心房钠尿肽对毛细支气管炎小鼠肺组织GATA-3 的调控

目的:探讨心房利尿肽信号通路对毛细支气管炎(简称毛支)气道炎症中GATA 结合蛋白3(GATA-3)的影 响,为毛支治疗提供新的思路。方法:建立毛支小鼠模型,分为正常对照组、RSV 组、ANP 组,ANP+A71915 组,观察各组小鼠肺 组织病理学、GATA3 及IL-4 的变化。结果:与RSV 组比较,经鼻吸入外源性心房钠尿肽可加剧气道炎性浸润,IL-4 因子及 GATA-3 蛋白表达量均升高;而利用拮抗剂A71915 预处理后,各项指标均表明心房钠尿肽的上述效应可被逆转。结论:心房 钠尿肽可增强毛细支气管炎的气道炎症,提高GATA-3 水平。     

γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对毛细支气管炎模型大鼠气道炎症的影响

为研究γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号对毛细支气管炎(简称毛支)模型大鼠气道炎症反应的影响,建立毛支大鼠模型并且尾静脉注射γ-促分泌酶抑制剂(MW167)。采用HE染色法观察肺组织病理改变,ELISA方法检测血浆中IL-4、INF-γ的水平,real-time PCR检测肺组织和外周血单个核细胞中IL-4mRNA、IFN-γmRNA的表达,Western blotting检测肺组织中NICD、GATA-3、T-bet的蛋白表达。结果显示,MW167注射组较RSV毛支组病理学改变有所减轻;MW167注射组血浆中IL-4水平较RSV组降低,IFN-γ水平增高;肺组织及外周血单个核细胞IL-4mRNA在MW167注射组表达减弱,IFN-γmRNA表达增强;Notch信号和GATA-3表达降低,T-bet表达增强。以上结果提示静脉注射γ-促分泌酶抑制剂能够抑制毛支模型大鼠的气道炎症,可能对毛支有潜在的治疗价值。     

T-bet基因转染对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的： 观察气道内T-bet基因转染对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法: C57BL/6小鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、空质粒干预组(C组) 和T-bet质粒干预组(D组)。卵白蛋白(OVA) 抗原溶液腹腔注射致敏,滴鼻造模。正常对照组用生理盐水代替OVA,空质粒干预组和T-bet质粒干预组OVA激发48 h前,分别经鼻滴入50 μg空质粒和重组T-bet质粒。观察各组实验小鼠的肺组织炎症以及BALF中各类炎症细胞以及IL-4、IFN-γ水平的变化。 结果: Western blotting检测发现,小鼠气道转染pcDNA3-T-bet质粒48 h后肺组织T-bet蛋白表达显著增加。pcDNA3-T-bet质粒转染能较好抑制给药后48 h OVA激发的哮喘小鼠气道炎症（包括炎症细胞浸润,上皮细胞损伤、黏液分泌、血管壁水肿及管腔缩窄）;下调小鼠BALF中Th2因子IL-4并上调Th1因子IFN-γ水平。 结论: 气道内转染T-bet质粒能有效改善哮喘小鼠的气道炎症。     

全氟辛酸暴露对哮喘小鼠炎症介质IL-4和IFN-γ及糖皮质激素受体的影响

目的:研究全氟辛酸(PFOA)对哮喘小鼠气道炎症、外周血炎症介质白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)以及肺组织糖皮质激素受体(GR)表达的影响及其可能机制。方法:30只BALB/c小鼠随机分为正常对照(C)组、哮喘模型(A)组、哮喘+PFOA低剂量(AP10)组、哮喘+PFOA中剂量(AP50)组和哮喘+PFOA高剂量(AP100)组,根据不同分组分别制作哮喘模型及PFOA暴露模型。留取肺组织标本后进行HE染色,透射电镜标本制作,ELISA法检测外周血IL-4及IFN-γ水平,并以Western blot及免疫组织化学染色法检测肺组织GR的蛋白表达。结果:肺组织病理切片HE染色结果显示,与正常小鼠相比,哮喘小鼠气道及血管周围可见明显的炎症细胞浸润及黏液分泌,AP各组表现更为明显。透射电镜结果显示,哮喘小鼠肺组织超微结构破坏明显。ELISA检测血清炎症因子结果表明,与C组相比,A组及AP各组外周血炎症因子IL-4升高,IFN-γ明显降低(P0.05);与A组相比,AP10组及AP50组无明显差异,而AP100组外周血炎症因子IL-4升高,IFN-γ明显降低(P0.05)。Western blot结果显示哮喘小鼠肺组织GR表达较正常小鼠降低(P0.05),而A组与AP各组之间无显著差异。免疫组化结果提示GR蛋白主要表达于小鼠肺组织支气管柱状上皮细胞、气道平滑肌细胞及血管平滑肌细胞胞浆。结论:哮喘小鼠气道PFOA急性暴露可通过诱导Th2型免疫反应加剧肺部炎症,促进气道及血管周围的炎症细胞浸润并破坏肺组织超微结构,且与剂量相关。     

