γ射线对白血病细胞K562 ppGalNAcT2 Mrna表达的影响及中药多糖的防护作用

目的 探讨γ射线对白血病细胞株K562中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mR-NA表达的影响,并探讨中药多糖对此种影响的防护作用。方法 以不同剂量的~(60)COγ射线照射K562细胞,并设加中药多糖实验组,观察不同剂量(5Gy、10Gy、15Gy)γ射线对K562细胞ppGalNAcT2 mRNA表达影响,及加入不同剂量中药(50mg/L,100mg/L,200mg/L)后对10Gy照射K562细胞组中T2 mRNA表达的防护作用。以RT-PCR法检测ppGalNAcT2 mRNA的表达差异变化。结果 γ射线照射K562细胞后ppGalNAcT2 mRNA表达明显减少,且与剂量呈负相关,而中药多糖则可对抗此种作用,使加中药多糖组细胞在照射后ppGalNAcT2 mRNA表达水平维持在正常细胞水平。结论 5～15Gyγ射线照射抑制白血病细胞ppGal-NAcT2 mPNA表达,可能与肿瘤细胞受照后分化抑制有关,而中药多糖明显对抗此种抑制作用。     

K562和SiHA细胞株经γ-射线照射后细胞周期阻滞与ATM表达量的关系研究

共济失调毛细血管扩张症（ataxia telangiectasis,A-T）是由ATM（ataxia telangiectasis mutant）基因突变所致,其突出特点是对放射线敏感.为探讨K562和SiHA两种肿瘤细胞株ATM表达量与γ-射线照射后细胞周期阻滞即自我保护功能之间的关系,应用半定量RT-PCR测量它们的ATM mRNA表达,同时以6、10和15 Gy 60Co γ射线分别照射细胞,并于照射后6、12、24、48及60小时观察细胞周期阻滞现象和凋亡率的变化.结果显示,K562细胞株ATM RNA相对表达量为0.04,而在SiHA细胞株为0.80,SiHA的ATM RNA表达量约为K562的20倍.结论：照射后K562和SiHA细胞株均表现G2/M期阻滞,K562细胞周期阻滞即自我保护机制明显比SiHA差.     

硝普钠促进辐射诱导的K562细胞凋亡的相关研究

目的：观察经不同剂量X射线及联合一氧化氮供体硝普钠在照射后不同时间点对K562细胞生长增殖及凋亡的影响，为提高肿瘤放射治疗效果提供理论依据。方法：以人红白血病细胞株K562细胞为研究对象，加入终浓度为0．1mmol／L的硝普钠共孵育一段时间后，经不同剂量X射线照射，继续培养不同时间分别收获细胞样品，MTT法检测细胞增殖．AO／EB双染法和流式细胞仪检测细胞凋亡和周期。结果：单纯辐射与硝普钠联合辐射对K562细胞的生长增殖均有一定的抑制作用并诱导其凋亡。且硝普钠与辐射联合作用时。X射线诱导K562细胞生长增殖抑制及细胞的凋亡率大于硝普钠和X射线单独作用之和。且随时间的延长及照射剂量的增加而增加；硝普钠对细胞周期的影响在照射前后小剂量（〈4Gy）时没有明显差异，均以G0／G1期阻滞为主，只是在大剂量时有明显不同；8Gy、12h时，照射前以G0／G1期阻滞为主，照射后12h出现明显的G2/M期阻滞，随照射剂量的增加G2／M期阻滞达到高峰，以后随时闾的延长G／M期阻滞逐渐解除，组问有统计学差异。结论：硝普钠在一定程度上可以抑制肿瘤细胞的生长增殖并促进辐射所致肿瘤细胞的凋亡。提高肿瘤细胞的辐射敏感性。[著者文摘]     

