脑缺血再灌注模型大鼠跑台运动后海马神经再生和血管内皮生长因子mRNA的变化

背景：研究表明跑台运动能促进健康大鼠海马的神经细胞再生。 目的：观察跑台运动对脑缺血再灌注模型大鼠海马神经再生和血管内皮生长因子mRNA表达的影响。 方法：用线栓法阻塞大脑中动脉以建立单侧脑缺血再灌注模型大鼠,将建模成功大鼠随机分为跑台运动组和安静对照组,另设假手术组。安静对照组和假手术组大鼠安静饲养,跑台运动组进行7 d跑台运动。跑台运动组和安静对照组大鼠在每天跑台运动前腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷溶液。 结果与结论：免疫组织化学染色结果显示,跑台运动组大鼠双侧海马及齿状回5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性表达细胞数量显著多于安静对照组(P < 0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示,跑台运动组大鼠海马血管内皮生长因子mRNA表达水平显著高于安静对照组和假手术组(P < 0.05)。结果证实,跑台运动能够明显促进脑缺血再灌注大鼠海马神经细胞的再生并上调海马组织血管内皮生长因子的表达。     

不同运动负荷对老龄大鼠认知能力及海马组织VEGF/VEGI表达的影响

目的:检测不同运动负荷对老龄大鼠认知能力的影响并探讨其可能的机制。方法:40只16月龄雄性Wistar大鼠随机分为4组:即对照组(不游泳)、小负荷组(游泳15 min)、中负荷组(游泳30 min)和大负荷组(游泳60 min)。各负荷组大鼠经8周无负重游泳训练后,进行八臂迷宫实验观察各组大鼠的行为学表现;运用实时定量PCR和免疫组化实验检测各组大鼠海马神经组织(VEGF)、血管内皮生长抑制因子(VEGI)的表达情况。结果:(1)与对照组相比,大负荷组大鼠的参考记忆错误次数和工作记忆错误次数均显著增多(P 0. 05,P 0.01);中负荷组大鼠各检测指标与对照组相比无统计学差异(P 0. 05);小负荷组大鼠的工作记忆错误次数和觅食完成时间均显著降低(P 0. 05)。(2)与对照组相比,小负荷组大鼠海马组织VEGF mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P 0. 01),VEGI mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P 0. 05,P 0. 001);大负荷组大鼠海马组织VEGF mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P 0. 01,P 0. 001),VEGI mRNA和蛋白表达水平均上调(P 0. 01,P 0. 001);中等负荷组大鼠海马神经组织VEGF和VEGI mRNA和蛋白的表达水平与对照组相比无统计学差异(P 0. 05)。结论:小负荷运动有利于改善老龄大鼠的认知能力,中等负荷对此改变不大,而大负荷运动则对于老龄大鼠的认知能力具有损伤作用。其机制可能为小负荷运动能够上调老龄大鼠海马神经组织VEGF表达、下调VEGI表达,促进血管的新生,进而改善海马神经元的增殖;大负荷运动组则表现出了相反的影响趋势。     

氯化钴和跑台运动对大鼠海马神经发生及低氧诱导因子-1水平的影响

目的:比较氯化钴(CoCl2)所致机体低氧和跑台运动对大鼠海马齿状回新生细胞数量和低氧诱导因子-1(HIF-1)水平的影响.方法:腹腔注射CoCl2和BrdU于动物,运动方式为跑台运动,大鼠海马齿状回新生细胞和HIF-1采用免疫荧光显色显示.结果:小强度跑台运动组大鼠海马齿状回内BrdU免疫阳性(BrdU+)细胞数量显...     

跑台运动对链脲霉素诱导的阿尔茨海默病大鼠空间学习能力损害的影响

目的:探讨跑台运动对海马细胞凋亡相关的空间学习能力的影响。方法:通过侧脑室注射链脲霉素(STZ)复制阿尔茨海默病大鼠模型(AD)。侧脑室注射STZ后3d,运动组大鼠在跑台上运动,每日30min,每天1次,共14d。8臂迷宫用于测试空间学习能力。Caspase-3免疫组织化学、Bax和Bcl-1蛋白质印迹用于测定细胞凋亡。结果:侧脑室注射STZ导致空间学习能力受损。8臂迷宫测试表明,与假手术组相比,AD组大鼠正确选择次数显著降低;与AD组相比,运动明显改善STZ诱导的正确选择次数的降低。STZ诱导的AD大鼠,海马Bcl-2表达降低,casepase-3和Bax表达增加。与AD组相比,跑台运动增加Bcl-2表达,降低casepase-3和Bax表达。结论:跑台运动改善神经退行性变疾病导致的记忆损害。     

