灵芝多糖对脓毒症急性肺损伤大鼠肺功能及TLR4/NF-κB通路的影响

目的探究灵芝多糖对盲肠结扎穿孔导致的脓毒症急性肺损伤大鼠肺功能及肺组织炎症的影响。方法 SD大鼠随机分成对照组、模型组及灵芝多糖低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组和乌司他丁组,除对照组外,其余各组大鼠均采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型。给予灵芝多糖和乌司他丁进行干预,采用全自动血气分析仪检测大鼠O₂分压[p(O₂)]和CO₂分压[p(CO₂)];取大鼠右肺中叶计算肺组织湿/干质量;采用ELISA法检测大鼠肺泡灌洗液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法检测大鼠肺组织病理变化;采用Western blotting法检测大鼠肺脏组织中Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)、p65、磷酸化p65(p-p65)蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠...     

降糖三黄片对糖尿病肾病大鼠TLR4/NF-κB通路的影响

目的观察降糖三黄片对糖尿病肾病大鼠肾组织Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路及单核细胞趋化蛋白~(-1)(MCP~(-1))表达的影响,探讨降糖三黄片对糖尿病肾病的保护作用及其机制。方法将80只SD大鼠随机分为正常组10只,模型组70只。模型组大鼠予腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)复制模型,成模大鼠随机分为模型组,降糖三黄片低、中、高剂量组(675,1350,2700 mg·kg~(-1)·d~(-1)),厄贝沙坦组(13.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)),正常组和模型组灌服等剂量蒸馏水。给药8周后腹主动脉采血测空腹血糖,收集24 h尿液测定尿蛋白,免疫组化法检测各组肾组织中MCP~(-1)蛋白的分布,Western blot法检测各组肾组织中TLR4、NF-κB(P-p65)蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组的空腹血糖、24 h尿蛋白及肾组织TLR4、NF-κB(P-p65)、MCP~(-1)蛋白表达均显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,降糖三黄片低、中、高剂量组空腹血糖均显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,降糖三黄片低、中、高剂量组及厄贝沙坦组肾组织TLR4、NF-κB(P-p65)、MCP~(-1)蛋白表达显著降低、尿蛋白排出显著减少,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论降糖三黄片通过抑制TLR4/NF-κB通路,下调MCP~(-1)的表达,起到减少尿蛋白排出,延缓DN进展的作用。     

当归多糖通过TLR4/NF⁃κB信号通路对糖尿病肾病大鼠的影响

目的探究当归多糖通过TLR4/NF?κB信号通路对糖尿病肾病大鼠的影响。方法48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(厄贝沙坦,17.5 mg/kg)及当归多糖低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg)。给药4周后,观察大鼠一般情况,HE染色观察肾组织病理形态改变,免疫比浊法检测24小时尿蛋白,RT?PCR检测MCP?1、TNF?α、IL?1、TLR4、MyD88、NF?κB mRNA表达,Western blot检测TLR4、MyD88、NF?κB蛋白表达。结果与模型组相比,当归多糖高剂量组大鼠一般情况明显好转,24小时尿蛋白降低,肾组织中TLR4、MyD88、NF?κB mRNA和蛋白表达降低,MCP?1、TNF?α、IL?1 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01);肾小球及肾小管病理变化明显减轻。结论当归多糖可降低糖尿病肾病大鼠肾组织中炎性指标,延缓病情发生,其机制可能与干预TLR4/NF?κB信号通路有关。     

电针对肥胖胰岛素抵抗大鼠下丘脑TLR4/IκBα/NF-κB信号通路的影响

目的:观察电针对肥胖胰岛素抵抗(OIR)大鼠下丘脑Toll样受体4(TLR4)/核因子κB抑制剂α(IκBα)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨电针治疗OIR的机制.方法:从42只Wistar雄性大鼠中随机挑选8只作为正常组,剩余大鼠给予高脂饲料喂养8周,建立OIR大鼠模型.将造模成功的16只大鼠随机分为...     

