转化生长因子α对鼠视网膜Müller细胞谷氨酸转运体调控作用的研究

目的 观察转化生长因子α（TGFα）对鼠视网膜Müller细胞谷氨酸转运体 (GLAST) mRNA、蛋白质表达及摄取活性的调控作用。方法 取出生后7～10 d 的新生昆明小鼠视网膜组织，体外进行Müller细胞的培养。同一原代细胞的第3～4代细胞培养后随机分为2组：①TGFα干预组：分别加入浓度为50、75、125、150 ng/ml的TGFα，每种浓度3孔；②对照组：仍用含20%胎牛血清的Dulbeccon改良Eagle培养基培养。采用L-3H-谷氨酸摄取分析方法观察不同浓度TGFα对Müller细胞GLAST摄取活性的影响；逆转录聚合酶链反应方法分析Müller细胞GLAST mRNA表达的差异；免疫组织化学染色方法检测Müller细胞GLAST蛋白质表达的变化。结果随着TGFα浓度的增加，L-3H-谷氨酸的摄取量及GLAST mRNA表达量均逐渐增加，TGFα浓度为125 ng/ml时，L-3H-谷氨酸的摄取量达到最大值，为对照组的266%，同时GLASTmRNA表达量也达到最大值，为对照组的近4倍。免疫组织化学染色显示当TGFα浓度为125 ng/ml时，干预组Müller细胞内的GLAST蛋白表达量明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 TGFα可通过上调GLAST mRNA和蛋白质的表达增加视网膜Müller细胞谷氨酸转运体GLAST的摄取活性。     

阿柏西普对体外培养的视网膜Müller细胞膜离子通道的影响

目的：探讨阿柏西普对体外培养的高糖环境下视网膜Müller细胞膜K⁺通道的影响。

方法：人Müller细胞分为3组：对照组(常规DMEM培养基培养)、高糖组(高糖DMEM培养基培养)、实验组(高糖DMEM培养基和100μmol/L 阿柏西普处理)。采用荧光探针检测细胞K⁺浓度,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测Müller细胞caspase-3蛋白水平。

结果：Müller细胞培养48h后呈现谷氨酰胺合成酶(GS)阳性,纯化度在90%以上。荧光检测显示对照组、高糖组、实验组K⁺相对浓度分别为(2.14±0.44)%、(23.11±4.39)%、(5.20±0.92)%,细胞存活率分别为(100.00±0.00)%、(73.24±4.13)%、(85.22±5.33)%,细胞凋亡率分别为(5.03±1.91)%、(26.73±3.14)%、(16.63±2.73)%(均P<0.05)。 与对照组相比,高糖组Müller细胞内caspase-3蛋白水平显著上升(P<0.05); 与高糖组Müller细胞相比,实验组Müller细胞内caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05)。

结论：阿柏西普可抑制体外培养的高糖环境下视网膜Müller细胞膜K⁺通道,抑制高糖诱导的Müller细胞凋亡,降低caspase-3蛋白表达水平,促进细胞增殖。     

热休克蛋白70在视网膜神经元和Müller细胞 中的诱导及其保护作用 

目的评价大鼠视网膜神经元（RNs）和Müller细胞中热休克蛋白（HSP）70的诱导表达，及其对低糖和谷氨酸损伤的视网膜神经元的保护作用。方法大鼠RNs和Müller细胞体外培养体系分别经过热休克处理（42℃下1 h）及免疫细胞化学法检测HSP70表达的时间经过；并对RNs进行低糖(0.56 mmol/L葡萄糖，作用6 h)和谷氨酸(100 μmol/L,作用 6 h)兴奋毒性损伤，四唑盐（MTT）比色法评价细胞存活能力，同时用HSP70抗体阻断其表达。结果热休克后大鼠RNs和Müller细胞中HSP70高效表达；经热休克预处理，RNs在低糖和谷氨酸盐损伤后的细胞活力明显提高，该现象可被HSP70抗体阻断。结论热休克能够诱导RNs和Müller细胞高效表达HSP70，从而增强RNs对低糖和谷氨酸兴奋毒性损伤的耐受能力。(中华眼底病杂志,2005,21:110-113)     

兔视网膜Müller细胞的原代培养

目的 探索体外培养兔视网膜Müller细胞的有效方法.方法 采用酶消化法从乳兔视网膜获取Müller细胞,通过振荡和反复洗涤使之纯化.采用免疫组织化学技术和透射电镜对传代Müller细胞进行鉴定.结果 培养24 h后即有部分细胞贴壁生长,72 h后贴壁细胞进一步增多.通过振荡吹打可使附着于Müller细胞上的神经元脱落.20～25 d后细胞接近融合,呈三角形或不规则形.传代后细胞经1周达到融合.培养细胞GFAP阳性率在95%以上.电镜观察显示细胞内含有线粒体、粗面内质网、核糖体及8～10 nm的中间丝.结论 利用酶消化法可成功分离兔视网膜Müller细胞,通过振荡和吹打洗涤,可使之纯化.     