急性脑缺血损伤大鼠海马神经元谷氨酸转运体的表达

目的：研究急性脑缺血损伤大鼠海马神经元谷氨酸转运体（EAAC1）的表达变化。 方法： 采用EAAC1反义寡核苷酸脑内注射，用插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。运用Western blot法和TTC染色观察缺血区EAAC1表达和梗塞体积；采用RT-PCR 和Western blot法，测定海马EAAC1 mRNA和蛋白在缺血1 h、6 h、24 h的变化。结果： 注射EAAC1反义寡核苷酸组大鼠梗塞体积［(105.67±8.70) mm3］显著小于正义组。缺血1 h大鼠海马EAAC1 mRNA表达（0.963±0.117）与假手术组（0.907±0.113）无明显差异，缺血6h、24h持续高于缺血1 h（分别为1.116±0.104和1.428±0.078）。而海马EAAC1蛋白表达（0.640±0.027）在缺血24 h高于假手术组，缺血1 h和6h EAAC1表达与假手术组比较无显著差异（分别为0.330±0.018、0.330±0.015）。结论： EAAC1可促进缺血脑损伤,在急性脑缺血病理过程中表达增加。     

运动预干预对睡眠剥夺大鼠学习记忆及海马nNOS表达的影响

目的:探讨跑台运动预干预对完全睡眠剥夺(TSD)大鼠空间学习记忆能力、海马单胺类神经递质水平和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组(CON)、运动组(EX)、完全睡眠剥夺组(TSD)及睡眠剥夺运动组(EX+TSD)。除CON组及TSD组大鼠,EX组和EX+TSD组大鼠进行跑台运动预干预4周,运动结束后建立大鼠72 h睡眠剥夺模型(小平台水环境法),然后运用八臂迷宫实验(ERM)评估大鼠空间学习记忆能力,用高效液相-电化学法检测大鼠海马单胺类神经递质多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)的表达水平,用免疫组化法检测海马一氧化氮合酶(nNOS)神经元的表达。结果:(1)与CON组比较,ERM实验中TSD组大鼠工作记忆错误次数(WME)、参考记忆错误次数(RME)均显著增多,正确反应的次数(CN)减少,完成八臂迷宫时间显著延长(P 0. 01);海马内DA及NE的水平均显著下降(P 0. 01),而5-HT的水平增加(P 0. 01),海马nNOS阳性细胞平均光密度显著增加(P 0. 01);(2)与TSD组比较,ERM实验中EX+TSD组大鼠WME及RME均显著减少,CN增多,完成八臂迷宫时间均显著缩短(P均0. 05); EX+TSD组海马DA的表达水平显著增加(P 0. 05),5-HT的表达水平下降(P 0. 05),NE的表达水平则无显著变化(P 0. 05),海马nNOS阳性细胞平均光密度显著下降(P 0. 05)。结论:规律的跑台运动预干预可以增强TSD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与此运动下调大鼠海马内nNOS活性、减弱高浓度NO的神经毒性纠正TSD大鼠单胺类神经系统紊乱,对睡眠剥夺引起的海马神经元损害具有保护作用有关。     

跑台运动及周龄对大鼠海马神经发生的影响

目的探讨运动及其周龄对大鼠海马神经发生的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为7周龄安静对照组、7周龄小强度运动组、9周龄安静对照组和9周龄小强度运动组。腹腔注射BrdU于大鼠,持续注射6d。采用免疫组织荧光染色技术,检测各组大鼠海马齿状回内新生细胞和新生神经元数量。结果各组动物海马齿状回BrdU免疫阳性(BrdU+)细胞数目为:7周龄安静对照组50.66±10.54,7周龄小强度运动组74.21±17.00,9周龄安静对照组37.62±9.02,9周龄小强度运动组46.01±10.82。各组动物海马齿状回BrdU++NeuN+细胞数目为:7周龄安静对照组22.54±6.76,7周龄小强度运动组33.38±8.26,9周龄安静对照组15.26±4.42,9周龄小强度运动组17.61±3.86。结论运动促进海马齿状回神经发生,随着周龄的增长而减弱。     

