离柱,用甲醇-1 mmoL乙酸铵(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,在负离子多反应监测模式下内标法定量。结果表明氟虫腈及其及其代谢物在0.05～20μg/L浓度范围内线性呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999,方法的检出限和定量限分别为0.2μg/Kg和0.7μg/Kg。在鸡蛋和鸡肉中氟虫腈及其代谢物的回收率为3.3%～7.8%,相对标准偏差(RSD)为3.3%～7.8%。该方法快速、灵敏度高、准确度好,有效消除基质效应,适合动物性食品中氟虫腈及其代谢物的同时检测。     

一种简便快速的液相色谱串联质谱法用于人体内血尿样品中奈诺沙星浓度的测定

目的建立一种简便快速高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)的方法用于测定人血浆和尿液中奈诺沙星药物浓度。方法色谱柱为Waters Symmetry RP1 8柱(50mm×2.1 mmm,5μm),以加替沙星为内标,血浆和尿液样品测定采用0.1%甲酸乙腈混合溶液为流动相,比例分别为82:1 8和85:1 5,流速均为0.2 mL/min。采用蛋白沉淀法处理血浆样品,以液液萃取法清除尿液样品中杂质。ESI源正离子选择性反应临测(SRM),奈诺沙星检测通道:m/z 372.4→m/z354.1,内标检测通道:m/z376.1→m/z 332.2。结果本方法测定血浆和尿液中的奈诺沙星的线性范围均为5～100ng/mL,最低检测浓度均为5ng/mL血浆和尿液的奈诺沙星提取回收率分别为(98.49±4.69)%和(84.92±6.81)%,且血浆和尿液的RSD)分别小于或等于4.31%和9.76%。奈诺沙星血浆样品的方法日内、日间准确度分别为(99.27～103.75)%和(100.40～106.36)%;而尿液样品的方法日内、日间准确度依次为(103.52～11 5.94)%和(9 9.50～1 10.96)%,且基质效应、精密度、稳定性等均通过方法学验证。并已用于该药的人体药动学研究中药物浓度的测定。结论本方法操作简便、迅速,特异性强,灵敏度高,准确性好,符合奈诺沙星人体药物动力学研究中血尿样测定的方法学要求。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度

目的采用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度。方法血浆样品用乙腈(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后用二氯甲烷反洗后进行分析。使用Agilent C8(75 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱。流动相:A泵:5 mmol/L醋酸铵(三乙胺调pH值至7.5),B泵:乙腈。线性梯度洗脱,流速0.4 mL/min。采用电喷雾离子源,多反应离子监测。用于定量分析的离子对二甲双胍为130.2/71.1,内标吗啉胍为172.2/60.2。结果线性范围为50～2 000 ng/mL,最低定量限为50 ng/mL,预处理回收率为81.7%～98.0%,二甲双胍的基质效应<9.97%,日内和日间相对标准偏差均<5.2%。结论液相色谱-串联质谱法快速、简便、灵敏度高,是一种适用于人血浆中药物浓度的测定及药物动力学和生物利用度研究的方法。     

高效液相色谱法测定人血浆中阿托伐他汀的浓度

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定人血浆中阿托伐他汀浓度。方法色谱柱:Aglient Eclipse HPLC色谱柱(150×4. 6 mm,5μm);流动相:乙腈:0. 02 mol/L醋酸铵缓冲溶液(冰醋酸调至p H=5. 2)=40:60;流速:1 ml/min。结果按上述色谱条件,阿托伐他汀保留时间为7. 5 min,专一性好,且基线无干扰。阿托伐他汀在0. 41～14. 45μg/ml范围内线性关系良好(R2=0. 9993)。以0. 64、3. 03、12. 89μg/ml为阿托伐他汀低、中、高浓度的血浆质控样品,日内和日间RSD均小于8%,相对提取回收率大于89%,且稳定性良好。结论该方法专一性强,简便快捷,适用于阿托伐他汀在特殊人群体内药代动力学及其相关性研究。     

