外周血STC-1mRNA测定及其在结直肠癌诊断中的价值

目的比较斯钙素（STC-1）mRNA在结直肠癌患者和健康人外周血中表达水平的差异,初步探讨STC-1mRNA作为循环肿瘤标志物的临床意义。方法采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测37例结直肠癌患者、18名健康人外周血STC-1mRNA的表达水平,并对其中30例患者的癌胚抗原（CEA）和糖链抗原199（CA199）等血清肿瘤标志物进行比较分析。结果结直肠癌患者与健康人的外周血STC-1mRNA表达水平差异有统计学意义,患者组高于健康组;以受试者工作特征（ROC）曲线分析,发现STC-1mRNA作为结直肠癌诊断指标具有较高的敏感性和特异性,其曲线下面积为0．730;以0．5为表达阳性界值,STC-1mRNA检出结直肠癌的效能优于血清肿瘤标志物CEA和CA199的联合应用。结论应用荧光定量RT—PCR检测结直肠癌患者外周血STC-1mRNA表达水平具有较高的诊断价值,其可能成为新的用于结直肠癌诊断的循环肿瘤标志物。     

斯钙素-1在乳腺癌中的表达及临床意义

目的：从mRNA和蛋白水平检测斯钙素-1（STC-1）在乳腺癌细胞系及乳腺癌患者外周血中的表达,并探讨其临床意义。方法2012年7月至2013年1月期间,应用RT-PCR检测3个乳腺癌细胞系、沈阳军区总医院收治的56例乳腺癌患者及10例健康女性外周血STC-1 mRNA的表达;应用酶联免疫吸附实验法检测STC-1蛋白的表达。结果在mRNA和蛋白水平,乳腺癌细胞系及患者外周血中STC-1表达均明显高于健康女性;且在不同TNM分期表达有显著差异（P<0.05）,Ⅳ期显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期（P<0.05）。STC-1 mRNA在小叶癌中的表达较导管癌及混合癌高（P=0.03）。STC-1 mRNA 和蛋白在CEA>5 ng/ml时表达较CEA≤5 ng/ml时明显增高（P<0.05）。结论 STC-1有望成为乳腺癌复发转移的标志物,其表达水平对于乳腺癌预后预测具有重要价值。     

肺腺癌患者外周血斯钙素1的检测和临床意义

目的为肺腺癌的诊断寻找一种新的肿瘤标志物。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测45例肺腺癌患者和52名健康成人外周血中的斯钙素1（stanniocalcin 1,STC1）基因表达,并采用化学发光微粒子免疫分析（CMIA）技术检测癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原211（CA211）、神经元特异烯醇化酶（NSE）等血清肿瘤标志物,将肺腺癌STC1基因表达结果与临床病理资料及上述肿瘤标志物检出率进行比较。结果 45例肺腺癌患者外周血中STC1基因的阳性率为48.89%（22/45）,并与临床分期、淋巴结转移有显著相关性（P〈0.05）;而健康成人的外周血中则无1例出现阳性。STC1分别与CA211、CA125、NSE阳性比较,2种方法检出率差异有统计学意义（P〈0.05）;STC1与联合CEA、CA125、CA211、NSE 4种标志物中1项指标阳性即为阳性比较,认为2种方法检出率基本一致（P〉0.05）。用受试者工作特征（ROC）曲线进行灵敏度和特异度的综合评价,ROC曲线下面积为0.744（95%可信区间：0.646~0.828,P〈0.01）。结论本研究提示检测外周血STC1基因对肺腺癌具有较高的诊断价值,STC1可能会成为检测肺腺癌的新的肿瘤标志物。     

E-钙粘素在结直肠癌中的表达及其与淋巴结微转移的关系

目的检测结直肠癌组织中E-钙粘素的表达及其淋巴结微转移,探讨两者间的关系。方法以CK20mRNA为标记物,应用RT-PCR对60例结直肠癌根治性手术切除的淋巴结标本共782例进行检测;免疫组化法（SP法）检测结直肠癌组织、癌旁组织、淋巴结微转移及正常对照组中E-钙粘素的表达。通过二者的综合分析,试图发现抑癌基因E-钙粘素在结直肠癌淋巴结微转移的生物学行为中的作用。结果CK20法检出45例（75.0％）患者有淋巴结转移,阳性淋巴结总数为436个（55．8％）;常规病理学检出34例（56．7％）患者有淋巴结转移,检出阳性淋巴结数为356个（45．5％）;两组比较,差异具有统计学意义（x2=16．72,P〈0．05）。11例检出淋巴结微转移患者癌组织中6例（54．5％）E-Cadherin表达阴性,而15例未检出淋巴结微转移癌组织中仅有1例（6．67％）表达阴性,两者比较差异有统计学意义（x2=4．160,P=0．041）。结论E—Cadherin的表达减弱或消失参与了结直肠癌淋巴结微转移的发生。     

