TRAF6在TLR4信号通路介导的2型糖尿病性肾病中的作用

中国2型糖尿病（T2DM）的患病率正在逐年增高,且发病年龄逐渐趋于年轻化,其中糖尿病性肾病（diabetic nephropathy）是糖尿病主要死亡原因之一,并成为末期肾衰竭的主要病因之一。随着炎症因子和通路发病机制的逐渐完善,免疫因素在DN患者的发病过程中被越来越关注。抑制免疫炎症的应答有望成为治疗糖尿病肾病的新手段。研究证实肿瘤坏死因子相关因子6（TNF receptor－associated factor6,TRAF6）参与的TLR4（Toll－like－receptor s 4,TLR4）炎症信号通道在糖尿病肾病的免疫炎症机制及胰岛素抵抗中发挥重要作用,可为糖尿病肾病研究发病机理提供新思路,为寻找治疗或延缓糖尿病肾病药物新靶点奠定基础。     

基于HMGB1/TLR4信号通路评价五味子乙素对 2型糖尿病肾病大鼠肾脏功能的保护作用

目的 研究五味子乙素(SchB)对2型糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏功能的保护作用及其对HMGB1/TLR4炎性通路的影响。方法 40只SD大鼠随机分为正常对照组、DN组、DN低剂量SchB组及DN高剂量SchB组,采用尾静脉注射链脲佐菌素构建DN模型,并同时给予药物治疗。治疗4周后处死大鼠取材,检测谷丙转氨酶(ALT)、尿肌酐(Ucr)、血肌酐(Scr)、血胱抑素C(Cys-c)及内生肌酐清除率(Ccr);HE染色观察大鼠肾脏组织结构变化;Western blot法分析肾脏组织HMGB1、TLR4、IL-1β、IL-6及TNF-α蛋白表达量。结果 与正常对照组比较,DN组大鼠Scr、Cys-c及ALT水平显著升高,Ucr、Ccr水平则显著降低(P<0.05),肾脏组织形态明显异常,并且HMGB1、TLR4、IL-1β、IL-6及TNF-α蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与DN组大鼠比较,经低、高剂量SchB治疗后大鼠Scr、Cys-c及ALT水平明显降低,Ucr、Ccr水平则显著升高(P<0.05),并且HMGB1、TLR4、IL-1β、IL-6及TNF-α蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。结论 SchB可改善DN大鼠肾脏功能,其机制可能与降低HMGB1/TLR4信号蛋白表达、发挥抗炎作用有关。     

川芎嗪对STZ诱导2型糖尿病大鼠肾病TLR4表达的影响

目的 探讨川芎嗪对链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠肾病的治疗作用及机制.方法 SD大鼠50只,随机分为正常组和模型组.除正常组外,其余大鼠均给予高脂-高糖饲料喂养4周,再给予链脲佐菌素(40 mg/kg,ip),72 h后测定空腹血糖,将血糖值高于16.67 mmol/L的大鼠随机分成4个组即模型组,二甲双胍阳性组(250 mg/kg),川芎嗪低、高剂量组(80、160 mg/kg),连续给予相应试药8周.其中正常组和模型组的大鼠均给予同等量蒸馏水灌胃.实验结束时,测定大鼠血糖、尿蛋白、血尿素氮和血肌酐含量;免疫组化法测定大鼠肾组织TLR4和caspase3蛋白表达.光镜下观察肾脏病理学变化.结果 与模型组比较,二甲双胍组和川芎嗪高剂量组给药8周后,大鼠动态空腹血糖均能明显降低(P<0.05),大鼠动态尿蛋白显著性降低(P<0.01,P<0.05);二甲双胍和高剂量组TLR4和caspase3蛋白表达明显低于模型组(P<0.05);肾脏组织病理性损伤明显减轻.结论 川芎嗪对STZ诱导2型糖尿病大鼠肾病具有保护作用,其机制可能与下调TLR4表达作用有关.     

TSC—mTOR信号通路在糖尿病及糖尿病肾病发病机制中的作用

糖尿病作为一种非传染性流行病，正肆虐全球。由于糖尿病的病因和发病机制尚未完全阐明，加之其多种并发症，给防治带来了不少的难度。糖尿病肾病是糖尿病引起的严重并发症之一，在我国，糖尿病肾病已成为慢性肾衰竭的第三位原因。因此，迫切需要深人研究糖尿病和糖尿病肾病的发病机制以寻找新的治疗手段。     

