利用双重TaqMan荧光定量聚合酶链反应技术鉴别诊断粪便标本中的伤寒和甲型副伤寒沙门菌

目的建立针对粪便标本中伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的检测方法,评价该方法的特异性、敏感性及检测下限,以提高感染人群粪便标本中两种病原的检出效率。方法分别根据伤寒沙门菌特异基因STY1633及甲型副伤寒沙门菌特异基因SPA4289设计特异性引物及探针,优化反应条件,建立双重TaqMan荧光定量聚合酶链反应(dual taqman fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)体系。利用44株伤寒沙门菌、30株甲型副伤寒沙门菌、88株其他血清型沙门菌染色体DNA及引起发热的其他病原菌,评价该方法的特异性和灵敏性,并对伤寒沙门菌及甲型副伤寒沙门菌的粪便模拟标本进行检测下限评价,同时利用10份伤寒患者、20份甲型副伤寒患者及48份其他病原所致发热和/或伴腹泻的患者粪便标本进行特异性、敏感性验证。结果利用本方法检测的伤寒、副伤寒沙门菌纯菌及伤寒、甲型副伤寒患者标本扩增阳性,其余的非伤寒沙门菌、致腹泻的其他5种肠道致病菌及引起发热症状的8种常见非肠道病原菌纯菌及相应患者标本均扩增阴性。在对纯伤寒沙门菌DNA及甲型副伤寒沙门菌DNA检测中,双重TaqMan荧光定量PCR法的最低检测限分别为1 pg/反应(194拷贝/反应)及2.5 pg/反应(485拷贝/反应)。以粪便模拟样品提取DNA为模板的检测中,增菌前伤寒沙门菌检测下限达102cfu/g,增菌后可达1 cfu/g;增菌前甲型副伤寒沙门菌检测下限达104cfu/g,增菌后可达10 cfu/g。结论本研究建立了特异性好、灵敏度高的检测粪便中伤寒沙门菌及甲型副伤寒沙门菌的双重TaqMan荧光定量PCR方法,为伤寒及甲型副伤寒疾病的同时快速诊断及鉴别诊断、某些不明原因发热及腹泻症状的病原的初步鉴定提供了简易手段。     

2013－2018年北京市顺义区腹泻病例中肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌的流行特征分析

目的分析2013 — 2018年北京市顺义区腹泻病例中肠炎沙门菌与鼠伤寒沙门菌流行特征,为科学防控沙门菌感染提供依据。方法收集2013 — 2018年北京市顺义区腹泻监测病例的流行病资料和粪便标本,分离培养沙门菌并进行血清学鉴定及脉冲场凝胶电泳分子分型,采用χ2检验对肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌人群分布、临床症状进行统计分析。结果腹泻病例中沙门菌属检出率为5.63%（109/1 936）,肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌构成比分别为32.73%（36/110）和28.18%（31/110）;肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌年均检出率分别为1.85%和1.60%,后者波动范围明显大于前者,且呈现此消彼长的态势;肠炎沙门菌月检出率呈现4 — 5月、9 — 10月2个高峰,鼠伤寒沙门菌则呈现4、7、9月3个高峰;鼠伤寒沙门菌在北京市顺义区西部的检出率（2.49%）高于其他区域;肠炎沙门菌及鼠伤寒沙门菌分别出现2次和6次短时间内脉冲场凝胶电泳带型成簇。结论腹泻病例中肠炎沙门菌与鼠伤寒沙门菌分别具有一定的流行特征,从血清型水平分析沙门菌属流行特征更有利于发现潜在的暴发疫情,同时要做好“散在暴发”病例的流行病学调查工作,才能为科学防控非伤寒沙门菌感染提供依据。     

沙门菌胃肠道感染235例分析

目的:了解沙门菌胃肠道感染的临床特征及流行病学特点。方法:回顾分析1998—2013年在复旦大学附属金山医院肠道门诊就诊的沙门菌胃肠道感染患者的临床资料及流行病学特点。结果:1998—2013年在复旦大学附属金山医院肠道门诊就诊的腹泻患者中共检出沙门菌感染者235例,以2006—2013年检出的病例为主,占96.17%,每年的5月到10月为沙门菌感染高发期。沙门菌感染多在食用污染的食物12~24 h后起病,临床表现为腹痛、腹泻及发热;排便每日3~4次至20~30次,多呈水样,粪便中偶含有黏液或呈脓血便;患者体温波动于38~39.4℃,可伴有畏寒。健康的成年人感染沙门菌后症状持续2~5 d后可恢复,而年老体弱者则可持续较长时间。呕吐、腹泻严重者可发生严重脱水。结论:了解沙门菌的临床表现、发病特点及流行病学特点,有利于该类疾病的早期临床诊断和治疗。     

