流式细胞术检测肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群研究

目的 探讨肿瘤患者T淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法 采用流式细胞术检测27例肿瘤患者和25例正常对照组的T淋巴细胞亚群。结果 肿瘤患者CD3^＋T细胞、CD4^＋T细胞和CD4^＋／CD8^＋比值明显低于对照组并有统计学意义，而CD8^＋T细胞显著高于对照组（P〈0．01）。结论 肿瘤患者的免疫功能下降。流式细胞术对肿瘤患者的免疫功能的检测具有快速、敏感、准确的特点，对于评价疗效、判断预后具有重要价值。     

MTT法在淋转和NK活性检测中的不同适用性

<正> MTT法广泛用于检测细胞存活和增殖。本文表明,在多种实验条件下,MTT法检测淋转的灵敏度都很低;而检测NK杀伤活性的灵敏度很高,但某些最佳实验条件与已有报道相异。1 实验方法1.1 MTT法检测淋巴细胞转化功能 取Balb/c小鼠脾脏经Ficoll分离后的淋巴细胞接种于96孔板。实验组加PHA,另设对照组。置37℃,5％CO_2中培养72或48h。培养结束前4h各孔加MTT液(5mg/ml)20μl。取出离心去上清,各孔加酸化异丙醇或DMSO溶解,酶标仪570nm处测OD值。转化功能以转化率表示:     

采用2-氯腺苷改善MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤功能1

目的研究2-氯腺苷(2-ClA)特异性杀伤巨噬细胞对MTT法检测淋巴细胞激活试验和细胞毒试验的影响.方法运用细胞培养技术,培养小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞.通过MTT法检测2-ClA处理和未处理的淋巴细胞的激活以及特异性活化后对肿瘤细胞的杀伤,同时还检测2-ClA对巨噬细胞的毒性作用.结果2-ClA对巨噬细胞有很强的杀伤作用,采用MTT法检测淋巴细胞的活化和杀伤活性时,2-ClA处理组的OD值要明显低于未经2-ClA处理的对照组(P＜0.05).结论2-ClA通过特异性杀伤巨噬细胞可以消除巨噬细胞在MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤试验中所产生的影响,使检测更为准确.     

束缚应激小鼠脾淋巴细胞功能的改变

目的：探讨束缚应激（IMS）对小鼠脾淋巴细胞功能的影响。方法：用MTT法检测细胞增殖，用流式细胞术检测膜IL－2受体（mIL-2R)和细胞增殖周期，用荧光指示剂Fura-2/AM检测细胞内[Ca^2 ]，将IMS后的结果与正常组进行比较。结果：IMS后细胞增殖反应的最低点在IMS结束后0，24h后接近正常，在IMS后0h,mIL-2R较正常组显著降低，细胞增殖可能受阻于G2／M期，细胞内[Ca^2 ]显著增高（P＜0.05）。结论；IMS可以引起淋巴细胞功能障碍，从而导致免疫抑制。     

一种新的淋巴细胞亚群流式细胞检测方法的建立

目的 根据流式细胞仪的结构和原理,结合淋巴细胞亚群表面抗原的分布特点,设计新的流式细胞检测荧光抗体标记组合方案,以简化操作步骤,减少操作失误,降低试验成本.方法 在组合方案CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PE-Cy5中加入CD19-FITC,则PE-Cy5和FITC双阳性细胞为CD4+T淋巴细胞,PE-Cy5阴...     

应用四色荧光标记流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群的变化

目的 探讨四色荧光标记流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测鼻咽癌患者服用云芝丹参胶囊后外周血淋巴细胞亚群:辅助性T淋巴细胞(CD4 ),抑制性和细胞毒T淋巴细胞(CD8 ),B淋巴细胞(CD19 ),NK(CD16 CD56 ) 细胞的绝对数和百分率等的变化.方法 收集鼻咽癌患者27例,设立中药组和安慰剂对照组,采用四色荧光标记流式细胞术对服用云芝丹参胶囊后的鼻咽癌患者外周抗凝全血的淋巴细胞亚群CD4 细胞、CD8 细胞、B细胞、NK细胞进行绝对计数和相对计数,并对两组结果进行比较分析.结果 四色荧光标记流式细胞术结果显示:接受放射治疗的鼻咽癌患者在服用云芝丹参胶囊16周后,外周血T淋巴细胞的绝对数和百分率,以及Ts、Th细胞绝对数的下降均明显低于安慰剂组(P＜0.05);中药组和安慰剂组NK细胞百分率的变化均显著增高(P＜0.05); 但两组NK细胞绝对值的变化不存在明显差异(P＞0.05).结论 云芝丹参能明显减轻放射治疗对鼻咽癌患者的淋巴毒性.     