黄芪甲苷Ⅳ对哮喘小鼠Th2转录因子表达的抑制作用

为探讨黄芪甲苷Ⅳ(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)对哮喘小鼠免疫失衡的调节机制,用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)诱导小鼠支气管哮喘模型,随机分为对照组、模型组、AST Ⅳ治疗组和地塞米松治疗组。HE染色观察肺组织病理改变;ELISA检测肺组织匀浆中IFN-γ、IL-5、IL-13、IL-17A及TGF-β的含量变化;RT-PCR检测脾脏中转录因子T-bet、GATA-3、STAT-6、RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平。结果显示,AST Ⅳ作用后小鼠肺部炎症细胞浸润及气道上皮细胞损伤明显改善;IL-5、IL-13和IL-17A的表达水平明显低于模型组(P <0.05),而对IFN-γ和TGF-β没有显著作用;AST Ⅳ能显著抑制STAT-6 mRNA的表达(降低2.65倍),同时对GATA-3(降低1.82倍)和RORγt(降低2.22倍)的表达也有抑制作用;但对Foxp3和T-bet mRNA表达无显著影响。研究表明,AST Ⅳ主要通过显著抑制Th2转录因子表达来抑制炎性因子IL-5、IL-13以及IL-17A的产生,从而改善哮喘模型小鼠肺部炎症程度。故AST Ⅳ可能是一种哮喘治疗新的药物活性成分。     

唾液乳杆菌对哮喘Balb/c小鼠气道高反应性及T-bet/GATA-3表达的影响

目的探讨唾液乳杆菌对哮喘Balb/c小鼠气道高反应性及T-bet/GATA-3表达的影响。方法选择30只4周、体质量16~18 g、SPF级Balb/c雌性小鼠,随机分成3组:正常对照组(N)、哮喘组(A)、哮喘加唾液乳杆菌组(AH)。应用卵蛋白建立急性哮喘模型,无创肺功能仪测定小鼠气道反应性、病理HE染色观察肺部炎症改变、Real-time PCR法检测肺组织中GATA-3 m RNA及T-bet m RNA表达。结果哮喘组小鼠较正常对照组小鼠气道反应性增高,AH组较哮喘组小鼠气道反应性降低(P0.05);病理HE染色见哮喘组支气管管壁增厚、管腔狭窄、气管及血管周围可见大量以嗜酸性粒细胞为主的炎症细胞浸润,管腔中较多炎性分泌物,AH组小鼠肺组织病理改变较哮喘组明显减轻;哮喘组小鼠肺组织中GATA-3m RNA表达水平较N组明显升高,T-betm RNA表达水平较N组明显降低(P0.05);而AH组小鼠肺组织中GATA-3m RNA表达水平较哮喘组明显降低,T-betm RNA表达水平较哮喘组明显升高(P0.05)。结论致敏前唾液乳杆菌灌胃一定程度上减轻了哮喘小鼠的气道高反应性及气道炎症,通过在转录水平增加T-betm RNA表达同时抑制GATA-3m RNA表达,进而改善哮喘小鼠Th1/Th2失衡,为支气管哮喘的免疫防治提供新的途径。     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿外周血心房钠尿肽和GATA3水平上调

目的研究在不同程度毛细支气管炎患儿外周血中心房钠尿肽(ANP)信号变化和GATA结合蛋白3(GATA3)表达的关系,探讨ANP信号参与毛细支气管炎发病的可能机制。方法选取正常儿童20例、轻度毛细支气管炎患儿16例、中重度毛细支气管炎患儿14例。ELISA检测血浆中ANP及白细胞介素4 (IL-4)含量,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中钠尿肽受体A(NPRA)和GATA3 mRNA表达,Western blot法检测PBMC中NPRA、GATA3的蛋白水平。结果随疾病炎症程度升高,患儿血浆内ANP、IL-4水平明显升高,同时PBMC中NPRA和GATA3的mRNA及蛋白表达也随之升高。结论毛细支气管炎患儿外周血ANP、NPRA、IL-4和GATA3水平升高。     

