紫草素通过p38 MAPK信号通路改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮肤炎症反应

目的:探索紫草素对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的影响及可能作用机制.方法:BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组、咪喹莫特模型组、紫草素低、中、高剂量组.连续处理7 d,记录小鼠每日体质量变化,银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)评分观察小鼠皮损动态变化;HE染色观察皮损组织形态学变化、表皮厚度及炎症细胞浸润程度...     

PM2.5通过p38 MAPK信号通路影响血管平滑肌细胞增殖和迁移

目的:研究细颗粒物(PM2.5)对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响,以及p38 MAPK信号通路在其中的作用。方法:体外培养人血管平滑肌细胞,分为对照组和不同浓度PM2.5染毒组,分别用PBS及6.25、12.5和25 mg/L的PM2.5作用于细胞,用CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖能力的变化,用划痕实验和Transwell法检测细胞的迁移能力,然后根据结果选取PM2.5最强作用浓度染毒细胞,在不同时点用Western blot法检测p38MAPK信号分子的磷酸化改变,并观察用特异性抑制剂阻断p38 MAPK信号后细胞在PM2.5刺激下的增殖和迁移情况。结果:与对照组比较,PM2.5染毒可明显促进血管平滑肌细胞的增殖和迁移能力,在设定的浓度范围内以12.5 mg/L浓度组的作用最为明显(P<0.05)。Western blot结果显示,12.5 mg/L PM2.5染毒可上调血管平滑肌细胞p38 MAPK的磷酸化水平;而加入p38 MAPK抑制剂SB203580预处理后,PM2.5诱导的细胞增殖和迁移明显受到抑制,说明p38 MAPK可能介导PM2.5的毒性作用。结论:PM...     

糖皮质激素通过抑制p38MAPK信号通路缓解大鼠内毒素性急性肺损伤

目的：研究糖皮质激素对内毒素导致的急性肺损伤的影响及作用机制。方法:成年雄性SD大鼠被随机分为6组：对照组（control组,n=6）;LPS组（n=24）;地塞米松＋LPS组（Dex＋LPS组,n=24）;糖皮质激素受体拮抗剂RU486组（RU486组,n=6）;RU486+LPS组（n=24）以及RU486＋Dex＋LPS组（n=24）。除对照组和RU486组外,其余4组在注射LPS后1、3、6、12h又被分为4个亚组。分别检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α和IL-6的浓度,肺组织的病理变化,以及肺组织中p38MAPK的活化状态和MKP-1的表达情况。另外又分别比较了LPS组与RU486＋LPS组、Dex＋LPS组与RU486＋Dex＋LPS组大鼠48h的死亡率。结果:注射LPS后,BALF中TNF-α和IL-6的浓度明显升高（P<0.05）,HE染色显示肺组织内广泛炎症反应。而这些现象在应用RU486后变得更加严重,并且RU486＋LPS组的死亡率也明显高于LPS组(P<0.05)。地塞米松能明显缓解LPS导致的肺损伤,糖皮质激素受体(GR)参与此作用。另外,在注射LPS后,肺组织中磷酸化的p38MAPK的表达明显升高,而MKP-1的表达则明显受到抑制。地塞米松能显著降低p38MAPK的磷酸化,这一作用也是GR依赖的。结论:糖皮质激素活化GR诱导肺组织中MKP-1的表达,进而抑制p38MAPK的活化,从而发挥其抗炎作用,缓解LPS诱导的肺损伤。     

甲酰肽受体2通过p38 MAPK通路参与复发性流产的发生

目的 探讨甲酰肽受体2(FPR2)在复发性流产患者(RSA)绒毛组织中的表达,及其对滋养细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。明确FPR2对滋养细胞功能的影响,分析其在复发性流产中的作用,并对机制进行探讨。方法 收集临床样本(正常30例,RSA30例),利用免疫组织化学染色、Real-time PCR和Western blotting等方法,分析FPR2在RSA患者和正常绒毛组织间的定位和表达差异;应用CRISPR/Cas-9技术,对人绒毛膜滋养细胞系HTR-8/Svneo的FPR2进行敲降并验证;采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验检测FPR2敲降后滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力改变;单独或联合使用p38 MAPK抑制剂SB203580后,采用免疫荧光染色和Western blotting分析FPR2敲降后磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK)及p38 MAPK的表达水平;采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验检测滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力改变。结果 复发性流产患者绒毛组织FPR2表达增加;FPR2敲低显著提高了HTR-8/Svneo细胞增殖、...     