Müller细胞对视网膜血管内皮细胞紧密连接蛋白表达的影响

目的
探讨体外培养的Müller细胞在糖基化终末产物（AGEs）作用下增殖活性的变化，以及这种改变对牛视网膜血管内皮细胞（BREC）紧密连接蛋白（occludin）表达的影响。
方法
培养新生大鼠Müller细胞和BREC，两类细胞均用特异性抗体进行免疫鉴定。将培养的BREC分4组观察：第1组未添加任何细胞上清液；第2组添加正常Müller细胞上清液；第3组添加糖基化终末产物(AGEs)作用后的Müller细胞上清液；第
4组无细胞组，为空白对照组。酶联免疫吸附法（ELISA）测定4组细胞上清液中紧密连接蛋白的含量，比较其变化。
结果
添加正常Müller细胞上清液组紧密连接蛋白表达量最多，未添加任何细胞上清液组次之，添加AGEs作用后的Müller细胞上清液组更少。
结论
AGEs能促进Müller细胞异常增殖、抑制BREC表达紧密连接蛋白。
(中华眼底病杂志, 2006, 22: 28-30)     

缺氧对视网膜Müller细胞促红细胞生成素mRNA和蛋白表达的影响

目的 探讨缺氧条件下促红细胞生成素（EPO）mRNA及蛋白在体外培养的Müller细胞的表达情况。 方法 胰酶消化新生大鼠视网膜组织制成单细胞悬液，机械震荡、吹打法分离纯化视网膜Müller细胞，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫细胞化学方法对缺氧条件下视网膜Müller细胞EPO基因和蛋白的表达进行测定。 结果 成功获得视网膜Müller细胞，传代后95%以上的细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色阳性。EPO蛋白的阳性染色位于视网膜Müller细胞的细胞浆及突起上。在正常的视网膜Müller细胞中仅见微弱的EPO mRNA和蛋白表达，而缺氧后表达明显上调，且呈时间依赖性。 结论 Müller细胞在缺氧条件下EPO mRNA和蛋白表达增强，EPO表达水平的升高可能是缺氧性视网膜病变的神经保护因素之一。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 196-199)     

巢蛋白和神经胶质纤维酸性蛋白在大鼠视网膜发育中的动态表达

目的 观察巢蛋白(nestin)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在大鼠视网膜发育中的动态变化.方法 48只Wistar大鼠,其中24只大鼠分为出生后1 d,1、2、3、4、7、12、20周8组,每组3只.制作眼球矢状位冰冻切片,采用共聚焦激光显微镜观察nestin和谷氨酰胺合成酶(GS)以及GFAP和GS免疫荧光染色情况.18只大鼠分为出生后id,1、2、3、4、12周,每组3只.提取大鼠视网膜总RNA,实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测nestin、GFAP和GS mRNA表达.选择6只出生后7～12 d新生鼠,取眼球体外培养Müller细胞,行GS和(或)nestin免疫荧光染色,共聚焦激光显微镜观察荧光染色情况.结果 出生后1 d,nestin免疫阳性细胞贯穿神经视网膜全层,主要定位于视网膜前体细胞放射状排列的细长纤维中,在视网膜内侧出现GFAP阳性的星形胶质细胞.出生后1周出现表达GS的Müller细胞,同时表达nestin,但不表达GFAP;GFAP阳性细胞仍然位于视网膜内侧.出生后2～12周,nestin在Mfiller细胞上的表达逐渐减少直至消失,GFAP在星形胶质细胞中的表达强度投有显著变化.体外培养的Müller细胞表达nestin,不表达GFAP.Nestin和GFAP mRNA在视网膜中的表达与免疫荧光染色结果相一致.结论 随大鼠视网膜不断发育,Müller细胞上nestin表达逐渐减少,成年大鼠视网膜Müller细胞不再表达nestin;新生鼠和成年鼠Müller细胞均不表达GFAP.     