黄芪多糖对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚中TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨黄芪多糖抑制异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚中Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)炎症信号通路的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为6组(每组10只):对照组,异丙肾上腺素组,异丙肾上腺素+黄芪多糖(低、中和高剂量)组,异丙肾上腺素+普萘洛尔组。各给药组连续腹腔注射3周,并于给药1 d后腹腔注射异丙肾上腺素2周。给药3周后,各组动物分别检测全心质量指数(HMI)、左心质量指数(LVMI);取左心室组织进行苏木精—伊红染色法(HE)染色;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌组织心钠素(ANP)和TLR4的mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌组织TLR4、p65蛋白(p65)和核因子κB抑制蛋白α(IκBα)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中TNF-α、IL-6的水平。结果与对照组相比,异丙肾上腺素组大鼠的HMI和LVMI显著增加,ANP、TLR4m RNA表达增加,TLR4、p65的蛋白水平增加和IκBα蛋白水平减少,血清中TNF-α、IL-6明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。与异丙肾上腺素组相比,黄芪多糖400、800mg/(kg·d)和普萘洛尔40 mg/(kg·d)组HMI和LVMI降低,ANP、TLR4 mRNA和TLR4、p65蛋白和血清中TNF-α、IL-6表达显著降低,IκBα蛋白的表达明显增加(P<0.01)。黄芪多糖200 mg/(kg·d)组ANP、TLR4 mRNA和TLR4、p65蛋白和血清中TNF-α的表达降低(P<0.05,P<0.01),IκBα蛋白的表达增高(P<0.05)。结论黄芪多糖能改善异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路有关。     

芪苓通络方抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善特发性膜性肾病大鼠肾损伤

目的:探讨芪苓通络方基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB(TLR4/MyD88/NF-κB)信号通路对特发性膜性肾病(IMN)大鼠的治疗效果及作用机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸贝那普利组(10 mg·kg^-1),芪苓通络方低、中、高剂量组(6.48,12.95,25.9 g·kg^-1),通过尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)复制IMN大鼠模型。模型制备成功后进行药物灌胃,每日1次,连续给药4周。治疗结束后,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色和碘酸六胺银(PASM)染色观察大鼠肾脏病理学形态变化;检测24 h尿蛋白(24 h UTP),血浆白蛋白(ALB),血清总蛋白(TP),血肌酐(SCr),尿素氮(BUN),尿酸(UA)含量水平;酶联免疫吸附测定试验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)含量水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),免疫组化法(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠24 h UTP水平和血清中SCr,BUN,UA,IL-1β,IL-6的含量明显升高(P<0.05,P<0.01),ALB,TP水平显著降低(P<0.01);肾组织中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达量明显升高(P<0.05,P<0.01);模型组大鼠炎症反应明显,肾小球结构紊乱,体积增大,基底膜呈不规则增厚,肾间质可见炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞数量减少、脱落和凋亡,部分呈现空泡样变性。与模型组相比,盐酸贝那普利组、芪苓通络方高剂量组大鼠血清中SCr,UA的含量明显降低(P<0.05),ALB,TP水平明显升高(P<0.05);盐酸贝那普利组和芪苓通络方低、中、高剂量组大鼠24 h UTP水平、血清中IL-1β,IL-6含量水平及肾组织中TLR4,MyD88,NF-κB p65mRNA和蛋白表达水平均有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01);盐酸贝那普利组和芪苓通络方各剂量组能够减少IMN炎症反应,大鼠肾小球肿胀、体积增大程度减轻,肾小球毛细血管轻微扩张,系膜基质少量增生,肾间质偶见炎性细胞浸润,大鼠肾脏病理形态学损伤有不同程度的减轻。结论:芪苓通络方可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,减少炎症因子的释放和表达,抑制IMN大鼠炎症反应,减少蛋白尿,减轻肾损伤,保护肾脏功能。     

天香丹对动脉粥样硬化模型小鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 通过研究天香丹对动脉粥样硬化（AS）模型小鼠Toll样受体-4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及相关炎症因子的影响，探讨天香丹防治AS的可能机制。方法 选取8周龄ApoE-/-小鼠30只予以高脂饲料喂养12周，造模成功后随机分为模型组、他汀组、天香丹组，每组10只；另取10只C57BL/6J小鼠予以普通饲料喂养作为空白对照组。他汀组、天香丹组分别以相应药液3 mg/kg、2.7 g/kg灌胃干预，空白组、模型组以0.5 mL蒸馏水灌胃，每日1次，连续12周。取小鼠血清用于检测血脂水平及TLR4、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，取主动脉用于观察主动脉病理变化情况。结果 1)HE染色结果显示：他汀组、天香丹组病理改变较模型组轻，斑块稳定性提高，模型组主动脉斑块面积（PA）与管腔面积（LA）比值显著大于空白组（P <0.01），他汀组、天香丹组PA/LA比值则小于模型组（P <0.01）。2）血脂检测结果显示：较空白组，模型组三酰甘油（TAG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）明显升高，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）明显降...     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨益气通脉方对ApoE-/-小鼠主动脉粥样硬化的作用机制

