裸鼠胰腺癌高肝转移模型的建立

目的〓〖HTK〗建立高肝转移率的胰腺癌转移裸鼠模型,为抗胰腺癌肝转移药物的筛选和机理研究提供基础。〖HTW〗方法〓〖HTK〗人胰腺癌MIA-PaCa2细胞株脾内接种形成肝转移病灶,经反复体外原代培养和体内接种后筛选出高转移亚型MIA-PaCa2-3,MIA-PaCa2-3细胞DAPI荧光标记后尾静脉注射建立裸鼠胰腺癌模型,小动物光学分子成像系统动态观察肝脏转移肿瘤的生长变化,荧光显微镜观察肝脏肿瘤细胞转移情况。采用Western-blot的方法比较MIA-PaCa2-3细胞及其源细胞MIA-PaCa2细胞转移部分相关基因的蛋白表达水平。〖HTW〗结果〓〖HTK〗MIA-PaCa2-3细胞尾静脉注射裸鼠6～8周后,裸鼠活体肝脏区域及肝脏冰冻切片均可见明显弥漫性的荧光影像,肝脏转移率为80%（8/10）,明显高于其源细胞MIA-PaCa2（2/10）;MIA-PaCa2-3细胞转移相关基因基质金属蛋白酶2（matrix metallo proteinase-2,MMP-2）、基质金属蛋白酶9（matrix metallo proteinase-9,MMP-9）、血管内皮细胞生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）表达水平明显高于MIA-PaCa2细胞。〖HTW〗结论〓〖HTK〗MIA-PaCa2-3细胞尾静脉注射可建立高肝转移率的裸鼠胰腺癌模型,借助荧光示踪可以简便、可靠地观察肝脏转移肿瘤的生长情况,适于胰腺癌肝转移机制研究和抗肝转移药物的筛选。     

白藜芦醇抑制胰腺癌裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:观察白藜芦醇(Res)对人胰腺癌Miapaca-2(PC-2)细胞构建的胰腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型并随机分组,分别给予3种不同浓度的白藜芦醇干预后处死胰腺癌裸鼠,取出移植瘤,观察其体积、重量的变化情况;HE染色法观察移植瘤组织病理学变化;采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和Western bolt法测定移植瘤组织Bcl-2、Bax、p53蛋白和mRNA表达水平。结果:Res组移植瘤的体积、重量明显低于阴性对照组,随着浓度增加变化越明显(P<0.01);3个浓度组白藜芦醇作用于胰腺癌裸鼠后,移植瘤组织中Bcl-2、Bax、p53蛋白和mRNA表达水平较阴性对照组差异具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增加表达水平的差异越明显。结论:白藜芦醇可能通过调节Bcl-2、Bax、p53的表达来抑制胰腺癌移植瘤的生长。     

蝎毒多肽提取物对小鼠Lewis肺癌生长转移的抑制作用

目的 观察蝎毒多肽提取物(PESV)对Lewis肺癌(LLC)生长及转移的影响并探讨其作用机制.方法 采用30只C57BL/6J小鼠,右腋下接种Lewis肺癌细胞悬液,建立皮下种植瘤模型,随机分为荷瘤对照组、5-FU治疗组、PESV治疗组,连续灌胃给PESV18d,检测肿瘤体积并计算抑瘤率.另取20只C57BL/6J小鼠,尾静脉注射Lewis肺癌细胞悬液,建立Lewis肺癌实验转移模型,随机分为荷瘤对照组和PESV组,连续灌胃给PESV28d,观察肺部转移灶数目并计算转移抑制率;采用免疫组化法和ELISA法分别检测瘤组织及血清中骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达.结果 PESV抑瘤率为46.02%,肺转移抑制率76.19%;与荷瘤对照组相比,瘤组织和血清中OPN和MMP-9的表达明显降低(P<0.05).结论 PESV能抑制小鼠Lewis肺癌的生长与转移,其机制可能与抑制OPN和MMP-9的表达有关.     

AC-88对荷瘤小鼠抑瘤作用和血清生化的影响

目的:探讨AC-88的抗肿瘤作用和它对机体的毒性作用.方法:以移植H 22肝癌细胞和Meth A肉瘤细胞的荷瘤小鼠为实验模型,研究AC-88对肿瘤细胞的抑制作用,并测定其血清生化指标.结果:AC-88的抑瘤率可高达70%以上,而且对动物的肝肾毒性不大.结论:AC-88有良好的抑瘤作用,是一种具有较高开发价值的抗癌药物.     