miR-346在糖尿病肾病TGF-β介导的Smad信号通路中的作用

目的:观察miR-346在高糖环境下小鼠肾小球系膜细胞TGF-β介导Smad信号通路中的作用,探讨miR-346参与糖尿病肾病(DN)的发病机制。方法:体外高糖(25 mmol/L)下培养小鼠肾小球系膜细胞(MC),p Genesil-miR-346和重组TGF-β药物作为干预因素,分别设TGF-β药物刺激组(10、30 ng/m L)、TGF-β药物刺激+shRNA P53干扰组、阴性对照组。细胞免疫荧光检测细胞表型;Western法检测P53蛋白和Smad3/4蛋白的表达;实时荧光定量RT-PCR法检测mRNA表达。结果:⑴miR-346的表达可由P53通过调节miR-346基因中启动子来调节;⑵miR-346可调节Smad3/4的表达,其过程是TGF-β通过P53、miR-346通路从上游来调节的。结论:miR-346通过TGF-β/Smad信号通路调控糖尿病肾病相关基因表达,二者形成正反馈效应,在DN的发生和发展中起到非常重要的作用。     

2型糖尿病患者单核细胞TLR4信号通路的研究

目的:探讨单核细胞TLR4/NF-κB信号通路在2型糖尿病(2-DM)患者炎症反应中的作用.方法:以TLR4配体LPS刺激正常人及2-DM患者单核细胞,应用实时定量RT-PCR检测单核细胞TLR4mRNA、A20mRNA的变化,FIISA法检测培养上清TNF-α、IL-10浓度.结果:2-DM患者单核细胞TLR4mRNA、A20mRNA相对表达羹高予正常对照组,LPS刺激后无明显上调.2-DM患者单核细胞在LPS刺激后与对照组单核细胞LPS刺激后相比,TNF-α产生更多,IL-10产生较少.结论:单核细胞TLR4/NF-κB信号通路可能参与了2-DM的炎症反应,TLR4表达上调、A20上调不足与炎症反应有关.TLR4通路的激活可能是2-DM患者易患动脉粥样硬化的原因之一.     

运动量对糖尿病动脉粥样硬化大鼠TLR2、TLR4的影响

目的:探讨不同强度的运动对糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉组织Toll样受体2(TLR-2)、Toll样受体4(TLR-4)的影响.方法:选取健康SD大鼠100只,随机分成对照组20只及糖尿病动脉粥样硬化组80只,糖尿病动脉粥样硬化模型采用高糖高脂饮食加链脲佐菌素(STZ)(30 mg/kg)注射建立.其中糖尿病动脉粥样硬化组又分成模型组、小运动量组、中等运动量组和大运动量组(每组20只).经过估计力竭运动时间及游泳训练后,小运动量组(12 min/次),中等运动量组(21 min/次),大运动量组(30 min/次),进行6周的运动干预,1次/d,一周6次.用PCR法测定各组大鼠主动脉组织的TLR2、TLR4mRNA的表达.结果:模型组较对照组血管组织中TLR2、TLR4水平升高;运动干预后,各运动组TLR2、TLR4水平较模型组降低,以中等运动量、大运动量组下降明显.结论:糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉组织中TLR2、TLR4水平升高,TLR2、TLR4水平的升高可能是糖尿病动脉粥样硬化的发病机制之一,运动能够降低TLR2、TLR4的表达.     

TLR4信号通路在高血压治疗中的研究进展

心血管疾病的慢性炎症状态是存在多年的命题,但没有明确证实,因此还是一个较新的研究课题,许多研究资料证实慢性血管炎症反应可能是高血压重要的发病机制,是与动脉粥样硬化的桥梁,炎症与高血压互为因果、相互影响,是一个恶性循环的关系,因此对炎症信号通路的研究并在此基础上开发新的药物至关重要,Toll 样受体4是研究较为广泛的炎症信号通路,以其为靶点来调控血压取得了一定疗效,文章介绍了近年来药物基于 TLR4信号通路治疗高血压及其靶器官损害的机制研究。     