目的 探讨益气通脉方调节Toll样受体4（TLR4）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路对载脂蛋白E-/-（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化（AS）炎症反应的作用机制。方法 将8只C57BL/6J小鼠作为空白组,40只同周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为模型组、益气通脉方低、中、高剂量组[0.39、0.78、1.56 g/（kg·d）]和阿托伐他汀组[2.6 mg/（kg·d）],每组8只。除空白组外采用高脂饲料诱导AS模型,各给药组分别给予相应药物灌胃,空白组与模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,连续12周。采用酶标仪检测小鼠血脂水平;ELISA检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平;油红O染色观察小鼠主动脉斑块面积;HE、Masson染色观察小鼠主动脉窦内膜斑块病理变化;免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）法检测主动脉窦中TLR4、髓细胞分化初级反应蛋白88（MyD88）的表达;Western Blot检测小鼠主动脉中TLR4 / NF-κB信号通路相关因子蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平升高（P<0.01）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平下降（P<0.01）;血清TNF-α、MCP-1含量升高（P<0.01）;主动脉窦内膜斑块以及胶原面积增加（P<0.01）,MyD88表达升高（P<0.01）;主动脉TLR4、NF-κB、核因子κB抑制蛋白α（IκBα）、MyD88蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较,益气通脉方中、高剂量组和阿托伐他汀组血清TC、TG、LDL-C水平下降（P<0.01）,血清中TNF-α、MCP-1含量下降（P<0.01）,主动脉窦斑块以及胶原面积均下降（P<0.01,P<0.05）,主动脉窦MyD88水平表达下降（P<0.01）,主动脉TLR4、NF-κB、MyD88、IκB蛋白表达下降（P<0.01,P<0.05）。结论 益气通脉方可改善血脂和炎症因子的水平,减少主动脉窦中斑块脂质堆积,其作用机制可能与下调TLR4/NF-κB信号通路有关。     

虎杖苷对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探究虎杖苷对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症的缓减作用,并初步探究其作用机制。方法:将大鼠随机分为空白对照组、模型组、虎杖苷30、60、120mg/kg组、地塞米松0.09mg/kg组。采用肺功能检测仪检测用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气容积(FEV0.1)、呼气峰流速(PEF)、最大呼吸中段气流(MMF)、肺顺应性(Cldyn);吉姆萨染色法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及中性粒细胞(PMN)、肺泡巨噬细胞(AM)、淋巴细胞(LYM)比例;酶联免疫吸附法检测BALF中TNF-α、IL-8、IL-1β水平;HE染色观察肺组织病理学变化;高碘酸希夫氏染色(PAS)观察支气管病理学变化;免疫印迹法检测肺组织中TLR4、NF-κB、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达;免疫组化法检测肺组织中TLR4、NF-κB蛋白阳性表达率。结果:与对照组相比,模型组肺组织病理半定量评分显著升高;FVC、FEV0.1、PEF、MMF、Cldyn明显降低,BALF中AM细胞比例明显降低,白细胞总数、PMN、LYM细胞比例明显升高,TNF-α、IL-8、IL-1β水平明显升高,支气管气管壁、平滑肌厚度升高,肺组织中TLR4、NF-κB p65、MMP-2、MMP-9蛋白表达及TLR4、NF-κB p65蛋白阳性表达率明显升高。与模型组相比,虎杖苷各组、地塞米松组肺组织病理半定量评分显著降低。FVC、FEV0.1、PEF、MMF、Cldyn升高,BALF中AM细胞比例显著升高,白细胞总数、PMN、LYM细胞比例显著降低,TNF-α、IL-8、IL-1β水平显著降低,支气管气管壁、平滑肌厚度降低,肺组织中TLR4、NF-κB p65、MMP-2、MMP-9蛋白表达及TLR4、NF-κB p65蛋白阳性表达率显著降低。结论:虎杖苷可改善肺组织、支气管组织形态,降低大鼠气道炎症反应,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。     