分子技术在流感病毒诊断中的应用

流感病毒(influenza virus)属于正黏病毒科,根据病毒内部蛋白抗原性的不同分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型.根据病毒表面结构蛋白血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)抗原性的不同,又将A型流感分为不同的血清亚型,已发现有15种HA亚型(H1～H15)和9种NA亚型(N1～N9)     

荧光定量聚合酶链反应检测CCND1基因扩增在乳腺癌诊断中的应用

目的应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测细胞周期蛋白D1（CCND1）基因表达水平,探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用价值。方法应用FQ-PCR法,并以β2-微球蛋白为内对照测定15例健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和81例乳腺癌患者外周血中CCND1的表达量。结果CCND1表达水平在健康对照组和良性乳腺疾病组间差异无统计学意义（P〉0．05）,乳腺癌组均高于前2组（P〈0．05）,β2-微球蛋白在3组间差异无统计学意义（P〉0．05）。81例乳腺癌患者阳性率为45．7％,良性乳腺疾病组为0。结论FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测CCND1方法,可有效监测乳腺癌的诊断：疗效、转移,评估其预后。     

实时定量PCR检测乳腺癌患者内皮素-1的表达及其临床意义

目的检测内皮素-1(EDN-1)基因在乳腺癌患者外周血中的表达情况,并探讨它在乳腺癌的发生、发展中的作用。方法选取2013年1月1日至2014年5月20日在花都区人民医院接受乳腺手术且经病理学证实为乳腺癌的患者54例纳入试验组,另选取同期体检健康女性60例纳入对照组。采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测所有研究对象外周血EDN-1的表达情况,并分析其与各临床参数的关系。结果乳腺癌患者外周血EDN-1表达水平高于体检健康女性,组间比较差异有统计学意义(P0.01),其表达水平为健康女性人群的5.877倍;EDN-1的表达水平与患者的年龄和肿瘤的组织类型均无关(P0.05),与患者的肿瘤大小、区域淋巴结转移情况、是否有远处转移密切相关(P0.05)。结论 EDN-1基因与乳腺癌的发生、发展关系密切,实时定量PCR可以敏感、特异地检测乳腺癌患者外周血中EDN-1的表达,可以为乳腺癌的筛查与早期诊断提供帮助,宜在临床工作中开展。     

抑癌基因ING1在大肠癌中的表达与突变

背景：抑癌基因ING1高表达可使多种癌细胞发生细胞凋亡，并使其细胞在合成前期细胞周期静止。ING1参与p53的信号传递通路，以一种转录活化因子调节p53的活性。目的：探讨人大肠癌组织中ING1基因表达及突变水平与大肠癌临床病理特征的关系。设计：以病理标本为观察对象的对照实验。单位：解放军第三军医大学西南医院普外科。对象：取自1998-10／1999-10在第三军医大学西南医院住院手术患者切除的大肠癌标本52块，于手术中分别取自距肿瘤边缘10cm正常黏膜及新鲜肿瘤组织。患者男29例，女23例；平均年龄50．28岁。方法：检测52块大肠癌组织标本中ING1mRNA及蛋白的表达情况，DNA单链多态性分析法检测基因突变情况。同时应用免疫组织化学方法检测大肠癌中P53蛋白表达情况。主要观察指标：①ING1mRNA及蛋白在结直肠癌中的表达。②P53在结肠癌中的表达。③聚合酶链反应-SSCP分析ING1基因突变情况。结果：①ING1mRNA在结直肠癌标本表达较正常黏膜明显减弱(0．626&;#177;0．382，1．166&;#177;0．245，P&;lt;0．001)。淋巴结转移阳性组肿瘤组织中ING1表达强度较阴性组中显著下降(0．393&;#177;0．243，0．960&;#177;0．299，P&;lt;0．01)。②P53蛋白表达强度与ING1mRNA表达相对强度呈显著正相关(P&;lt;0．01)。③52块标本仅检测到1块存在ING1mRNA基因表达突变。结论：ING1基因可能参与了结直肠癌的发生与发展，其降低使结肠癌患者抑癌基因不能发挥。通过ING1mRNA及蛋白表达的下降而不是基因位点的丢失和突变，提示ING1不像传统的抑癌基因那样主要通过基因位点的丢失和突变来参与癌症的发生，可能存在其他机制参与到ING1基因表达的缺失。     