糖尿病视网膜Müller细胞病理改变的体内外研究

目的研究糖尿病视网膜Müller细胞的病理改变.方法用链脲菌素(STZ)腹腔注射建立大鼠糖尿病模型,3个月后观察视网膜Müller细胞超微结构的变化.行免疫组织化学染色,在激光共聚焦显微镜下观察视网膜Müller细胞GFAP、VEGF表达的改变;纯化培养出生5～7d(SD)乳鼠的Müller细胞,在其中加入糖基化终末产物(AGEs)2500μg/mL,培养24h后,用MTT方法检测细胞活性.结果3个月后电镜观察发现糖尿病鼠视网膜Müller细胞突起有损伤表现,微血管内皮细胞、周细胞未见病理改变;正常鼠视网膜VEGF染色阴性,视网膜内界膜下、神经节细胞层有GFAP染色;糖尿病鼠除视网膜内界膜下、神经节细胞层有GFAP染色外,其余各层也可见丝条状贯穿于内外界膜之间的GFAP染色,在上述部位有VEGF及GFAP的共表达.培养24h后,2500μg/mL质量浓度的AGEs对Müller细胞活性有显著促进作用.结论反应性胶质化增生可能是糖尿病早期Müller细胞的主要病理改变,它所引起的Müller细胞结构和功能改变应在糖尿病视网膜病变(DR)的发生发展中起重要作用.AGEs可能是DR中视网膜Müller细胞反应性胶质化增生的重要致病因素.     

PKC对豚鼠近视眼视网膜M&#252;iler细胞近视因子基因的调控作用

目的研究蛋白激酶C（PKC）对豚鼠近视眼视网膜Mtiller细胞中酪氨酸羟化酶（TH）、诱导型NO合成酶（iNOS）、神经型NO合成酶（nNOS）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、转化生长因子B（TGFl3）基因表达的调控作用。方法眼罩遮盖法建立豚鼠近视眼模型,酶消化法原代培养其视网膜M&#252;ller细胞,GFAP免疫组织化学染色进行细胞鉴定。根据干预因素不同,把M&#252;ler细胞分为正常对照组、近视组、近视＋GF109203X组、近视＋PMA组和近视＋DMSO组。RT—PCR检测TH、iNOS、nNOS、bFGF和TGFβmRNA的表达情况。结果与正常对照组比较,近视眼视网膜Mtiller细胞iNOS、nNOS、bFGF和TGFβmRNA表达上调,THmRNA表达下调（P〈0．05）。PKC激活剂（PMA）激活PKC后,近视眼视网膜M&#252;ller细胞表达nNOS、iNOS、TH和bFGFmRNA上调（P〈0．05）;GF109203X抑制PKC活性后,这些因子的mRNA表达下调（P〈n05）。结论豚鼠近视眼视网膜M&#252;ller细胞nNOS、iNOS、bFGF和TH基因的表达受PKC调控,M&#252;ller细胞可能为近视信号因子的一个重要来源。     

高浓度胰岛素对兔视网膜Müller细胞表达血管内皮生长因子的影响

目的探讨高浓度胰岛素对体外培养的视网膜Müller细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法采用免疫细胞化学法、原位杂交法及ELISA法,定性、定量测定在不同浓度胰岛素条件下,体外培养的兔视网膜Müller细胞表达VEGF的变化.结果胰岛素能明显增强VEGF的表达,并通过转录水平调节.结论高浓度胰岛素可能通过刺激Müller细胞编码VEGF基因的转录,增强VEGF蛋白的表达,从而加速糖尿病视网膜病变的新生血管形成.     