基于TLR4/NF-κB信号通路研究清开灵口服液防治肺炎的作用机制

目的 基于Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路研究清开灵口服液防治肺部炎症的作用及机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组及清开灵口服液低、中、高剂量(4、8、16 mL/kg)组和头孢氨苄(175 mg/kg)组,各给药组ig相应药物,1次/d,连续6 d。给药同时进行造模,肺部注射肺炎克雷伯菌菌液造模3 d,对照组肺部注射生理盐水。给药结束后采集大鼠血液、肺泡组织灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),进行菌落培养和计数;采用全自动血液细胞分析仪检测白细胞数量及中性粒细胞、单核细胞比例;采用ELISA法检测血清中白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、IL-2、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、缓激肽(bradykinin,BK)、单核细胞趋化因子(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)水平及环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)、COX-2活性;采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肺组织病理变化;采用免疫组化法检测肺组织TLR4蛋白表达;采用Western blotting法检测肺组织磷酸化p65(phosphorylated p65,p-p65)、p65、磷酸化NF-κB抑制因子(phosphorylated inhibitor of NF-κB,p-IκB)和IκB表达。结果 与模型组比较,清开灵口服液组大鼠全血及BALF中经培养后的菌落数显著降低(P<0.05);全血中白细胞数目及中性粒细胞、单核细胞比例均显著降低(P<0.05、0.01);血清中IL-1、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、BK、MCP-1水平及COX-1、COX-2活性均显著降低(P<0.05、0.01);肺实质中炎性细胞浸润、红细胞渗出及肺泡上皮细胞脱落等现象明显减少;肺组织中TLR4蛋白阳性表达明显减少,p-p65/p65和p-IκB/IκB蛋白表达水平显著下降(P<0.05、0.01)。结论 清开灵口服液具有抑制肺炎克雷伯菌所致肺炎的作用,其机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路有关。     

苦参碱通过HMGB1/TLR4/NF-κB通路对胃溃疡大鼠溃疡修复的影响

目的:探讨苦参碱对胃溃疡(GU)大鼠炎症反应和溃疡修复的影响及对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法:取SD雄性大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、苦参碱0.1、0.2 g/kg组、甘草酸(HMGB1抑制剂)0.03 g/kg组、苦参碱0.2 g/kg+甘草酸0.03 g/kg组,每组12只;除假手术对照组外,其余各组均用乙酸烧灼法建立GU大鼠模型,并于造模成功后灌胃给药,1次/d,连续给药28 d。观察大鼠一般行为变化;检测大鼠溃疡指数、溃疡抑制率;透射电镜观察大鼠胃黏膜组织形态变化;TUNEL法检测大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡率;免疫荧光检测TLR4在胃黏膜组织中阳性表达水平;免疫组化法检测HMGB1、NF-κB在胃黏膜组织中阳性表达水平;蛋白印迹法检测白细胞介素-6(IL-6)、环氧合酶-2(COX-2)、髓样分化因子88(MyD88)、DNA损伤标记蛋白-磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)、修复关键蛋白-羧基末端连接蛋白反应蛋白(CtIP)和Rad51蛋白表达情况。结果:与假手术对照组比较,模型对照组大鼠...     

天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠TLR4/NF-κB信号通路影响的研究

目的:探讨天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠的脑保护作用及其作用机制。方法:72只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、天麻素组、Toll样受体4 (TLR4)激活剂脂多糖(LPS)组、天麻素+LPS组,每组12只。采用腹腔注射毛果芸香碱建立癫痫大鼠模型。双抗体夹心酶联免疫法检测大鼠血清和海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1β(IL-1β)水平,TUNEL染色法检测海马组织细胞凋亡数,Western blot分别检测海马组织活化半胱氨酸基天冬氨酸酶-3 (CleavedCaspase-3)、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、兔抗大鼠p-核因子-κB亚基p65亲和肽(p-NF-κBp65)和磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκB-α)表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠脑电频率显著降低(P<0.05),波幅显著升高(P<0.05);血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显升高(P<0.05);IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组、天麻素组和天麻素+LPS大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05),血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显降低(P<0.05),IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著升高(P<0.05);LPS组大鼠脑电频率、血清及海马组织IL-10水平、Bcl-2蛋白显著降低(P<0.05),血清与海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65和p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。与LPS组比较,天麻素+LPS组大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05);血清及海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65蛋白表达均明显降低(P<0.05),IL-10水平、Bcl-2及p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:天麻素可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠发挥脑保护作用。     