雷公藤甲素通过调控TLR/NF-κB信号通路对早期糖尿病肾病足细胞的作用研究

目的 观察雷公藤甲素治疗糖尿病肾病小鼠的疗效,并探讨其通过Toll-样受体（TLR）/核因子κB（NF-κB）信号通路对糖尿病肾病足细胞的作用机制。方法：9周龄db/m和db/db雄性小鼠分为db/m正常对照组（等量0.9%生理盐水）、db/db糖尿病对照组（等量0.9%生理盐水）、替米沙坦治疗组[5mg /( kg.d)]、雷公藤甲素组 [50ug /( kg.d) ],治疗8周。记录各组小鼠一般情况、24h尿蛋白定量、体质量、肾脏指数和血生化指标。光镜观察肾小球病变情况。WT1免疫组化计算足细胞数量。Western blot检测肾脏足细胞相关蛋白Nephrin、Podocin以及肾脏组织TLR4和NF-κB蛋白定量表达。结果 与糖尿病对照组比较,经雷公藤甲素组小鼠治疗后24h尿蛋白定量[(98.28±11.10)mg/24h比(239.89±44.26)mg/24h]、血清肌酐[(38.82±3.66)μmol/L 比(45.32±7.63)μmol/L]、总胆固醇[(3.05±0.54)mmol/L比(4.00±0.67)mmol/[及甘油三酯[(1.23±0.15)mmol/L比(2.09±0.48)mmol/L]均明显下降(P 均< 0.01),血清白蛋白水平上升[(39.21±4.33)g/L比(25.46±1.54)g/L,P < 0.01],肾小球肥大和足细胞损伤减轻,Nephrin[ (2.05±0.44)比(1.15±0.22)]、Podocin[(1.32±0.25)比(0.72±0.20)]蛋白表达量上升;(P 均< 0.01),TLR4[ (0.37±0.04)比(0.61±0.04)]和NF-κB[ (0.41±0.05)比(0.76±0.06)]蛋白表达量下降(P 均< 0.01)。结论 雷公藤甲素可能通过抑制TLR/NF-κB信号通路相关因子的表达,减轻糖尿病肾病小鼠足细胞损伤,减低蛋白尿,保护肾功能,起到治疗糖尿病肾病的作用。     

TLR4及其信号通路在阻塞性黄疸肝脏损伤中的作用研究

目的 探讨TLR4及其信号通路在阻塞性黄疸中引起肝脏损伤的作用机制.方法 将60只SD大鼠(雌雄各半)随机分为阻塞性黄疸+多粘菌素B组(OJ+PMB组,n=15)、阻塞性黄疸组(OJ组,n=15)、假手术组(SO组,n=15)、空白对照组(CG组,n=15).结扎胆总管建立阻塞性黄疸大鼠模型,并于术后7、14、21 d...     

血同型半胱氨酸在2型糖尿病肾病中的作用观察

目的:探讨血浆总同型半胱氨酸水平(Hcy)与2型糖尿病肾病的关系.方法:应用高效液相色谱仪和荧光检测器测定39例2型糖尿病肾病变组和32例2型糖尿病无肾病变组的血浆总Hcy水平.并对糖尿病肾病患者应用胰岛素治疗4周后复查血浆总Hcy.结果:2型糖尿病肾病变组血浆Hcy,明显高于无肾病变组,胰岛素治疗4周后无明显改变.Logistic回归分析提示高Hcy是糖尿病肾病的独立危险因子.结论:2型糖尿病肾病变组血浆Hcy明显高于2型糖尿病无肾病变组,胰岛素治疗不能降低2型糖尿病肾病变组血浆Hcy.高Hcy是糖尿病肾病的独立危险因子.     

活性氧簇介导的信号转导通路与糖尿病肾病

糖尿病时,在高糖等一系列致病因素的作用下,将导致肾小球系膜细胞和小管上皮细胞活性氧产生增多,抗氧化物质减少,不仅对机体造成氧化损伤,而且使蛋白激酶C、丝裂原活化蛋白激酶以及蛋白酪氨酸激酶/信号转导子和转录激活子通路活化增加而上调多种细胞因子的表达,使细胞外基质合成增加,降解减少,促进了糖尿病肾病的发生与发展。而抗氧化治疗则能减轻糖尿病肾病患者的肾损伤,为其临床治疗提供了又一新的策略。     

FOXP3基因甲基化在2型糖尿病肾病中的作用

目的探讨FOXP3基因甲基化在2型糖尿病肾病发病过程中的作用。方法将90名研究对象分为正常对照组、单纯糖尿病组、糖尿病肾病组。采用亚硫酸氢盐测序法检测FOXP3基因启动子区(~+2071,~+2182)的甲基化水平,以流式细胞术检测CD4~+CD25~+FOXP3~+T细胞表达率。结果单纯糖尿病组和糖尿病肾病组FOXP3基因启动子区5个Cp G位点均呈现高甲基化(100%),而正常对照组第5个Cp G位点(~+2156)可见低甲基化(90%)。与正常对照组相比,其余两组CD4~+CD25~+T细胞表达率均下降,差异有统计学意义(P0.05)。不同组别之间CD4~+CD25~+FOXP3~+T细胞表达率差异有统计学意义(P0.01),糖尿病肾病组低于其余两组(P0.05)。三组之间CD4~+CD25~+FOXP3~+T细胞表达呈现随病情加重而下降的趋势。年龄、糖化血红蛋白、空腹血糖、白细胞、糖尿病病程与CD4~+CD25~+FOXP3~+T细胞表达率之间呈现负相关(P0.05)。结论 FOXP3基因启动子区高甲基化和CD4~+CD25~+FOXP3~+T细胞表达率下调可能与2型糖尿病肾病发病相关。     