压力对牛眼小梁细胞诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达及蛋白质合成的影响

目的　研究牛眼小梁细胞中诱导型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesynthase,iNOS)在不同压力下的mRNA表达及蛋白质合成的变化 ,探讨一氧化氮 (nitricoxide,NO)在青光眼发病中的作用。方法　培养新生牛眼小梁细胞 ,并分别给予 2 0、40、6 0及 80mmHg(1mmHg =0 133kPa)的压力 ,以不加压组为对照组 ,用原位杂交和还原型辅酶Ⅱ硫辛酰胺脱氢酶 (nicotinamide adeninedinucleotidephosphate ,NADPH)组织化学染色技术对小梁细胞iNOS的mRNA和蛋白质含量变化进行定性及定量观察。结果　牛眼小梁细胞中iNOSmRNA及蛋白质含量均随压力增高而增高。对照组与压力 2 0mmHg组比较 ,两组iNOSmRNA均为弱表达 ,组间差异无显著性 (t=0 95 0 1,P >0 0 5 ) ;压力 40mmHg和 6 0mmHg组与对照组相比差异有显著性 (t值分别为 0 0 381和 0 0 32 4,P <0 0 5 ) ;压力 80mmHg组与对照组相比差异有非常显著性 (t=0 0 0 0 16 ,P <0 0 1) ;压力 40mmHg组与 6 0mmHg组相比 ,组间差异无显著性 (t=0 112 3,P >0 0 5 ) ,而与 80mmHg组相比差异有非常显著性 (t值分别为 0 0 0 2 9和 0 0 0 45 ,P <0 0 1)。NADPH组织化学染色结果与原位杂交结果基本相同 ,仅显示 40mmHg组与6 0mmHg组的组间差异有显著性 (t=0 0 42 0 ,P <0 0 5     

压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞诱导型一氧化氮合酶mRNA及其蛋白表达的影响

目的 研究不同压力下纯化培养的大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs)中诱导一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA及其蛋白质的表达,探讨青光眼患者RGCs损伤的机制。方法 将纯化培养的Sprague-Dawley大鼠RGCs随机分成对照组A,B,C,及D组,分别在0,20,40,60及80mmHg(1mmHg=0.133KPa)的压力下培养48h后,用原位杂交,RTPCR及Western blot法检测RGCs中iNOSmRNA及其蛋白质的表达,并用全自动图像分析系统测定其吸光度值。结果 纯化培养的RGCs纯度为98％。原位杂交,RT－PCR及Western blot法检测RGCs中iNOS mRNA及其蛋白表达结果变化均呈平行关系;对照组无表达,A组有较弱的表达信号,B,C及D组表达逐渐增强;3项检测结果用全自动图像分析显示;A组iNOSmRNA均弱表达,与对照组比较差异有显著意义（P＜0．05）;B,C及D组均为强表达,各组与对照组比较差异有非常显著意义（P＜0．01）。结论 压力可激活RGCs中iNOSmRNA及其蛋白质的表达,由此产生过量的NO损伤RGCs成为青光眼的发病因素之一。     

氯离子通道2对压力应激状态下人眼小梁细胞功能的影响

目的 探讨分布于小梁细胞上的氯离子通道2(ClC-2)与小梁细胞数量及功能之间的关系,以进一步了解原发性开角型青光眼的形成机制.方法 首先分别利用反转录聚合酶链反应、台盼蓝染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测不同压力,以及不同压力作用时间下小梁细胞C1C-2 mRNA表达、小梁细胞活力及凋亡情况的变化;再利用RNAi技术抑制CIC-2 mRNA的表达,观察一定压力及作用时间下小梁细胞活力、凋亡情况的变化.结果 与0 mm Hg(1 mm Hg =0.133 kPa)、20 mm Hg相比,30 mm Hg及40mm Hg时,随压力作用时间的增加,CIC-2 mRNA的表达明显增高,差异有统计学意义;表达最高点为24 h;60mm Hg时,各时间点下C1C-2 mRNA的表达较30 mm Hg、40 mm Hg时明显降低,差异有统计学意义,且随时间延长,C1C-2 mRNA的表达逐渐下降.当40 mm Hg及60 mm Hg的压力持续作用一段时间后,小梁细胞活力明显降低,凋亡指数明显增加,差异有统计学意义.抑制C1C-2 mRNA表达后,压力应激状态下小梁细胞活力下降及凋亡增加更显著,差异有统计学意义.结论 压力应激条件下,C1C-2表达的变化与小梁细胞的活力及凋亡有一定的相关性,提示C1C-2对小梁细胞存在保护作用.(中国眼耳鼻喉科杂志,2012,12:26-29)     

压力对牛眼小梁细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨压力对牛眼小梁细胞的增殖周期及凋亡相关基因bcl-2和bax mRNA表达的影响。方法：体外培养牛眼小梁细胞。按照施加压力的大小分为实验组和对照组,对照组不施加压力,实验组分别给予20、40、60及80mm Hg(1mm Hg=0.133kPa）的压力,培养时间分别为24及48h。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法、流式细胞仪和原位杂交技术,检测不同压力和持续时间下小梁细胞的增殖和凋亡指数,及在此条件下凋亡相关基因bcl-2和bax mRNA的表达。结果：≤40mm Hg的压力持续24h,小梁细胞凋亡率与对照组比较差异无显著意义（P＞0．05）;≥60mm Hg的压力使小梁细胞凋亡率显著增高。40mm Hg的压力持续24h后,细胞的凋亡指数虽未显著增高,但增殖指数已显著下降,bax基因表达有明显改变。≥40mmHg的压力持续48h后,细胞的凋亡率、增殖指数及bcl-2家庭基因表达量与对照组相比,差异均有显著意义（（均P＜0．01）。结论：≥40mm Hg的压力持续一段时间后,可通过影响bcl-2家族基因抑制小梁细胞的增殖并导致细胞凋亡。     

