对比法测定人绒毛膜促性腺激素的效价

<正> 绒促性素的效价测定方法为生物检定法(中国药典九○版二部附录102页),该法条件要求高,结果计算繁琐,并且所需估计效价必须准确,否则要达到所要求的可信限率需经多次检定,消耗大量人力、物力。而目前所报道的一些免疫方法误差又太大,无规律可循,难以与生物检定法的结果相一致。因此本文摸索出了只用少量雌性幼鼠即可准确估计绒促性素效价的子宫增重对比法。该法的结果与生物检定法的结果接近,更适用于生物检定前的效价估计和药厂投料前的效价估计。     

人绒毛膜促性腺激素对早期胚胎发育的影响

于大鼠妊娠第1日一次腹腔注射20～40IU HCG(5～40IU)可引起胚胎儿乎全部丧失,以20IU最严重。第2日给予,胚胎丧失减少。第3、4、5日给予,则无胚胎毒性作用。研究胚胎死亡发生在孕卵植入前、植入时或植入后,发现妊娠第1日给予20IU,胚胎活存数在第4、5日几乎减至零,其影响开始发生在植入前。与此同时,血清雌二醇浓度显著增加,孕酮浓度有较少程度的下降。研究表明:HCG对胚胎的毒性有时间、剂量依赖关系,主要亦发生在植入前,同时血清雌二醇水平显著升高。     

高效价人绒毛膜促性腺激素粗品提取新工艺

本文报道由孕妇尿中提取高效价人绒毛膜促性腺激素粗品的新方法.该法使用一种新型的高效HCG吸附剂吸附活性成分,用醋酸铵乙醇溶液将它洗脱下来,增加乙醇浓度使其沉淀.所得粗品效价为250～500iu/mg,HCG回收率比苯甲酸工艺提高25%.     

人绒毛膜促性腺激素生产新工艺

采用 Polyerde 吸附柱层析,从孕尿起始一步制备500～1000 IU/mg 的 HCG 粗品,活性回收率为92～96%。     

高活性人绒毛膜促性腺激素的制备及其β—亚基的分离和纯化

HCG经改进方法分离纯化、生物活性为14000IU/mg,纯化倍数为4660倍、PAGE呈单带.纯化HCG经解离和纯化得HCG-α和HCG-β亚基,其活性分别为HCG活性的0.086%和0.17%、再经重组结合,可恢复75—81%的生物活性。     

唾液中人绒毛膜促性腺激素的检测及临床应用

尿中人绒毛膜促性腺激素(HCG)的检测在临床上已广泛用于早孕诊断,但对唾液中HCG的实验研究国内报道较少。我们采用ELISA法对唾液中HCG进行了测定,并同时对158例观察对象的唾液与尿液进行了对照试验,初步将唾液中HCG的检测用于早孕诊断,结果满意,现报道如下。     

抗人钠碘转运体单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与初步鉴定

目的 制备抗人钠碘转运体(NIS)单克隆抗体。方法 以人NIS蛋白质的二个片段(第2膜外段和第14f段)为抗原免疫小鼠，运用杂交瘤技术，制备鼠抗人NIS单克隆抗体(rhNIS MAb)，采用小鼠Ig亚类测定试剂条测定单抗的亚类，并通过ELISA、Western-blot、免疫组化技术等鉴定其特异性。结果 运用杂交瘤技术成功地制备出能稳定分泌抗人NIS单克隆抗体的细胞系。Western-blot分析表明：此单抗所识别的靶分子的相对分子量主要在97KD，免疫组化染色显示：甲状腺滤泡细胞基底膜上有棕黄色着色。结论 成功地制备出抗人NIS单克隆抗体，为NIS抗原-抗体的研究提供了新的工具，NIS单克隆抗体不仅可以应用于甲状腺、乳腺等领域的基础研究，而且可以用于临床，为甲状腺疾病的诊断和治疗提供切实保障。     

脾内一次性免疫莸取抗人体肺癌单克隆抗体

用人体肺腺癌细胞(LAX)脾内一次性免疫BALB/C小鼠后,将脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NSO)融合,融合率为80％,对LAX细胞反应阳性率为20％。以酶联免疫吸附试验,免疫荧光试验和免疫组织化学试验,检测其与正常人体细胞,人体肿瘤细胞和人体肺腺癌的反应,发现获得的ALA-05单克隆抗体与正常人体细胞无交叉反应,与多株人体其他肿瘤细胞也无反应,而与人体肺腺癌则呈阳性反应,且为抗膜抗体。免疫扩散法证明其是IgG_(2a)。     

血清FSH、LHⅡ、E2检测在更年期妇女中的意义

目的：探讨血清FSH、LHⅡ、E2检测在更年期妇女中的意义。方法：采用电化学发光法对217例更年期妇女进行血清FSH、LHⅡ、E2测定,并与100名22～35生育年龄妇女对照。结果：更年期组FSH、LHⅡ、E2分别为41.9±17.8mIU/m1、28.6±11.3mIU/m1和27.5±9.2pg/ml,与正常对照组比较,FSH、LHⅡ值明显增高,E2明显降低,差异非常显著（P〈0.01）。结论：血清FSH、LHⅡ、E2检测可作为诊断更年期综合征、卵巢早衰的特异性指标。更年期妇女40岁以后每年定期检测FSH、LHⅡ、E2激素水平,对提高生命质量有着重要意义。     