大蒜素对过敏性哮喘小鼠气道炎症及cAMP/PKA/CREB通路的影响

目的 探究大蒜素对过敏性气道炎症的治疗作用及对cAMP/PKA/CREB通路的影响。方法 40只SPF级雄性BALB/c小鼠,随机分为空白组、模型组、大蒜素组、地塞米松组,每组10只。模型组与给药组利用卵白蛋白（OVA）致敏联合雾化激发的方法建立过敏性哮喘模型。检测炎症细胞数量变化;HE染色、Masson染色观察肺组织病理改变及气道重塑情况;ELISA检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ、TNF-α及IgE水平变化;免疫荧光方法观察肺组织cAMP蛋白表达变化;Western blot检测肺组织PKA、CREB、p-CREB蛋白表达变化。结果 大蒜素能够改善肺组织炎症病理损伤,调节气道重塑;降低BALF中炎性细胞数量、降低IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α表达、降低IgE含量,上调IFN-γ表达;上调肺组织cAMP、PKA、CREB、p-CREB蛋白的表达。结论 大蒜素可能通过调控cAMP/PKA/CREB信号通路抑制过敏性哮喘小鼠气道炎症反应。     

鱼腥草总黄酮对肺炎支原体感染小鼠Bcl-2 和Bax 表达的影响

目的:探讨鱼腥草总黄酮对肺炎支原体感染小鼠肺组织Bcl-2、Bax蛋白与mRNA表达水平及血清炎症因子的影响及作用机制。方法:50只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、鱼腥草总黄酮低、中和高剂量组(0.5、1.0、2.0 g/kg),滴鼻给予肺炎支原体。HE染色观察肺组织病理变化,Western blot法与RT-PCR法分别检测各组小鼠肺组织Bcl-2、Bax蛋白与mRNA表达水平,ELISA法检测各组小鼠血清炎症因子TNF-α、IFN-γ和IL-6水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠肺湿重指数明显升高(P0.05),肺组织出现炎症病变,肺泡璧增厚、肺泡间隔变宽、可见炎症细胞浸润,肺组织Bcl-2蛋白与mRNA表达水平明显降低(P0.05),Bax蛋白与mRNA表达水平明显升高(P0.05),Bcl-2/Bax值明显降低(P0.05),血清TNF-α、IFN-γ和IL-6水平明显升高(P0.05)。与模型组相比,鱼腥草总黄酮低、中和高剂量组小鼠肺湿重指数明显降低(P0.05),炎症细胞浸润情况改善,肺组织Bcl-2蛋白与mRNA表达水平明显升高(P0.05),Bax蛋白与mRNA表达水平明显降低(P0.05),Bcl-2/Bax值明显升高(P0.05),血清TNF-α、IFN-γ和IL-6水平明显降低(P0.05)。结论:鱼腥草总黄酮可上调Bcl-2蛋白与mRNA表达,下调Bax蛋白与mRNA表达,降低炎症因子水平,减少细胞凋亡,对肺炎支原体感染小鼠起抗感染作用。     

地塞米松对实验性哮喘小鼠TH1/TH2细胞因子的影响及其机制的探讨

目的：初步探讨地塞米松对小鼠哮喘模型哮喘进展过程中T_H细胞因子的影响及其机制。方法： 18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和地塞米松处理组，每组各6只。运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白细胞介素-4和干扰素-γ的表达,用Western blotting方法检测各组小鼠肺组织转录因子 T-bet 和GATA-3的表达，用组织学观察肺组织炎症程度。结果：哮喘鼠T细胞内IL-4/IFN-γ比值明显高于正常组（P﹤0.01）；地塞米松组细胞内IL-4/IFN-γ比值明显低于哮喘组（P﹤0.01）。哮喘组肺组织T-bet的表达明显低于正常对照组（P﹤0.01），GATA-3明显高于正常对照组（P﹤0.01）;地塞米松组的小鼠肺组织T-bet和GATA-3的表达均明显低于哮喘组（P﹤0.01）， GATA-3降低更为明显。结论：调控T_H1和T_H2细胞转化过程中重要转录因子T-bet和GATA-3的表达，可以改变IL-4/IFN-γ比值，纠正哮喘的T_H2漂移，从而改善相应的炎性症状，这可能是地塞米松抑制哮喘的重要机制之一。     