HPLC法测定人血中阿莫西林的方法学研究

目的 建立一种实用的HPLC法用于人血中阿莫西林含量测定.方法 采用含1%磷酸的甲醇溶液沉淀蛋白,高效液相色谱法测定.以替硝唑为内标,色谱柱为Waters XBridge C18,150 mm×4.6 mm,waters保护柱;流动相为:甲醇:0.01 mol/L磷酸二氢钾(pH2.3)=16:84,流速为1.0 mL/min,柱温30 ℃,检测波长为225 nm.结果 血浆内源性物质对样品测定没有干扰.阿莫西林的线性范围为0.25～32.0 μg/mL(r=0.999 9).阿莫西林以及替硝唑各浓度点的稳定性实验的RSD均小于15%.结论 该方法样品处理简便,结果准确,灵敏度较高,可用于人血浆中阿莫西林含量的测定以及阿莫西林药代动力学研究.     

高效液相色谱法测定人血浆中加替沙星浓度

目的:建立HPLC法测定人血浆中加替沙星浓度的方法。方法:采用噻克硝唑为内标,色谱柱为Polaris C18-A柱(150*4.6mm),流动相为乙腈:0.05M的枸缘酸溶液(22:78),流速1.0ml/min,检测波长为295nm。结果:加替沙星血清浓度在0.015～6.48μg·ml-1范内具有良好线性关系,最低定量限为0.015μg·ml-1,方法回收率为99.1%～101.0%,日内、日间RSD均<7%。结论:本法简便、准确、灵敏,适用于加替沙星血药浓度监测及人体药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定空白血浆中伪麻黄碱的含量

背景:盐酸伪麻黄碱的测定方法有滴定法、分光光度法、气相色谱法、毛细管电泳法、高效液相色谱法和液质联用等方法,选取合适的方法检测药物在血液中的浓度对指导临床合理、安全用药具有十分重要的意义。目的:建立反相高效液相色谱法测定空白血浆中伪麻黄碱含量的方法。设计:单一样本实验。单位:武汉大学人民医院药学部。材料:实验于2005-05/07在武汉大学人民医院药学部实验室完成。盐酸伪麻黄碱标准品(湖北省药检所提供);空白血浆(孝感市中心血站提供)。方法:准确配制含盐酸伪麻黄碱浓度为50,100,200,500,750,1000μg/L的系列标准血浆样品,采用有机溶剂萃取血浆中的伪麻黄碱,并用高效液相的方法测定其含量。采用ZorbaxSB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:0.2%磷酸溶液-乙腈(95∶5),流速:1.0mL/min,检测波长为194nm。主要观察指标:通过制备标准曲线、精密度和回收率评价方法的准确性和可行性。结果:线性范围50～1000μg/L(r=0.9993),平均回收率79.20%。日内、日间RSD<5%,限按信噪比为2计算,盐酸伪麻黄碱的最低检测为25μg/L。结论:反相高效液相的方法简便、准确,适用于伪麻黄碱药代动力学和生物等效性研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中丙戊酸的浓度

目的建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定人血浆中丙戊酸的浓度。方法采用乙腈沉淀蛋白法处理人血浆样本,选用Shimpack VP-ODS色谱柱(150mm×2.0mm I.D,5μm),以甲醇:5mmol/L乙酸铵(55∶45,v/v)为流动相,流速为0.4mL/min,采用API3200型三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,电喷雾离子化源,负离子方式,选择监测离子反应分别为m/z 142.9→m/z 142.9(丙戊酸)和m/z 179.0→m/z 179.0(1-庚烷磺酸)。结果丙戊酸和内标1-庚烷磺酸的保留时间分别为3.03、2.38min;血浆中丙戊酸的线性范围为0.800~80.0μg/mL(r0.99),定量下限为0.800μg/mL;批内、批间精密度(RSD)均小于15%;准确度(RE)均在±15%的范围以内;平均提取回收率为(84.1±2.4)%;平均基质效应因子为(104.3±2.0)%。稳定性试验中,在各种贮存条件下的血浆中,丙戊酸均较稳定。结论该方法适用于人血浆中丙戊酸浓度的测定及丙戊酸半钠缓释片的人体药代动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法检测人血浆中碘帕醇

