马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响

目的：探讨马鞭草(Verbena officinalis)提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响。方法：通过相差显微镜观察活细胞贴壁程度、细胞形态改变；MTT法测定不同浓度C部位在不同时段对JAR细胞的增殖抑制率，结果用方差分析进行统计学检验：流式细胞仪检测细胞阻滞周期。结果：马鞭草C部位可引起细胞数目减少并萎缩；细胞增殖抑制率随着时间的延长和浓度的增加逐渐增大．72h的40mg／ml剂量组抑制最明显，抑制率为65％；流式细胞仪检测结果显示阻滞周期在GJM期之间。结论：马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖有明显抑制作用，其作用机制有待进一步探索。     

马鞭草C部位对人绒癌JAR细胞hCG分泌的影响和作用机制

目的:研究马鞭草C部位对绒毛膜癌JAR细胞绒毛膜促性腺激素(hCG)分泌的影响及其作用机制.方法:不同浓度马鞭草C部位(马鞭草C部位终浓度:10,2040 mg/ml)作用于体外培养的JAR细胞,分别于第12,24,48,72 h取上清液,采用β-hCG单克隆抗体酶免定量法检测hCG含量;琼脂糖凝胶电泳观察用药后细胞DNA断裂情况;流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:马鞭草C部位对绒毛膜癌JAR细胞分泌hCG产生明显的抑制作用,呈时间和剂量相关性.在该药物作用下,细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现\     

马鞭草醇C部位抗人绒毛膜癌JAR细胞作用机制的研究

应用MTT法及3H -TdR同位素标记细胞增殖抑制实验 ,在马鞭草醇提液中筛出其中一个活性部位 ,命名为C部位。一定浓度的马鞭草C部位能明显抑制JAR细胞的增殖 ,加药后 48h细胞增殖仅为相应对照组的 3 0 0 5 % ;EGFR的表达为对照组的2 7 0 4% ;见明显的凋亡小体 ;琼脂糖凝胶电泳可见典型的“阶梯状”条带 ,流式细胞术出现凋亡峰。马鞭草C部位已确定对绒癌细胞具有明显的促凋亡作用 ,故而该药有望能成为治疗绒毛膜癌或逆转多药耐药的有效药物     

马鞭草C部位对人绒毛膜癌JAR细胞体外抑制作用的研究

目的 探讨马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞体外抑制作用。方法 MTT法测定不同浓度C部位在不同时段对JAR细胞的增殖抑制率；HCG单克隆酶免定量法检测马鞭草C部位对JAR细胞分泌HCG的影响；透射电镜观察细胞超微结构变化。结果 JAR细胞经马鞭草C部位作用后，细胞增殖抑制率随着时间的延长和浓度的增加逐渐增大，72h的40g／L剂量组抑制最明显，抑制率为65％；HCG分泌受到明显抑制，呈剂量和作用时间依赖性；马鞭草C部位可引起细胞数目减少并萎缩；电镜下见到明显的凋亡小体。结论 马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖及分泌HCG有明显抑制作用，并可诱导JAR细胞凋亡。     

冬凌草甲素诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡及对G2/M细胞周期的阻滞作用

目的 探讨冬凌草甲素对胰腺癌PANC-1细胞生长抑制以及促进凋亡的机制.方法 采用MTT还原法检测冬凌草甲素对PANC-1细胞生长的抑制作用;碘化丙啶(PI)染色和Hoechst 33342染色法观察细胞形态学的变化;PI染色流式细胞术检测细胞周期分布;膜联蛋白V(Annexin V)/pI双标流式细胞术测定凋亡细胞比...     