一起鼠伤寒沙门菌暴发疫情快速诊断和溯源分析

2013年6月四川省眉山市发生一起以发热、乏力、头痛、腹泻为主要症状的暴发疫情。为快速诊断致病因子,查找污染来源,控制疫情,结合流行病学调查,采集患者、食堂员工相关样本和食堂留样食品进行检测分析,从6份病例样本检出鼠伤寒沙门菌,2份食品样本检出鼠伤寒沙门菌;来自患者和食品的鼠伤寒沙门菌菌株经XbaⅠ酶切后脉冲场凝胶电泳图谱完全一致,快速准确诊断疫情,为及时有效的控制疫情发展提供技术支持。     

聚合酶链反应扩增STY3671基因鉴别伤寒与甲型副伤寒沙门菌

目的 评价伤寒沙门菌基因STY3671用于特异性检测该血清型沙门菌的可能性。 方法 根据伤寒沙门菌与甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白质组比较得到的伤寒沙门菌特异性蛋白点编码基因STY3671的序列设计引物,提取伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌以及其他非伤寒沙门菌血清型菌株的基因组DNA进行PCR检测, 对引物特异性和灵敏性进行分析。 结果 检测的184株伤寒沙门菌均得到807 bp长度片段,部分菌株扩增产物测序结果与伤寒沙门菌标准株CT-18一致。146株甲型副伤寒沙门菌以及其余163株其他血清型沙门菌均未扩增出该片段。 结论 STY3671基因能够作为特异性检测伤寒沙门菌的靶标,能够区别于甲型副伤寒沙门菌及其他常见非伤寒沙门菌血清型,在发热患者的伤寒沙门菌感染诊断、尤其使用血液标本检测中具有良好的潜在价值。     

舟山市血培养中沙门菌的检测及药敏分析

1997年6月至今,从本院就诊患者的2 650份血培养标本中分离到沙门菌共185株,其中伤寒沙门菌19株,副伤寒沙门菌166株,现报道如下. 一、材料与方法 1.仪器和方法:采用美国BD公司BACTEC 9050全自动细菌血培养仪上进行.用公司提供的需氧与厌氧瓶进行血液培养.对仪器的阳性报警者移种血琼脂平皿,培养分离后做肠杆菌常规生化反应,同时做沙门菌诊断血清玻片凝集. 2.药敏试验(K-B法 ):用大肠埃希菌ATCC 25922,金黄色葡萄球菌ATCC 25923,铜绿假单胞菌ATCC 27853标准菌株进行质量控制.纸片为北京天坛药物生物技术开发公司的产品.     

2008年夏季北京市沙门菌腹泻监测结果分析

目的了解北京市沙门菌致病现状、发病特征,掌握沙门氏菌血清型别和耐药谱的变化。方法按病例定义采集初诊腹泻患者粪便标本,进行血清学检查和药敏试验。结果2008年夏季,6家医院检出38株沙门菌,阳性率4.83%（38/786）;患者以中青年为主,男女性别比为1.9∶1,主要临床表现为腹泻、发热、恶心、呕吐。38株菌分布于11个血清型,最多的是肠炎沙门菌,其次是鼠伤寒沙门菌。所有菌株对头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟完全敏感,耐药性最高的是萘啶酸,耐药率达到了65.69%。结论沙门菌感染引起的腹泻具有较明显的特征,有助于提高检出率;耐药监测可对合理用药提供指导。     