基于肠-肝-脑轴探讨益木脑液灌肠对肝性脑病大鼠TLR4/NF-κB/NLRP3通路的影响

目的：观察中药益木脑液灌肠对肝性脑病大鼠的治疗作用,并探讨其对TLR4/NF-κB/NLRP3通路表达的影响。方法：72只大鼠随机分为正常组,模型组,益木脑液高、中、低剂量组,乳果糖组,每组12只。除正常组外,其余大鼠均给予0.25 mL/100 g的CCl4溶液腹腔注射,每周2次,共6周,制备大鼠肝损伤模型。6周后给予300 mg/kg的硫代乙酰胺溶液隔日腹腔注射,共2次,建立大鼠肝性脑病模型。造模成功后各组大鼠给予相应剂量的药物灌肠,给药10d后进行神经功能反射评分、行为学检测（水迷宫实验、旷场实验）,取血清、血浆及肝脏组织样本。检测各组大鼠ALT、AST、血浆氨含量;ELISA法检测血清白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脂多糖（LPS）水平;HE染色观察肝脏病理变化;免疫组化观察肝组织TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白含量;Western blot法检测肝脏TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase1蛋白的表达。结果：与模型组比较,益木脑液中、高剂量组能显著改善肝性脑病大鼠神经功能反射评分,提高大鼠行为学水平,降低ALT、AST、血浆氨、IL-6、TN...     

生脉散联合阿托伐他汀对老年冠心病患者TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:研究生脉散联合阿托伐他汀对老年冠心病(CHD)患者TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响。方法:收集112例老年CHD患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组56例。两组均接受常规治疗,对照组加用阿托伐他汀,观察组加用阿托伐他汀与生脉散。比较两组临床疗效、心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左室舒张末内径(LVDD)及6 min步行距离(6MWD)],以及外周血TLR-4、MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平。结果:观察组总有效率高于对照组。治疗后,观察组TLR4、MyD88及NF-κB mRNA和蛋白表达低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,观察组LVEF、6MWD水平高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:生脉散联合阿托伐他汀治疗老年CHD疗效较好,可能与其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。     

当归芍药散基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对阿尔茨海默病模型大鼠神经炎症的影响研究

目的 研究当归芍药散对β淀粉样蛋白_1-42(Aβ_1-42)诱导的阿尔茨海默症(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠神经炎症及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法 SD大鼠大脑双侧侧脑室注射Aβ_1-42构建AD动物模型。实验分为假手术组、模型组、当归芍药散组和阳性药物组。假手术组、模型组给予生理盐水灌胃，当归芍药散组给予当归芍药散24 g·kg^-1·d^-1灌胃，阳性药物组给予米诺环素36 mg·kg^-1·d^-1灌胃，连续灌胃14 d。Morris水迷宫实验测定大鼠的学习记忆能力。复制模型成功后取材，HE染色检测海马神经元组织病理形态学变化，免疫荧光法检测小胶质细胞和星形胶质细胞活化情况，实时荧光定量PCR(qPCR)检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达情况，免疫印迹法(W...     

艾灸“足三里”“肾俞”抑制miR-155介导的TLR4/NF-κB信号通路改善大鼠佐剂性关节炎的研究

目的:观察艾灸"足三里""肾俞"对佐剂性关节炎(AA)大鼠miR-155/Toll样受体4 (TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎的可能机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、拮抗剂组、艾灸组,每组12只。采用风、寒、湿环境因素+弗氏完全佐剂复合造模方法复制AA模型。艾灸组于大鼠"足三里""肾俞"给予艾灸治疗,30 min/次,1次/d,连续治疗21 d;拮抗剂组经尾静脉注射TLR4拮抗剂,1次/d,连续注射21 d;正常组和模型组不做任何处理。观察各组大鼠关节肿胀度(JSD)、关节炎指数(AI),荧光定量PCR法及Western blot法检测大鼠滑膜组织中miR-155/TLR4/NF-κB信号通路相关指标miR-155及TLR4、NF-κB、髓样分化因子88(MyD88)、白细胞介素(IL)1受体相关酶(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6的mRNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组、艾灸组及拮抗剂组大鼠JSD、AI明显升高(P<0.01),滑膜组织中miR-155及TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、TRAF6、IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和拮抗剂组大鼠JSD、AI明显降低(P<0.01),滑膜组织中miR-155及TLR4、NF-κB、MyD88、IRAK1、TRAF6、IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA和蛋白表达明显减少(P<0.01)。艾灸组大鼠JSD、AI及滑膜组织中miR-155 mRNA及NF-κB、MyD88、IRAK1、TRAF6、IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA和蛋白表达明显低于拮抗剂组(P<0.01),滑膜组织中TLR4 mRNA及蛋白表达明显高于拮抗剂组(P<0.01)。结论:艾灸"足三里""肾俞"能够明显改善AA大鼠滑膜炎性反应,可能与艾灸抑制miR-155/TLR4/NF-κB信号通路有关。     

