加味通幽汤对食管癌Eca-109细胞mTOR/HIF-1α通路及肿瘤缺氧相关因子的影响

目的研究加味通幽汤对食管癌Eca-109细胞雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通路及肿瘤缺氧相关因子的影响及干预机制。方法采用加味通幽汤、生理盐水分别灌胃大鼠14 d制备含药和对照血清。实验分为常氧组、缺氧组、常氧含药血清组和缺氧含药血清组,常氧组加入10%对照大鼠血清培养;缺氧组加入10%对照大鼠血清、10%CoCl 2缺氧诱导液培养;常氧含药血清组加入10%含药大鼠血清培养;缺氧含药血清组加入10%含药大鼠血清、10%CoCl 2缺氧诱导液培养。Western blot法检测各组中mTOR、HIF-1α及血管内皮生长因子(VEGF)、骨桥蛋白(OPN)、血管内皮细胞钙黏连蛋白(VE-cadherin)表达情况;实时荧光定量RT-PCR法检测各组中mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin mRNA表达情况;免疫荧光法分析各组中VE-cadherin与HIF-1α共表达情况。结果Western blot分析显示,缺氧组细胞中mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin蛋白表达水平均显著高于常氧组(P均<0.05),缺氧含药血清组mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin蛋白表达水平均显著低于缺氧组(P均<0.05)。实时荧光定量RT-PCR检测显示,缺氧组细胞中mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin mRNA相对表达水平显著高于常氧组(P均<0.05),缺氧含药血清组mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin mRNA相对表达水平显著低于缺氧组(P均<0.05)。免疫荧光结果显示,缺氧组HIF-1α与VE-cadherin荧光强度较常氧组明显增强,缺氧含药血清组HIF-1α与VE-cadherin荧光强度较缺氧组均显著降低。结论加味通幽汤可显著抑制缺氧微环境下食管癌Eca109细胞mTOR/HIF-1α通路及肿瘤缺氧相关因子VEGF、OPN和VE-cadherin蛋白和mRNA表达。     

蜂毒素抑制骨肉瘤血管生成拟态与影响肿瘤细胞增殖、调亡的关系

目的：探讨蜂毒素抑制骨肉瘤裸鼠移植瘤的作用及机制。方法：建立裸鼠骨肉瘤原位移植瘤模型,裸鼠18只,随机分3组：生理盐水组,蜂毒素组,顺铂组。观察各组裸鼠骨肉瘤体积和瘤体质量抑制率;应用免疫组化CD34与PAS双重染色法检测各组裸鼠瘤体血管生成拟态密度;免疫组织化学法检测增值细胞核抗原（PCNA）蛋白表达;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡;运用相关性分析法研究蜂毒素抑制骨肉瘤血管生成拟态与影响肿瘤细胞增殖、凋亡的关系。结果：蜂毒素组瘤体积和瘤体质量抑制率分别为42.98%、39.03%,蜂毒素能明显抑制CD34与PAS双重染色法标记的肿瘤血管生成拟态密度,能明显抑制肿瘤细胞增殖、促进细胞凋亡,且蜂毒素抑制肿瘤血管生成拟态密度与肿瘤细胞增殖呈正相关、与细胞凋亡呈负相关。结论：蜂毒素具有抑制骨肉瘤裸鼠移植瘤生长的作用,其作用机制可能与其能够抑制肿瘤血管生成拟态、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制细胞增殖有关     

