雷公藤多苷对小鼠细胞免疫功能的影响

目的 研究雷公藤多苷对正常小鼠细胞免疫功能的影响.方法 用流式细胞仪及T淋巴细胞增殖试验分别测定雷公藤多苷对正常小鼠外周血T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞增殖能力的影响.结果 与空白对照组比较,雷公藤多苷可显著降低成熟淋巴细胞(CD3+)、T辅助性及T诱导性淋巴细胞亚群(CD4+)百分比以及T淋巴细胞增殖能力,也可显著升高T抑制淋巴细胞亚群(CD8+)百分比.结论 雷公藤多苷具有一定的细胞免疫抑制作用.     

仙人掌多糖主要组分对糖尿病小鼠的免疫调节作用

目的研究野生仙人掌多糖(Opuntia dillenii Haw.Polysaccharides,ODPs)对糖尿病(DM)小鼠免疫调节作用的影响。方法建立链脲佐菌素(STZ)+环磷酰胺(Cy)诱导的DM免疫功能低下复合模型,观察ODPs主要组分ODP-I对DM小鼠NO含量、腹腔巨噬细胞的吞噬功能、血清IgM和IgG的含量、脾淋巴细胞增殖反应、外周血T淋巴细胞亚群比例的影响。结果 400 mg/kg ODP-I能调节DM小鼠NO至正常水平;极显著增强DM小鼠巨噬细胞的吞噬功能;显著提高DM小鼠血清IgM或IgG的含量;显著提高DM小鼠T、B淋巴细胞的增殖能力,且使之恢复至正常水平;能通过提高CD8+T细胞亚群比例,降低CD4+/CD8+T细胞比值,使之恢复至正常水平,改善DM小鼠的免疫紊乱现象。结论 ODP-I能从DM小鼠的非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫方面增强DM小鼠的免疫功能,改善DM症状,效果优于阳性对照药左旋咪唑。     

蟾酥不同溶剂萃取物对小鼠免疫细胞功能的影响

目的对蟾酥不同溶剂萃取物进行初步免疫活性筛选。方法用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖反应和腹腔巨噬细胞(M)能量代谢水平,中性红吞噬法测定腹腔M的吞噬功能,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群和S期细胞的百分率。结果蟾酥各萃取层中的水层(VB2)、乙酸乙酯层(VB4)及总水提蛋白层(VB6)分别在1.25～30、10～20和10～40mg.L-1浓度范围内增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应;其他3组(VB1,VB3和VB5)蟾酥提取物单独作用或与ConA联合作用对小鼠脾淋巴细胞增殖反应无明显影响;VB2,VB4和VB6在1.25～40mg.L-1浓度范围内可增强ConA诱导的小鼠腹腔M能量代谢水平和吞噬中性红的能力。在10mg.L-1时,VB2,VB4和VB6可协同ConA增加脾淋巴细胞中S期细胞百分率,并降低CD4+CD8-和CD4-CD8+、增加CD4+CD8+T淋巴细胞亚群百分率。结论蟾酥不同溶剂萃取物VB2,VB4和VB6体外可协同ConA促进脾淋巴细胞和腹腔M的免疫功能,其机制可能与协同ConA促进DNA合成并活化CD4+CD8-T细胞表达CD8a抗原、增加兼具辅助和细胞毒作用的CD4+CD8+T淋巴细胞亚群的数量有关。     

乙型肝炎患者外周血淋巴细胞表达的变化

目的 分析乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的表达.方法 对112例乙型肝炎患者采用荧光定暈PCR技术和流式细胞术分别检测血中HBV DNA及外周血淋巴细胞亚群CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD3~-/CD16~+CD56~+(NK细胞)、CD3~- CD19~+(B细胞)表达百分比,进行各淋巴细胞亚群百分比统计学分析.结果 与急性乙型肝炎(AHB)组比较,慢性乙型肝炎(CHB)组、肝炎肝硬化(LC)组CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD4~+/CD8~+比值均有显著性下降,LC组下降最显著(P<0.01).而LC组B细胞百分比较CHB、AHB组高(P<0.01).NK细胞百分比较CHB、AHB组均存在降低趋势(P<0.01).结论 乙型肝炎患者体内存在T细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱;外周血T细胞亚群随病情进展而减少.     