TPX2通过p38 MAPK信号通路诱导直肠癌HR-8348细胞凋亡

目的:研究下调非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)对直肠癌细胞凋亡的影响及机制。方法:用TPX2小干扰RNA(si RNA)转染直肠癌HR-8348细胞,记为TPX2 si RNA组;以不做转染的细胞作为正常对照(control)组;以转染si RNA阴性对照(si RNA-NC)的细胞作为si RNA-NC组;用p38 MAPK抑制剂处理敲减TPX2表达后的直肠癌HR-8348细胞记为TPX2 si RNA+SB203580组。RT-qPCR和Western blot测定TPX2的表达水平,MTT法测定细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定细胞中p38 MAPK、p-p38 MAPK、cleaved caspase-3和Bcl-2的蛋白水平。结果:TPX2 si RNA转染后HR-8348细胞中TPX2的m RNA和蛋白表达水平显著下降(P <0. 05),而转染si RNA-NC对HR-8348细胞中TPX2的m RNA和蛋白水平没有影响。敲减TPX2表达后的直肠癌HR-8348细胞存活率降低,凋亡率升高,细胞中的cleaved caspase-3、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白水平明显升高,Bcl-2水平水平降低,与control组比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。与TPX2 si RNA组相比,TPX2 si RNA+SB203580组的HR-8348细胞凋亡率、cleaved caspase-3水平和p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白水平明显降低,存活率明显升高(P <0. 05)。结论:TPX2表达下调可以通过激活p38 MAPK促进直肠癌HR-8348细胞凋亡。     

胰岛素和人参皂甙 Rg1对脂联素mRNA 表达的影响

目的:探讨不同浓度的胰岛素和人参皂甙Rg1对体外3T3-L1脂肪细胞脂联素(adiponectin)mRNA表达的影响。方法:通过不同浓度胰岛素和Rg1与3T3-L1脂肪细胞共同培养,以β-actin为内对照,半定量逆转录PCR法测定脂联素mRNA表达。结果:随着胰岛素浓度的升高,脂联素mRNA表达逐渐降低,在胰岛素浓度≥100nmol/L时具有显著差异（P<0.05）;40mg/LRg1能有效逆转高胰岛素对脂联素mRNA表达的抑制作用（P<0.05）。结论:体外高胰岛素水平可使3T3-L1细胞脂联素表达下降,Rg1可逆转体外高胰岛素降低脂联素表达的作用。     

BMP9 通过 P38 MAPK 信号通路对成骨细胞自噬和凋亡的作用研究

目的 研究 BMP9 对 P38 MAPK 信号通路的调控作用以及对成骨细胞自噬和凋亡的影响。 方法 体外培养小鼠 MC3T3-E1 成骨细胞系, 用雷帕霉素 ( rapamycin) 诱导细胞发生自噬, Western 印迹检测BMP9、 P38、 p-P38 的蛋白表达。 再将细胞随机分组后进行相应处理, 分别为 pcDNA3. 1-BMP9 组 ( pcDNA3. 1-BMP9)、 BMP9 siRNA 组 (BMP9 siRNA)、 P38 激活组 (茴香霉素, 10 μmol / L)、 P38 抑制组 ( SB202190, 10 μmol / L)、 pcDNA3. 1-BMP9 + P38 抑制组 ( pcDNA3. 1-BMP9 + SB-202190, 10 μmol / L)、 BMP9siRNA + P38 激活组 (BMP9 siRNA + 茴香霉素, 10 μmol / L) 以及对照组。 Western 印迹检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、 Beclin-1 和 P62 的表达, CCK-8 和流式细胞技术检测细胞的增殖和凋亡情况。 结果 雷帕霉素处理后的 MC3T3-E1 细胞中 LC3-Ⅱ、 Beclin-1、 BMP9 和 p-P38 蛋白升高 (P< 0. 05), P62 蛋白降低 (P< 0. 05)。pcDNA3. 1-BMP9 组、 P38 激活组 LC3-Ⅱ和 Beclin-1 蛋白升高 (P< 0. 05), P62 蛋白降低 (P< 0. 05); BMP9siRNA 组、 P38 抑制组 LC3-Ⅱ和 Beclin-1 蛋白降低 (P< 0. 05), P62 蛋白升高 (P< 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 +P38 抑制组和 BMP9 siRNA + P38 激活组 LC3-Ⅱ、 Beclin-1 和 P62 蛋白水平与对照组均无差异 (P均 > 0. 05)。pcDNA3. 1-BMP9 组细胞增殖率升高、 凋亡率降低 (P均 < 0. 05); BMP9 siRNA 细胞增殖率降低, 凋亡率升高 (P均 < 0. 05)。 P38 激活组细胞增殖率升高, 凋亡率降低 (P均 < 0. 05); P38 抑制组细胞增殖率降低, 凋亡率升高 (P均 < 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 + P38 抑制组和 BMP9 siRNA + P38 激活组细胞增殖率、 凋亡率与对照组均无差异 (P均 > 0. 05)。 结论 BMP9 能激活 P38 MAPK 通路, 诱导成骨细胞自噬, 减少细胞凋亡。     