60Coγ射线照射人胶质瘤细胞U251对糖基转移酶β3GnT8及多聚乳糖胺糖链的影响

目的 研究60Coγ射线照射胶质瘤细胞U251对β3GnT8及多聚乳糖胺糖链的影响,为治疗恶性肿瘤和研究高效、低毒的辐射防护剂奠定实验基础.方法 采用0Gy、1Gy、5Gy和8Gy剂量的60Coγ射线辐照胶质瘤细胞U251,Western blotting检测60Coγ射线对β3GnT8蛋白水平表达的影响;流式细胞术分析60Coγ射线对多聚乳糖胺糖链表达水平的影响.结果 随着60Coγ射线辐照剂量的增加,β3GnT8蛋白和细胞表面多聚乳糖胺糖链表达水平逐渐降低.结论 60Coγ射线照射胶质瘤细胞U251对β3GnT8和多聚乳糖胺糖链表达均有影响,为研究高效、低毒的辐射防护剂奠定一些实验基础.     

用脉冲电场凝胶电泳研究γ射线诱导的DNA双链断裂

用不同剂量的60Coγ射线照射GM0639细胞,利用脉冲电场电泳仪测量DNA双链断裂后的断裂片段分布。结果表明在20~100Gy的照射剂量下,γ射线引起的DNA断裂片段释放的比例(FAR)随照射剂量的增加而增加,在剂量比较大时释放的比例(FAR)趋于饱和,DNA断裂片段的平均长度随照射剂量的增加而减小,60Coγ射线对GM0639细胞的断裂产额为(6.00±0.6)×10-9Dsb/Bp/Gy。     

γ射线照射单倍型供者淋巴细胞输注抗白血病作用的实验研究

目的　探讨 7.5Gyγ射线照射单倍型供者淋巴细胞输注 (DLI)的体内抗白血病作用。方法　荷L61 5白血病 61 5(H 2 k) /BALB/c(H 2 d)F1小鼠 ,于接种L61 5白血病细胞后第 3天接受环磷酰胺(CTX ,2 0 0mg/kg)化疗 ,分别于化疗后第 3 ,5,7天输注 1× 1 0 7经 7.5Gyγ射线照射的亲代BALB/c(H 2 d)小鼠脾淋巴细胞 ,观察抗白血病作用。结果　单倍型供鼠脾淋巴细胞体外经 7.5Gyγ射线照射后 ,增殖能力趋于消失 ,而细胞毒活性增强。输注给荷瘤L61 5CF1小鼠后 ,受鼠的生存期延长为 (1 5.4± 1 .2 )d ,与CTX化疗对照组比较 ,差异具有显著的统计学意义 (t=1 0 .0 3 ,P <0 .0 0 1 ) ,且无严重移植物抗宿主病 (GVHD)发生。结论　 7.5Gyγ射线照射单倍型供者淋巴细胞输注能够在减轻GVHD发生的同时 ,保留抗白血病作用 ,为延迟或预防白血病复发提供一种简便易行的方法。     

白血病细胞放射生物特性初步探讨及不同分割照射方式细胞存活率的比较

目的 探讨相同剂量下不同分割照射方式对人白血病细胞K562和S-801存活率的影响。方法体外培养人白血病细胞K562和S-801，进行半固体培养基集落形成实验，RADIO-MED软件拟合剂量-存活曲线，得到相关参数D0、Dq、N值，分析白血病细胞的亚致死性损伤修复能力，并对比相同剂量下单次照射组与分次照射组（8Gyvs4Gy×2；12Gy vs 2Gy×2×3）的细胞存活率差异。结果1．K562和S-801两种白血病细胞的剂量-存活曲线肩段都很窄，Dq值分别为0．39和0．28；2．相同剂量下单次与分次照射细胞存活率无显著差异（P〉0．05）.结论白血病细胞的亚致死性损伤修复能力很弱。在分次照射间期几乎不存在放射损伤修复，相同剂量下单次照射与分次照射效应相似。     

