高效液相色谱法测定丁公藤中东莨菪内酯的含量

目的:建立测定丁公藤中东莨菪内酯含量的高效液相色谱法.方法:采用高效液相色谱法.以ZORBAX RX-SIL(250 mm×4.6 mm 5 μm)为色谱柱;流动相:甲醇-0.5%冰醋酸(30:70):检测波长:345 nm:流速:1.0 mL/min.结果:东莨菪内酯的加样回收率平均为97.93%RSD为2.14%(n=6).结论:试验结果表明,该方法准确、灵敏度高,重现性好.     

RP-HPLC测定丁公藤中东莨菪内酯的含量

目的:采用RP-HPLC测定丁公藤中有效成分东莨菪内酯的含量.方法:选用CLC-ODS C18色谱柱,采用甲醇-水(0.01%磷酸)二元梯度洗脱,流速1mL·min-1,检测波长347nm.结果:在0.100～4.000μg线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为100.2%(n=6),RSD=2.34%.结论:该方法简便快速,准确度高,重现性好.     

HPLC法测定丁公藤中东莨菪内酯的含量

目的测定丁公藤中东莨菪内酯的含量,提高丁公藤药材的质量标准.方法采用高效液相色谱法,C18柱,以甲醇-水-冰醋酸(32:68:0.16)为流动相,检测波长为298 nm.结果东莨菪内酯在0.0937～3.7472 μg范围内呈良好线性关系(r=1.000),平均回收率为93.85%,RSD为1.75%.结论该方法重现性好,可用于丁公藤药材的质量控制.     

不同来源丁公藤药材中东莨菪内酯含量的研究

目的:采用RP-HPLC法测定不同来源丁公藤药材中有效成分东莨菪内酯的含量。方法:选用CLC-ODS C18色谱柱,采用甲醇-水(0.01%磷酸)二元梯度洗脱,流速:1 mL/min,检测波长:347 nm。结果:在0.100~4.000μg范围内,线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为100.23%(n=6),RSD=1.14%。结论:不同来源丁公藤药材中东莨菪内酯的含量存在着较大差异。     

高效液相色谱法测定枸杞子中东莨菪内酯的含量

目的:建立枸杞子中东莨菪内酯的含量测定方法,为枸杞子质量控制提供新的检验方法.方法:采用HPLC荧光测定法.色谱条件Diamonsil C18柱;以乙腈-0.1%磷酸(25: 75)为流动相;荧光检测波长为λex＝340 nm、λem＝430 nm;流速1 ml/min;柱温40℃.结果:在0.048～2.88 μg/ml之间呈良好的线性关系,回归方程为Y＝4323857.1X 20388.5,r＝0.99996.加样回收率为100.02%,RSD＝3.40%.结论:本方法结果准确灵敏,重现性好,可用于枸杞子商品药材及其制剂的质量控制.     

HPLC测定4种丁公藤类生药中东莨菪素及东莨菪苷的含量

丁公藤为广东、广西民间用于抗风湿的传统药,2 0 0 0年版《中国药典》收载丁公藤ErycibeobtusifoliaBenth .和光叶丁公藤E .schmidtiiCraib的茎藤入药,有祛风除湿、消肿止痛的功效,临床上用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、坐骨神经痛、腰肌劳损等症[1,2 ] 。据文献[3 6 ]报道,丁公藤抗风湿作用的有效成分是东莨菪素(scopoletin)及东莨菪苷(scopolin) ,2个成分均具有一定的镇痛、抗炎、祛痰、平喘的作用。文献[7]曾报道采....     

不同来源丁公藤药材中东茛菪内酯含量的研究

目的:采用RP-HPLC法测定不同来源丁公藤药材中有效成分东莨菪内酯的含量.方法:选用CLC-ODS C18色谱柱,采用甲醇-水(0.01%磷酸)二元梯度洗脱,流速:1 mL/min,检测波长:347 nm.结果:在0.100～4.000μg范围内,线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为100.23%(n=6),RSD=1.14%.结论:不同来源丁公藤药材中东莨菪内酯的含量存在着较大差异.     

RP-HPLC法同时测定丁公藤中东莨菪苷、东莨菪内酯及绿原酸

目的建立RP-HPLC同时定量测定丁公藤中东莨菪苷、东莨菪内酯及绿原酸的分析方法。方法丁公藤甲醇超声提取物的分析在Hypersil ODS色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)实施,乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相系统进行梯度洗脱;柱温30℃;检测波长347 nm;体积流量1.0 mL/min。结果东莨菪苷、东莨菪内酯、绿原酸分别在0.399³1.920μg/mL(r=0.999 9)、0.36031.920μg/mL(r=0.999 9)、0.360²8.800μg/mL(r=0.999 9)、0.41228.800μg/mL(r=0.999 9)、0.412³2.960μg/mL(r=0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为99.9%(RSD为1.3%)、99.5%(RSD为0.6%)、99.9%(RSD为1.0%)。结论本方法中提取溶剂和检测波长适合同时测定丁公藤中3个成分。     

HPLC法测定丁公藤中总东莨菪内酯含量

目的：为确定丁公藤药材质控指标积累数据。方法：ＣＬＣ-ＯＤＳ_１柱,流动相０．５％冰醋酸甲醇溶液水（２６∶５５）,检测波长３１０ｎｍ,反相高效液相色谱法测定总东莨菪内酯含量。结果：平均回收率为９９．３７％,ＲＳＤ０．３９％。结论：提供了３个品种１４批测定数据,其含量限度不低于３０ｍｇ／１００ｇ。     