高温阻滞HeLa细胞于G1期并引起G1期细胞凋亡

目的探讨高温阻滞HeLa细胞周期进程及其与细胞凋亡的关系。方法HeLa细胞经培养增殖后分为37℃、40℃、43℃和45℃共4个温度组。每组分别在0．5、1、2和4h共4个时间点取材，经PI染色在流式细胞仪上检测4种温度条件下，4个时间段时HeLa细胞的凋亡指数和在各细胞周期时相中的指数。结果37℃时，60％的细胞处于G，期，S期及Gz／M期的HeLa细胞分别为17％和18％，约5％细胞凋亡。40℃时，细胞周期受到抑制，G1期的HeLa细胞明显增加，达73％，S及G2／M期的细胞分别为9％和15％，凋亡细胞占3％。43℃时，不但细胞周期受阻，而且凋亡细胞极明显地增加，达19％，G1期细胞为61％，S期细胞为9％，G2／M期细胞为11％。45℃时，细胞凋亡数和在细胞周期各时相的细胞数与40℃时的分布相似。结论温度升至40℃时对HeLa细胞的增殖活动有明显的抑制，使HeLa细胞滞留于G1期。43℃时除了细胞周期受抑制外，凋亡细胞明显增加，这可能是由于细胞周期受阻和高温启动了凋亡机制而诱发了细胞凋亡，凋亡的细胞主要为G1期的细胞。45℃以上的高温对HeLa细胞的杀伤失去对周期时相的选择性，均等地杀伤细胞周期各时相的细胞。     

三氧化二砷诱导人肿瘤细胞凋亡和G2＋M期阻滞但引起人永 …

目的　研究 As2 O3引起肿瘤细胞凋亡和对细胞周期的影响。方法　采用 DNA凝胶电泳 ,流式细胞仪分析、RT- PCR和 Western免疫印迹等技术检测细胞凋亡的发生。结果　由 As2 O3诱导的人肺腺癌 GL C- 82、胃腺癌 MGC- 80 3和 SGC- 790 1、食管癌 Ec10 9、宫颈癌 He L a细胞凋亡前 ,细胞阻滞在 G2 M期 ,上述细胞均表现为对c- myc基因的下行调节 ;但在导致永生化人宫颈上皮 HCE16 /3细胞凋亡之前 ,细胞却被阻滞在 G1期 ,对 c- m yc基因表达无影响。结论　 As2 O3引起细胞凋亡与细胞周期阻滞有关 ,在肿瘤细胞和前恶变的 HCE16 /3细胞中阻滞的时期不同 ,这可能与 c- myc基因表达的改变与否有关     

Bcl-2/Bax基因在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时的表达变化

目的观察辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时Bcl-2/Bax变化,探讨Bcl-2/Bax与细胞凋亡之间关系。方法 20μmol/L辛伐他汀处理K562细胞24、48和72h;流式细胞技术检测细胞凋亡率;免疫组织化学法检测细胞色素C,RT-PCR技术检测Bcl-2/Bax基因。结果 20μmol/L辛伐他汀作用K562细胞24、48和72h,细胞凋亡率变化分别是（6.1±0.4）%,（14.2±0.4）%,（30.7±0.6）%;胞浆内细胞色素C显著高于对照组（P〈0.05）;抑凋亡基因Bcl-2显著降低,促凋亡基因Bax显著升高（P〈0.05）。结论辛伐他汀能诱导K562细胞凋亡,Bcl-2/Bax比值降低可能是辛伐他汀诱导K562细胞凋亡机制之一。     

紫杉醇对人绒癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究紫杉醇(Paclitaxel)对绒癌细胞株JEG-3细胞凋亡率和细胞周期的影响.方法 用紫杉醇作用于绒癌细胞株JEG-3细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察紫杉醇对绒癌细胞增殖的影响.通过流式细胞仪分析紫杉醇处理后绒癌细胞凋亡率和细胞周期的改变.结果 紫杉醇对绒癌细胞株JEG-3细胞的增殖具有抑制作用,且随药物浓度的增加和作用时间的延长,抑制作用越明显;紫杉醇对细胞凋亡率和细胞周期均有影响,随药物浓度增加和作用时间的延长,细胞凋亡率增加,G2/M期细胞百分率增加.结论 紫杉醇能有效诱导绒癌JEG-3细胞的凋亡.     

丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡及其机制

目的 研究丁酸钠诱导子宫颈癌细胞株HeLa和原代培养的人胚肺成纤维细胞凋亡情况,建立丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡模型,并探讨其诱导凋亡机制。方法 倒置相差显微镜下观察细胞形态改变;MTT法检测药效动力学特征;流式细胞仪检测药物作用前后细胞凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯状条带,RT-PCR检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2转录水平。结果 丁酸钠抑制细胞生长呈时效和量效关系,其对HeLa细胞的生长抑制作用较对人胚肺成纤维细胞的作用明显;亚G1峰和AnnexinV／PI、DNA Ladder结果显示,丁酸钠作用后HeLa细胞72h后出现的凋亡率显著高于人胚肺成纤维细胞;RT-PCR结果显示丁酸钠作用前后HeLa细胞中凋亡相关基因：Bax和Bcl-2表达水平无明显改变。结论 一定浓度的丁酸钠可以选择性诱导子宫颈癌细胞株HeLa凋亡,而对正常人二倍体细胞毒性较小,并且这种凋亡诱导作用并非通过调控：Bax和Bcl-2的转录水平而实现。     