转录因子GATA-3 mRNA在哮喘模型小鼠体内的表达

目的:探讨转录因子GATA-3 mRNA在哮喘模型小鼠体内的表达。 方法:建立卵白蛋白（OVA）致小鼠哮喘模型，计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞总数和分类，评价肺组织炎症细胞浸润；ELISA检测BALF和脾细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ浓度；RT-PCR检测脾细胞和肺组织GATA-3 mRNA表达水平。 结果:哮喘组BALF中炎症细胞总数及嗜酸粒细胞百分比明显高于对照组，支气管出现明显炎症细胞浸润、黏液分泌和支气管收缩，BALF和脾细胞培养上清液中IL-4明显高于对照组，肺组织和脾细胞GATA-3 mRNA表达水平均明显高于对照组。 结论:哮喘模型小鼠肺组织和脾细胞GATA-3 mRNA表达增加，可能在促进Th2细胞因子合成和介导气道炎症细胞浸润中具有重要作用。     

白三烯受体拮抗剂下调OX40L调控Th9细胞因子改善过敏性哮喘小鼠气道重塑和炎症

目的 探讨白三烯受体拮抗剂对过敏性哮喘小鼠气道重塑的改善作用及可能机制.方法 30只SPF级BALB/c小鼠随机分成对照组、模型组及孟鲁司特组,每组10只.HE染色观察肺组织形态学变化;Masson染色观察肺组织气道纤维化;ELISA检测支气管肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ、IL-9和OVA特异IgE含量;Western blot检测肺组织OX40L蛋白表达;Western blot和qRT-PCR检测肺组织TRAF6、IL-9和IL-9R蛋白及mRNA表达.结果 与对照组相比,模型组小鼠肺组织形态学病理变化明显,纤维化增加,支气管肺泡灌洗液IL-4、IL-9和OVA特异IgE含量增加,IFN-γ含量降低,OX40L、TRAF6、IL-9和IL-9R表达水平升高.孟鲁司特改善肺组织形态,降低肺组织气道纤维化,降低支气管肺泡灌洗液IL-4、IL-9和OVA特异IgE含量,增加IFN-γ含量,降低OX40L、TRAF6、IL-9和IL-9R表达水平.结论 白三烯受体拮抗剂改善过敏性哮喘小鼠气道重塑和炎症,其作用机制可能与调节OX40L和Th9细胞相关因子表达有关.     

IL-31RA基因敲除对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的本研究通过构建IL-31RA基因敲除小鼠模型及哮喘模型,观察该基因敲除对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法采用OVA建立小鼠哮喘模型,于末次激发后取肺组织HE染色及甲苯胺蓝染色观察肺部炎症细胞浸润和肥大细胞增生情况,支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞及嗜酸性粒细胞(EOS)计数,ELISA法检测血浆中总Ig E、IFN-γ、IL-4水平。结果成功构建IL-31RA基因敲除小鼠模型及哮喘模型,哮喘小鼠BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比和血浆中Ig E水平明显增多,基因敲除哮喘小鼠较野生型哮喘小鼠增多更明显。哮喘小鼠肺组织病理切片EOS、肥大细胞浸润,基因敲除小鼠较野生型小鼠EOS、肥大细胞浸润增多。哮喘小鼠血浆中Th2类细胞因子IL-4水平明显高于正常对照组,Th1类细胞因子IFN-γ水平明显低于对照组,且基因敲除哮喘小鼠IL-4水平较野生型哮喘小鼠增高。结论 IL-31受体A信号可抑制哮喘小鼠气道的炎症反应。     