MDR1基因在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨多药耐药基因MDR1在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 收集2009年12月～2010年8月胃癌新鲜癌组织标本53例(实验组)、15例正常胃黏膜组织(对照组),采用逆转录-聚合酶链反应技术检测胃癌组织和正常胃组织中MDR1基因的表达,并分析与临床病理特征之间的关系及对化疗的指导意义.结果 MDR1基因在正常胃组织及胃癌组织中的表达分别为0.57±0.27和0.20±0.10(t=8.13,P＜0.001).MDR1基因的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移之间差异具有统计学意义(t=2.83,3.47;P=0.007,0.002),而与患者性别、肿瘤部位、大小之间差异无统计学显著性意义(t=1.41,0.54,1.16;P=0.16,0.60,0.25).结论 MDR1基因的高表达可能是胃癌多药耐药产生的基础,MDR1基因的检测对制定化疗方案和选择化疗药物有一定的指导意义.     

凋亡抑制基因Livin 在胃癌中的表达及其临床意义

目的:检测Livin在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌的关系及作用机制.方法:采用RT-PCR法检测Livin mRNA在79例胃癌及30例癌旁正常组织中的表达.分析Livin表达与胃癌临床病理因素之间的关系.结果:胃癌组织中Livin mRNA表达显著高于癌旁正常组织(P＜0.01);Livin mRNA表达肿瘤大小、生长方式、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期显著性相关,差异均有统计学意义(P＜O.05).结论:Livin在胃癌的发生、发展过程中起重要作用,为胃癌的诊断及治疗提供了一个新的途径,也可成为观察疗效的新指标.     

6种肿瘤标志物联合检查对肺癌的诊断价值

目的：探讨肿瘤标志物神经特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角蛋白（CYFRA21-1）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原153（CA153）和铁蛋白（Ferritin）对肺癌的诊断价值。方法采用电化学发光法分别检测151例肺癌（肺癌组）、100例肺良性疾病患者（肺良性疾病组）及50例健康对照组的血清 NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125、CA153、Ferritin 水平并进行分析。结果肺癌组患者6种肿瘤标志物水平明显高于肺良性疾病组和健康对照组,差异有统计学意义（P ＜0．05）。小细胞肺癌的 NSE 水平高于鳞癌和腺癌,差异有统计学意义（P ＜0．05）,而鳞癌和腺癌 CYFRA21-1水平高于小细胞肺癌,差异有统计学意义（P ＜0．05）。6种肿瘤标志物中 NSE 的灵敏度最高,为82．8％。6项肿瘤标志物中3项阳性时,肺癌组阳性率较高,假阳性显著降低。结论血清肿瘤标志物的水平和阳性率与肺癌的病理类型有关。联合检测血清肿瘤标志物可提高早期诊断肺癌的灵敏度和特异度,首选 CEA、NSE 和 CYFRA21-13种肿瘤标志物联合检测。     

外周血microRNA-23b作为胃癌筛查分子标志物的价值和应用研究

目的观察和分析外周血microRNA-23b作为胃癌筛查分子标志物的应用价值。方法选取100例接受胃镜病理活检者作为研究对象,根据检查结果将其分为三组,确诊为胃癌者列为胃癌组,共纳入46例;确诊为胃癌前病变者列为癌前病变组,共纳入28例;胃粘膜检查结果基本正常者列为对照组,共纳入26例。应用定量real time PCR检测技术对三组研究对象外周血样本中的miRNA-23b表达水平进行检测和比较。结果对照组研究对象的外周血样本的Log2△Ct值显著高于癌前病变组（P〈0.05）,而且癌前病变组的Log2△Ct值显著高于胃癌组（P〈0.05）;胃癌组、癌前病变组和对照组研究对象外周血样本中的miRNA-23b表达阳性率分别为71.7%、32.1%和3.8%,胃癌组的阳性率显著高于癌前病变组（P〈0.05）,癌前病变组显著高于对照组（P〈0.05）。与胃镜活检结果对比,其阳性预测值为76.7%,阴性预测值为77.2%。结论胃癌患者外周血中miRNA-23b表达水平可反映患者病情的进展程度,且其诊断效率较高,有望成为用于胃癌早期筛查的新型分子标志物。     