小青龙汤通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制LPS诱导慢性肾小球肾炎的机制研究

目的 探究小青龙汤通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的慢性肾小球肾炎的机制。方法 24只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、小青龙汤组。对照组切片在DMEM基础培养基中培养80min, LPS模型组将10μg/mL浓度的LPS加入基础培养基中，切片在基础培养基中培养30min,转入含有LPS的基础培养基中培养50min。小青龙汤组：将含药血清溶解于基础培养基中，继续培养LPS模型组。造模成功后，取出切片进行指标检测。观察肾组织形态学变化；用ELISA检测肾组织中IL-1β、IL-4、TNF-α等含量；RT-qPCR和Western blot检测肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达水平。结果 与对照组相比，模型组大鼠肾组织中可见明显的炎性细胞浸润，偶见肾小球体积增大，增生的肾小球内细胞数量增多，肾小管的管腔扩张且内有明显的透明管型，肾组织中IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8的含量显著升高，IL-4显著下降(P<0.01);Western blot检测结果显示，与对照组比较，模型组大鼠肾组织TLR4、MyD88和P-NF-...     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨绿原酸对糖尿病肾病大鼠肾组织炎症和凋亡的影响

目的 探讨绿原酸对糖尿病肾病大鼠肾组织炎症、细胞凋亡及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、绿原酸低剂量组、绿原酸中剂量组、绿原酸高剂量组、二甲双胍组,每组10只。除正常组外,其他各组大鼠腹腔注射柠檬酸钠缓冲液稀释的链脲佐菌素建立糖尿病肾病模型。造模成功后第2天,绿原酸低、中、高剂量组大鼠分别灌胃30 mg/kg、60 mg/kg、120 mg/kg的绿原酸,二甲双胍组大鼠灌胃200 mg/kg的二甲双胍,正常组和模型组大鼠灌胃等剂量的生理盐水,均1次/d,连续灌胃8周。测定各组大鼠24 h尿蛋白定量、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、空腹血糖(FPG)水平,采用HE染色和PAS染色观察大鼠肾组织形态,ELISA法检测血清炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡情况,Western blot法检测肾组织凋亡蛋白和Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量、...     

三七总皂苷通过TLR4/NF-кB信号通路抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大

目的 :探讨三七总皂苷(PNS)在异丙肾上腺素(ISO)诱导心肌细胞肥大中的保护作用及其机制。方法:离体培养SD乳鼠心肌细胞,用10μmol/L异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大,观察5μmol/L BAY11-7082(核因子-кB特异性抑制剂)及不同剂量三七总皂苷(12.5 mg/L,25 mg/L,50 mg/L)对肥大心肌细胞的影响。采用计算机图像分析系统测量细胞体积;考马斯亮蓝法测心肌细胞总蛋白含量;酶联免疫吸附法检测细胞外液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;反转录-PCR法检测ANP mRNA的表达;蛋白质印迹法检测心肌细胞TLR4和IκBα蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,异丙肾上腺素模型组心肌细胞体积、总蛋白含量、ANP mRNA的表达、炎症因子TNF-α的含量及TLR4蛋白的表达均明显增高,而IκBα蛋白表达明显降低。三七总皂苷和BAY11-7082均能有效抑制异丙肾上腺素诱导的肥大反应及炎症反应,表现为细胞体积、总蛋白含量、ANP mRNA表达、细胞外液中TNF-α含量、TLR4蛋白表达均明显降低,IκBα蛋白含量显著增高。结论 :三七总皂苷对异丙肾上腺素诱导乳鼠心肌细胞肥大具有保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路,减少炎症反应有关。