灵芝孢子粉抑制人肝癌细胞生长的实验研究

目的:研究灵芝孢子粉在体内、体外对人肝癌细胞生长的抑制作用.方法:运用噻唑蓝(MTT)法研究灵芝孢子粉水溶性成分在体外对HepG2细胞的抑制作用,并利用裸小鼠的移植瘤模型研究灵芝孢子粉在体内对HepG2细胞的生长抑制作用.HE染色观察肝癌组织结构和细胞形态改变.结果:灵芝孢子粉对HepG2细胞的IC50值随作用时间增加而减小,72 h达到最低,IC50值为2.14 g/L.灵芝孢子粉为2 g/kg时,对裸小鼠移植瘤的抑制率为57.0%.镜下观察灵芝孢子粉治疗组肿瘤坏死组织较多,细胞异型性较小.结论:高浓度及高剂量的灵芝孢子粉具有抑制肿瘤细胞生长的作用.     

胰腺癌裸鼠原位模型3.0TMRI表现

目的 探讨人胰腺癌裸鼠原位模型种植方法,研究其MRI表现及病理基础,为活体研究胰腺癌奠定基础.方法 采用人胰腺癌BXPC-3细胞对裸鼠进行原位种植,并使用3.0 T MRI成像,包括T1WI、T2WI及增强扫描,结合病理,分析人胰腺癌裸鼠原位模型的MRI表现.结果 18只裸鼠有15只接种成功,接种成功率为83.3％( 15/18).病理学检查符合胰腺高分化实体癌.对15只裸鼠行磁共振成像,肿瘤MR1表现为10只T1WI呈均匀稍低信号(66.7％),5只(33.3％)信号不均,以稍低信号为主;T2 WI呈均匀(26.7％,4/15)或不均匀(73.3％,11/15)稍高信号,增强扫描瘤灶边缘强化较明显,瘤灶轻度强化,坏死部分不强化.结论 3.0 T MRI能够检测出直径≥2 mm的胰腺肿瘤,并能够清晰显示裸鼠原位模型肿瘤的位置、形态、大小及其内部结构,能为胰腺癌进一步活体研究提供可视化平台.     

蜂房提取物对荷瘤鼠放化疗的增效作用

目的:观察蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠的放化疗增效作用.方法:移植H22肝癌的小鼠模型,给予蜂房乙醇提取物与化疗和放疗联合,计算抑瘤率及增效率.结果:蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠放化疗的抑瘤率分别达60.5%和61.2%,增效率分别为33.3%和32.6%.结论:蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠的放化疗均有明显的增效作用.     

蝎毒抗癌多肽对肝癌小鼠免疫功能的影响

观察蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉｉｖｅｎｏｍ,ＡＰＢＭＶ）对肝癌Ｈ２２带癌小鼠ＮＫ细胞活性,外周血白细胞计数,淋巴细胞增殖,迟发型超敏反应和血清溶血数水平的影响。     

Clobenpropit在胰腺癌动物模型中与吉西他滨抗肿瘤的协同作用

目的:探讨Clobenpropit作为一种特定的H_3受体拮抗剂和H_4受体激动剂,在胰腺癌中与吉西他滨共同使用的抗肿瘤作用。方法:通过人胰腺癌细胞株(PANC-1)建立裸鼠模型进行研究,通过尾静脉注射药物,测量肿瘤生长及抑制情况,并最终处死后行进一步研究以评价两种药物对细胞增殖、凋亡的影响。结果:Clobenpropit与吉西他滨联用可显著提高吉西他滨对肿瘤的抑制作用,而单用Clobenpropit的抗肿瘤效果不如单用吉西他滨显著。其联合使用可能是通过抑制细胞迁移、上调钙粘附蛋白E等实现的。结论:Clobenpropit可以增强吉西他滨对胰腺癌细胞的抗肿瘤作用。     

蝎毒对人肝癌细胞Bel-7404凋亡及端粒酶逆转录酶基因的作用

目的观察蝎毒对人肝癌Bel-7404细胞增殖的影响及对端粒酶逆转录酶基因(hTERTmRNA)活性的影响。方法以人肝癌细胞株Bel-7404为研究对象,以不同浓度的蝎毒处理体外培养的人肝癌Bel-7404细胞72 h,以噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制,采用RT-PCR法检测细胞hTERTmRNA的表达情况。结果MTT结果显示蝎毒抑制Bel-7404细胞增殖、诱导细胞凋亡且抑制有浓度依赖性。同时,蝎毒可抑制hTERTmRNA的表达。结论抑制端粒酶逆转录酶基因(hTERTmRNA)表达而抑制端粒酶的活性、诱导细胞凋亡,可能是蝎毒的抗癌细胞机制之一。     