BALB/c小鼠哮喘进展过程中T-bet和GATA3的表达变化

目的:初步探讨转录因子T-bet和GATA3在小鼠哮喘模型哮喘进展过程中的改变及其意义.方法:18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和药物组(地塞米松组),每组各6只.采用Western blot法检测各组小鼠肺组织T-bet和GATA3的表达,同时运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的表达.结果:哮喘组与正常对照组相比,药物组与哮喘组相比,肺组织T-bet和GATA3均有明显改变(P＜0.01).哮喘组T-bet明显减低,而GATA3明显升高;地塞米松治疗后,T-bet和GATA3均明显减低,后者减低更为明显.流式细胞仪分析显示:哮喘组CD4 T细胞细胞内IL-4/IFN-γ的比值显著高于对照组(P＜0.01);经地塞米松处理后的哮喘小鼠CD4 T细胞细胞内IL-4/IFN-γ的比值显著降低(P＜0.01).结论:转录因子T-bet和GATA3与哮喘进展密切相关,调控它们的表达,可以改变IL-4/IFN-γ比值,纠正哮喘的Th2漂移,可能成为哮喘治疗的新靶点.     

IL-27对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的研究IL-27对卵白蛋白(OVA)激发哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 24只雌性BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及IL-27组,每组8只。应用OVA建立哮喘模型,IL-27组小鼠应用1μgIL-27(溶于50μlPBS中)滴鼻给药,观察3组小鼠肺组织病理改变,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞;ELISA法测定小鼠BALF中IL-4和IFN-γ浓度,RT-PCR测定肺组织T-bet mRNA的表达量。结果 IL-27组小鼠肺组织炎症反应明显轻于哮喘组小鼠;IL-27组小鼠BALF中嗜酸性粒细胞计数为(2.21±0.33)×107/L明显低于哮喘组的(12.82±2.17)×107/L(P0.01);IL-27组小鼠BALF中IL-4浓度为(20.4±3.2)μg/L,明显低于哮喘组的(61.3±13.1)μg/L(P0.05);IL-27组小鼠BALF中IFN-γ浓度为(50.3±6.3)μg/L,明显高于哮喘组的(11.1±3.3)μg/L(P0.05);IL-27组小鼠肺组织T-bet mRNA表达量(吸光度积分比值)为(0.268±0.048),明显高于哮喘组的(0.130±0.012)(P0.05)。结论 IL-27可能通过增强T-bet mRNA的表达增强Th1反应,减少BALF中嗜酸性粒细胞数量,进而减轻了哮喘小鼠肺组织炎症反应。     

IL-31在哮喘小鼠中的动态表达及对肺泡上皮细胞表达CCL11和CCL22的影响

目的通过观察IL-31在OVA诱导小鼠哮喘模型中的动态表达及IL-31对肺泡上皮细胞表达趋化因子CCL11和CCL22的影响,探讨IL-31在哮喘气道炎症中的作用。方法常规OVA法建立小鼠哮喘模型,于末次激发后取肺组织HE染色及AB-PAS染色,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞和嗜酸性粒细胞(EOS)计数,ELISA法检测血浆中IgE、IL-4、IFN-γ、IL-31水平,荧光定量PCR检测肺组织IL-31R mRNA表达水平,同时体外培养小鼠肺泡上皮细胞,用IL-31处理24 h后检测CCL11和CCL22 mRNA的表达水平。结果成功构建哮喘小鼠模型,哮喘小鼠BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比和血浆中IgE水平明显增多。哮喘小鼠肺组织病理切片见中性粒细胞、EOS浸润。哮喘小鼠血浆中Th2类细胞因子IL-4水平明显高于对照组,Th1类细胞因子IFN-γ明显低于对照组。哮喘小鼠血浆IL-31水平和肺组织IL-31R mRNA表达水平明显增高,第2周至第8周虽略有降低但仍明显高于对照组。IL-31作用小鼠肺泡上皮细胞24h后,趋化因子CCL11、CCL22mRNA表达增高。结论IL-31通过刺激趋化因子表达募集炎性细胞,促进气道炎症的发生发展。     

γδ T细胞参与呼吸道合胞病毒感染对气道变态炎症反应的影响作用

目的 证实γδ T细胞在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)不同感染时间所致哮喘鼠不同气道炎症反应中的作用.方法 建立致敏前后不同时间感染RSV的哮喘动物模型,HE染色观察哮喘鼠肺炎症反应;real-time RT-PCR法检测γδ T细胞Th1/Th2型细胞因子IFN-γ和IL-4 mRNA表达;流式细胞仪分析脾及肺组织中γδ T细胞数量;γδ T细胞过继回输进一步明确其功能.结果 致敏前感染RSV显著减轻哮喘鼠肺炎症;减少脾及肺组织细胞中γδ T细胞总数及其活化细胞数量;增加γδ T细胞IFN-γ mRNA表达;降低IL-4 mRNA表达,但致敏后感染RSV对哮喘鼠肺炎症反应及ΥδT细胞数量和生物学活性无明显影响.尾静脉回输γδ T细胞导致模型鼠肺炎症反应明显增强,提示γδ T细胞参与哮喘鼠气道炎症的发生发展.结论 致敏前RSV感染可能通过影响γδ T细胞数量及其生物学活性改变变应原诱发的气道炎症反应.     