马鞭草醇提液对绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响

目的　探讨马鞭草醇提液 (ae Vo)对绒毛膜癌 JAR细胞株的影响。方法　 JAR细胞株与人肝癌 SMMC- 772 1细胞株及人胚肺 2倍体成纤维细胞株 (2 BS)体外培养比较 ,应用溴化甲噻唑基四唑 (MTT)法、荧光法测得细胞相对生长曲线及增殖抑制率。结果　 ae Vo对 JAR细胞有明显抑制作用 ,于加药后 4 8h,增殖抑制率为 (71.9± 4 .0 ) %及 (69.6± 2 .0 ) % ,MTT法及荧光法所测结果无明显差异 (P>0 .0 5 )。 ae Vo对 SMMC- 772 1细胞及 2 BS细胞无明显影响。结论　 ae Vo具有抗绒癌作用 ,且作用具有特异性 ,有关机制需进一步研究     

马鞭草醇提液对绒毛膜癌JAR细胞增殖及表皮生长因子受体？…

用溶剂蒸馏法制备了马鞭草醇提液(EV),分别作用于体外培养的绒毛膜癌JAR细胞、人肝癌SMMC-7721细胞及人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)。MTT法及荧光法检测结果表明,EV对JAR细胞增殖有明显抑制作用,两种方法测得抑制率分别为71．9％±4．0％和69．6％±2．0％;同时还测得EV对JAR细胞质中表皮生长因子受体(EGFR)的表达也有明显抑制作用,含25mg／ml和50mg／mlEV的培养液对其抑制率分别为36．7％和80．6％。而EV对SMMC-7721细胞及2BS细胞则无明显影响。EV对体外培养的绒毛膜癌JAR细胞有明显抑制作用,且具有特异性,这一作用可能与抑制EGFR的表达有关。     

RT-PCR及激光共聚焦检测人绒毛和绒癌细胞中AE2的表达

目的 探讨在人正常绒毛细胞和绒癌JAR细胞中阴离子交换蛋白2(AE2,Anion Exchanger2)的表达差异及意义.方法 以RT-PCR技术及免疫荧光激光共聚焦技术检测人正常绒毛滋养细胞和绒毛膜癌细胞株JAR细胞膜上AE2的表达.结果 ①在人绒毛滋养细胞与人绒癌JAR细胞株中,均检测到AE2mRNA的表达.绒癌组AE2的OD值为(0.85±0.21);正常组AE2的OD值分别为(0.19±0.01).绒癌组AE2的OD值明显高于正常组(P<0.05).②免疫荧光激光共聚焦实验证实AE2在绒癌组呈红色阳性表达,在正常组中未见红光,当加强激发强度后,仍可探及AE2在正常组的表达.结论 AE2在绒癌中表达异常升高,可能引起滋养细胞内水电解质平衡紊乱,导致绒癌发生.     

柚皮素- 铜络合物对Hep- G2细胞增殖与凋亡的影响

目的观察柚皮素-铜络合物在体外对人肝癌Hep-G2细胞增殖与凋亡的影响,探究其作用机制。方法将不同浓度柚皮素-铜络合物作用于体外培养的Hep-G2细胞,采用甲基噻唑基四唑法检测细胞生长抑制率;荧光显微镜下观察柚皮素-铜络合物对DAPI染色的Hep-G2细胞凋亡的影响;应用流式细胞仪检测凋亡率;Western blot法检测细胞中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的变化。结果柚皮素-铜络合物可显著地抑制Hep-G2细胞增殖,且在一定的范围内呈浓度依赖性。荧光显微镜下观察显示,柚皮素-铜络合物作用的Hep-G2细胞出现显著的凋亡特征,呈剂量依赖性地增加细胞凋亡率。柚皮素-铜络合物可上调Hep-G2细胞中Bax、Caspase-3蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,且呈一定的剂量依赖性。结论柚皮素-铜络合物可抑制Hep-G2细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与上调Bax、Caspase-3蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达有关。     