免疫刺激对大鼠海马CA2、3区nNOS和c-Fos表达的影响

目的通过观察细菌脂多糖(LPS)对海马CA2、3区nNOS和c-Fos表达的影响,探讨海马CA2、3区的免疫调节作用及其与NO和c-Fos蛋白的相关性。方法实验组SD大鼠腹腔注射LPS,对照组注射生理盐水,2.5 h后,采用RT-PCR方法检测大鼠海马CA2、3区nNOS mRNA、原位杂交技术检测该区c-Fos mR-NA,免疫组化方法分别检测该区nNOS和c-Fos的表达变化。结果对照组和腹腔注射LPS组大鼠海马CA2、3区的nNOS,c-Fos及其mRNA的OD值如下:nNOS mRNA(0.283±0.09,0.476±0.03),nNOS(0.653±0.97,1.155±0.12),c-Fos mRNA(1.031±0.99,1.326±0.91),c-Fos(0.426±0.16,0.830±0.14);LPS使大鼠海马CA2、3区nNOS和c-Fos mRNA及表达产物含量均上调。结论海马CA2、3区在机体的免疫应激反应中起重要调节作用,NO和c-Fos蛋白可能是该调节过程中的重要信使分子。     

卡托普利对大鼠缺血心肌KDR/Flk-1表达的影响

目的：观察大鼠心梗后心肌内血管新生以及KDR/Flk-1表达情况和血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）卡托普利的干预对其影响，探讨ACEI类药物对大鼠缺血的心肌血管新生作用和机制。 方法： 在成功复制心肌梗死大鼠模型的基础上，给予ACEI类药物卡托普利治疗6周，摘取心脏，采用免疫组化法和荧光定量PCR（FQ-PCR）的方法观察缺血心肌新生血管与受体的表达情况。 结果： 卡托普利干预后，缺血心肌的Ⅷ因子表达未受到抑制，但KDR/Flk-1表达降低，与模型组及未干预组比较，有显著差异（P<0.05）；FQ-PCR所得到的心肌组织KDR/Flk-1 mRNA拷贝数， 卡托普利组最少（P<0.01）；组间两两比较，卡托普利组与模型组、假手术组、未干预组比分别为P<0.05、P<0.01、P>0.05，即卡托普利组KDR/Flk-1 mRNA拷贝数与未干预组接近，明显少于模型组和假手术组。 结论： 在长期应用ACEI类药物卡托普利后，可以抑制心肌中缺血心肌KDR/Flk-1的表达，不会明显抑制心肌的血管新生，还有可能改善缺血心肌局部的血供。     

有氧运动通过调节海马小胶质细胞表型极化缓解青春期间歇性酒精暴露所致的成年期大鼠认知障碍

目的：探究有氧运动对青春期间歇性酒精暴露（AIE）大鼠成年期海马小胶质细胞活化水平和表型极化的影响。方法：出生后28 d(P28)的雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水安静（SS）组、生理盐水运动（SE）组、酒精安静（AS）组和酒精运动（AE）组。从P28到P55,AS和AE组大鼠进行酒精灌胃（200 g/L乙醇，5.0 g/kg,2 d灌胃，2 d休息，共灌胃4周），SS和SE组大鼠在同一时点接受等体积的生理盐水灌胃。从P28到P83,SE和AE组大鼠进行8周跑台运动干预。八臂迷宫实验检测大鼠学习记忆能力；免疫荧光染色检测海马组织小胶质细胞数量、形态和表型；ELISA检测海马组织促炎因子和抗炎因子的表达。结果：运动减少AIE大鼠八臂迷宫实验中的工作记忆错误和完成时间（P<0.05或P<0.01）。运动减少AIE大鼠海马组织小胶质细胞数量（P<0.01），降低小胶质细胞形态指数（P<0.01）。运动减少AIE大鼠海马组织M1型小胶质细胞数量（P<0.01），增加M2型小胶质细胞数量（P<0.01）。运动减少AIE大鼠海马组织促炎因子白细胞介素1β(I...     

