细菌超声分散计数仪在结核分枝杆菌最小抑菌浓度检测中的应用

目的 评估细菌超声分散计数仪在结核分枝杆菌(MTB)最小抑菌浓度(MIC)检测中的应用价值.方法 应用分散仪法和玻璃珠振荡研磨法2种细菌分散定量方法分别制备MTB标准菌株H37Rv(ATCC 27294)和28株MTB临床分离株菌悬液,接种于TREK Sensititre MYCOTB药敏板(简称MYCOTB),进行体...     

不同耐药型的结核分枝杆菌hspX基因序列与表达的比较

目的 比较不同耐药型的结核分枝杆菌(MTB)热休克蛋白基因hspX序列与表达，初步探讨hspX与MTB的耐药是否存在相关性。方法选取4种一线抗结核药物全部敏感株(S)、同时对异烟肼和利福平耐药(MDR)和一种耐药[单耐利福平(MTB^R+)、单耐异烟肼(MTB^H+)、单耐链霉素(MTB^S+)和单耐乙胺丁醇(MTB^E+)]的菌株各10株，采用改良的十二烷基苯磺酸钠裂解法和TRIzol法分别提取各组菌株的DNA和RNA，使用特异性引物进行PCR和实时荧光定量PCR确定hspX基因的存在及其表达。对PCR产物进行测序以检查正向和反向的多态性，并用DNAman软件进行与标准株H37Rv序列比对。以敏感菌株(S)组为对照组进行两两对比分析不同耐药型的MTB菌株hspX表达的差异。结果PCR成功获得各组特异性的hspX基因，与H37Rv序列比对具有97%～99%的同一性，无存在明显差异；以相对定量2^-ΔΔCt法计算获得S、MDR、MTB^R+、MTB^H+     

泰地唑胺对革兰阳性球菌的体外抗菌活性研究

目的研究革兰阳性球菌对新型噁唑烷酮类抗菌药物——泰地唑胺的敏感性,并探讨泰地唑胺不敏感菌株的耐药机制。方法收集1 069株革兰阳性球菌[耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)202株、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)294株、凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)115株、粪肠球菌206株、屎肠球菌55株、无乳链球菌159株和咽峡炎链球菌群菌株38株]非重复临床分离株。采用微量肉汤稀释法检测所有菌株对泰地唑胺和利奈唑胺的最小抑菌浓度(MIC),分析泰地唑胺和利奈唑胺MIC值的差异,比较2种抗菌药物的抗菌活性;采用聚合酶链反应(PCR)检测泰地唑胺/利奈唑胺不敏感菌株的耐药基因。结果所有葡萄球菌(MIC≤0.5μg/mL)、屎肠球菌(MIC≤0.5μg/mL)和链球菌(MIC≤0.25μg/mL)均对泰地唑胺敏感,粪肠球菌对泰地唑胺的敏感率为94.7%,检测出11株泰地唑胺和利奈唑胺均不敏感粪肠球菌(泰地唑胺MIC=1μg/mL,利奈唑胺MIC=8μg/mL)。泰地唑胺的抗菌活性是利奈唑胺的4～8倍。泰地唑胺/利奈唑胺不敏感菌株只携带optrA基因。结论泰地唑胺作为治疗革兰阳性球菌感染的一种新型抗菌药物,具有较大的应用价值,但携带optrA基因的泰地唑胺不敏感肠球菌值得关注。     