~(60)Coγ辐射致小鼠血液中miRNA表达改变及意义

目的探讨~(60)Coγ射线辐射损伤对小鼠血液miRNA的影响及意义。方法 SPF级C57BL/6J小鼠25只随机分为对照组、0.5Gy照射组、2Gy照射组、6Gy照射组和10Gy照射组,每组5只。0.5Gy照射组、2Gy照射组、6Gy照射组和10Gy照射组分别采用~(60)Coγ射线0.5、2.0、6.0、10.0Gy剂量进行射线照射,剂量率为10.0Gy/h;对照组不进行射线照射。照射后6、24h各组检测外周血白细胞计数,应用Agilent microRNA生物芯片筛选小鼠血液中差异表达miRNA。结果照射6h后,0.5Gy照射组差异表达miRNA 11个,2Gy照射组16个,6Gy照射组12个,10Gy照射组28个,对照组0个;照射24h后,0.5Gy组差异表达miRNA 32个,2Gy照射组36个,6Gy照射组30个,10Gy照射组26个,对照组0个;照射6、24h时各剂量照射组miRNA差异表达均高于对照组(P0.05);10Gy照射组照射6h时miRNA差异表达高于0.5、2、6Gy照射组(P0.05),照射24h时与0.5、2、6Gy照射组比较差异无统计学意义(P0.05);筛选27个miRNA组成的表达谱,对辐射损伤剂量和时间判断的准确率、敏感性和特异性均90%;照射6、24h后,6Gy照射组和10Gy照射组外周血白细胞计数均明显低于对照组(P0.05),且照射24h低于6h(P0.05);照射6、24h时,10Gy照射组外周血白细胞计数均明显低于0.5、2、6Gy照射组(P0.05)。结论 miRNA在血浆中差异表达与辐射损伤有关,有可能成为辐射损伤的新血液标志物。     

急性大剂量γ射线照射对小鼠外周血淋巴细胞损伤的作用及其机制

目的：已知射线能引起免疫系统损伤，为此观察急性大剂量γ射线照射后小鼠外周血淋巴细胞的凋亡机制及与免疫功能的关系。方法：用原位末端标记、原位杂交和碱磷酶免疫组化技术观察急性大剂量γ射线照射小鼠外周血淋巴细胞凋亡特征，bax，bcl-2和bcl-XL的表达及T细胞亚群的变化。结果：①照射后，白细胞数迅速下降。而淋巴细胞凋亡率持续升高，7d达到峰值，12个月仍未恢复到正常值。照后24h在6～12Gy范围内呈较好的剂量效应关系，≥15Gy照射后凋亡率降低。②6Gy照后24h，淋巴细胞Bax蛋白表达即出现升高，当剂量为12Gy时达到峰值，≥15Gy照射后出现降低；而Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达在照后24h明显下降，于12Gy照射后降至最低。Bax和Bcl-2 mRNA的表达显示出相似的变化趋势。③照后3d，随照射剂量的增加T细胞及其亚群急剧降低，呈较好的剂量效应关系。结论：≤12Gy照射后细胞凋亡是淋巴细胞的主要死亡方式。照射后Bax的上调及Bcl-XL的下调在急性大剂量照射引起的淋巴细胞凋亡和免疫调控中起重要作用。     

电离辐射对肺腺癌A549细胞血管内皮生长因子C基因表达的影响

目的:探讨不同剂量电离辐射对人肺腺癌A549细胞表达血管内皮生长因子C(VEGF-C)的影响.方法:肺腺癌A549细胞接受不同剂量60Coγ射线照射后,培养12、48 h后提取细胞总RNA,RT-PCR测定VEGF-C基因表达变化,熔解曲线及琼脂糖凝胶电泳分析产物特异性,采用2(-△△CT)法及SPSS 13.0软件进行相关分析.结果:肺腺癌A549细胞射线照射后12 h和48 h,与对照组比较,除0.5、2 Gy照射剂量外VEGF-C表达明显增高;48 h与12 h相比,0.5、1、5 Gy照射剂量组VEGF-C表达明显升高.结论:电离辐射可诱导A549细胞高表达VEGF-C,在放疗早期阶段联合应用抑制VEGF-C基因表达技术既可杀伤癌细胞又可抑制癌细胞远处转移,是一种值得深入研究的新模式.     