乏氧环境下川芎嗪对肺癌干细胞样细胞血管生成拟态的作用

目的：探讨乏氧状态下,川芎嗪(TMP)对非小细胞肺癌A549干细胞样细胞(CSLCs)血管生成拟态(VM)的作用,及TMP对肝细胞生长因子(HGF)/肝细胞生长因子受体(c-Met)蛋白表达的影响。方法：应用无血清成球培养法分离富集A549 CSLCs,流式细胞术检测A549 CSLCs干细胞标志物CD44⁺/CD24^-/low表达水平,使用CoCl₂化学诱导乏氧模型。细胞活性与增殖检测(CCK-8)法检测(100、200、400、800、1 600、3 200μmol·L^-1)TMP对A549 CSLCs细胞活力的作用,选择对A549CSLCs细胞活力无明显影响的低、中、高浓度(100、200、400μmol·L^-1)进行后续实验。小管形成实验检测不同浓度TMP对乏氧状态A549 CSLCs VM形成的作用,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度TMP对乏氧状态CSLCs HGF/c-Met蛋白表达的影响。结果：流式细胞术检测所分离富集CSLCs CD44     

加味参麦汤对中晚期食管癌三维适形放疗治疗的影响

目的观察加味参麦汤在中晚期食管癌三维适形放疗治疗中的减毒增效作用。方法将63例中晚期食管癌患者随机分为3组,各21例,均采用三维适形放射治疗,放疗对照组(A组)口服配制液,参麦注射液组(B组)予参麦注射液静脉滴注(1次/d),加味参麦汤联合放疗组(C组)同时口服加味参麦汤(50 mL,2次/d),至放疗结束。结果 C组临床获益率高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05);在生存质量和症状缓解评价方面,C组优于A组和B组(P<0.05);TGF-β1和IL-6在放疗后3组结果无统计学差异(P>0.05)。结论加味参麦汤对中晚期食管癌患者三维适形放疗治疗没有增效的作用;对早期急性放射反应起到一定的减毒作用,但不是通过影响细胞因子TGF-β1和IL-6水平实现的。     

中医药调控血管生成拟态机制的研究进展

血管生成拟态(VM)是近年来发现的肿瘤新生血管形成的新的形式,与肿瘤细胞的侵袭转移和肿瘤患者的不良预后有着密切的关系。乏氧微环境、促血管生成因子、PI3K、ERK1/2等多种细胞因子和信号通路参与肿瘤组织中VM的形成。肿瘤干细胞、上皮间质转化等促进肿瘤进展的因素也与VM关系密切。中医药对VM的形成具有一定的干预作用,文章即对VM的形成机制以及中医药对VM的调控及重塑肿瘤细胞的功能作用做一综述。     

毛茛总苷对人胃癌MGC803细胞血管生成拟态的影响及其机制

目的 探讨毛茛总苷对人胃癌MGC803细胞血管生成拟态的影响及其机制.方法 采用细胞黏附实验观察毛茛总苷对MGC803细胞黏附作用的影响;通过细胞划痕实验检测毛莨总苷对MGC803细胞迁移能力的影响;通过Matrigel肿瘤细胞类血管生成模型实验观察毛莨总苷对MGC803细胞体外类血管生成的作用;半定量RT-PCR方法检测毛茛总苷对MGC803细胞血管生成拟态相关基因表达的影响.结果 毛茛总苷有效抑制MGC803细胞黏附、细胞迁移以及MGC803细胞介导的体外类血管生成;明显抑制MGC803细胞血管生成拟态相关基因VE-cadherin、sema 4D和integrin β5的表达.结论 毛莨总苷通过抑制血管生成拟态相关基因VE-eadherin、sema 4D和integrin β5的表达来抑制MGC803细胞黏附、细胞迁移和血管生成拟态.     

加味四君子汤对结肠癌细胞SW620增殖和凋亡的影响

目的:探讨加味四君子汤对人结肠癌细胞SW620增殖和凋亡作用的影响。方法:用不同浓度加味四君子汤提取物处理SW620细胞24小时,MTT法检测加味四君子汤对SW620细胞增殖作用的影响,显微镜下观察加味四君子汤对细胞形态的影响,应用流式细胞术分析加味四君子汤提取物对细胞凋亡的影响。结果:加味四君子汤提取物能有效抑制人结肠癌SW620细胞增殖,IC50为96.083μg/ml。流式分析和透射电镜观察结果表明,加味四君子汤提取物可显著诱导SW620细胞凋亡。结论:加味四君子汤能抑制SW620细胞增殖,诱导SW620细胞凋亡,具有一定的抗结肠癌作用。     