东亚钳蝎蝎毒蛋白的分离纯化

本文用离子交换层析、凝胶过滤等分离纯化技术从东亚钳蝎蝎毒中首次得到１个分子量为２６６２５的蝎毒蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示为一条带，激光扫描纯度为９４％。结果说明，蝎毒成分非常复杂，其广泛的药理学性质可能与此有关。     

东亚钳蝎蝎毒二级提取物XIII－2的钠通道阻滞作用

培养小鼠心肌细胞。用微电极胞内引导快反应心肌细胞动作电位。东亚钳蝎蝎毒二级提取物ＸＩＩＩ－２３μＧ·Ｍｌ－１使心肌细胞动作电位的除极有关参数全部减小，对动作电位时程与发放频率无影响。此效应于洗脱后立即消失。实验性钠通道失活同样使除极有关参数减小。应用钙通道阻滞剂后除极有关参数无改变。结果表明：ＸＩＩＩ－２有单纯钠通道阻滞作用。     

胰体尾癌肝转移的外科治疗

目的 探讨胰体尾癌肝转移的外科治疗方法和预后的影响因素。方法 回顾性分析32例胰体尾癌肝转移病例的，1名床资料。结果 根治性切除组、姑息性切除组和未切除肿瘤组中位生存时间分别为13、8和5个月。结论 积极行手术切除肿瘤是胰体尾癌肝转移患者获得长期生存的惟一途径，术中肝动脉栓塞化疗是治疗肝转移灶的重要方法。     

蝎毒多肽提取物对人卵巢癌SKOV3细胞增殖及血管内皮生长因子、凝血酶敏感蛋白表达的影响

目的 观察蝎毒多肽提取物（简称蝎毒多肽）对人卵巢癌SKOV3细胞增殖及血管内皮生长因子（VEGF）、凝血酶敏感蛋白（TSP-1）表达的影响,进一步探讨蝎毒多肽的抗肿瘤作用机制。方法 MTT法检测蝎毒多肽对SKOV3细胞增殖的影响;免疫细胞化学法及Western boltting测定蝎毒多肽对SKOV3细胞VEGF、TSP-1蛋白表达的影响。结果 蝎毒多肽12.5～200 μg/mL对SKOV3细胞增殖有抑制作用,且呈明显的质量浓度相关性,质量浓度大于50 μg/mL时细胞增殖抑制作用显著（P＜0.01）。随着蝎毒多肽质量浓度的增加,SKOV3细胞TSP-1蛋白表达增加,VEGF蛋白表达下降（P＜0.01）。结论 蝎毒多肽能显著抑制VEGF的表达,促进TSP-1的表达,其抗肿瘤作用机制可能是通过抑制肿瘤细胞增殖、影响肿瘤细胞血管生成过程中关键因子的表达来实现的。     

肿瘤转移相关基因1与抑制基因KISS-1在胰腺癌中的表达及意义

目的研究肿瘤转移相关基因1（metastasis associated 1,MTA1）与抑制基因KISS-1在胰腺癌中的表达,探讨其与病理指标的关系。方法应用免疫组化Envision二步法在36例胰腺癌组织、10例癌旁胰腺组织中检测MTA1与KISS-1蛋白的表达情况。结果 MTA1在胰腺癌组织中的阳性表达率为77.8%（28/36）,显著高于癌旁胰腺组织中的表达[20.0%（2/10）]（P〈0.01）;KISS-1在胰腺癌组织中的阳性表达率为38.9%（14/36）,明显低于癌旁胰腺组织的90.0%（9/10）（P〈0.01）。二者的表达均与患者年龄、性别及肿瘤部位无关（P〉0.05）,而与癌组织的分化程度、淋巴结转移及临床分期有关（P〈0.05）。胰腺癌组织中MTA1与KISS-1的表达呈负相关（r=-0.533,P〈0.01）。结论MTA1和KISS-1与胰腺癌的发生、侵袭以及转移有关,其有望成为胰腺癌诊治的重要生物学指标。