Detection of Mammaglobin A-mRNA-positive circulating tumor cells in peripheral blood of patients with operable breast cancer with nested RT-PCR

OBJECTIVES: The development and validation of a nested RT-PCR methodology for the detection of Mammaglobin A-mRNA-positive circulating tumor cells in peripheral blood of patients with operable breast cancer and evaluation of its prognostic significance. DESIGN AND METHODS: Different combinations of specific primers were in silico designed and selected, so that false positive results due to genomic DNA contamination were avoided. The specificity of the primers used was evaluated in 30 healthy individuals, 20 patients with colorectal cancer and 20 patients with non-small cell lung cancer. The method was applied in 101 patients with operable breast cancer before the administration of adjuvant chemotherapy and 39 patients with metastatic breast cancer. RESULTS: Mammaglobin A-mRNA-positive cells were detected in 14/101 (13.9%) of early breast cancer patients but not in the control population studied (0%); 9 of them (64.3%) relapsed during the follow-up period. Mammaglobin A was detected in 7/39 (17.9%) of patients with verified metastasis. Multivariate analysis revealed the detection of Mammaglobin A-mRNA-positive cells, as an independent risk factor for reduced DFI. CONCLUSIONS: Mammaglobin A is a highly specific molecular marker for the detection of circulating tumor cells in operable breast cancer, with important prognostic applications.     

宫颈癌患者血清叶酸受体-1表达水平及早期诊断价值

目的 探讨血清叶酸受体-1(叶酸受体-1)作为生物标志物在宫颈癌早期诊断中的价值。方法 收集2017年1月至2019年1月在南充市第五人民医院门诊(下称该院)行宫颈脱落细胞学检查136例人乳头瘤病毒(HPV)感染患者临床资料,经病理组织学确诊为宫颈上皮内瘤变组58例和宫颈癌组78例;另选择该院同期52例体检的健康女性作为健康对照组。收集3组研究对象临床资料,包括年龄、FOLR1水平、HPV感染、HPV16型感染、孕次、流产史、肿瘤家族史等。分析血清FOLR1表达与宫颈癌组临床病理资料关系。采用酶联免疫吸附法检测血清FOLR1,利用受试者工作曲线(ROC)评价血清FOLR1对宫颈癌的诊断效能。结果 3组研究对象在年龄、FOLR1水平、HPV感染、HPV16型感染比较,差异具有统计学意义(P<0.05);而在孕次、流产史、肿瘤家族史比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清FOLR1水平与年龄、病理类型、组织分化、FLGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05);血清FOLR1水平与孕次、流产史、肿瘤家族史无关,差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈癌组血清FOLR1水平(271.68±109.38)ng/L明显高于宫颈上皮内瘤变组r (141.08±60.05)ng/L、健康对照组的(124.52±50.17)ng/L,差异具有统计学意义(t=8.214、8.587,P<0.001),而宫颈上皮内瘤变组与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清FOLR1鉴别宫颈癌和宫颈上皮内瘤变的AUC为0.884,灵敏度为81.03%,特异度为79.49%;血清FOLR1鉴别宫颈癌和健康对照组的AUC为0.946,灵敏度为84.62%,特异度为92.31%。结论 宫颈癌患者血清FOLR1水平明显升高,高水平表达FOLR1与患者年龄、病理类型、组织分化、FLGO分期、淋巴结转移有关,血清FOLR1可作为宫颈癌早期诊断指标之一。     