消痰散结方对血管生成拟态相关蛋白表达的影响

目的探讨消痰散结方对血管生成拟态（VM）相关蛋白表达的影响。方法30只裸鼠皮下移植人胃癌瘤块建立荷瘤模型。造模后的荷瘤鼠随机分为生理盐水组、消痰散结组、盐酸多西环素组,每组10只,分别给予相应药物灌胃治疗4周后,脱颈椎处死荷瘤鼠。观察移植瘤中VM的形态结构,计数VM的数量;运用免疫组织化学法检测肿瘤中基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和层黏连蛋白5γ2链（LN-5γ2）等VM相关蛋白的表达。结果人胃癌裸鼠移植瘤可以形成VM。消痰散结组和盐酸多西环素组VM数量明显少于生理盐水组,差异有统计学意义（P〈0．01）。消痰散结组和盐酸多西环素组MMP-2、MMP-9和LN-5γ2蛋白的阳性表达低于生理盐水组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论消痰散结方可抑制裸鼠移植瘤VM的形成,其机制可能与下调MMP-2、MMP-9和LN-5γ2蛋白表达有关。     

不同氧环境下川芎和丹参对肺癌干细胞样细胞血管生成拟态的作用

目的 观察川芎和丹参以及两药配伍后对不同氧环境下肺癌干细胞样细胞(CSLCs)血管生成拟态(VM)的影响.方法 采用无血清成球培养法分离A549CSLCs亚群,建立A549 CSLCs荷瘤小鼠模型,分为常氧组和乏氧组,每组进一步分为对照组、川芎组、丹参组、川芎和丹参(川丹)组以及恩度组,通过CD31/PAS双染法检测各...     

加味归脾汤对乳腺癌细胞抑制作用的研究

目的:研究加味归脾汤对人类乳腺癌细胞的抑制机制。方法:不同浓度的加味归脾汤作用于人类乳腺癌ER+代表株MCF-7和ER-代表株MDA-MB-435,阳性对照药为多西紫杉醇(Docetaxel),通过MTS、细胞凋亡分析和Caspase-8检测等方法评价各药物浓度组的抑制效果。结果:MCF-7和MDA-MB-435的加味归脾汤高浓度组细胞抑制率在48h时均高于其Docetaxel组(P0.05),72h时MCF-7较其Docetaxel组略低(P0.05),MDA-MB-435与其Docetaxel组相近。流式细胞仪72h检测结果显示MCF-7和MDA-MB-435的加味归脾汤高浓度组和Docetaxel组凋亡程度相近。加味归脾汤中、低浓度组效果低于Docetaxel组。Caspase-8检测显示MCF-7和MDA-MB-435的加味归脾汤高浓度组检测结果接近或超过Docetaxel组(P0.05),加味归脾汤中、低浓度组均低于Docetaxel组。结论:加味归脾汤高浓度药液对ER+、ER-乳腺癌细胞抑制效果均可达到或超过阳性对照药。初步确定Caspase途径为其机制之一。     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后血管生成的影响

目的从血管生成的角度探讨益气养阴活血法及其代表方芪棱汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机理。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、芪棱汤去养阴药组(对照组)、芪棱汤组(治疗组)。采用颈内动脉线栓法复制大鼠脑缺血再灌注(MCAO/Reperfusion)模型。在再灌注不同时点采用免疫组织化学法测血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素(Ang)-2,CD34标记微血管计数。结果假手术组VEGF表达、Ang-2表达极弱;除缺血再灌注6h外,各相应再灌注时间点12h、1d、3d、7d,治疗组及对照组VEGF表达、Ang-2表达较模型组明显增多,且治疗组与对照组比较有显著差异。CD34标记微血管计数再灌注各时间点,治疗组、对照组与模型组比较均有显著差异;治疗组与对照组比较有显著差异。结论芪棱汤通过促进VEGF、Ang-2表达的上调,促进微血管新生,可能是其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制之一;益气养阴活血法优于益气活血法。     

