β-内啡肽对IL-1诱导IL-2产生的调节作用

本文研究天然阿片样多肽对IL-1诱导小鼠淋巴瘤细胞系EL-4产生IL-2的作用。实验表明:在rIL-1α或rIL-1β和Ca 离子载体存在情况下,β-内啡肽能明显地增强EL-4细胞产生IL-2,且对rIL-1刺激的反应呈剂量依赖方式。用LBRM33-IA5细     

人大颗粒的淋巴细胞(LGL)是IL-1的强有力的产生细胞

IL-1是由很多种细胞如单核细胞、角质细胞和人树枝状细胞产生的分子量为1.2-1.8万的一种淋巴因子,它在免疫调节和炎症反应中超重要作用.近年来已有报告IL-1和IL-2或干扰素在增强LGL介入的NK活性中起协同作用.本文报告高度纯化的具有NK活性的人LGL能被刺激分泌IL-1.     

IL-2对IL-4刺激B细胞产生IgE的抑制作用

IL-2是T、B 细胞增殖的重要因子。IL-4能增强LPS 刺激的B 细胞分泌IgE 和IgG_1。最近研究表明:体外低浓度的IFN-γ可完全抑制LPS 刺激B 细胞产生IgE 和IgG_1,另外,IL-2和IL-4同时作用于Th_1和Th_2细胞时可能起协同作用。本实验采用由BALB/C 或裸鼠脾脏纯化来源的B 细胞,用[~3H]掺入增殖实验,测定了IL-2对IL-4诱导LPS 刺激的B 细胞产生IgE 的抑制作用。结果表明:纯化B 细胞在IL-4和LPS 培养     

IL-1β影响大鼠星形胶质细胞中SSeCKS表达的研究

目的:研究Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)在IL-1β激活的星形胶质细胞中的表达.方法:以炎性因子IL-1β刺激大鼠体外培养的星形胶质细胞,观察细胞中SSeCKS的表达及其细胞内的亚定位的改变.结果:IL-1β可上调大鼠原代培养星形胶质细胞中SSeCKS的表达,诱导其丝氨酸磷酸化.在亚细胞水平,IL-1β还能引起SSeCKS向核周、细胞星状突起聚集,而蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro-31-8220能抑制IL-1β对细胞中SSeCKS亚细胞定位及磷酸化水平的影响.结论:在IL-1β的影响下,大鼠星形胶质细胞中SSeCKS的表达增加,磷酸化水平增强,细胞内定位发生改变,这种改变与PKC的功能相关,提示SSeCKS可能作为PKC的下游分子参与到炎性因子引起的星形胶质细胞活化的过程中.     

人类重组IL-1对IL-2诱导淋巴因子激活杀伤细胞活性的协同作用

业已证明IFN-γ对IL-2诱导淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)具有协同作用,而IFN-γ能诱导单核细胞产生IL-1和TNF。为此,作者进一步探讨了IL-1与IL-2诱导LAK 活性之间的关系。常规分离健康人外周血单个核细胞和外     

单核因子(monokine)的研究——不同活化状态МФ培养上清液IL-1水平的比较

白细胞介素1(interleukin 1,IL-1),是巨噬细胞分泌的单核因子中重要的成份之一,它具有多种免疫学功能,如增强T辅助细胞分泌白细胞介素2(interleukin 2,IL-2),能增强B细胞分泌各种免疫球蛋白,能增强自然杀伤细胞的杀伤功能等,有人称它为激素样的物质。本试验测定了不同活化状态的巨噬细胞     

幽门螺杆菌经ROS通路激活NLRP3炎症复合体诱导THP-1细胞分泌IL-1β和IL-18

目的:研究幽门螺杆菌(H.pylori)对NLRP3炎症复合体活化的影响及活性氧(ROS)在其中的作用。方法:将THP-1细胞与H.pylori SS1共孵育,于不同时间点收集细胞及上清,ELISA检测细胞上清中IL-1β和IL-18的含量;流式细胞术(FCM)检测胞内ROS的产生;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测细胞中NLRP3、caspase-1 mRNA的表达;Western blot检测细胞中caspase-1活性亚单位p10的表达;检测ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)及NLRP3特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)预处理细胞后相关信号分子的表达。结果:H.pylori SS1能以时间依赖性和剂量依赖性方式诱导THP-1细胞产生IL-1β、IL-18和胞内ROS;H.pylori SS1刺激能使THP-1细胞NLRP3和caspase-1 mRNA转录水平显著升高;NAC及NLRP3-siRNA预处理THP-1细胞能显著降低H.pylori SS1诱导的NLRP3炎症复合体相关成份的表达及细胞因子的分泌。结论:H.pylori SS1株通过ROS途径激活NLRP3炎症复合体诱导THP-1细胞分泌IL-1β和IL-18,这可能与机体的先天免疫防御及细菌的致病作用相关。     