目的建立一种稳定的检测人血浆碘帕醇的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),并对该方法进行性能评价。方法以氘代同位素作为内标,人血浆样品经直接沉淀法前处理后进样,用XSelect^TM HSS PFP色谱柱进行分离,用含0.1%甲酸-5mmol/L九氟戊酸-10%乙腈的水溶液等度洗脱;正离子电喷雾离子化扫描检测,多反应监测(MRM)扫描分析,建立检测血浆碘帕醇的LC-MS/MS方法。根据CLSI EP10-A和CLSI C62-A,评价该方法的线性范围、正确度、精密度、选择性、基质效应、稳定性。结果 LC-MS/MS检测血浆碘帕醇的线性范围为1～1 000μgI/mL(以含碘量计算);低、中、高浓度(3、50、800μgI/mL)血浆质控品检测结果与理论靶值的偏移为-6.1%～7.5%,重复性以不精密度表示,CV<6.6%(4.6%～6.6%),期间精密度CV<8.5%(6.6%～8.5%),方法回收率为92.5%～95.9%,基质效应为88.8%～95.2%;方法选择性良好,溶血和脂血因素均不影响检测结果。血浆样品在室温下放置最好不要超过48 h,在-80℃下反复冻融不超过2次,经前处理后的血浆样品4℃自动进样器中放置不超过72 h,碘帕醇可稳定检测。结论建立并评价了一种可靠的检测人血浆碘帕醇的LC-MS/MS方法。     

湖南地区孕晚期女性血浆D-二聚体参考区间的建立

[目的]建立湖南地区孕晚期女性血浆D-二聚体的参考区间.[方法]选取2014年1月至2016年3月在湖南省妇幼保健院做产前检查的678例单胎晚孕孕妇、418例双胎/多胎晚孕孕妇为研究对象,以同期208例健康非孕妇女为对照,采用全自动生化分析仪使用免疫比浊法测定其D-二聚体浓度.[结果]晚孕孕妇血浆D-二聚体含量明显高于非孕妇女(P<0.05),且双胎/多胎组显著高于同期单胎组(P<0.05).孕晚期女性血浆D-二聚体(D-二聚体单位,DDU)的参考区间:单胎组:28~35周,<3.64μg/mL;36~39周:<6.12μg/mL;40~41周,<6.84μg/mL;双胎/多胎组:28~31周,<6.26μg/mL;32~35周,<7.13μg/mL;36~39周,<8.00μg/mL.[结论]本研究初步建立了湖南省孕晚期妇女免疫比浊法血浆D-二聚体参考区间,适宜全省参考应用.     

改良ATB Fungus 3法检测糠秕马拉色菌对抗真菌药物的敏感性

目的用改良ATB Fungus 3法测定糠秕马拉色菌的药物敏感性,以了解临床患者呼吸道分离的糠秕马拉色菌对常用抗真菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。方法在ATB F2半固体培养基中添加0.5%吐温40和0.5%吐温60,用ATB Fungus 3药敏板条对47株临床分离的糠秕马拉色菌进行MIC检测。结果氟康唑MIC50为>128μg/mL,MICRange为≤1.0～>128μg/mL;5-氟胞嘧啶MIC50为>16μg/mL,MICRange为>16μg/mL;沃尔康唑MIC50为8.0μg/mL,MICRange为≤0.06～>8.0μg/mL;两性霉素B MIC50为4.0μg/mL,MICRange为≤0.5～16μg/mL;伊曲康唑MIC50为1.0μg/mL,MICRange为≤0.125～4.0μg/mL。呼吸道分离的糠秕马拉色菌对5种抗真菌药物的MIC值高于健康人皮肤分离的糠秕马拉色菌及标准菌株ATCC14521。结论改良ATB Fungus 3法操作简便,结果重复性好且易观察。糠秕马拉色菌MIC值的升高可能与患者使用抗真菌药物有关。     

液相色谱-质谱法测定人血浆氢氯噻嗪浓度的研究

目的建立液相色谱-质谱(LC-MS)测定人血浆中氢氯噻嗪浓度的方法。方法以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取后进样测定。分析柱为XTerraMS C18柱(5μm,2.1 mm×150 mm);保护柱为Diamonsil C18(2)Gart-ridges(3μm,2.1 mm×10 mm),柱温30℃;流动相为水:乙腈-60:40,流速为0.2 ml/min。用于定量的检测离子为氢氯噻嗪296,内标150。结果血浆氢氯噻嗪浓度在0.5～150μg/L范围内线性关系良好,方法回收率为95.6%～109.1%,日内、日间RSD均小于15%。结论所建立的LC-MS方法灵敏、准确、快速,可用于人血浆中氢氯噻嗪浓度的测定。     