小柴胡汤对S180荷瘤小鼠肿瘤血管生成的影响

小柴胡汤出自《伤寒论》，由柴胡、黄芩、人参、半夏、甘草、大枣、生姜7味药组成，是和解少阳之代表方剂。由于该方配伍严谨，组合巧妙，应用广泛，近年来，备受重视。将小柴胡汤对S180荷瘤小鼠肿瘤血管生成影响的实验结果作了报道。     

小柴胡汤对S180荷瘤小鼠肿瘤血管生成的影响

小柴胡汤出自<伤寒论>,由柴胡、黄苓、人参、半夏、甘草、大枣、生姜7味药组成,是和解少阳之代表方剂.由于该方配伍严谨,组合巧妙,应用广泛,近年来,备受重视.将小柴胡汤对S180荷瘤小鼠肿瘤血管生成影响的实验结果作了报道.     

抑癌方对结肠癌转移潜能及血管生成拟态的影响

目的:观察结肠癌细胞的转移潜能(迁移、侵袭力)是否和血管生成拟态(VM)存在相关性;探讨抑癌方对结肠癌转移潜能的影响,及其机制是否与VM有关。方法:以实验中可以形成VM的人结肠癌细胞为VM(+)组,不能形成VM的人结肠癌细胞为VM(-)组,划痕、Transwell侵袭实验观察其迁移、侵袭能力;对VM(+)组细胞进行后续实验,分组如下:抑癌方处理过的中药组和未经处理的空白对照组,划痕、侵袭实验观察其迁移、侵袭能力,体外三维培养法观察其血管生成拟态的形成情况。结果:三维培养环境下,人结肠癌细胞株HCT116可以形成VM为VM(+)组,HT29不能形成VM为VM(-)组,VM(+)组的迁移、侵袭力明显强于VM(-)组(P<0.05),且VM密度和细胞的迁移呈正相关(r=0.994,P<0.05),VM密度和侵袭力呈显著正相关(r=0.998,P<0.05);经抑癌方处理的中药组其迁移、侵袭力明显弱于未处理的对照组(P<0.05),中药组的VM密度和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:结肠癌的迁移、侵袭能力和VM存在相关性,抑癌方可以抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能和抑制VM的形成有关。     

抑癌方对结肠癌转移潜能及血管生成拟态的影响

目的:观察结肠癌细胞的转移潜能(迁移、侵袭力)是否和血管生成拟态(VM)存在相关性;探讨抑癌方对结肠癌转移潜能的影响,及其机制是否与VM有关。方法:以实验中可以形成VM的人结肠癌细胞为VM(+)组,不能形成VM的人结肠癌细胞为VM(-)组,划痕、Transwell侵袭实验观察其迁移、侵袭能力;对VM(+)组细胞进行后续实验,分组如下:抑癌方处理过的中药组和未经处理的空白对照组,划痕、侵袭实验观察其迁移、侵袭能力,体外三维培养法观察其血管生成拟态的形成情况。结果:三维培养环境下,人结肠癌细胞株HCT116可以形成VM为VM(+)组,HT29不能形成VM为VM(-)组,VM(+)组的迁移、侵袭力明显强于VM(-)组(P<0.05),且VM密度和细胞的迁移呈正相关(r=0.994,P<0.05),VM密度和侵袭力呈显著正相关(r=0.998,P<0.05);经抑癌方处理的中药组其迁移、侵袭力明显弱于未处理的对照组(P<0.05),中药组的VM密度和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:结肠癌的迁移、侵袭能力和VM存在相关性,抑癌方可以抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能和抑制VM的形成有关。     