IL-1和TNF对PHA刺激T细胞增殖反应的协同作用

在PHA(1μg/ml)刺激下,IL-1或TNF均能诱发静止T细胞发生增殖反应,其最适浓度为IL-1(50U/ml)和TNF(200U/ml)。利用其最适浓度,联合作用于PHA刺激T细胞,其增殖反应增强了25％,但仍低于PHA联合10％的Mφm所诱发的增殖反应。单克隆抗体anti-Tac(p55)完全阻断了由PHA联合IL-1所诱发的增殖反应,但对PHA联合TNF所诱发的增殖反应只能部份地抑制。这些结果表明,TNF除了同IL-1一样具有通过IL-2途径来诱导T细胞活化外,还有着其他的途径,提示T细胞活化增殖的第二信号可由多种单核因子提供,而最大的增殖反应的发生,则是多种单核因子和其他因素协同作用的结果。     

小檗碱对IL-1或TNF诱导的多形核白细胞与内皮细胞粘附的影响

目的:通过研究小檗碱对IL-1、TNF诱导的多形核白细胞(PMN)与血管内皮细胞粘附及粘附分子表达的影响,探讨小檗碱抗炎作用机制。方法:以小檗碱加IL-1、TNF处理人PMN或人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后,用蛋白染料染色法研究小檗碱对PMN与HUVEC粘附的作用,用细胞ELISA、APAAP法研究小檗碱对细胞表面粘附分子表达的影响。结果:小檗碱与IL-1或TNF共同处理HUVEC,能抑制IL-1、TNF诱导的PMN与HUVEC间的粘附增强,且能下调由IL－1、TNF诱导的HUVEC表面粘附分子ICAM-1表达的增高;小檗碱与TNF共同处理PMN,能抑制TNF诱导的PMN与HUVEC的粘附增强,亦能降低TNF诱导的PMN表面粘附分子CD18的表达。结论:通过抑制细胞表面粘附分子的表达而抑制PMN与内皮细胞的粘附,可能是小檗碱发挥抗炎作用的机制之一。     

小鼠IL-1β在H22细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响

目的：重组表达小鼠IL-1β全长基因，转染H22肝癌细胞，分析对NK细胞杀伤活性的影响。方法：构建小鼠IL-1β重组表达载体pIRES2-EGFP-mIL-1β，利用jetPEI转染H22肝癌细胞，RT—PCR和激光扫描共聚焦显微镜分析IL-1β重组载体的表达，MTT方法分析转染前后，野生型小鼠脾脏NK细胞对H22细胞杀伤活性的变化。结果：RT—PCR扩增出小鼠IL-1β，长度约843bp。纯化的PCR产物与pIRES2-EGFP同时经Xho I和EcoR I双酶切，在T4连接酶作用下连接，转化大肠杆菌，提取质粒经PCR、限制性酶谱分析（XhoI＋EcoRI）和DNA序列测定后，确认获得重组表达载体pIRES2-EGFP-mIL-1β。将该质粒转染至H22小鼠肝癌细胞中，RT—PCR和荧光观察证实，H22细胞能表达高水平IL-1β重组表达载体，与转染空载体的对照组细胞相比，IL-1β转基因后H22细胞对NK92细胞杀伤抵抗性明显增强，同时野生型小鼠脾脏NK细胞对pIRES2-EGFP-mIL-1β转基因细胞的杀伤活性明显下降，效靶比40：1时下降了约10％。结论：IL-1β能够明显增强H22肝癌细胞对NK细胞杀伤的抵抗性，可能是肝癌细胞借以逃逸天然免疫应答的重要机制。     

人大颗粒淋巴细胞能产生IL-1

人大颗粒淋巴细胞(LGL)具有NK细胞活性,表面有T细胞和髓单核细胞的标志,可有类似T细胞的作用,如产生IL 2和α、γ干扰素等.本文报导人LGL能产生髓单核细胞因子IL 1.作者取健康人外周血淋巴细胞(经贴壁和尼龙柱法除去粘附细胞)用不连续Percoll密度梯度离心法获取不同组分的细胞,然后测定NK细胞活性和IL 1的产量,组分1和组分2分别含有30～40%和5～10%的单核细胞,其余为LGL;组分3主要是LGL(80～85%),大多细胞有NK细胞标志(67%OKM1~+,62%OKT10+,75%B     

