P2Y受体与卵巢癌转移相关性初步研究

目的探讨P2Y受体在卵巢癌细胞中的表达及其与卵巢癌转移之间的关系。方法采用RT-PCR检测P2Y受体在卵巢癌细胞系中的表达,趋化试验分析P2Y受体与卵巢癌转移的关系。结果 P2Y受体在5株卵巢癌细胞中的表达有明显的差异,其中P2Y12在所有卵巢癌细胞株中均无表达,而P2Y1弱表达于HO-8910、CAOV-3和细胞中,P2Y6弱表达于HO-8910和SW626细胞,在其他细胞株中不表达。HO-8910细胞株几乎表达所有检测的P2Y受体,而3AO细胞株仅表达P2Y15受体。趋化试验表明,卵巢癌细胞能在ATP作用下发生明显移动,以ATP浓度为1.0×10-6mol·L-1时趋化作用最明显,其趋化指数（CI）为4.3±0.6,这种趋化作用是一种定向迁移,而非随机运动。结论 P2Y受体在卵巢癌的转移中可能发挥着重要的作用。     

P2Y及P2Y2受体的研究进展

嘌呤P2受体家族是比较复杂的受体家族之一,可分为门控离子通道P2X受体和G蛋白偶联P2Y受体,目前已有7种P2X受体和8种P2Y受体被克隆。随着分子生物技术的发展,P2Y受体的研究取得了明显的进展,P2Y受体在体内分布广泛,功能复杂,迄今为止已从人体组织细胞克隆出的P2Y受体分别为P2Y1,2,4,6,11,12,13．14。P2Y2受体作为P2Y受体的一个重要亚型,与诸多生理功能密切相关,日趋受到人们的重视。本文针对P2Y受体和P2Y2受体的分子结构特征,分类和生理功能等方面进行综述。     

P2X嘌呤受体及其调节

P2受体广泛分布于全身多种组织和系统中，根据其分子结构和信号转导机制的不同分为P2X和P2Y受体，现在人们普遍认为P2X是配体门控性阳离子通道，P2Y是G-蛋白耦联受体。最初对P2X受体的研究仅局限在药理学的研究，到10世纪中期相继克隆出7种P2X受体亚基之后，对它的研究才突飞猛进。本文主要对近年来P2X受体的结构、分布及其调节进行综述。     

吗啡精神依赖对大鼠消化道嘌呤受体亚型P2Y2mRNA表达的影响

目的 观察吗啡条件性位置偏爱(CPP)大鼠消化系统食道、胃、十二指肠P2Y2受体mRNA表达的变化,探讨阿片类精神依赖下消化系统异常的分子机制。方法 吗啡剂量递增颈背部皮下注射建立大鼠吗啡CPP模型,实时荧光定量RT-PCR分别检测其食道、胃、十二指肠P2Y2受体mRNA的表达水平,采用2-( △△Ct) 方法进行比较分析。结果 与生理盐水对照组比较,模型组大鼠在白箱的停留时间明显延长(P＜0.01);食道、胃、十二指肠P2Y2受体mRNA表达水平下调,分别仅为NS对照组的0.53、0.14和0.26倍。结论 P2Y2受体mRNA表达下调可能与吗啡精神依赖过程胃肠道功能的失调有关。     

P2Y受体激动剂2-mesADP诱发脊髓背角小胶质细胞[Ca2+]i升高

目的观察体外培养的背角小胶质细胞P2Y受体激活对其[Ca2+]i的影响。方法培养并纯化脊髓背角小胶质细胞,采用激光共聚焦技术观察P2Y受体激活后小胶质细胞[Ca2+]i的变化。结果 P2Y受体激动剂2-mesADP在10μm即可引起小胶质细胞[Ca2+]i升高,当随着2-mesADP浓度增大,小胶质细胞[Ca2+]i升高更为明显。结论体外培养的大鼠脊髓背角小胶质细胞P2Y受体激活可以促进细胞[Ca2+]i升高。     