抗癌抗生素C1027与单克隆抗体Fab片段偶联物的抗肝癌作用

抗人肝癌单克隆抗体(单抗)3A₅用木瓜蛋白酶消化得到Fab片段。单抗3A₅和Fab片段分别与抗癌抗生素C1027偶联,偶联物经克隆生成法测定对肝癌细胞有很强的杀伤作用,C1027,Fab-C1027和3;3A₅-C1027的IC₅₀分别为6.5×10^-16,8.6×10^-16和4.2×10^-14mol·L^-1;Fab-C1027偶联物对非靶细胞(KB)的IC₅₀值为1.4×10^-13mol·L^-1,与靶细胞(BEL-7402)的IC₅₀值相比,两者相差160倍。说明Fab-C1027的杀伤活性强于3A₅-C1027,并对靶细胞呈选择性杀伤作用。给皮下移植人肝癌的裸鼠iv剂量0.1 mg·kg^-1,结果C1027和Fab-C1027的抑瘤率分别为59和85%,说明Fab片段与C1027偶联物比游离C1027的疗效更高。     

抗成骨肉瘤单克隆抗体的研制及其反应性

用人新鲜骨肉瘤组织免疫BALB/C小鼠,经融合、筛选,获4株杂交瘤细胞株,分泌的单克隆抗体AOS-01、02、03、及04与多种人体正常组织无交叉反应。用ELISA、免疫荧光或免疫组织化学染色法检测了该4株单抗与3株人体骨肉瘤细胞株及10例人骨肉瘤标本的反应性,结果4株单抗对不同标本的反应性不相同。     

人单克隆抗体与平阳霉素偶联物治疗乳腺癌实验研究

抗乳腺癌人单抗CMI用DextranT-40为中介体的方法与平阳霉素(PYM)偶联,体外实验显示CMI-PYM偶联物对人乳腺癌细胞的IC₅₀(抑制50%克隆生成浓度)为0.35μmol·L^-1;游离PYM为4.0μmol·L^-1。裸鼠体内实验证明,局部给予CMI-PYM偶联物(2.5mg·kg^-1)对移植的人乳腺癌抑制率达95%,等剂量平阳霉素为58%。结果表明人单抗CMI-平阳霉素偶联物对乳腺癌有显著疗效,偶联物对肿瘤的抑制作用比游离平阳霉素更强。     

烯二炔抗癌抗生素单克隆抗体的制备及初步应用

抗癌抗生素C1027分子由一个含110个氨基酸的蛋白和一个含烯二炔结构的发色团非共价结合而成。发色团是C1027的活性部分,易被紫外线照射灭活,蛋白则对发色团有保护作用。以紫外灭活的C1027为抗原,用杂交瘤技术,制备了小鼠抗C1027单克隆抗体F9。免疫印迹证实单抗F9能特异性识别C1027,该单抗对C1027与紫外线灭活C1027的亲和力无显著差别。单抗F9对C1027的亲和常数为2.2±0.47×10⁷L·mol^-1,其亚型为IgG1。克隆形成测定结果表明,单抗F9对C1027的细胞毒性无明显影响,提示该单抗没有对C1027的发色团产生封闭效应。ELISA与Westernblot测试说明单抗F9能与裁短的C1027基因工程肽发生特异性结合。提示单抗F9可用于C1027基因工程的研究,并可能用于研究C1027的代谢与分布及筛选大分子抗肿瘤抗生素等方面。     

单克隆抗体与丝裂霉素交联物对人胃癌细胞的选择性杀伤作用

本文选用抗胃癌单克隆抗体(MoAb)3H 11与Mitomycin C(MMC)制备交联物。体外实验结果表明,3H 11-MMC对人胃癌细胞BGC 823有明显的杀伤作用。而且有明显的选择性:3H 11-MMC(相当于MMC 100 ng/ml)对靶细胞的杀伤率为71%,而对非靶细胞MCF-7仅为14%。MoAb 3H11与靶细胞预温后可使杀伤率(1 μg/ml)由85%下降为38%,而与MoAb 3G9预温却无明显影响。体内实验表明。3 H 11-MMC处理组,肿瘤形成的时间较各对照组明显延长,肿瘤生长速度明显减慢,具有显著性差异。     

大鼠单克隆抗体与博来霉素A6偶联物治疗人大肠癌实验研究

用Dextran T-40为中介体偶联大鼠抗人大肠癌单克隆抗体R19和博来霉素A6。体外实验显示R19与A6偶联物对人盲肠癌细胞Hce-8693抑制50%克隆生成浓度(IC₅₀)为0.019μmol/L;游离A6及无关单抗与A6偶联物M3-A6分别为1.05和1.00μmol/L;对人结肠HT-29细胞IC₅₀为0.078μmol/L,而游离A6为4.0μmol/L。同时加入R19单抗能阻断R19-A6偶联物的细胞毒性。体内实验显示:R19-A6偶联物对裸鼠移植的人盲肠癌生长的抑制率达90%,而同等剂量的游离A6,R19与A6混合物和M3-A6的抑制率分别为52,34和48%。结果表明单抗R19与A6偶联物对人大肠癌的抑制作用明显比游离A6强。     

单克隆抗体与博来霉素A6偶联物对肝癌的实验研究

用Dextran T40为中介体的方法偶联抗人肝癌单抗Hlll和博来霉素A6,体外实验显示Hlll与A6偶联物对人肝癌细胞抑制90%克隆生成浓度(IC₉₀)为0.17μmol/L:游离A6以及无关抗体与A6偶联物M3-A6分别为17/μmol/L和7μmol/L;同时加入Hlll单抗明显降低Hill-A6偶联物的细胞毒性;体内实验证明:Hlll-A6偶联物对裸鼠移植的人肝癌抑制率达78%,等剂量A6,M3-A6偶联物和Hlll与A6混合物的抑制率均约为30%。结果表明单抗Hlll与A6偶联物对肝癌的抑制作用明显比游离A6强。