S-O_2-1菌苗对小鼠淋巴细胞的作用

动物实验和初步临床应用表明有抑制肿瘤生长作用的S-O_2-1菌苗,在体外能直接刺激小鼠脾细胞淋巴细胞的增殖,并协同增强脾细胞的Con A增殖反应、S-O_2-1菌苗诱导和增强小鼠腹腔粘附细胞的抑制活性,后者表现在直接抑制脾细胞和肠系膜淋巴结细胞对Con A和S-O_2-1菌苗的增殖反应。腹腔转移菌苗活化的腹腔粘附细胞能抑制受体小鼠对SRBC的PFC应答。提示:S-O_2-1菌苗诱导增强巨噬细胞的抑制活性,以致间接抑制淋巴细胞的免疫应答。     

IL-1β促进肺癌细胞增殖的作用机制研究

目的:研究IL-1β在巨噬细胞促进肺癌细胞增殖的作用机制。方法:采用Transwell 插入式细胞培养皿共培养人肺癌细胞株A549、NCI-H520 细胞和巨噬细胞。BrdU-ELISA 法检测巨噬细胞对肺癌细胞的增殖能力。采用Real-time PCR 法检测巨噬细胞和A549、NCI-H520 细胞中IL-1βmRNA 的表达。应用IL-1β的中和抗体抑制IL-1β的活性,观察IL-1β 在巨噬细胞促进肺癌细胞增殖中的作用。利用Western blot 法检测肺癌细胞中自噬标志物Beclin 1 的表达。结果:BrdU-ELISA 检测结果:A549 细胞与巨噬细胞以1 .0.5 的比例共培养,A549 细胞的OD 值从(0.41±0.06)增加到(1.13依0.10),差异有统计学意义(P<0.05),且A549 细胞的OD 值随共培养巨噬细胞比例的增加而升高(P<0.05)。NCI-H520 细胞与不同浓度的巨噬细胞共培养后,NCI-H520 细胞的OD 值变化趋势与A549 细胞相似。Real-time PCR 法检测结果:在共培养后,巨噬细胞中IL-1βmRNA 的表达显著上调,且有时间依赖性,并显著高于肺癌细胞中的表达。加入IL-1β中和抗体后,BrdU ELISA 法检测的细胞增殖,结果显示IL-1β中和抗体可明显抑制巨噬细胞对肺癌细胞A549 和NCI-H520 的增殖促进作用。Western blot法检测结果显示IL-1β可显著抑制肿瘤细胞Beclin 1 的表达。结论:巨噬细胞和肺癌细胞通过增强IL-1β的表达促进肿瘤细胞的增殖。抑制肿瘤细胞的自噬可能是IL-1β促进肺癌发展的作用机制。     

IL-1和IL-1R拮抗剂在人类风湿性关节炎滑膜组织巨噬细胞中的表达

IL-1是介导类风湿性关节炎(RA)炎症和炎症破坏的重要因素,它能促进纤维母细胞分泌前列腺素(PGE_2)和胶原酶,并能提高这些细胞表面的粘附分子的表达.IL-1也能激活单核细胞和中性粒细胞并能促进纤维母细胞和内皮细胞生长.而最近已得到分离、纯化、克隆并且表达的IL-1受体拮     

IL-1R相关激酶-1和磷脂酰肌醇3-激酶协同调控IL-1诱导的NF-κB活化

为研究IL 1R相关激酶 1(IRAK 1)和磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI 3 激酶 )在IL 1诱导NF κB活化中的作用 ,本文采用Lipo fectin介导反义IRAK 1寡核苷酸或反义PI 3 激酶寡核苷酸转染HEpG2细胞后 ,用Western杂交检测IRAK 1和PI 3 激酶表达水平 ,以SandwichELISA法检测NF κB的活化。结果表明 ,①反义IRAK 1寡核苷酸和反义PI3 激酶寡核苷酸分别抑制IRAK 1和PI3 激酶表达 ;②反义IRAK 1寡核苷酸或反义PI 3 激酶寡核苷酸部分抑制NF κB活化 ;③与反义IRAK 1寡核苷酸或反义PI 3 激酶寡核苷酸单独转染HEpG2细胞相比 ,反义IRAK 1寡核苷酸和反义PI 3 激酶寡核苷酸共转染HEpG2细胞对NF κB的抑制作用明显增强。表明IRAK 1或PI3 激酶调控NF κB活化但不能完全激活NF κB ,IRAK 1和PI3 激酶在调控NF κB活化时协同作用。     