雌激素对MCF-7细胞P2Y2 mRNA的抑制作用

目的探讨在MCF-7细胞株中雌激素是否影响P2Y2 mRNA的表达。方法取生长良好的MCF-7细胞,以不同浓度17β-雌二醇(17β-E2)、雌激素受体(ER)拮抗剂ICI182780、ERα拮抗剂MPP和ERβ拮抗剂PHTPP作用于细胞,应用实时定量RT-PCR方法测定细胞中P2Y2受体mRNA表达。结果在MCF-7细胞中,雌激素(1nmol/L～1μmol/L)下调P2Y2 mRNA的表达量从对照组的(73.79±8.91)%减少至对照组的(53.68±5.90)%,这种下调作用可以被ER拮抗剂ICI182780(1μmol/L)拮抗,ERα的拮抗剂MPP(50μmol/L)可以部分阻断雌激素(0.1μmol/L)的作用,而ERβ拮抗剂PHTPP(50μmol/L)对雌激素(0.1μmol/L)的作用无影响。结论雌激素通过ERα抑制P2Y2 mRNA的表达,这一途径可能参与了雌激素对MCF-7细胞的促增殖作用。     

趋化因子受体CXCR4的表达与骨肉瘤转移的相关性研究

目的 探讨趋化因子受体CXCR4在骨肉瘤组织中的表达及其与血行转移的相关性.方法 应用MaxvisionTM法检测21例骨肉瘤组织中CXCR4的表达情况.结果 21例骨肉瘤患者中CXCR4阳性表达率为52.4%(11/21),其中TNMI-Ⅱ者的阳性表达率为37.5%(3/8),TNMⅢ-Ⅳ者的阳性表达率为61.5%(8/13),两者比较差异有统计学意义(P＜0.05);无淋巴结转移者的阳性表达率为46.2%(6/13),有淋巴结转移者的阳性表达率为62.5%(5/8),两者比较差异有统计学意义(P＜0.05);骨肉瘤组织中CXCR4的表达与肿瘤大小无关(P＞0.05).结论 骨肉瘤转移是通过调节CXCR4的表达,促进肿瘤细胞向特异性靶器官迁移;CXCR4表达可作为骨肉瘤预测预后的指标之一.     

P2Y6受体生物学效应的研究进展

嘌呤受体分为P1和P2受体两大类,其中,P2受体又分为配体门控离子通道型受体(P2X受体)和G蛋白偶联型受体(P2Y受体)。P2Y6受体是P2Y家族中的一员,P2Y6受体参与心血管疾病、内分泌疾病及神经病变等疾病的发生。随着氯吡格雷（P2Y12受体阻断剂）等嘌呤受体阻断剂被FDA批准应用于临床,且表现出良好的疗效,P2Y6受体的生物学效应的研究,亦成为人们开展针对P2Y受体的新型靶向性药物研究的热点之一。基于分子生物学技术的发展,P2Y6受体生物学效应的研究取得了显著进展。     

电针深刺对三叉神经痛大鼠三叉神经节中P2Y2受体及Kv3.4表达的影响

目的探讨电针深刺法对三叉神经痛(TN)大鼠三叉神经节中P2Y2受体及Kv3.4表达情况的影响,进而阐明此法镇痛机制。方法将30只SD大鼠(成年健康雄性)随机分成假手术组、模型组、电针组,各10只。制备大鼠三叉神经痛模型(眶下神经慢性缩窄环术法)。3组均用细丝法检测大鼠痛阈,分别于14、28 d后检测痛阈并进行组间比较;3组均采用Western blot方法检测大鼠神经节(TG)神经元中P2Y2受体表达情况,并进行组间比较;3组均采用实时定量PCR技术检测大鼠神经节中Kv3.4 mRNA表达情况,并进行组间比较。结果电针深刺法治疗后三叉神经痛大鼠痛阈显著提高(P0.05),TG中P2Y2受体的表达显著下降、Kv3.4 mRNA表达显著增加,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),与假手术组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论此法可以通过降低P2Y2受体表达同时增加Kv3.4 mRNA表达,抑制神经元兴奋性而起到镇痛作用。     