周期性眼外负压吸引对兔视网膜超微结构的影响

目的探讨不同强度的周期性眼外负压吸引对兔视网膜超微结构的影响。方法以新西兰大白兔为实验动物分为对照组和实验组,对实验组分别应用改良准分子激光原位角膜磨镶术负压吸引环置于兔角巩膜缘,以眼球外负压每3s100mmHg(1mmHg=0.133kPa)的速度升高至负压(200±20)mmHg(实验组Ⅰ)、(300±20)mmHg(实验组Ⅱ)、(400±20)mmHg(实验组Ⅲ)、(500±20)mmHg(实验组Ⅳ)。即时眼压分别为35、45、55及75mmHg,维持约5s后释放压力至0,间隔1min后重复上述操作共10个循环,隔日实验1次。2周后电镜观察不同部位兔视网膜超微结构,并比较实验组和对照组的差异。结果实验组Ⅰ与对照组相比未见到明显变化,实验组Ⅱ视网膜超微结构与对照组相比发现细胞器略有增多,提示细胞代谢增强。Ⅲ、Ⅳ组视网膜超微结构有一定变化,其中Ⅳ组超微结构破坏,细胞有坏死征象。结论不同终点眼压的周期性眼外负压吸引对视网膜超微结构影响不同,小于45mmHg基本无影响,55mmHg左右有一定影响,大于75mmHg有明显的破坏作用。     

Glaucoma without ocular hypertension. A clinical study

One hundred eighty-four glaucomatous eyes (125 patients) with visual field defects of Stage I and II in the central visual field were examined with the Octopus perimeter 201, Program 31 or 33, and were divided into 3 groups according to maximum intraocular pressures: (1) low-tension glaucoma (21 mm Hg), (2) glaucoma simplex (22-29 mm Hg), (3) glaucoma simplex (30-39 mm Hg). In these three groups of glaucomatous eyes the cupping of the optic disk, vision and blood pressure were examined and a further check for cardiovascular risk factors was carried out by the internist. All three groups proved to have an equally high incidence of cardiac insufficiency, abnormal EKG changes and diabetes. However, a low systolic blood pressure was found to be the risk factor more often in patients with low-tension glaucoma than with glaucoma simplex. Furthermore, intraocular pressures in the low-tension glaucoma group were higher than those in the normal population. The occurrence of cupping of the optic disk, which is not present with purely vascular optic nerve diseases, and the location of visual field defects in low-tension glaucoma, which is similar to that in glaucoma simplex but different from vascular diseases, as well as the increased diurnal tension variations of diurnal tension curves compared to the normal population are all factors which indicate that low-tension glaucoma is not a purely vascular optic nerve disease, and that pressure-lowering therapy is necessary.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞存活及轴突生长的影响

目的 研究压力对视网膜神经节细胞(RGC)存活和轴突生长的影响及其与神经微丝蛋白(NF)-H表达变化的关系,探讨压力引起RGC损伤的机制.方法 对照实验研究.纯化培养20只SD乳鼠的RCC.采用开放式压力控制培养系统,建立压力损伤模型,分别检测20、40、60及80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)压力作用48 h对RGC存活数及轴突生长的影响,测定存活且有轴突的RGC数及其最长轴突的长度.采用免疫组织化学染色加图像分析系统,检测压力对RGC表达NF-H的影响,以吸光度(A)值表示.采用SPSS 13.0统计学软件对数据进行分析.组间RGC存活数和细胞轴突长度与对照组比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),组间进一步两两比较采用SNK法(g检验).以P<0.05作为差异有统计学意义.结果 纯化培养的SD大鼠RGC纯度可达96.24%.压力40、60及80 mm Hg作用48 h,RGC存活数和细胞轴突长度与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(存活细胞数:P=0.001,0.000,0.000;细胞轴突长度:P=0.000,0.000,0.000),且降低程度随压力增高而增大;NF-H表达差异也有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000),且NF-H阳性细胞分布不规则.结论 压力可影响纯化培养的RGC存活数和轴突生长,可能与其下调RGC中NF-H的表达有关,推测压力是引起青光眼视神经损害的机制之一.(中华眼科杂志,2009,45:164-167)     

Postural change of intraocular and blood pressures in ocular hypertension and low tension glaucoma.