T-bet对肺癌细胞系(Lewis细胞)致瘤作用的体内干预研究

目的:探讨T-bet质粒局部应用对小鼠肺癌细胞皮下移植瘤的干预作用。方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于小鼠右肩部皮下,制备荷瘤小鼠模型;瘤内分别注射PIRES-eGFP/mT-bet(m指小鼠)、PIRES-eGFP质粒和PBS,观察各组小鼠存活时间,肿瘤体积的变化;HE染色观察肿瘤组织的病理变化;Western blot检测肿瘤组织T-bet的表达,QRT-PCR检测肿瘤组织T-bet和IFN-γ的mRNA水平。结果:瘤内注射T-bet质粒载体后Western blot检测发现,肿瘤组织T-bet蛋白表达显著高于对照组;QRT-PCR结果显示,肿瘤组织T-bet和IFN-γ的mRNA水平呈上升趋势,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。T-bet质粒干预组小鼠肿瘤生长明显缓慢,存活期延长。HE染色组织病理观察可见mT-bet干预组小鼠局部组织淋巴细胞大量浸润。结论:T-bet基因局部注射可延缓小鼠肺癌Lewis皮下移植瘤的生长,提高机体的抗肿瘤免疫应答能力,增强对已发肿瘤的生长限制作用,为T-bet应用于肿瘤治疗积累试验数据。     

慢性尘螨暴露诱导小鼠气道Th1炎症相关的气道重塑

目的:观察慢性尘螨变应原暴露对小鼠气道变应性炎症及重构的影响。方法:采用α平滑肌肌动蛋白启动子驱动的Cre重组酶(α-SMA-Cre)与R26R双转基因报告小鼠,尘螨连续滴鼻60 d后测定气道阻力;肺泡灌洗并分类计数;分离肺组织并提取肺组织蛋白;制备病理组织切片;分离培养脾脏淋巴细胞。结果:慢性尘螨暴露组小鼠气道阻力明显升高(P0.01),肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和淋巴细胞比例显著高于正常对照组(P0.01),肺组织HE染色示:慢性尘螨暴露组小鼠气道上皮细胞炎症水肿,小血管周围淋巴细胞浸润,未见嗜酸粒细胞。X-gal染色显示:尘螨暴露组气道平滑肌细胞及上皮下肌纤维母细胞明显增生,相应Western blotting结果显示α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达明显增多。尘螨暴露组肺匀浆上清γ干扰素(IFN-γ)较正常对照组升高(P0.01),白细胞介素-4(IL-4)水平两者间没有显著差异(P0.05)。流式细胞检测显示尘螨暴露组分泌IFN-γ的CD4+Th1细胞较正常对照组增多。结论:慢性尘螨气道暴露诱导了Th1炎症,与气道重构和气道高反应性密切相关。     

乳胶致小鼠气道炎症的研究

目的：以乳胶为致敏原，建立具有哮喘主要特征的小鼠模型，研究乳胶与气道炎症之间的关系。方法：乳胶腹腔注射与滴鼻诱发BALB／C小鼠气道炎症，在激发后2，4小时行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数分类、肺组织病理检查、血清总IgE及乳胶特异性IgE(sIgE)测定并检测IL-5、IFN-γ的表达。结果：乳胶诱发后，实验组小鼠BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比升高；肺组织病理切片示支气管上皮增生、脱落，粘液腺分泌现象，支气管痉挛、收缩，炎症细胞浸润；血清总IgE及乳胶sIgE水平升高；BALF及肺组织局部IFN-γ减少，IL-5增高。结论：用乳胶蛋白作为致敏原，采用腹腔致敏与多次滴鼻激发可使BALB/C小鼠发生气道炎症，具有与变应原诱导的人类哮喘迟发反应相一致的主要特征：气道变应性炎症；外周血IgE浓度升高；肺组织中Th2型CK表达占优势。