反相高效液相色谱法测定人血浆及尿样中普卢利沙星活性代谢物

目的建立分析人血浆及尿样中普卢利沙星活性代谢物浓度的反相高效液相色谱方法。方法样本用甲醇-乙腈(1 :1)沉淀后离心取上清液进行色谱分析。分析柱为Diamonsil C_(18)(250 mm×4．6 mm,5μm)。流动相为乙腈—0．05 mol/L磷酸二氢钾(pH2．2,含1%的四丁基溴化铵);血浆和尿样分析分别用20:80(V/V)、流速1．0 mL/min和12:88(V/V)、流速1．6 mL/mln。激发和发射波长分别为280 nm和425 nm。结果血浆和尿样测定的线性范围分别为0．005～5 mg/L(r= 0．9999)和0．05～5 mg/L(r=0．9999),最低检测浓度分别为0．002 mg/L和0．01mg/L。血浆5．00、0．50和0．05 mg/L浓度的相对回收率在100．64%～101．00%,日内和日间相对标准差(RSD)分别小于2．5%和4．6%。尿样2．50、0．50和0．10 mg/ L浓度的相对回收率在97．20%～100．20%,日内和日间RSD分别小于1．3%和4．3%。方法成功用于健康人口服普卢利沙星的药动学研究。结论本方法具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等特点,适用于普卢利沙星的药动学研究。     

高效液相色谱法测定胎盘灌流液中格列苯脲的浓度

目的建立测定胎盘灌流液中格列苯脲浓度的高效液相色谱(HPLC)检测方法。方法采用的色谱柱为Symmetry Shield RP C18(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温40℃,流动相为NaH2PO4缓冲盐(25 mmol/L,pH值5.2)︰乙腈=1︰1;内标为格列齐特,流速1.0 mL/min,检测波长228 nm,采用液-液萃取预处理方法测定胎盘灌流液中格列苯脲的浓度。结果格列苯脲浓度线性范围为2.0～25.0μg/mL,线性方程为:y=0.226x+0.002,r=0.999 9(n=6),日内相对标准偏差(RSD)<3.1%,日间RSD<9.5%,方法学回收率为95.32%～103.35%。结论 HPLC检测方法灵敏、简便,可用于胎盘灌流液中格列苯脲浓度的检测。     

乳酸左氧氟沙星片剂的健康人体药代动力学和相对生物利用度研究

目的:研究乳酸左旋氧氟沙星片剂的健康人体药代动力学和相对生物利用度。方法:18名健康受试者单次,交叉口服乳酸左旋氧氟沙星片200 mg后,用HPLC-荧光法测定血浆中左氧氟沙星浓度,用BAPP2.0软件进行数据处理,计算药代动力学参数。结果:供试与参比制剂的药时曲线可用二室模型拟合,两者主要药代动力学参数Cmax分别为(2.92±0.60)μg/mL(、3.22±0.53)μg/mL;Tmax分别为(0.9±0.3)h(、0.9±0.3)h;t1/2分别为(7.27±1.02)h、(6.83±0.80)h;AUC0~24分别为(17.18±2.46)μg/(mL.h)(、17.19±2.55)μg/(mL.h),乳酸左氧氟沙星片供试制剂的相对生物利用度为(100.3±9.4)%。结论:供试与参比制剂具有生物等效性。     

高效液相紫外法测定胰腺炎患者血浆中维生素C浓度

目的建立一种反相高效液相紫外检测法来测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度。方法将胰腺炎患者血浆样本经预处理后用反相高效液相色谱（HPLC）仪进行浓度测定。色谱条件为KromasilC18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇和5％偏磷酸（15：85）,pH=4．0,检测波长为245nm,流速为1．0mL／min。柱温39℃。结果在上述色谱条件下,血浆中的VC得到良好分离,线性范围2．5～500μg/mL,日内差异和日间差异分别为0．22％和0．97％;回收率为98．64％。测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度平均测定值为11．31μg／mL,明显低于健康人测定值23．67μg／mL。结论该方法能更简单、快速、准确、灵敏测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度。