六味地黄汤及其拆方对快速老化小鼠免疫功能的调节作用

目的比较六味地黄汤全方（LW）及其拆方三补（地黄、山茱萸、山药）和三泻（茯苓、泽泻、牡丹皮）对快速老化小鼠（SAM）免疫功能的调节作用。方法分别灌胃给予SAM亚系小鼠（SAMP8）LW（10g/kg）、三补（6.4g/kg）和三泻（3.6g/kg）,每日1次,连续60d;抗快速老化亚系小鼠（SAMR1）作为对照。采用3H-TdR掺入法检测脾脏淋巴细胞增殖能力,流式细胞术观察脾脏CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD19＋淋巴细胞百分率。结果与SAMR1组相比,SAMP8组经刀豆蛋白A（ConA）和脂多糖（LPS）诱导的脾细胞增殖能力、脾脏CD3＋、CD4＋细胞百分率、CD3＋/CD19＋和CD4＋/CD8＋比值均显著下降,而CD19＋细胞百分率显著上升;灌胃给予LW全方及折方对上述指标具有不同程度的改善作用,其中,LW对LPS诱导的脾细胞增殖能力、CD3＋和CD19＋细胞百分率、CD3＋/CD19＋比值、CD4＋细胞百分率及CD4＋/CD8＋比值的改善作用优于三补和三泻;三补对升高ConA诱导的脾细胞增殖能力优于LW和三泻,对脾脏CD3＋和CD19＋细胞百分率、CD3＋/CD19＋细胞比值及CD4＋细胞百分率的改善作用优于三泻;三泻升高CD4＋/CD8＋比值的作用优于三补。结论 LW可显著改善SAMP8低下的T、B淋巴细胞功能,纠正脾脏CD4＋/CD8＋T细胞亚群比例失衡,其作用优于单独应用三补和三泻;三补和三泻对SAMP8的免疫改善作用各有侧重,三补的作用可能在于调节T、B淋巴细胞的数量和功能,三泻则可能着重于调节T细胞亚群的比例。本研究提示LW对免疫功能的调节是三补和三泻相互协调综合作用的结果 ,该结果为揭示LW配伍规律及其科学内涵提供了一定的实验依据。     

呼吸道合胞病毒、肺炎链球菌肺炎患儿免疫功能分析

目的 分析呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎、肺炎链球菌(SP)肺炎患儿外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞以及NK细胞的变化.方法 对入院儿童行多病原联合检测,包括直接免疫荧光法检测7种病毒抗原、痰细菌培养、PCR检测痰肺炎支原体和肺炎衣原体,明确RSV、SP感染,并用流式细胞仪检测部分患儿外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞以及NK细胞.结果 RSV肺炎患儿外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞以及CD19+B细胞百分比与对照组相仿;但CD4+/CD8+比值和NK细胞比对照组低.SP肺炎患儿外周血T细胞亚群以及CD4+/CD8+比值与对照组相仿;但CD19+B细胞较正常组为高,而NK细胞比对照组为低.两感染组比较,PSV组CD4+Tlymphocyte升高;而SP组B lymphocyte升高.结论 RSV感染后刺激机体产生细胞免疫为主的反应,而SP感染后则产生体液免疫为主的反应.     