Attenuation of the exercise-induced increase in skeletal muscle Flt-1 mRNA by nitric oxide synthase inhibition

We investigated the vascular endothelial growth factor (VEGF) receptor [fms-like-tyrosine kinase (Flt-1 and fetal liver kinase-1 (Flk-1)] response to acute exercise. In female Wistar rats, the VEGF receptor messenger RNA (mRNA) response to a single acute exercise bout was examined using semi-quantitative Northern blot from the left gastrocnemius muscles at rest and post-exercise at 0, 1, 2, 4, 8, 16, 24 and 48 h. Exercise altered both Flt-1 and Flk-1 mRNA, with significant increases in Flt-1 mRNA at 1 and 24 h. However, post-hoc analysis was unable to discern the time point where a significant increase in Flk-1 mRNA occurred. To investigate the regulation of Flt-1 mRNA by exercise we examined if nitric oxide synthase (NOS) inhibition alters the Flt-1 mRNA response. Eight groups [Condition: Rest or Exercise; Drug: Saline, 30 mg kg(-1)N(omega)-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME), 300 mg kg(-1) L-NAME or 300 mg kg(-1) D-NAME] were used to determine the effect of NOS inhibition on the Flt-1 mRNA response to exercise. L-NAME, a known NOS inhibitor, attenuated the exercise-induced increase in Flt-1 mRNA by approximately 50%. These findings suggest that: (1) exercise alters Flt-1 and Flk-1 gene expression; and (2) NO is important in the regulation of the Flt-1 gene response to exercise.     

Vascular endothelial growth factor and its receptor Flk-1 are expressed in the hippocampus following entorhinal deafferentation

Vascular endothelial growth factor (VEGF) has been thought of as a mitogen that promotes proliferation of endothelial cells and as a neurotrophic factor that stimulates neurogenesis and axonal growth in both peripheral and central nervous systems. To investigate the potential involvement of VEGF in the lesion-induced reorganization in the brain, the expression changes of VEGF and its receptor Flk-1 were analyzed in the mouse hippocampus after transections of the entorhinal afferents. In situ hybridization and immunohistochemistry showed the time-dependent expression upregulation of VEGF mRNA and protein in the entorhinally denervated hippocampal stratum lacunosum-moleculare and dentate outer molecular layer, which initiated by 3 days postlesion, reached its maximum at 7-15 days postlesion, still persisted by 30 days postlesion for protein, and recovered to the normal levels at 30 days postlesion for mRNA and at 60 days postlesion for protein. Double labeling of VEGF and glial fibrillary acidic protein revealed that VEGF-expressing cells in the denervated areas were reactive astrocytes. Semi-quantitative RT-PCR analysis showed that VEGF receptor Flk-1 mRNA was also time-dependently upregulated in the deafferented hippocampus with its maximal elevation at 7-15 days postlesion while the Flt-1 mRNA levels remained unchanged at any time point we examined. Immunohistochemistry analysis also displayed the upregulation of Flk-1 protein in the denervated stratum lacunosum-moleculare and outer molecular layer with a time course similar to that of VEGF mRNA upregulation. Flk-1 receptors were found to be expressed not only by reactive astrocytes but also by neurites, which most likely belong to sprouting axons by 7 days postlesion and regrowing dendrites by 15-30 days postlesion. From these data we suggest that the spatiotemporal upregulation of VEGF and Flk-1 in the hippocampus is induced by entorhinal deafferentation and that VEGF may be involved in the structural reorganization in the deafferented hippocampus via directly or indirectly promoting neurite growth.     

含人AGM区基质细胞培养体系定向诱导胚胎干细胞为造血干细胞的实验研究

目的： 体外模拟胚胎早期AGM区造血微环境，诱导胚胎干细胞（ESCs）分化为造血干细胞（HSCs）。方法：将小鼠E14 ESCs在含BMP-4及VEGF的半固体培养基中诱导为拟胚体（EB），分别于3、6、9、12、15 d时收获EB，流式细胞术检测Flk-1+细胞含量。取Flk-1+ 细胞处于高峰期的EB细胞，在人AGM区基质细胞饲养层上进一步诱导分化，并设无饲养层对照，分别于3、6、9、12 d时收获细胞计数、流式细胞术检测Sca-1+c-kit+ 细胞含量，并分析造血细胞集落形成能力。结果：诱导E14细胞形成EB过程中添加BMP4+VEGF的因子组Flk-1+细胞在第9 d达峰值（27.53%± 2.84％），与未添加因子组（8.77%± 1.12％）比较差异显著(P<0.05)。将培养9 d的EB细胞在hAGMS3、hAGMS4饲养层上进一步诱导分化，第6 d时Sca-1+c-kit+细胞达峰值，分别为7.31%±1.21％、7.62%±1.52％，其绝对数分别扩增(2.57±0.48)倍、(2.35±0.36)倍，与无饲养层组比较显著差异（P<0.05）。该分化阶段的Sca-1+c-kit+细胞具有形成各系造血细胞集落的能力。结论：人胚早期AGM区基质细胞能促进小鼠ESCs定向分化为HSCs，为研究ESCs分化为HSCs的分子机制提供了实验模型。     