浅蓝菌素在诱导骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡过程中对Bcl-2和Bax的影响

目的研究凋亡蛋白Bcl-2、Bax是否参与浅蓝菌素（Cerulenin）诱发骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡信号传导。方法采用Western—blotting检测Cerulenin作用前、后骨肉瘤细胞株U2—OS中凋亡蛋白Bcl-2和Bax表达变化情况,了解不同的Cerulenin剂量和作用时间骨肉瘤细胞株U2-OS中凋亡蛋白Bcl-2和Bax表达变化情况。结果骨肉瘤细胞株U2-OS中Bcl-2和Bax呈阳性表达,Cerulenin作用细胞株后Bcl-2表达量随着浓度增加和作用时间延长而递减,Bax表达量随着浓度增加和作用时间延长而递增。结论Cerulenin可能通过下调Bcl-2的表达和上调Bax的表达而诱导骨肉瘤细胞凋亡。     

大蒜素调节Bcl-2/Bax促进宫颈癌U14细胞凋亡的研究

目的探讨大蒜素对小鼠宫颈癌U14细胞凋亡的影响及作用机制。方法体外培养U14细胞,将细胞分为对照组(不加大蒜素处理组)和大蒜素组(质量浓度分别为5、10和20mg.L-1)。采用四甲基偶氮噻唑蓝法测定大蒜素作用24、48、72h时对U14细胞的增殖抑制率;膜联蛋白A5-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测U14细胞的凋亡率;逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法分别检测U14细胞Bcl-2和Bax mRNA和蛋白的表达水平。结果 5、10和20mg.L-1大蒜素组对U14细胞增殖的抑制率:24h时分别为(6.6±1.41)%、(23.5±2.79)%和(58.9±1.65)%,48h时分别为(25.5±2.89)%、(47.9±8.78)%和(69.5±3.72)%,72h时分别为(58.9±1.66)%、(78.9±1.19)%和(92.6±7.33)%,均显著高于对照组(P<0.05),且细胞增殖抑制率呈浓度和时间依赖性。5、10和20mg.L-1大蒜素组作用24h后,细胞凋亡率分别为(9.22±0.55)%、(22.34±1.53)%和(35.73±1.98)%,与对照组的(3.23±0.35)%比较差异有统计学意义(P<0.05),且呈浓度依赖性。与对照组比较:10、20mg.L-1组Bcl-2mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),而10、20mg.L-1组Bax mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。结论大蒜素可能通过上调Bax表达,下调Bcl-2的表达诱导U14细胞凋亡。     

猫爪草皂苷对结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡影响的研究

目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus ternate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg/mL4个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖的抑制情况;荧光染色观察细胞凋亡;流式细胞仪(FCM)进行细胞周期分析;采用细胞免疫化学检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的变化。结果:与对照组比较,猫爪草皂苷可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,猫爪草皂苷处理组随着浓度的增加和作用时间延长,LoVo细胞增殖的抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.001);荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,对照组和4个猫爪草皂苷不同浓度处理组凋亡率分别为(3.57±1.56)%、(8.14±1.02)%、(11.11±2.30)%、(17.59±0.95)%和(25.10±1.23)%;流式细胞术显示,G1期细胞增加,而停滞在S、G2期细胞减少;细胞免疫化学检测发现,经猫爪草皂苷作用24h后,LoVo...     

莪术油对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:观察中药提取物莪术油(zedoray turmeric oil)对人乳腺癌(human breast cancer)细胞系MCF-7的凋亡诱导作用。方法:用不同浓度的莪术油对体外培养的MCF-7细胞进行干预。分别采用MTT、细胞免疫组织化学染色、流式细胞仪检测等方法,观察其对MCF-7细胞增殖的抑制和凋亡诱导作用,并对凋亡相关Bcl-2与Bax蛋白的表达变化进行定性检测。结果:经不同浓度的莪术油处理后的MCF-7细胞,其生长受到明显的抑制,细胞凋亡指数随药物浓度增加而明显增加;莪术油作用后,细胞中Bax蛋白表达明显高于对照组。结论:一定浓度的莪术油能抑制MCF-7细胞增殖,促进其凋亡;其机制可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。