虫草多糖调节小鼠T淋巴细胞及其亚群数量的机制研究

目的 研究冬虫夏草菌丝体多糖（虫草多糖）对正常小鼠T淋巴细胞及其亚群数量的影响及可能的机制。方法 ICR小鼠,随机分成空白对照组、阳性组（香菇多糖1 mg·kg^-1）和虫草多糖高、中、低剂量（200,100,50 mg·kg^-1）组,连续腹腔注射10 d后,流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞（CD³⁺细胞）及其亚群细胞CD4⁺CD8^-和CD4-CD8+数量、CD³⁺细胞凋亡率;MTT法测定小鼠脾淋巴细胞转化功能;实时荧光定量PCR检测脾脏组织Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的转录水平,并测定胸腺和脾脏指数。结果 与空白对照组比较,虫草多糖能提高小鼠脾脏质量、促进未经ConA诱导的脾淋巴细胞增殖转化能力,并呈现剂量依赖性;虫草多糖高剂量组能明显增加外周血CD³⁺细胞和CD4⁺CD8^-细胞亚群的数量,降低CD4^-CD8⁺细胞亚群数量,显著提高CD4⁺CD8^-/CD4-CD8⁺的比值;高剂量虫草多糖能明显降低小鼠外周血CD³⁺细胞凋亡率,显著升高脾组织Bcl-2 mRNA转录水平和Bcl-2/Bax比值,而对Bax mRNA转录水平没有明显影响。结论 虫草多糖可刺激小鼠主要免疫器官（胸腺和脾脏）增生,提高T淋巴细胞及CD4^-CD8⁺亚群的数量,其作用机制可能与上调抑制凋亡基因Bcl-2 mRNA的转录,提高Bcl-2/Bax比值,从而抑制淋巴细胞凋亡有关。     

外周血T淋巴细胞对乙肝病毒相关慢加急性肝衰竭患者预后的影响

目的 探讨乙肝病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血T淋巴细胞亚群比例对其预后的影响.方法 选择HBV-ACLF患者43例,随访观察3个月后患者的存活率,应用流式细胞仪测定外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞及CD4+ CD25+ Treg细胞的百分比,并计算CD4+和CD8+T淋巴细胞比值,分析T淋巴细胞亚群对乙肝病毒相关慢加急性肝衰竭患者预后的影响,选择门诊同期健康体检者20例为健康对照组.结果 3个月后,43例HBV-ACLF患者存活26例,死亡17例.与肝衰竭存活组相比,肝衰竭死亡组CD3+细胞百分率(22.96±20.59)％、CD8+细胞百分率(31.63±12.69)％均低于存活组(37.89±17.36)％和(36.52±9.75)％,而CD4+细胞百分率(55.15±14.23)％、CD4+/CD8+(1.77±1.38)高于存活组(48.51±13.35)％、(1.32±0.68),均差异有统计学意义(P＜0.05),但两组之间CD4+ CD25+ Treg细胞比例差异无统计学意义.与健康对照组相比,肝衰竭死亡组患者外周血CD3+、CD8+T淋巴细胞及CD4+ CD25+ Treg细胞比例下降,CD4+T淋巴细胞、CD4+/CD8+升高,肝衰竭存活组患者CD3+T淋巴细胞及CD4+ CD25+ Treg细胞百分比下降,均差异有统计学意义(P＜0.05).结论 T淋巴细胞亚群比例的变化在一定程度上可以预测HBV-ACLF患者的预后,外周血T淋巴细胞CD3+、CD8+、CD4+ CD25+ Treg比例下降的程度越重,预后可能越差.     