广泛药物耐药铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌对多粘菌素B的MIC值分布调查

目的通过检测多粘菌素B体外对广泛药物耐药(extensive drug-resistant,XDR)的铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC)的分布上,来评价其对此类细菌的抗菌活性,为临床治疗、控制感染提供依据。方法用纸片扩散法检测临床分离的288株细菌(铜绿假单胞菌130株,鲍曼不动杆菌158株)对临床常见的25种抗菌药物的敏感性以确定其中广泛药物耐药菌;用E-试验检测多粘菌素B及临床常用11种抗菌药物MIC值,分析菌株的MIC值分布情况。结果 288株细菌经K-B法确认均为XDR菌株,对临床常用的11种抗菌药物的敏感性均低于15%;对多粘菌素B的MIC值均≤2μg/ml;130株铜绿假单胞菌的MIC值分布情况为0.125μg/ml1株、0.19μg/ml2株、0.25μg/ml9株、0.38μg/ml37株、0.5μg/ml48株、0.75μg/ml19株、1.0μg/ml11株、1.5μg/ml4株,MIC50为0.5μg/ml,MIC90为1.0μg/ml;158株鲍曼不动杆菌的MIC值分布情况为0.125μg/ml1株、0.19μg/ml3株、0.25μg/ml12株、0.38μg/ml45株、0.5μg/ml56株、0.75μg/ml21株、1.0μg/ml13株、1.5μg/ml7株、2.0μg/ml1株,MIC50为0.5μg/ml,MIC90为1.0μg/ml。结论多粘菌素B体外对广泛药物耐药铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌均敏感,本地区临床未发现有多粘菌素B耐药株;但存在敏感区域内的高MIC值菌株,应引起临床重视。     

土槿皮乙酸与氟康唑联合应用于体外抗白念珠菌活性研究

目的探讨土槿皮乙酸(PAB)联合氟康唑对白念珠菌的抑菌效果,为临床抗真菌治疗提供依据。方法收集氟康唑耐药及敏感白念珠菌临床分离株33株,分别采用微量稀释法及棋盘式微量稀释法测定PAB单独及与氟康唑联用时的最小抑菌浓度(MIC),以部分抑菌浓度指数(FICI)评估联用时药物体外相互作用的方式,采用时间-杀菌曲线试验动态监测2种药物体外联用的效果。结果 PAB单独作用时,对氟康唑耐药及敏感白念珠菌有类似的抑菌效果,MIC为4～32μg/mL。PAB与氟康唑联用可增加耐药白念珠菌对药物的敏感性(氟康唑MIC由≥128μg/mL降至≤16μg/mL,PAB MIC降至≤2μg/mL)。对氟康唑耐药的12株白念珠菌均表现出协同抑菌的效果(FICI为0.035～0.188);对氟康唑敏感的21株菌株中,10株(47.62%)有协同抑菌效果(FICI范围为0.188～0.375),11株无相互作用(FICI0.5)。结论 PAB可抑制白念珠菌的生长,与氟康唑联用还有较好的协同抑菌效果,尤其对耐氟康唑白念珠菌,抑菌效果更好。     

复方三黄液对60株骨科分离金黄色葡萄球菌体外抑菌效果研究

目的：了解复方三黄液对金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果,为临床应用提供实验室依据。方法采用肉汤稀释法,以复方三黄液为抑菌药,观察其对骨科感染分离出的60株金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果42株 MSSA 中32株 MIC 为7．8μg/mL,10株 MIC 为15．6μg/mL;18株 MRSA 中14株 MIC 为7．8μg/mL,4株 MIC为15．6μg/mL。MRSA 组均值为9．6μg/mL,MSSA 均值为9．5μg/mL。结论复方三黄液对金黄色葡萄球菌体外抑菌效果明显,并能避免耐药菌的产生。     

结核分枝杆菌临床分离株对三种氟喹诺酮类药物的敏感性分析研究

目的对结核分枝杆菌（MTB）临床分离株对氧氟沙星（OFX）、左氧氟沙星（LFX）和莫西沙星（MFX）三种临床常用的氟喹诺酮类药物的敏感性进行分析研究,为临床用药提供依据。方法本研究采用液体培养基联合MTT技术进行抗结核药物的最低抑菌浓度（MIC）检测。对来自我院不同结核病患者的163株MTB临床分离株进行0FX、LFX、MFX三种药物的MIC检测和BactecMGIT960药敏检测。结果163株中OFX耐药株占35．6％;耐多药（MDR）结核菌株中,OFX耐药率为73．5％,MDR菌株中LFX耐药率超过一半以上;所有MTB菌株MFX的MIC值均≤1μg／ml。结论目前在MTB临床分离株中,OFX和LFX已出现较高的耐药率,值得引起临床医生的重视,MFX在MDR结核和广泛耐药（XDR）结核中显示出良好的抗菌效果,给MDR结核病的治疗带来希望。     