The effect of body position on the intraocular and blood pressures of normal volunteers and of patients with ocular hypertension and low tension glaucoma was studied. Changing from the sitting to the supine position increased the intraocular pressure by an average of 4.4 (SD 2.0) mm Hg in the control group, 4.0 (SD 2.0) mm Hg in the ocular hypertension group, and 4.1 (SD 1.8 mm Hg) in the low-tension glaucoma group. After 30 minutes in the supine position the intraocular pressure in normal volunteers and patients with low tension glaucoma remained stable. In contrast patients with ocular hypertension showed a further significant increase in intraocular pressure of 1.6 (SD 2.8) mm Hg (p = 0.004). This was accompanied by an equally significant decrease in blood pressure (p less than 0.001). We believe that these are manifestations of different mechanism of intraocular pressure regulation between these groups.     

青光眼持续高眼压状态下改良式前房穿刺术

目的探讨改良式前房穿刺术在青光眼持续高眼压状态下的效果。方法35例（38眼）持续高眼压青光眼,急性闭角型青光眼急性发作期21例（24眼）,慢性闭角型青光眼6眼,新生血管性青光眼4眼,年龄相关性白内障膨胀期4眼。所有患眼应用常规降眼压药物不能有效降低眼压,采用手术显微镜下改良式前房穿刺术放液。结果所有患者放液后眼压迅速降低,眼痛、头痛缓解,视力有不同程度提高,术后眼压平均为（17．30±5．40）mmHg（1mmHg=0．133kPa）。结论改良式前房穿刺术放液是治疗高眼压持续状态的安全、有效的方法,损伤小、反应轻、简便高效,可以避免长期大量应用降眼压药物引起的副作用。     

Evaluation of travoprost as adjunctive therapy in patients with uncontrolled intraocular pressure while using timolol 0.5%

PURPOSE: To evaluate the intraocular pressure-lowering efficacy and safety of travoprost 0.0015% and 0.004%, dosed daily in the evening compared with vehicle, in patients with open-angle glaucoma or ocular hypertension, whose intraocular pressure was not adequately controlled on timolol 0.5% twice daily (twice daily). METHODS: Subjects who qualified at screening began a run-in period dosing timolol twice daily for 3 weeks. If the subjects had an intraocular pressure of 24 to 36 mm Hg at 8 AM and 21 to 36 mm Hg at 10 AM and 4 pm in at least one eye on timolol, they were randomized to one of two concentrations of travoprost (0.0015% or 0.004%) or vehicle solution every day and were followed for 6 months. Four hundred twenty-six subjects were randomized. The mean intraocular pressure at 8 AM, 10 AM, and 4 PM in the patient's eye with the higher intraocular pressure was used for the analysis. RESULTS: Mean baseline values (25 mm Hg) for subjects at eligibility (while maintained on timolol) were not significantly different (P <.0001) among the treatment groups. The intraocular pressure was lowered an additional -5.7 to -7.2 mm Hg and -5.1 to -6.7 mm Hg in the travoprost 0.004% and 0.0015% concentrations, respectively. These changes were significantly (P < or =.0001) different from the vehicle group (-1.3 to -2.8 mm Hg). The intraocular pressure range on treatment at all visit times over the 6-month treatment period ranged from 17.9 to 19.2 mm Hg for travoprost 0.004% and 18.3 to 20.1 mm Hg for travoprost 0.0015% compared with 22.4 to 24.1 mm Hg for vehicle. Average hyperemia scores ranged from trace to mild (mean 0.5 on a scale of 0 = none/trace; 1= mild; 2 = moderate; 3 = severe) for all treatment groups. No iris pigmentation changes were observed in any patient during this study. There were no clinically or statistically significant changes from baseline in visual acuity, ocular cells and flare, fundus parameter, cup-to-disk ratio and visual field between the treatment groups. There were no serious adverse events reported for any treatment group. CONCLUSIONS: Travoprost produced clinically relevant and statistically significant additional intraocular pressure reductions from baseline when used adjunctively with timolol in subjects with open-angle glaucoma or ocular hypertension.