2-甲氧基雌二醇对慢性髓系白血病K562细胞Caspase-3及Survivin表达的影响

本研究探讨2-甲氧基雌二醇（2-ME）对慢性髓系白血病（CML）K562细胞caspase-3和survivin表达的影响。实验分3组：对照组,培养基中不含2-ME;实验组,分别用1、2、4、8及16μmol／L的2-ME处理K562细胞;阴性对照组,培养液中以不合RNase的灭菌蒸馏水代替K562细胞。应用TUNEL、流式细胞术（FCM）、半定量RT—PCR分别检测K562细胞凋亡率、caspase-3及survivin蛋白及其基因表达水平。结果表明：2-ME在一定的浓度范围内呈剂量依赖形式诱导K562细胞凋亡,与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．01）,且TUNEL和FCM方法检测的K562细胞凋亡率呈正相关（γ=0．845,P=0．034）。随着2-ME浓度增加,caspase-3蛋白表达量逐渐增加,而survivin蛋白表达量逐渐降低,两者与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;且caspase-3与survivin蛋白表达量之间呈负相关（γ=-0．956,P=0．001）。随着2-ME浓度增加,caspase-3基因表达量逐渐增加,而survivin基因表达量逐渐降低,两者与对照组比较差异均有统计学意义（p均〈0．01）,且caspase-3与survivin基因表达量之间呈负相关（γ=0．966,P=0．001）。结论：2-ME能够以剂量依赖形式诱导K562细胞凋亡,显示了其对CML有潜在的治疗价值。     

不同剂量γ射线照射对体外培养胶质瘤细胞系的影响及对神经功能的保护作用

目的：比较不同剂量γ射线对胶质瘤细胞系C6和SHG-44的影响，建立γ射线诱导胶质瘤细胞系C6和SHG-44凋亡研究的生物模型，探索γ射线照射对胶质瘤细胞周期的影响。方法：采用对数生长期的C6和SHG-44胶质瘤细胞经4，8，16，32和64Gy的γ射线照射后培养48h，用流式细胞仪进行细胞凋亡检测并分析细胞周期的改变。结果：不同剂量γ射线照射均可诱导C6和SHG-44胶质瘤细胞凋亡。C6细胞对照组、4，8，16，32和64Gy组照射后48h的凋亡百分数分别为(3．1&;#177;0.5)，(16．7&;#177;0.6)，(27．9&;#177;0.8)，(27．3&;#177;0.4)，(33．8&;#177;0.7)和(36．7&;#177;0.7)，照射组凋亡率均高于对照组(t=30．16～67．65，P&;lt;0.01)。SHG-44细胞对照组，4，8，16，32和64Gy组照射后48h的凋亡率均高于对照组(t=35．51～103．79，P&;lt;0.01)，但两组细胞的坏死比例均无明显增加(P&;gt;0.05)。SHG-44细胞对电离辐射更加敏感。两种细胞G0／G1期的细胞比例与γ射线照射剂量呈正相关；S期的细胞比例与照射剂量呈负相关。结论：以γ射线照射C6和SHG-44胶质瘤细胞可建立理想的射线诱导的细胞凋亡模型，γ射线照射可引起两种胶质瘤细胞系G1期阻滞和S期延迟。     