高效液相色谱法测定藤络宁胶囊中东莨菪内酯的含量

 目的建立测定藤络宁胶囊中东莨菪内酯含量的高效液相色谱法。方法采用高效液相色谱法。以ZORBAX RX SIL(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱;流动相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨水(200∶200∶12∶1)：检测波长：349 nm;流速：1.0 mL·min^-1。结果东莨菪内酯的加样回收率平均为98.02%,RSD为1.98%(n=6)。结论试验结果表明,该方法准确、灵敏度高,重现性好。     

高效液相色谱法同时测定大黄中14种成分的含量

建立高效液相色谱法同时测定大黄中大黄素、大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素甲醚、番泻苷A、番泻苷B、没食子酸、儿茶素、(-)-表儿茶素-3-没食子酸酯、异莲花掌苷、4-4'-羟基苯基-2-丁酮、莲花掌苷、4'-羟基苯基-2-丁酮-4'-O-β-D-(2″-O-桂皮酰基-6″-O-没食子酰基)-葡萄糖苷14个成分含量的方法。采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),采用0.05%的磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温40℃,检测波长268 nm。结果表明在线性范围内14个成分线性良好(r0.999 9);日内精密度和日间精密度均小于3.1%;平均回收率在91.80%~104.1%。同时,对收集到的10个掌叶大黄和10个唐古特大黄合格样品进行定量测定,发现掌叶大黄中含量比较高的成分是芦荟大黄素,唐古特大黄中含量比较高的是4-4'-羟基苯基-2-丁酮,各样品中所有化合物的含量差异都比较大。所建立的含量测定方法能同时测定大黄中14个成分的含量,为大黄药材多成分含量测定和质量控制提供一种简便的方法。     

中药标准组分的高效液相色谱/质谱联用(HPLC/MS)表征

高效液相色谱/质谱联用表征是化学袁征的重要内容,本文通过高效液相色谱/质谱联用方法系统表征中药标准组分,采用了电喷雾电离源(ESI)、大气压化学电离源(APCI)的正负离子扫描模式,获取标准组分在统一分析条件下,不同表征模式中化合物的光谱、质谱信息。通过对不同标准组分中大量表征数据的比对和分析可发现和归纳色谱、质谱规律,用于不同药材的成分差异性研究,以及由系统制备得到的同种药材不同层次标准组分中成分与含量的变化,为制备成分的确定和高效制备条件及参数的优化提供基础。建立包含分析方法的标准组分色谱质谱数据库,结合色谱、质谱规律,实现已知化合物的搜索匹配与自动质谱解析;预测和发现结构类似的未知化合物,提高研究效率,加强中药物质基础研究的系统性和深入性。     

中药标准组分的高效液相色谱/质谱联用(HPLC/MS)表征

高效液相色谱／质谱联用表征是化学表征的重要内容，本文通过高效液相色谱／质谱联用方法系统表征中药标准组分，采用了电喷雾电离源（ESI）、大气压化学电离源（APCI）的正负离子扫描模式，荻取标准组分在统一分析条件下，不同表征模式中化合物的光谱、质谱信息。通过对不同标准组分中大量表征数据的比对和分析可发现和归纳色谱、质谱规律，用于不同药材的成分差异性研究，以及由系统制备得到的同种药材不同层次标准组分中成分与含量的变化，为制备成分的确定和高效制备条件及参数的优化提供基础。建立包含分析方法的标准组分色谱质谱数据库，结合色谱、质谱规律，实现已知化合物的搜索匹配与自动质谱解析；预测和发现结构类似的未知化合物，提高研究效率，加强中药物质基础研究的系统性和深入性。     

Apoptotic effects of a high performance liquid chromatography (HPLC) fraction of Antrodia camphorata mycelia are mediated by down-regulation of the expressions of four tumor-related genes in human non-small cell lung carcinoma A549 cell

Aim of the study

Antrodia camphorata (niu-chang-chih) is a fungus native to Taiwan which is believed to be effective in preventing diseases. Recent reports demonstrate that Antrodia camphorata products induce the apoptosis of various kinds of tumor cells. In this study we determined the inhibitory effects of alcohol extract and individual fractions of alcohol extract on the proliferation of human non-small cell lung carcinoma A549 cell and clarified the mechanism underlying the anti-cancer activities.

Materials and methods

Alcohol extracts of Antrodia camphorata mycelia were prepared by the serial extraction with the solvents with increasing polarity and fractionated using HPLC. Cell viability was determined by MTT assay. Apoptosis detection was carried out by subG₁ analysis and annexin V/propidium iodide staining using flow cytometry. The impacts of HPLC fractions on the expression levels of apoptosis- and cancer-related proteins were evaluated by western blotting.

Results

Three HPLC fractions, fractions 5–7, had robust inhibition of human A549 cells and among them fraction 6 (Fr-6) possessed the most potent effectiveness. Apoptotic assay showed that Fr-6-induced human A549 cell apoptosis by triggering the mitochondrial pathway and endothelium reticulum (ER) stress. Immunoblotting results demonstrated that Fr-6 possibly activated ER stress by lowering the expression level of calpain 1/2 small subunit and Fr-6-mediated decrease in cell proliferation might attribute to the suppressive effect on the Erk 1/2 pathway, which arose from Fr-6-derived low galectin-1 expression. Furthermore Fr-6 could diminish Rho GDP dissociation inhibitor α (RhoGDI-α) expression and subsequently activated c-Jun NH₂-terminal kinase (JNK) pathway, which is linked to cell apoptosis. Fr-6 also could decrease the production level of eukaryotic translation initiation factor 5A, which is a potential cancer intervention target.

Conclusion

These results suggested that the anti-cancer activity of Antrodia camphorata might be due to multiple active metabolites, which work together to induce cell apoptosis via various pathways.