加味当归补血汤对肺癌患者放疗后T淋巴细胞亚群及NK细胞的影响

目的：观察加味当归补血汤对肺癌患者放疗后 T 淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞（NK）的影响。方法选择经病理证实的肺癌患者70例,随机分治疗组和对照组各35例,其中对照组单纯进行放疗;治疗组在接受放疗的同时口服加味当归补血汤,每日一剂。使用流式细胞仪进行检测患者放疗前后外周血淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞的比例。结果治疗后治疗组的自然杀伤细胞和 CD3＋、CD4＋、CD4＋/ CD8＋比例都升高,CD8＋降低,与对照组相比 NK 细胞和 CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/ CD8＋比例都具有显著差异（P ﹤0.05）,治疗组患者外周血淋巴细胞各亚群比例较对照组明显改善（P ﹤0.05）。结论加味当归补血汤对肺癌患者放疗后 T 淋巴细胞具有一定的调节作用,对放疗造成的免疫功能损伤有明显改善作用,可提高患者放疗后的免疫功能。     

淋巴细胞亚群检测在儿童特发性血小板减少性紫癜中的临床意义

目的：探讨淋巴细胞亚群与儿童特发性血小板减少性紫癜（ITP）的关系及临床意义。方法：采用流式细胞术分别检测儿童ITP患者和对照者外周血Th和Tc细胞亚群、B细胞、NK细胞及Treg细胞变化。结果：持续性ITP组和慢性ITP组与对照组比较,CD8＋T淋巴细胞、CD19＋B细胞升高,CD3＋、CD4＋T细胞,CD4＋/CD8＋T细胞降低,CD4＋CD25＋/CD4＋T细胞和CD4＋CD25＋Foxp3＋细胞/CD4＋T细胞降低,新诊断ITP组CD4＋CD25＋Foxp3＋/CD4＋T细胞低于与对照组;与持续性ITP组和慢性ITP组比,CD19＋B细胞降低,CD3＋、CD4＋T细胞,CD4＋/CD8＋T细胞,CD4＋CD25＋/CD4＋T细胞和CD4＋CD25＋Foxp3＋/CD4＋T细胞均升高,对照组CD16＋56＋NK细胞高于其他三组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞比例失衡与儿童持续性和慢性ITP的发病有关,外周血淋巴细胞亚群变化对儿童ITP的临床诊断及预后判断有一定价值。     

当归多糖组分AP-3诱生小鼠脾细胞IL-2和IFN-γ的作用

目的研究当归多糖组分AP-3对细胞因子IL-2和IFN-γ的诱生作用，以探讨其免疫调节的特点。方法 流式细胞术测定培养的脾细胞中CD4⁺细胞比例；酶联免疫法测定培养上清液中IL-2和IFN-γ的浓度；RT-PCR法测定IL-2和IFN-γ mRNA的转录水平。结果AP-3在0.6～2 μmol·L^-1，能显著提高培养脾细胞CD4⁺细胞的百分率；在2～6 μmol·L^-1，AP-3时间、剂量依赖性地增加培养的细胞上清液中IL-2的浓度和细胞内IL-2 mRNA的转录水平，而对于IFN-γ和IFN-γ mRNA，则先升高后降低，并呈现剂量依赖性。结论当归多糖能够促进IL-2和IFN-γ的分泌，激活Th1细胞，从而发挥免疫调节作用。     

咖啡酸苯乙酯对小鼠CD3~+T细胞体外活化和增殖的影响

目的研究咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对小鼠CD3+T淋巴细胞活化及增殖的影响,探讨其作用机制。方法无菌分离小鼠淋巴结淋巴细胞,制备淋巴细胞悬液。在淋巴细胞活化实验中,分别与不同浓度的咖啡酸苯乙酯预先孵育2h后,加入促分裂原伴刀豆蛋白A(ConA),运用荧光抗体染色技术结合流式细胞术,8h后,检测T淋巴细胞早期活化标记分子CD69的表达情况;24h后,检测T淋巴细胞中期活化标记分子CD25的表达情况;在淋巴细胞增殖试验中,运用CFDA-SE标记法检测T淋巴细胞刺激48h后的增殖情况。结果CAPE(0·5、1、5、10mg·L-1)能够明显地抑制ConA刺激的小鼠淋巴细胞活化,且呈浓度依赖性;CAPE(0·5、1、5、10mg·L-1)能够明显地抑制ConA刺激的小鼠淋巴细胞增殖,且呈浓度依赖性。结论CAPE对小鼠CD3+T淋巴细胞的体外活化和增殖具有抑制作用,其作用机制可能通过同时抑制PLC-γ信号途径和MAP激酶途径,由此推理CAPE是一种潜在的有效的免疫抑制剂。     