γ-射线诱导Jurkat细胞凋亡过程中催乳素对Bcl-2及Bax表达的调节

背景：国内外文献表明．催乳素可通过调节细胞内凋亡相关蛋白的表达促进免疫细胞增殖并抑制细胞凋亡。目的：拟验证催乳素是否能通过调节T细胞Bax和Bcl-2的表达来影响Jurkat细胞凋亡。设计、时间及地点：以细胞为对象的对比观察实验，于2006—07／2007—05在新乡医学院免疫学实验室完成。材料：人白血病T细胞株Jurkat细胞为上海生工产品，人催乳素为sigma公司产品。方法：以10Gyγ-射线照射Jurkat细胞建立细胞凋亡模型。在射线照射前30min内，于模型中分别加入20μg/L．300μg/L和1000μg／L的人催乳素进行干预，同时设不含人催乳素的对照组，以及不进行辐射处理且不加催乳素的正常组。于辐射后的0，24，48h收集细胞。主要观察指标：以四甲基偶氮唑盐法检测Jurkat细胞的增殖情况；以流式技术检测细胞凋亡情况；以琼脂糖凝胶电泳检测Jurkat细胞凋亡DNA：以Western Blot法检测Jurkat细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平。结果：①在γ射线处理后24和48h，与对照组比较，300μg／L和1000μg/L催乳素组和正常组的细胞数量明显增多（P〈0．01）。②在细胞经Y-射线处理后48h，与对照组比较，300μg／L和1000μg／L催乳素组和正常组细胞凋亡率显著降低（P〈0．05）。③在γ-射线处理后的24和48h，与对照组比较，各质量浓度催乳素组Bcl-2／β-actin灰度比值均明显升高（P〈0．01）；300μg/L和1000μg/L催乳素组Bax／β-actin灰度比值明显降低（P〈0．01）。结论：在γ-射线诱导的Jurkat细胞凋亡过程中，催乳素可通过提高Bcl-2的表达并下凋Bax的表达，来抑制Jurkat细胞凋亡。     

不同剂量γ射线照射对体外培养胶质瘤细胞系的影响及对神经功能的保护作用

目的:比较不同剂量γ射线对胶质瘤细胞系C6和SHG-44的影响,建立γ射线诱导胶质瘤细胞系C6和SHG-44凋亡研究的生物模型,探索γ射线照射对胶质瘤细胞周期的影响。方法:采用对数生长期的C6和SHG-44胶质瘤细胞经4,8,16,32和64Gy的γ射线照射后培养48h,用流式细胞仪进行细胞凋亡检测并分析细胞周期的改变。结果:不同剂量γ射线照射均可诱导C6和SHG-44胶质瘤细胞凋亡。C6细胞对照组、4,8,16,32和64Gy组照射后48h的凋亡百分数分别为(3.1±0.5),(16.7±0.6),(27.9±0.8),(27.3±0.4),(33.8±0.7)和(36.7±0.7),照射组凋亡率均高于对照组(t=30.16～67.65,P<0.01)。SHG-44细胞对照组,4,8,16,32和64Gy组照射后48h的凋亡率均高于对照组(t=35.51～103.79,P<0.01),但两组细胞的坏死比例均无明显增加(P>0.05)。SHG-44细胞对电离辐射更加敏感。两种细胞G0/G1期的细胞比例与γ射线照射剂量呈正相关;S期的细胞比例与照射剂量呈负相关。结论:以γ射线照射C6和SHG-44胶质瘤细胞可建立理想的射线诱导的细胞凋亡模型,γ射线照射可引起两种胶质瘤细胞系G1期阻滞和S期延迟。     

铁皮石斛对人正常皮肤成纤维细胞GM0639辐照后微核的影响研究

目的分析铁皮石斛煎剂作用后人正常皮肤成纤维细胞GM0639微核的变化。方法通过MTT法测定不同药物浓度及不同药物作用时间对GM0639细胞存活率的影响,MTT法测定相同剂量^60Coγ射线辐照后培养24h未加药组和加不同浓度药物组细胞的存活率,通过胞质分裂阻滞法（CB法）计数铁皮石斛煎剂作用联合不同剂量^60Coγ射线照射后的微核率（Micronucleus frequency,MNF）和微核细胞率（Micronucleus cell frequency,MNCF）,将铁皮石斛煎剂作用的GM0639细胞与单纯照射细胞的微核率和微核细胞率的统计分析结果进行比较。结果铁皮石斛煎剂在给药浓度0-100mg／mL范围内,铁皮石斛对GM0639细胞没有细胞毒性。4Gy照射后培养24h,随着药物浓度的增加,细胞的存活率均显著增加,加药60mg／mL就可明显提高细胞的存活率。4Gy照射后培养24h,在试验药物浓度为60mg／mL,作用时间为24h时,将CB微核法得到的数据进行回归拟合可以得到药物作用及未经药物作用的剂量效应曲线,比较两组曲线,铁皮石斛作用组的微核率及微核细胞率明显低于单纯照射组（P〈0．05）。结论铁皮石斛可以降低辐照后GM063细胞微核率及微核细胞率,铁皮石斛具有较好的抗辐射作用。     