Fractalkine通过激活p38MAPK信号通路调控狼疮性肾炎小鼠Treg细胞凋亡北大核心CSCD

目的:探讨趋化因子Fractalkine(FKN)对狼疮性肾炎(LN)小鼠Treg细胞凋亡的影响及机制。方法:构建LN小鼠模型,使用FKN中和抗体(Anti-FKN)、p38MAPK信号通路的抑制剂(SB203580)、p38MAPK信号通路的激活剂(U-46619)作用于正常小鼠及模型小鼠,采用免疫组化检测小鼠肾组织中FKN、磷酸化p38(p-p38)及Foxp3的蛋白表达;采用免疫磁珠法分选模型小鼠脾脏CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞,使用腺病毒转染细胞的方式敲低FKN的表达水平,同时使用p38MAPK信号通路抑制剂(SB203580)及激活剂(U-46619)干预细胞。采用Western blot验证FKN敲低的成功转染、检测p38、p-p38、Foxp3、凋亡相关因子(Bax、Bcl-2及Cyt-c)的蛋白表达。结果:LN小鼠肾组织中的FKN及磷酸化p38MAPK的表达明显上调,低表达FKN可降低LN小鼠肾组织及Treg细胞中FKN和p-p38的表达,增加Foxp3的表达,同时增加细胞内抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,而减少促凋亡因子Bax及Cyt-c蛋白的表达。p38MAPK信号通路抑制剂对上述因子的作用与低表达FKN相似,其激活剂可以逆转这些因子在LN小鼠Treg细胞中的表达。结论:FKN可能通过激活p38MAPK信号通路参与调控LN小鼠Treg细胞凋亡,为阐明LN的发病机制提供了实验依据。     

黄芪多糖通过激活脂联素信号通路减轻小鼠溃疡性结肠炎

目的:探讨黄芪多糖治疗小鼠溃疡性结肠炎的效果,并初步探究其作用机制.方法:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖中剂量组和黄芪多糖高剂量组,每组8只.除对照组外,其余各组小鼠通过饮用5％葡聚糖硫酸钠盐(DSS)溶液10 d构建溃疡性结肠炎模型.于饮用5％DSS溶液30 min...     

p38MAPK信号通路在雨蛙素诱导的胰腺AR42J细胞炎症反应中的作用

目的:探讨p38MAPK信号通路在急性胰腺炎体外模型中的作用。方法:AR42J细胞随机分为3组:正常对照组、雨蛙素组(10-8mol/L雨蛙素)和SB203580组(10μmol/LSB203580+10-8mol/L雨蛙素)。于3h收集细胞,检测淀粉酶分泌率;免疫荧光染色观察p-p38MAPK核移位;Westernblotting印迹检测p-p38MAPK和TNF-α蛋白表达;EMSA检测NF-κB活性。结果:与正常对照组比较,雨蛙素组淀粉酶分泌率和TNF-α蛋白水平增高(P<0.01),p-p38MAPK表达及NF-κB活性表达增加(P<0.01);免疫荧光示雨蛙素组p-p38MAPK发生了核移位。而与雨蛙素组相比,SB203580组明显降低淀粉酶分泌率和TNF-α蛋白表达(P<0.01),p-p38MAPK和NF-κB的活性表达也下降(P<0.05);SB203580还抑制了p-p38MAPK核移位。结论:p38MAPK通路参与了胰腺细胞内的炎症反应,其机制可能涉及NF-κB通路的活化。