杨梅素对淋巴细胞活化及增殖的影响

目的研究杨梅素(myricetin)对小鼠T细胞活化及增殖的影响,探讨其作为免疫调节药物开发的可能性并提供相关实验依据。方法无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的杨梅素预先孵育1h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆抗体双染技术,流式细胞仪检测杨梅素对小鼠CD3+T细胞CD69表达的影响;采用3H-TdR参入法检测杨梅素对淋巴细胞增殖的影响,采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测杨梅素对IL-2mRNA表达的影响。采用ELISPOT检测杨梅素对IFN-γ分泌的影响。结果杨梅素能抑制T细胞早期活化标志CD69的表达,并能抑制淋巴细胞增殖反应,同时对淋巴细胞活化后IL-2 mRNA的表达及IFN-γ的分泌也有抑制作用。结论杨梅素对淋巴细胞的活化增殖反应具有抑制作用。     

当归多糖对小鼠免疫功能的影响

目的　研究当归多糖对小鼠免疫功能的影响。方法　sc环磷酰胺复制免疫抑制模型 ;测定胸腺、脾脏重量并计算脏器系数 ;碳粒廓清法测定单核巨噬细胞吞噬功能 ;比色法测定血清溶血素IgG、IgM含量 ;MTT法测定混合淋巴细胞培养反应。结果　在 1 0～ 1 0 0mg·kg- 1 剂量范围内 ,当归多糖能对抗环磷酰胺引起的小鼠脾萎缩 ,增加正常小鼠脾重 ,而对于正常及免疫抑制小鼠胸腺影响不大 ;促进正常及免疫抑制小鼠碳粒廓清率 ;而对小鼠血清溶血素IgG、IgM的生成有较强的抑制作用 ;在 30～ 30 0mg·L- 1 剂量范围内能促进同种异型抗原激活的小鼠脾细胞的增殖。结论　当归多糖能增强正常及免疫抑制小鼠的非特异性免疫功能 ,而对正常小鼠的体液免疫功能有抑制作用     

Immunotoxicity of N,N-diethylaniline in mice: effect on natural killer activity, cytotoxic T lymphocyte activity, lymphocyte proliferation response and cellular components of the spleen

We previously found that N,N-diethylaniline increased the frequency of sister chromatid exchange (SCE) of human lymphocytes to about five times that of the control value, and was as toxic as cyclophosphamide used as a positive control for SCE. To explore whether N,N-diethylaniline affects the function of lymphocytes, we evaluated its immunotoxicity using CBA/N mice. The mice were divided into four groups and received 0, 100, 200, or 400 mg/kg body weight of N,N-diethylaniline by subcutaneous injection. The following items were investigated on days 3 and 7 after injection: body weight, weight of spleen, number of splenocytes, natural killer (NK) and cytotoxic T lymphocyte (CTL) activities, and concanavalin A (Con A)- and lipopolysaccharide (LPS)-stimulated lymphocyte proliferation using splenocytes. The following splenocyte phenotypes were also quantified by flow cytometry: (1) B cells; (2) total T cells; (3) CD4⁺ and CD8⁺ T cells; (4) NK; (5) macrophages and (6) nucleated erythrocytes. The splenic NK and CTL activities in exposed groups significantly decreased compared to the control in a dose-dependent manner and lymphocytes from the 200 and 400 mg/kg groups showed significantly higher spontaneous proliferation. The weight of the spleen and number of splenocytes were significantly higher in exposed groups than in the control. N,N-Diethylaniline also increased the percentages of macrophages, nucleated erythrocytes and B cells in the spleen. On the other hand, N,N-diethylaniline did not affect LPS-stimulated B cell and Con A-stimulated T cell proliferation, or the percentages of NK, total T, and CD4⁺ and CD8⁺ T cells in the spleen or the body weight of mice. The above findings indicated that N,N-diethylaniline selectively inhibited splenic NK and CTL activity and this inhibition was due to decreased NK and CTL functions, but not due to changes in the numbers of splenic NK and T cells.     