miR-638在乳腺癌血清中的表达及其临床应用价值

目的评估miR-638在乳腺癌患者血清中的表达水平及其临床应用价值。方法以152例乳腺癌患者作为疾病组,102例体检健康者作为对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组血清中miR-638的表达水平,并比较血清miR-638在不同的乳腺癌病理分期、手术前后和化疗前后的表达水平差异;采用ROC曲线分析血清miR-638单独及其联合CEA、CA125、CA15-3等肿瘤标志物对乳腺癌的筛查效能,并采用Z检验进行统计学分析。结果在乳腺癌组中,血清miR-638的表达水平[3.6(1.3,10.5)]较对照组[79.0(52.5,120.8)]明显降低(P0.01);线性回归结果表明,化疗及病理分期是影响血清miR-638表达水平的重要因素;血清miR-638单独筛查乳腺癌时的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.954,当cut-off值为27.47时,其敏感性为94%,特异性为86.2%;miR-638与CEA、CA125、CA15-3联合筛查乳腺癌的AUC~(ROC)为0.978 8,当cut-off值为0.29时,其敏感性为95.4%,特异性为89.5%。两种方法的AUC~(ROC)差异无统计学意义(Z=1.68,P=0.091)。结论血清miR-638可能是潜在的乳腺癌筛查的分子标志物。     

lncRNA LINC00460和ADAR1表达与乳腺癌预后的关系及其诊断价值

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) LINC00460和RNA特异性腺苷脱氨酶1(ADAR1)表达水平与乳腺癌预后的关系及其诊断价值。方法回顾性收集2019年5月至2020年5月同济大学附属第一妇婴保健院收治的86例乳腺癌患者的乳腺组织和癌旁组织。采用qRT-PCR法测定乳腺癌组织和癌旁组织中LINC00460和ADAR1的表达,同时分析LINC00460和ADAR1表达与乳腺癌患者临床病理的关系。Pearson相关性分析法分析LINC00460和ADAR1的相关性; Kaplan-Meier生存分析法分析LINC00460和ADAR1与乳腺癌患者预后的关系; Cox多因素回归法分析乳腺癌预后的影响因素。结果乳腺癌组织中LINC00460和ADAR1的相对表达量为4.13±1.24和5.07±1.62,均明显高于癌旁组织(0.91±0.27和1.03±0.39),差异均有统计学意义(P <0.05)。乳腺癌组织中LINC00460和ADAR1的表达与TNM分期、淋巴结转移、病理类型有关(P <0.05)。乳腺癌组织中LINC00460与ADAR1的表达呈正相关(r=0...     

4种肿瘤标志物联合检测对乳腺癌的诊断价值

目的探讨血清肿瘤标志物CA153、CA125、CA199、CEA联合检测对乳腺癌早期诊断的价值。方法采用化学发光法分别检测乳腺癌和乳腺良性疾病患者血清中CA153、CA125、CA199、CEA的水平。结果 CA153、CA125、CA199、CEA 4种肿瘤标志物联合检测乳腺癌患者与单独检测相比灵敏度明显提高(均P0.01)。结论联合检测乳腺癌患者血清标志物CA153、CA125、CA199、CEA的阳性率、敏感性有较大幅度的提高,四项肿瘤标志物的联合检测虽不能作为乳腺癌的特异性指标,但可为临床早期发现、诊断乳腺癌提供十分重要的依据。     

血清及腹水肿瘤标志物诊断良恶性腹水的临床研究

目的分析血清及腹水肿瘤标志物在诊断腹水良恶性中的应用价值,为临床提供参考。方法选择该院2015年11月至2016年6月收治的腹水患者168例作为研究对象,所有患者均经腹腔穿刺采集腹水,分析腹水中的肿瘤标志物,静脉穿刺采集血液,离心取上层血清检测肿瘤标志物糖类抗原153(CA153)、肿瘤相关物质(BXTM)与癌胚抗原(CEA),所有患者均进行病理活检确诊腹水的良恶性。采用正态分布法确定腹水和血清的恶性标准,以病理诊断结果为金标准,采用四格诊断表,分别计算腹水肿瘤标志物和血清肿瘤标志物不同组合诊断腹水良恶性方案的灵敏度和特异度。结果 168例患者病理确诊为恶性56例,良性112例,腹水肿瘤标志物不同组合中3种标志物联合检测结果为:恶性57例,良性111例;血清3种肿瘤标志物联合检测结果为:恶性64例,良性104例,腹水中3种肿瘤标志物联合诊断的灵敏度为85.71%,特异度为91.96%,分别高于血清中3种肿瘤标志物联合诊断的特灵敏度(82.41%)和特异度(83.93%)。结论腹水3种肿瘤标志物联合诊断腹水良恶性的灵敏度、特异度较高,可作为患者整体病情诊断的重要辅助手段,为患者后续选择其他检查方法确诊病情提供重要参考,具有一定的临床价值。