采用2—氯腺苷改善MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤功能

目的 :研究 2 氯腺苷 ( 2 ClA)特异性杀伤巨噬细胞对MTT法检测淋巴细胞激活试验和细胞毒试验的影响。方法 :运用细胞培养技术 ,培养小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞。通过MTT法检测 2 ClA处理和未处理的淋巴细胞的激活以及特异性活化后对肿瘤细胞的杀伤 ,同时还检测 2 ClA对巨噬细胞的毒性作用。结果 :2 ClA对巨噬细胞有很强的杀伤作用 ,采用MTT法检测淋巴细胞的活化和杀伤活性时 ,2 ClA处理组的OD值要明显低于未经 2 ClA处理的对照组 (P <0 0 5 )。结论 :2 ClA通过特异性杀伤巨噬细胞可以消除巨噬细胞在MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤试验中所产生的影响 ,使检测更为准确。     

流式细胞术和微量细胞毒法检测HLA-B27的比较

人白细胞相关抗原 (ＨＬＡ Ｂ2 7)分子 (简称Ｂ2 7)的生理功能是携带提呈的细菌多肽 ,并激活ＣＤ8+ Ｔ细胞。Ｂ2 7因与强直性脊柱炎 (ＡＳ)等脊柱关节病 (ＳＰＡ)的关联 ,是所有疾病与ＨＬＡ相关中最为密切的 ,多年来一直是风湿病学界研究的热点之一[1] 。分析Ｂ2 7的表达对ＡＳ的发病机制、诊断、预防及预后判断都有重要意义[2 ,3 ] 。既往采用微量细胞毒法检测ＨＬＡ Ｂ2 7表型 ,本文采用流式细胞术进行检测 ,并比较了两种方法的优缺点。1　材料和方法1.1　材料　微量细胞毒法用倒置显微镜产自重庆光学仪器厂。标准羊抗人血清、Ｂ2 7抗原…     

蚕蚀性角膜溃疡患者外周血淋巴细胞免疫表型和T细胞活化的研究

目的：观察蚕蚀性角膜溃疡患者外周血淋巴细胞免疫表到和T细胞活化的变化,进一步探讨本病患者的免疫功能。方法：用流式细胞术检测8例活动性蚕蚀性角膜溃病患者外周血淋巴细胞对项免疫表型变化,用植物凝集素和沸被醉酯作为刺激剂,以HLA－DR,CD69、CD71、CD25的表达为T细胞活化的指标,用流式细胞术分析。结果：蚕蚀性角膜溃疡患者外周血CD4、CD5、CD8、CD10、CD11b、CD15、CD16、CD19、CD23、CD25、CD41、CD69、HLA-DP、HLADR抗原表达阳性淋巴细胞以及HLA－DR、CD69、CD71、CD25在CD3和CD8细胞的表达均明显高于正常对照组。结论：蚕蚀性角膜溃疡患者具有增强的细胞免疫和体液免疫,外周血T细胞及其亚群出现异常活化,反映患者体内存在自身免疫反应而支持该病发病之自身免疫学说。     

流式细胞术外周血样品的直标法

流式细胞术 (FCM)以其快速、简便、准确的检测和分析而广泛应用于细胞生物学、肿瘤学、免疫学等领域 ,特别是多种识别白细胞抗原的单克隆抗体的出现 ,使FCM在外周血白细胞分析的基础研究和临床诊断中得到了广泛应用[1] 。因而优化一种快速、简便、准确的外周血白细胞的FCM免疫荧光标记法显得尤为重要。我们通过对 3种直接荧光标记法的比较及其样品用血量的探讨 ,旨在建立一种用于FCM的最佳直接荧光标记法。1　材料与方法1 1　材料1 1 1　标本　 2mlEDTA抗凝外周血。外周血WBC在 10 0 0～ 10 0 0 0cells μl之间的为A组 ;WBC在 10 …     

Use of the orthogonal design method to study the synergistic effects of asbestos fibres and 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) in the BALB/3T3 cell transformation system

An orthogonal design method was used to study the transformingeffects of chrysotile and crocidolite asbestos fibres in BALB/3T3cells. Three experiments, designed by tables L₉ (3⁴), L₈ (2⁷)and L₆ (3¹ x 2²) of the orthogonal method respectively, wereperformed separately. The results indicate exponential reductionsin survival of treated cells concomitant with a linear increasein exposure concentrations from 0.1 to 10.0 µg/cm², andthat chrysotile was more toxic than crocidolite; the total transformationfrequency was significantly increased with both chrysotile andTPA concentrations. There was synergism between chrysotile andTPA in sequential treatment, which suggests that chrysotileis an initiator and has a complete transforming effect at 10.0µg/cm². Crocidolite only has an initiating-like effectwithin the dose range of 0.1 – 10.0 µg/cm², andno synergistic effect when associated with TPA. ¹Present address: Department of Occupational Health, Shanghai Medical University, Shanghai 200032, People's Republic of China ²To whom correspondence should be addressed.