针刺联合通幽汤对痰瘀互结型食管癌术后患者康复的影响及机制

目的 观察针刺联合通幽汤对食管癌术后患者康复的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 采用前瞻性研究方法,选取2021年1月—2023年1月太和县中医院收治的痰瘀互结型食管癌患者80例,采用随机数字表法分为对照组和观察组。2组均给予常规手术治疗,对照组术后给予常规对症支持治疗,同时给予抗感染治疗。观察组术后常规治疗方法同对照组,加针刺联合通幽汤治疗。均连续治疗7 d。对比2组首次肛门排气时间、疼痛消失时间、胸管拔除时间、首次进流质饮食时间、引流管拔除时间、住院时间;术前和术后第8天中医证候积分、血清炎症因子（IL-6、TNF-α、CRP）、氧化应激指标（SOD、MDA和GSH-Px）、免疫指标（Th17、Treg细胞比例,Th17/Treg）。结果 观察组首次肛门排气时间、疼痛消失时间、胸管拔除时间、首次进流质饮食时间、住院时间均较对照组短（P<0.05）;2组引流管拔除时间比较差异无统计学意义（P>0.05）。术后第8天,2组各项症状中医证候积分均较术前降低（P<0.05）,且观察组食欲不振、胸胁疼痛评分低于对照组（P<0.05）;2组血清IL-6、TNF-α、C...     

基于免疫相关细胞因子研究理冲汤对子宫肌瘤细胞凋亡和增殖的影响

目的：从免疫相关细胞因子表达情况研究理冲汤对子宫肌瘤细胞凋亡和增殖的影响。方法：用异种移植法建立子宫肌瘤小鼠模型,随机分为正常组、模型组、理冲汤组和阳性药组,每组6只,连续药物干预4周;通过透射电子显微镜观察子宫平滑肌细胞的超微结构;采用免疫组织化学染色检测促进细胞凋亡因子胱天蛋白酶3(Caspase-3)、抑制细胞增殖因子Ki67的表达情况;采用MSD电化学发光技术检测白细胞介素-12p70(IL-12p70)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤生长相关基因(GRO/KC)的表达情况。结果：与模型组比较,理冲汤组子宫平滑肌细胞超微结构改善明显,细胞排列紊乱和细胞膜增厚现象均有所减轻;子宫组织中Caspase-3表达升高(P<0.01),Ki67表达降低(P<0.01);血清中IL-12p70表达升高(P<0.05),IL-1β、IL-6、GRO/KC表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论：理冲汤具有促进子宫肌瘤细胞凋亡、抑制细胞增殖的作用,其分子机制与调控免疫相关细胞因子表达有关。     

蔡氏扶正消症汤对胃癌血管生成影响的实验研究

目的:通过蔡氏扶正消症汤生药对胃癌血管内皮生长因子表达的影响,探究蔡氏扶正消症汤抑制胃癌血管生成的机制研究。方法:用免疫组化S-P法检测对肿瘤血管内皮细胞生成因子(VEGF)表达的影响。结果:蔡氏扶正消症汤浓度为1.1mg/ml时其平均吸光度分别为0.096±0.004,与空白对照组平均吸光度0.125±0.025相比,有非常显著性差异(P<0.01),并且VEGF平均吸光度随蔡氏扶正消症汤的浓度增加而降低。结论:蔡氏扶正消症汤能抑制VEGF的表达。     

消痰散结方对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成拟态的影响

目的 探讨消痰散结方对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）的影响及其机制。 方法 30只裸鼠右前肢腋部皮下移植人胃癌瘤块建立荷瘤模型。造模后的荷瘤鼠随机分为模型组（10只）、消痰散结组（10只）和多西环素组（10只）,分别给予相应药物灌胃治疗4周后,脱颈椎处死荷瘤鼠。剥取肿瘤,称取瘤质量,计算抑瘤率;计数肿瘤中VM的数量;运用免疫组织化学法检测肿瘤中基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）蛋白的表达。