康乐霉素C对T—和B—淋巴细胞活化的抑制作用

目的：阐明康乐霉素Ｃ对脾细胞增殖和Ｔ－细胞亚型的作用。方法：氚掺入法或噻唑蓝比色法测定细胞增殖；用荧光激活细胞分选仪测定细胞亚群；曲利苯蓝排斥法测定细胞存活率。结果：Ｋａｎ８，４０，８０和４００ｎｍｏｌ．Ｌ＾－１除抑制丝 同种异型抗原刺激的小鼠脾细胞增殖外；与Ｃｉｃ不同，抑制ＬＰＳ刺激的脾细胞增殖；使Ｌ３Ｔ４＾｜Ｌ－细胞亚型比倒置；     

1型糖尿病患者T细胞亚群和共刺激分子的表达及其意义

目的：动态观察1型糖尿病患外周血T淋巴细胞亚群及CD28、CD80等共刺激分子的表达，探讨其在1型糖尿病发病中的作用。方法：应用免疫荧光标记技术和流式细胞仪，检测17例正常对照组及37例1型糖尿病患外周血T细胞亚群、CD28、CD80、人类白细胞抗原（HLA－DR）分子的表达，并进行随访。结果：（1）1型糖尿病组外周血CD4^ 、CD4^ CD28^ T细胞的百分率增加，CD8^ 、CD8^ CD28^ T细胞显降低，CD28、CD80、HLA－DR的表达也增加，与正常组比，差异均有显性。（2）经胰岛素治疗6个月后随访，T细胞亚群的失衡、共刺激分子的异常表达得到不同程度的改善，但CD4^ CD28^ 、CD8^ CD28^ T细胞、HLA－DR表达仍未恢复正常。结论：共刺激分子CD28、CD80及HLA－DR的异常表达、T细胞亚群的异常激活、增殖在1型糖尿病的发生、发展中起着重要的作用，监测其变化，为临床上免疫调节治疗，提供了理论依据。     

当归多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IFN-γ的影响

目的研究当归多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IFN-γ的影响。方法用4种不同浓度乙醇将当归总多糖(AP)进行分级沉淀,获得AP-I,AP-II,AP-III和AP-IV 4个部分多糖。用［³H］-TdR参入法检测当归部分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖作用;结晶紫染色法测定IFN-γ的生物活性;ELISA法测定IFN-γ的含量。结果AP-I和AP-II能明显促进体内外小鼠脾淋巴细胞增殖,体外显著诱导脾淋巴细胞分泌IFN-γ,增强IFN-γ的生物活性;特别是AP-II体外诱生较高含量的IFN-γ,AP-I体内诱生的IFN-γ生物活性较强。结论AP-I和AP-II是免疫活性较强的部分。     

化疗后T细胞亚群变化与乙型肝炎病毒再激活关系研究

目的 了解患者化疗后出现乙型肝炎病毒再激活时T细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋变化情况.方法 采用流式细胞术检测接受化疗的32例发生乙型肝炎病毒再激活和25例未发生乙型肝炎病毒再激活化疗前后外周血T细胞亚群.结果 化疗后CD3＋T细胞、CD4＋ T细胞百分比以及CD4＋/CD8＋较化疗前明显降低（P＜0.05）,CD8＋T细胞百分比较化疗前无明显变化（P＞0.05）.结论 化疗能对T细胞数量及比例产生明显的影响,抑制细胞免疫功能是导致乙型肝炎病毒再激活的原因之一.