激活蛋白-1(c-Fos/c-Jun) mRNA水平与牙龈炎症相关性研究

目的 研究激活蛋白-1 (AP-1) (c-Fos/c-Jun) mRNA的表达水平与牙龈炎症间的相关性,探讨牙周炎的发病机理.方法 将获得的牙龈组织根据牙龈指数(GI)分为3组:GI=0组(对照组,14例)、GI=1组(15例)和GI=2组(11例).提取各组牙龈组织的总RNA,反转录合成cDNA,采用反转录PCR检测健康牙龈组织(GI=0组)中c-Fos mRNA和c-Jun mRNA的表达情况,实时定量PCR分析各组c-Fos mRNA和c-JunmRNA的表达水平.结果 c-Fos mRNA和c-Jun mRNA在健康牙龈组织中均有表达.GI=1组c-Fos mRNA和c-Jun mRNA的表达水平(15.58±.9.19、3.47±1.77)明显高于GI=0组(1.31±1.03、1.32±0.94),差异均具有统计学意义(均P＜0.05).GI=2组c-Fos mRNA的表达水平(3.01±1.48)低于GI=1组(P＜0.05),但高于GI=0组(P＜0.05);c-Jun mRNA的表达水平(1.48±0.65)低于GI=1组(P＜0.05),但与GI =0组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AP-1 (c-Fos/c-Jun)与牙龈炎症程度存在相关性,提示其参与牙龈炎症的发生发展.     

Acute effects of continuous and high‐intensity interval exercise on executive function

The purpose of this study was to examine the acute effects of 20‐min of cycling exercise at varying exercise intensities on executive function performance. Participants (N = 107) completed a baseline measure of executive function (Stroop task [ST]) and a graded cardiovascular exercise test during Visit 1. During Visit 2, participants were randomized to groups and completed 20 min of activity involving: high‐intensity interval exercise, high‐, moderate‐ or very‐light intensity continuous exercise, or no‐exercise (control). The ST was performed immediately following the exercise/control manipulation and at 10‐min post‐manipulation. Results showed exercise positively influenced executive function immediately after exercising in all groups with the exception of the very‐light intensity exercise group, while all groups showed significant improvements at 10‐min post‐exercise. Findings also revealed a significant difference between the moderate‐intensity exercise group in comparison to the very‐light intensity exercise group immediately post‐exercise. Among the exercise stimuli investigated, results suggest moderate‐intensity exercise provides the greatest beneficial effects on executive function immediately following exercise. Future research should focus on mechanisms that would account for enhanced executive function performance following acute exercise and dose–response effects.     

BMSCs移植后通过分泌神经营养因子对大鼠脑缺血神经功能改善的实验研究

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植改善大鼠脑缺血后神经功能及探讨其可能机制。方法采用线栓法构建大鼠永久性脑缺血动物模型,实验动物分缺血对照组和移植治疗组(n=24/组),缺血24h后移植治疗组经尾静脉移植体外培养的同种异体骨髓间充质干细胞(2×106cells/mLPBS)。移植后14d用Nissl染色观察移植前后缺血脑组织神经元缺损变化。于移植后1、7和14d用mNSS评分检测大鼠神经功能综合评价,于移植后1、3、7和14d用ELISA方法检测缺血中心区脑组织和缺血半暗带中的海马和皮质中VEGF的表达。移植后14d用免疫荧光观察移植后缺血侧海马新生神经元的迁移。结果BMSCs移植14d后大鼠脑缺血损伤的神经功能明显改善。Nissl染色发现BMSCs移植组缺血脑组织中尼1氏体的缺损比对照组少。BMSCs移植组缺血半暗带区的海马在1和3d[(63.324±0.625)pg/mL,(60.125±1.127)pg/mL]与对照组[(31.097±0.677)pg/mL,(35.05±0.681)pg/mL]相比VEGF表达显著增加,差异具有统计学意义(P0.05),缺血半暗带区的皮质中VEGF的表达在BMSCs移植后7和14d[(36.945±0.625)pg/mL,(32.177±1.127)pg/mL],与对照组比[(31.219±0.677)pg/mL,(25.636±0.681)pg/mL]明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,第14天,BMSCs移植组能观察到缺血侧海马新生神经元的迁移。结论BMSCs移植后可使大鼠脑缺血损伤的神经功能显著改善,其作用机制可能为移植的BMSCs通过分泌VEGF等营养因子,促进内源性神经干细胞向脑缺血损伤区迁移,参与损伤修复从而改善脑缺血神经功能。     