中华眼镜蛇毒对K562/ADM和难治性急性髓性白血病细胞作用研究

目的:探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对人红白血病/阿霉素细胞(K562/ADM细胞)及原代难治性急性髓性白血病细胞的作用。方法:以K562/ADM细胞及10例急性髓性白血病(AML)患者的原代初发难治性急性髓性白血病细胞为研究对象进行实验,应用不同剂量的NNAV作用于细胞后,采用噻唑蓝实验法(MTT)测定细胞增殖情况,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bcl2表达,流式细胞仪测定凋亡率,蛋白质印迹法检测Caspase-3表达。流式细胞仪检测NNAV对细胞周期的影响,检测原代初发难治性急性髓性白血病细胞细胞周期蛋白D(Cyclin-D)的表达情况;观察以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组有无差异。结果:经过不同浓度的NNAV处理后,无论是K562/ADM细胞还是初发难治性急性髓性白血病细胞,Bcl-2表达下调,Caspase-3表达上调;细胞增殖抑制明显,并具有时间依赖性及剂量依赖性。流式细胞仪检测证实0.8 mg/L和1.0 mg/L的NNAV均能够使原代初发难治性细胞阻滞于细胞周期的G0/G1期,而处于G2/M期的细胞含量减少。10例原发难治性急性髓性白血病细胞中Cyclin-D表达阳性7例,Cyclin-D表达阴性3例,但以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组无显著差异。结论:NNAV在体外可明显抑制K562/ADM细胞和原代初发难治性AML细胞增殖;调节细胞周期停滞于G0/G1期,减少G2/M期的细胞含量,提示NNAV有可能通过干预Bcl-2、Caspase-3表达而诱导细胞凋亡,细胞周期进程可能是中华眼镜蛇毒组分对原发难治性AML细胞的发挥增殖抑制作用的机制。     

60Coγ照射加深低温保存对大鼠同种带瓣主肺动脉免疫原性的作用

目的本实验应用60Coγ射线照射加液氮深低温保存大鼠同种带瓣主肺动脉（Valvedpulmonary hongraf conduit,VPHC）,并建立大鼠VPHC颈总动脉移植模型,观察不同照射剂量对同种带瓣主肺动脉免疫原性的作用,寻找合适照射剂量,为进一步基础研究及临床应用提供理论依据。方法1月龄雌性Wistar大鼠50只,作为供体,成年雄性赋）大鼠50只,作为受体,随机分为实验对照组（单纯深低温保存组）、300Gy照射组、600Gy照射组、900Gy照射组和1200Gy照射组,另取10只sD大鼠行颈总动脉切断吻合术,作为空白对照组。应用流式细胞术对VPHC移植术后1周、2周、3周受体鼠外周血行CD4＋T细胞及CD8＋T细胞检测。结果600Gy照射组VPHC移植术后1周、2周、3周CD4＋T细胞、cD8＋T细胞百分率及cD4＋／cD8＋与空白对照组相比无显著性差异（P〉0．05）,与实验对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论应用60Gy 60Coγ射线对VPHC进行照射在保持VPHC活性的同时明显降低了其免疫原性。     