伤寒沙门氏菌诱导不同分化和活化状态的THP-1细胞产生TNF-α和IL-12的研究

为探讨伤寒沙门氏菌诱导宿主细胞产生细胞因子,以及细胞因子在宿主防御伤寒沙门氏菌感染中的调节作用,我们应用人类单核白血病细胞系—THP1细胞,对伤寒沙门氏菌诱导不同分化和活化状态的THP1细胞产生TNFα和IL12进行了研究。结果表明,伤寒沙门氏菌不能诱导THP1细胞产生TNFα,但可诱导PMA分化的THP1细胞产生TNFα和IL12;TNFγ既可增强伤寒沙门氏菌诱导THP1细胞产生IL12,又可增强伤寒沙门氏菌诱导的PMA分化的THP1细胞产生TNFα和IL12。以上结果提示,TNFα的产生可能与单核细胞的分化状态有关;TNFα和IL12的产生可能存在着不同的诱导机制;IFNγ对TNFα和IL12的产生具有调节作用。     

IL-1受体相关激酶1和2协同调控IL-1诱导的NF-κB活化

目的　研究白细胞介素 1受体相关激酶 1(IRAK 1)和IRAK 2在白细胞介素 1(IL 1)诱导核因子 κB(NF κB)活化中的作用。方法　Lipofectin介导反义IRAK 1寡核苷酸和反义IRAK 2寡核苷酸转染HepG2细胞。用逆转录PCR法检测IRAK 1mRNA和IRAK 2mRNA表达水平 ,以夹心ELISA法检测NF κB的活化。结果　 (1)反义IRAK 1寡核苷酸和反义IRAK 2寡核苷酸分别抑制IRAK 1mRNA和IRAK 2mRNA表达。 (2 )反义IRAK 1寡核苷酸或反义IRAK 2寡核苷酸部分抑制NF κB活化 ,最高抑制率分别为 (34 6± 0 9) %和 (5 4 5± 0 2 ) %。 (3)反义IRAK 1寡核苷酸与反义IRAK 2寡核苷酸共转染HepG2细胞对NF κB的抑制作用明显增强 ,抑制率达 (77 5± 0 9) %。结论　IRAK 1或IRAK 2调控NF κB活化 ,但不能完全激活NF κB ;IRAK 1和IRAK 2协同调控IL 1诱导的NF κB活化。     

IL-1β和IL-6对椎间盘髓核细胞NGF表达的影响

目的:研究白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6对体外培养的椎间盘髓核细胞神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:分离培养人腰椎间盘髓核细胞,经过7d的预培养后,实验组分别加IL-1β(10μg/L,50μg/L)和IL-6(10μg/L,50μg/L)进行刺激,对照组加0.3%FBS,48h后应用免疫组织化学法、RT-PCR和Western blotting检测NGF的表达。结果:培养的椎间盘髓核细胞经鉴定为类软骨细胞。对照组髓核细胞很少表现NGF免疫活性,IL-1β和IL-6刺激组明显上调了髓核细胞NGF mRNA及蛋白质的表达,在相同的浓度下IL-6的上调作用更明显。结论:正常情况下NGF在椎间盘髓核细胞呈低表达状态,IL-1β和IL-6能促进髓核细胞NGF的表达,相同浓度下IL-6刺激髓核细胞分泌NGF的作用更强。     

中枢神经系统IL-1及其对神经胶质细胞活性的调节

哺乳动物在胚胎期和出生后的发育过程中,中枢神经系统(CNS)中白细胞介素1(IL-1)呈高水平表达,而在正常成年哺乳动物CNS中,IL-1呈组成性低水平表达。CNS炎症、损伤后,IL-1的含量显著增加。小胶质细胞和星形胶质细胞是CNS中内源性IL-1的主要来源。小胶质细胞、星形质细胞和少突胶质细胞均表达IL-1的功能性受体IL-1R,因而IL-1能通过调节这些神经胶质细胞的活性,参与CNS的生理病理过程。     

牡荆葡基黄酮调节TAK1 / AMPK 通路增强人肝癌细胞的放射敏感性

目的:探究牡荆葡基黄酮(VG)对人肝癌细胞放疗敏感性的作用及作用机制。方法:用不同浓度VG 和放疗处理细胞,CCK8 检测细胞活性,流式检测细胞凋亡,Western blot 检测凋亡标记蛋白和TAK1/ AMPK 通路蛋白表达。TAK1siRNA(si-TAK1)转染细胞,Western blot 检测TAK1 的表达,CCK8 检测细胞活性,流式检测细胞凋亡。结果:VG 和放疗均能明显抑制Huh7 细胞的活性,且VG 浓度为20 μmol/ L 和40 μmol/ L 时,其抑制作用优于放疗。VG 可显著增强放疗对肝癌细胞凋亡的促进作用,并升高Bax/ Bcl-2 的比值。同时,VG 还能增强放疗对TAK1/ AMPK 通路蛋白(TAK1、AMPKα1 和PPARγ)表达的促进作用,下调TAK1 表达能明显反转VG 增强放疗促细胞凋亡活性及抑制细胞增殖活性的作用。结论:VG 可通过TAK1/ AMPK 通路增强肝癌细胞的放疗敏感性。