趋化因子受体CCR7对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响

目的检测趋化因子受体CCR7[Chemokine(C-C)Receptor 7]的表达及其对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot检测20例口腔鳞癌组织、口腔鳞癌细胞系Tca-8113、腺样囊性癌细胞系ACC-M(Adenoid Cystic Carcinoma,ACC-M)和10例正常口腔黏膜组织中CCR7的表达。用MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察在CCR7的配体次级淋巴组织趋化因子(Sec-ondary Lymphoid-tissue Chemokine,SLC)作用下对口腔鳞癌细胞的趋化迁移作用。结果①在口腔鳞癌组织和Tca-8113细胞中,CCR7在mRNA及蛋白水平均有强的表达,ACC-M细胞系中CCR7弱表达,而在正常口腔黏膜组织细胞不表达。②口腔鳞癌细胞在SLC作用下增殖反应明显增强,CCR7抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖。③体外实验显示SLC可诱导口腔鳞癌细胞发生明显迁移,在30、50 ng/ml的实验浓度范围内,诱导口腔鳞癌细胞迁移的作用呈明显量效关系。结论 CCR7/SLC受体配体系统可通过介导口腔鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移,从而在口腔鳞细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用,CCR7有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点。     

趋化因子受体CCR7对口腔鳞(癌细胞增殖和迁移的影响

目的 检测趋化因子受体CCR7[Chemokine(C-C)Receptor 7]的表达及其对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot 检测 20例口腔鳞癌组织 、口腔鳞癌细胞系Tca-8113 、腺样囊性癌细胞系ACC-M(Adenoid Cystic Carcinoma,ACC-M)和10例正常口腔黏膜组织中 CCR7的表达.用MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察在CCR7的配体次级淋巴组织趋化因子(Secondary Lymphoid-tissue Chemokine,SLC)作用下对口腔鳞癌细胞的趋化迁移作用.结果 ①在口腔鳞癌组织和Tca-8113细胞中,CCR7在mRNA及蛋白水平均有强的表达,ACC-M细胞系中CCR7弱表达,而在正常口腔黏膜组织细胞不表达.②口腔鳞癌细胞在SLC作用下增殖反应明显增强,CCR7抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖.③体外实验显示SLC可诱导口腔鳞癌细胞发生明显迁移,在30、50 ng/ml的实验浓度范围内,诱导口腔鳞癌细胞迁移的作用呈明显量效关系.结论 CCR7/ SLC受体配体系统可通过介导口腔鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移,从而在口腔鳞细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用,CCR7有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点.     

趋化性细胞因子受体CXCR4在肾透明细胞癌中的分布探讨

目的 研究肾透明细胞癌中趋化性细胞因子受体CXCR4的分布。方法 用免疫组织化学的方法对患者癌组织CXCR4的分布进行探讨，结合手术、病理及临床资料，统计学分析CXCR4表达与淋巴结浸润的关系。结果 所有患者CXCR4呈阳性分布，按照免疫组织化学染色模式将肿瘤分为局灶型及弥散型，其中弥散型又分为强阳性和弱阳性。结合临床资料，发现弥散型和局灶型之间以及强阳性和弱阳性之间在局部淋巴转移方面有显著性差异。结论 CXCR4的表达可能与肾透明细胞癌的转移及预后密切相关。     

CCR2拮抗剂研究进展

细胞表面趋化因子受体2（CCR2）属于G蛋白偶联受体（GPCR）超家族成员,并且是单核细胞趋化蛋白1～4（MCP 1～4）的受体。MCP 1～4是促炎症反应的化学诱导物,CCR2和MCP-1在人类侵蚀性疾病模型如动脉粥状硬化、多发性硬化症中均起显著作用。大量研究证明CCR2和MCP-1拮抗剂可以减少临床炎症模型的发病率,这些化学拮抗剂的结构多样,主要包括γ-氨基丁酰胺类、甘胺酰胺类、噻唑类、吲哚类、二取代双哌啶醇类、季铵盐类和不饱和杂环类等,它们表现出不同的药理活性。CCR2拮抗剂对各种与趋化因子相关的疾病具有较好的疗效,部分药物已经进入临床试验阶段,综述CCR2及其受体拮抗剂的研究进展。     