兔血管平滑肌细胞在低剂量电离辐射后的分子生物学变化

目的：观察体外培养的兔动脉平滑肌细胞(smooth muscle cells，SMCs)对γ射线照射的分子生物学机制。方法：取新西兰白兔(n=2)SMCs培养至第5～7代，对静止期SMCs分别给予γ射线2．5，5．0，10．0，20．0及30．0Gy一次性照射后继续培养4，24或72h。通过原位杂交方法观察γ射线对SMCs的c-fos与p53基因表达的影响。结果：低剂量γ射线照射后早期(4h左右)SMCsc-fos mRNA表达减少，p53mRNA表达增加，而高剂量γ射线照射及低剂量γ射线照射24h及72h时c-fos与p53基因表达无明显变化。结论：SMCs在低剂量电离辐射后，早期发生了c-fos与p53基因改变，c-fos与p53基因的改变可能参与了γ射线抑制SMCs的增殖过程。     

X射线照射对人外周血淋巴细胞 miRNA表达谱影响的初步研究

目的　探讨 X射线照射人外周血淋巴细胞后 miRNA表达谱的变化，为寻找新的辐射损伤生物标志物奠定基础。方法　采集健康成年男性外周血，给予 2Gy与 4Gy X射线照射后分别于 12h和 24h分离外周血淋巴细胞，提取各组细胞总 RNA，采用 Taqman低密度流体芯片技术检测照射组与对照组的 miRNA表达谱差异，并选取 4种 miRNAs进行 PCR单管验证。结果　2Gy与 4Gy X射线照射人外周血淋巴细胞 12h可诱导 283种 miRNAs表达上调，473种 miRNAs表达下调； 2Gy与 4Gy X射线照射人外周血淋巴细胞 24h可诱导 464种 miRNAs表达上调，331种 miRNAs表达下调。其中， 2Gy与 4Gy X射线照射后，有 20种 miRNAs同时表现出时间反应性，即随着照射时间的延长而升高，其升高倍数为 0.25~27.43倍； 8种 miRNA随着照射时间的延长而降低，其下调倍数为 0.11~13.84倍。其次，照射 12h与 24h后，外周血淋巴细胞中仅发现 2种 miRNAs表现出剂量反应性，即随着照射剂量的升高而升高，其升高倍数为 0.16至 1.12倍； 24种 miRNAs随着剂量的增加而降低，其下调倍数为 0.08~45.34。结论　人外周血淋巴细胞经 2Gy与 4Gy X射线照射后，不同时间点可筛选出多种差异表达的 miRNAs，这些差异表达的 miRNAs表现出一定的时间和剂量反应性，可能是辐射损伤评估的潜在指标。     

急性大剂量γ射线照射对小鼠外周血淋巴细胞损伤的作用及其机制

目的:已知射线能引起免疫系统损伤,为此观察急性大剂量γ射线照射后小鼠外周血淋巴细胞的凋亡机制及与免疫功能的关系。方法:用原位末端标记、原位杂交和碱磷酶免疫组化技术观察急性大剂量γ射线照射小鼠外周血淋巴细胞凋亡特征,bax,bcl-2和bcl-XL的表达及T细胞亚群的变化。结果:①照射后,白细胞数迅速下降。而淋巴细胞凋亡率持续升高,7d达到峰值,12个月仍未恢复到正常值。照后24h在6～12Gy范围内呈较好的剂量效应关系,≥15Gy照射后凋亡率降低。②6Gy照后24h,淋巴细胞Bax蛋白表达即出现升高,当剂量为12Gy时达到峰值,≥15Gy照射后出现降低;而Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达在照后24h明显下降,于12Gy照射后降至最低。Bax和Bcl-2mRNA的表达显示出相似的变化趋势。③照后3d,随照射剂量的增加T细胞及其亚群急剧降低,呈较好的剂量效应关系。结论:≤12Gy照射后细胞凋亡是淋巴细胞的主要死亡方式。照射后Bax的上调及Bcl-XL的下调在急性大剂量照射引起的淋巴细胞凋亡和免疫调控中起重要作用。