弓形虫感染对人早孕母胎界面细胞因子转录水平的影响

研究弓形虫感染时IL-4、IL-10在绒毛滋养层细胞和IFN-γ在蜕膜NK细胞中mRNA水平的变化,从而探讨弓形虫感染致不良妊娠的分子免疫机制。选取正常妊娠5~10周妇女行人工流产术后的绒毛及蜕膜组织14例,利用绒毛组织分离滋养层细胞和蜕膜组织分离蜕膜NK细胞。分别将绒毛滋养层细胞和蜕膜NK细胞平均分为实验组和对照组,加入弓形虫培养和单独培养48 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测滋养层细胞IL-4、IL-10 mRNA表达水平和蜕膜NK细胞IFN-γmRNA表达水平。结果:实验组和对照组IL-4、IL-10、IFN-γmRNA平均表达水平分别为(0.05±0.02)、(0.06±0.03)、(0.33±0.09)和(0.31±0.13)、(0.18±0.06)、(0.08±0.03),三者之间均具有显著性差异(P<0.05、P<0.01、P<0.05);实验组IFN-γ/IL-10、IFN-γ/IL-4的比值分别为(3.96±0.84)和(3.21±0.41),对照组则分别为(0.60±0.21)、(0.78±0.25),两组间同样均具有显著性差异(P<0.01、P<0.01)。早孕期弓形虫感染可致母胎界面Th1型细胞因子表达增高,Th2型细胞因子表达降低,从而打破正常妊娠状态下二者的平衡,可能是早孕期弓形虫感染导致不良妊娠的重要分子机制。     

豚鼠糖尿病性膀胱病逼尿肌中c-kit mRNA和蛋白的表达变化及意义

目的: 检测豚鼠糖尿病性膀胱病(DCP)逼尿肌中酪氨酸蛋白激酶生长因子受体(c-kit)mRNA和蛋白的表达水平,探讨c-kit表达与DCP的关系及其发病机制。方法: 60只豚鼠随机分成对照组20只,实验组40只,实验组采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病豚鼠模型,2组豚鼠饲养10周后运用尿动力学检测并将实验组筛选出DCP组和糖尿病性非膀胱病(NDCP)组,应用RT-PCR、激光共聚焦显微镜技术分别检测各组膀胱组织c-kit mRNA和蛋白的表达。结果: DCP组c-kit mRNA表达显著低于对照组(P<0.01)及NDCP组(P<0.05),相对平均吸光度值分别为4.65±0.47、5.66±0.54、5.54±1.28。糖尿病性膀胱病组c-kit蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)与NDCP组(P<0.01),c-kit蛋白荧光值分别为548.69±48.51、844.67±59.24、856.52±53.03。结论: 豚鼠DCP逼尿肌中c-kit mRNA、c-kit蛋白表达减少,导致c-kit信号通路异常,从而使Cajal样细胞在膀胱中的功能减弱而导致逼尿肌功能障碍发生DCP,因此c-kit表达异常可能是DCP的发病机制之一。     

CTGF在胃癌中的表达及其促进血管生成的机制

目的研究CTGF在人胃癌标本中表达情况及其促进血管生成的机制。方法应用Real Time PCR和免疫组织化学染色检测胃癌标本中CTGF mRNA,VEGF mRNA及其在组织中蛋白表达情况;应用pcDNA3.1质粒上调AGS细胞中CTGF的表达,并用Real Time PCR和Western blot检测VEGF mRNA水平和蛋白水平表达变化;AGS稳定株细胞接种于裸鼠,成瘤后肿瘤组织切片,免疫组化染色。结果与正常组织相比,胃癌组织中CTGF mRNA,VEGF mRNA表达水平均显著增加,免疫组化亦显示CT-GF、VEGF在胃癌的标本中显色比正常对照组织强。统计显示两者mRNA水平及免疫组化表达有相关性（P〈0.05）。转染pcD-NA3.1 CTGF质粒后,AGS细胞中CTGF蛋白的表达上调,Real Time PCR及Western blot检测显示过表达CTGF后,VEGF表达上调。与对照细胞相比,过表达CTGF的AGS的肿瘤形成和生成速度明显加快（P〈0.05）。免疫组化染色显示VEGF的染色明显强于对照组。结论在胃癌中CTGF,VEGF表达明显增加,CTGF可能通过上调VEGF表达促进肿瘤血管生成。