趋化因子受体CXCR4在肝细胞癌中的表达

目的:研究趋化因子受体CXCR4在肝细胞癌组织、肝癌MHCC97细胞、人脐带血管内皮细胞(HUVEC)中的表达,同时检测肝癌患者腹水中CXCR4的配体CXCL12的含量,为进一步探讨CXCR4在肝癌细胞转移中的作用奠定基础.方法:利用半定量RT-PCR和蛋白印迹方法检测MHCC97细胞、HUVEC细胞、21例不同时期的肝细胞癌组织及17例正常肝组织中CXCR4的表达水平,同时ELISA检测18例肝癌患者腹水中CXCL12的含量.结果:在肝细胞癌组织、肝癌细胞株及血管内皮细胞中,CXCR4在mRNA及蛋白水平的相对表达量分别为2.21±1.09、2.14±1.15、1.72±1.20及1.51±0.12、1.76土0.25、1.89±0.24,正常肝脏组织在mRNA及蛋白水平均未检测到CXCR4的表达.肝细胞癌癌性腹水定量检查结果显示,CXCL12含量为783～8 364 pg/ml(中位数为6 871 pg/ml).结论:肝细胞癌组织和细胞中存在着CXCR4的高表达.但与肝癌临床分期无显著性相关,同时肝癌患者腹水中存在CXCL12的含量升高,这提示CXCR4可能在肝癌的转移中发挥重要的作用.     

粒-巨细胞集落刺激因子对单核细胞表达CCR2的影响

目的:探讨粒-巨细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)对体外培养的人单核细胞株THP-1表达半胱氨酸-半胱氨酸趋化因子受体2(Cysteine-cysteine chemokine receptor2,CCR2)mRNA和蛋白的影响.方法:以不同浓度的GM-CSF处理THP-1细胞,应用半定量RT-PCR方法检测CCR2 mRNA表达,并应用Western蛋白印迹法进一步枪测CCR2蛋白的表达.结果:对照组THP-1细胞表达较低水平的CCR2 mRNA和蛋白,经GM-CSF刺激后各实验组CCR2 mRNA和蛋白表达随GM-CSF浓度和时间的增加而增强.结论:GM-CSF可以刺激THP-1细胞CCR2 mRNA和蛋白的表达,且其增加程度与GM-CSF刺激浓度及刺激时间呈正性相关.     

Cyclosporin A impairs dendritic cell migration by regulating chemokine receptor expression and inhibiting cyclooxygenase-2 expression

Migration of dendritic cells （DCs） into tissues and secondary lymphoid organs plays a crucial role in the initiation of innate and adaptive immunity. In this article, we show that eyelosporin A （CsA） impairs the migration of DCs both in vitro and in vivo. Exposure of DCs to clinical concentrations of CsA neither induces apoptosis nor alters development but does impair eytokine secretion, chemokine receptor expression, and migration. In vitro, CsA impairs the migration of mouse bone marrow-derived DCs toward maerophage inflammatory protein-3beta （MIP-3beta） and induces them to retain responsiveness to MIP-lalpha after lipopolysaecharide （LPS）-stimulated DC maturation, while in vivo administration of CsA inhibits the migration of DCs out of skin and into the secondary lymphoid organs. CsA impairs ehemokine receptor and cyelooxygenase-2 （COX- 2） expression normally triggered in LPS-stimulated DCs; administration of exogenous prostaglandin E2 （PGE2） reverses the effects of CsA on chemokine receptor expression and DC migration. Inhibition of nuclear faetor-kappaB （NF-kappaB） and mitogen-aetivated protein kinase （MAPK） pathway signaling by CsA may be responsible for the CsA-mediated effects on the regulation of ehemokine receptor and eyelooxygenase-2 （COX-2） expression. Impairment of DC migration due to inhibition of PGE2 production and regulation of ehemokine receptor expression may contribute, in part, to CsA-mediated immunosuppression.     

Cyclosporin A impairs dendritic cell migration by regulating chemokine receptor expression and inhibiting cyclooxygenase-2 expression

Cyclosporin A impairs dendritic cell migration by regulating chemokine receptor expression and inhibiting cyclooxygenase-2 expression     

P2Y2受体在人涎腺及腺样囊性癌中的表达

[目的]探讨P2Y2受体在涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma,SACC）中表达的临床意义。[方法]应用免疫组织化学方法检测P2Y2受体在49例SACC和肿瘤周边涎腺组织中的表达及分布,利用显微镜图像分析技术测定P2Y2受体表达的平均灰度值,统计学分析两组该受体表达量的差异。[结果]SACC中P2Y2受体表达的平均灰度值为12.73±7.59,显著高于肿瘤周边涎腺组织的3.76±1.82（P〈0.05）。SACC实性型的表达平均灰度值高于腺样-管状型,Ⅲ~Ⅳ期高于Ⅰ~Ⅱ期,神经侵袭型高于非神经侵袭型,以上分组中两组间差异均具有统计学意义。[结论]SACC中P2Y2受体表达与肿瘤的恶性程度呈正相关性。