中药结核丸对结核分枝杆菌体内外抗菌效果的观察

目的检测中药结核丸的体内外抗结核分枝杆菌效果.方法建立结核分枝杆菌H37Rv株小鼠感染模型.以乙胺丁醇为对照药,采用二倍试管稀释法测定中药结核丸对结核分枝杆菌H37Rv株、牛分枝杆菌bovis株、草分枝杆菌phlie株的体外最低抑菌浓度(MIC);以半数存活时间(ST50)为指标,检测各药物对结核分枝杆菌H37Rv株感染小鼠的体内抗菌效果.结果中药结核丸对结核分枝杆菌H37Rv株、牛分枝杆菌bovis株、草分枝杆菌phlie株的MIC分别为1024、1024和2048μg/ml,对照药乙胺丁醇MIC则均分别为1μg/ml.小鼠感染对照组ST50为13d.中药结核丸对结核分枝杆菌感染小鼠的ST50分别为16d(32mg/d/mouse)、15d(16或8mg/d/mouse)、14d(4mg/d/mouse)和13d(2或1mg/d/mouse),对照药乙胺丁醇对结核分枝杆菌感染小鼠的ST50分别为大于28d(1～4mg/d/mouse)、24d(0.5mg/d/mouse)和19d(0.25mg/d/mouse).结论中药结核丸体外抑制结核分枝杆菌的作用较弱,但剂量≥4mg/只小鼠时有明显的体内抗结核分枝杆菌活性.     

结核分枝杆菌mpt64基因突变研究

目的分析结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)mpt64基因突变情况。方法提取MTB标准株H37Rv和45株MTB临床株的DNA,扩增mpt64基因并进行序列分析。结果 MTB标准株H37Rv和44株MTB临床株的mpt64基因无突变,1株MTB临床分离株的mpt64基因存在63个碱基的缺失突变。结论结核分枝杆菌mpt64基因突变频率低。     

头孢他啶与头孢替坦对产ESBL肠杆菌耐药表型及交叉耐药情况分析

目的通过头孢他啶(CAZ)、头孢替坦(CTT)对产超广谱β内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌(ECO)和肺炎克雷伯菌(KPN)的耐药情况并根据分布图进行相关性分析,探讨该两种抗菌药物在临床上的应用。方法采用Whonet5.6软件对分别对2012-2015年间分离出的1 311株ECO(750株产ESBL)和898株KPN(306株产ESBL)进行CTT与CAZ的耐药表型分析,并用实验解释结果分布图分析两种抗菌药物间的关系。结果 ESBL+KPN对CAZ耐药性为41.2%,对CTT耐药性为14.1%,差异具有统计学意义(P0.05)。ESBL+ECO对CAZ的耐药性为34.6%,对CTT耐药性为1.1%,差异具有统计学意义(P0.05)。在ESBL-菌株中也存在相同现象。CAZ在ESBL+KPN菌株中最低抑菌浓度(MIC)平均值最高为6.39μg/mL,在ESBL-KPN菌株中最低为1.37μg/mL。CTT平均MIC值也在ESBL+KPN菌株中最高,在ESBL-KPN菌株中最低。CAZ与CTT在所有菌株中MIC范围分别是1~64、4~64μg/mL;CAZ与CTT在ESBL-菌株交叉敏感率均在90.0%以上,交叉耐药率在5.0%以下。ESBL+菌株中交叉敏感率低于70.0%,其中ESBL+KPN菌株CAZ与CTT交叉耐药率高达13.4%。结论抗菌药物交叉敏感性及耐药性结果对于指导临床选药或换药具有重要的临床意义。