2007－2018年浙江省余姚市沙门菌血清型变迁及耐药分析

目的了解浙江省余姚市腹泻监测哨点医院腹泻患者沙门菌感染情况、血清型变迁及药物敏感情况,为制订预防措施和临床治疗提供参考依据。方法对2007 — 2018年从余姚市腹泻患者中分离出的295株沙门菌进行复苏、血清分型、药敏试验及分析,采用χ2检验对不同年份沙门菌检出率进行比较。结果2007 — 2018年余姚市腹泻监测哨点医院腹泻患者沙门菌检出率为8.60%,男女性别比为1.07∶1,各年龄段均可感染沙门菌,以＜5岁儿童为主,夏季检出率最高（10.20%）,冬季最低（1.64%）。 分为10个群39种血清型,前4位优势血清型分别为4,5,12:i:-沙门菌（24.41%）、鼠伤寒沙门菌（15.25%）、肠炎沙门菌（9.83%）和斯坦利沙门菌（8.14%）。 295株沙门菌对青霉素类、四环素、磺胺甲恶唑耐药率较高,其余均较敏感,2014 — 2018年对头孢类耐药率比2007 — 2013年明显上升;多重耐药菌多集中于优势菌型,共107株（36.27%）。 2007 — 2018年余姚市沙门菌检出率、血清型和耐药性均发生了变迁。 2007 — 2013年检出率低,为3.08%（34/1 103）,菌型少,检出14种血清型,以鼠伤寒沙门菌（38.24%,13/34）和肠炎沙门菌为主（20.59%,7/34）;2014 — 2018年检出率高,为11.22%（261/2 307）,菌型多,检出34种血清型,4,5,12:i:-沙门菌取代鼠伤寒沙门菌成为第1位常见血清型,鼠伤寒沙门菌居于第2位,之后是斯坦利沙门菌和肠炎沙门菌。结论余姚市沙门菌的优势菌主要以4,5,12:i:-沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主,多重耐药严重,应进一步加强耐药监测。     

舟山市血培养中沙门菌的检测及药敏分析

1997年 6月至今 ,从本院就诊患者的 2 65 0份血培养标本中分离到沙门菌共 1 85株 ,其中伤寒沙门菌 1 9株 ,副伤寒沙门菌 1 66株 ,现报道如下。一、材料与方法1 .仪器和方法 :采用美国 BD 公司BACTEC 90 5 0全自动细菌血培养仪上进行。用公司提供的需氧与厌氧瓶进行血液培养。对仪器的阳性报警者移种血琼脂平皿 ,培养分离后做肠杆菌常规生化反应 ,同时做沙门菌诊断血清玻片凝集。2 .药敏试验 ( K- B法 ) :用大肠埃希菌 ATCC2 5 92 2 ,金黄色葡萄球菌 ATCC2 5 92 3,铜绿假单胞菌 ATCC2 785 3标准菌株进行质量控制。纸片为北京天坛药…     

斑点酶联免疫吸附试验检测伤寒沙门菌特异性抗体

为提高伤寒沙门菌抗体检测的敏感性和特异性，我们用斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）测定伤寒沙门菌包膜抗原Ｖｉ，菌体抗原Ｏ９和鞭毛抗原Ｈｄ的特异性抗体，并与肥达反应相比较，效果满意，报告如下。１　材料与方法１．１　研究对象　血培养检出伤寒沙门菌患者血清１４例，双份血清肥达反应效价升高４倍以上的伤寒患者血清２例，疑似伤寒发热病人血清２０例，非伤寒发热病人血清４０例，健康对照血清４０例。１．２　试剂１．２．１　羊抗人辣根过氧化物酶标抗体　购自华美生物工程公司。１．２．２　沙门菌属诊断血清　购自…     

Tiotidine and cimetidine--kinetics and dynamics

Tiotidine and cimetidine kinetics and dynamics were compared to assess mechanisms of the longer duration of effect of tiotidine in man. Both drugs has similar lag times for absorption. Tiotidine with a meal was more slowly absorbed than when fasting and was also more slowly absorbed than cimetidine with a meal. The elimination rates for both drugs did not differ; they were both approximately 2 to 3 hr. Oral doses of cimetidine achieved areas under the plasma concentration curve approximately three times that of tiotidine but these concentrations were only 1/10 as potent. The cimetidine concentration inducing 50% inhibition of food-stimulated gastric acid secretion was 0.41 +/- 0.04 whereas it was 0.04 +/- 0.003 microgram/ml for tiotidine. The effect of tiotidine lasted longer than that of cimetidine because the doses recommended for use in man resulted in higher concentrations in plasma relative to effective concentration than clinical doses of cimetidine.