NR4A1在2型糖尿病发病中的作用

孤儿核受体NR4AI是核受体超家族中的一员,在多种细胞中表达,同时功能十分广泛,不仅参与细胞周期调控（增殖或凋亡）,还与神经性疾病、类固醇激素的生成、肿瘤、动脉粥样硬化的形成及能量调控密切相关。近年来,NR4A1与能量代谢的关系逐渐引起人们的广泛关注,并发现在能量平衡调控中发挥了重要作用,与2型糖尿病等疾病发生关系密切。     

霉酚酸酯对糖尿病肾病大鼠肾组织 TLR4、IL-18表达的影响

目的：探讨霉酚酸酯对糖尿病肾病大鼠肾脏Toll样受体-4（ TLR4）及白细胞介素-18（ IL-18）表达的影响。方法：雄性SD大鼠随机分为对照组（n＝12）、模型组（n＝11）、治疗组（n＝11）,后2组制作糖尿病肾病模型。治疗组每天给予霉酚酸酯15 mg／kg灌胃,余2组给予溶媒灌胃。于12周末采用HE染色、PAS染色观察肾脏病理改变,免疫组化、Western blot检测肾组织TLR4、IL-18蛋白的表达。结果：与对照组比较,模型组大鼠肾小球体积增大,基底膜增厚,炎症细胞浸润明显,而治疗组较模型组有所改善。3组大鼠肾组织TLR4、IL-18蛋白的表达差异有统计学意义,其中模型组大鼠肾组织TLR4、IL-18蛋白的表达均高于对照组（P＜0．05）,治疗组上述2指标较模型组下降（ P＜0．05）。结论：霉酚酸酯可能通过下调肾脏TLR4、IL-18蛋白的表达对糖尿病肾病大鼠的肾脏起保护作用。     

哮喘大鼠TLR1、 FasL和TRAF2表达及甲基强的松龙干预作用

目的:探讨TLR1、FasL和TRAF2在大鼠哮喘炎症机制中的作用,观察甲基强的松龙对其表达的影响。方法:27只SD大鼠,随机分成哮喘模型组、正常对照组和甲基强的松龙组,每组9只,采用流式细胞术检测血淋巴细胞TLR1和FasL表达,免疫组织化学法检测肺组织TRAF2表达。结果:哮喘组血淋巴细胞TLR1表达水平显著低于甲基强的松龙组(P<0.05),正常对照组血淋巴细胞TLR1表达水平分别与哮喘组及甲基强的松龙组比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。哮喘组和甲基强的松龙组血淋巴细胞FasL表达水平均显著高于正常对照组(P均<0.05),而哮喘组血淋巴细胞FasL表达水平与甲基强的松龙组比较差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘组TRAF2光密度值显著高于正常对照组和甲基强的松龙组(P均<0.01),甲基强的松龙组TRAF2光密度值与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:哮喘模型大鼠FasL和TRAF2表达增加,而TLR1无变化;甲基强的松龙能下调TRAF2和提升TLR1水平,从而起到抗炎作用。     

mTOR信号通路在糖尿病肾病足细胞损伤中的研究进展

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是临床常见的继发性肾病,有关DN发病机制的研究,人们早先关注的是肾脏系膜基质堆积和肾小球基底膜增厚,近年来足细胞在DN中的损伤,成为人们关注和研究的热点,足细胞损伤可分为足细胞数量减少、肥大变性及足突融合消失。mTOR信号途径参与了足细胞肾病的发病调控机制,其分为mTOR信号复合物1(mTORC1)与mTOR信号复合物2(mTORC2),目前的研究主要集中在mTORC1对肾小球系膜基质、细胞外基质、系膜细胞增生的影响,对mTORC2研究甚少,mTORC2信号通路主要作用是调控肌动蛋白和细胞骨架重组。本文探讨mTOR信号通路在DN足细胞损伤中的研究进展,旨在探寻防治DN的更有效方法。     

瘦素在糖尿病肾病中的作用

目的探讨瘦素在糖尿病肾病发病（DN）中的作用,以期为DN的早期诊治提供一定参考价值。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,对照组喂以普通饲料2个月后,腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液;实验组喂以高糖高脂饲料2个月后,腹腔注射STZ30mg/kg。分别测定各组血清瘦素（leptin）、空腹胰岛素（FINS）水平。结果①实验组大鼠经高热量饮食2个月及注射STZ后各阶段血糖、胆固醇、甘油三酯均显著高于对照组（P〈0.01）;②实验组大鼠FINS及胰岛素抵抗指数在高热量饮食2个月至注射STZ6个月内持续存在;③实验组大鼠于注射STZ2个月后出现明显的蛋白尿;④实验组大鼠肾小球体积于注射STZ1个月后,体积开始增大;而在3个月及6个月时肾小球体积则显著下降;⑤实验组大鼠血清瘦素浓度在高热量饮食2个月后较对照组显著增高（P〈0.01）。结论leptin与DN的发生、发展有密切联系。