糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白的表达及意义

目的了解糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞Ot一肌动蛋白（actin）的表达及意义。方法利用链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病及糖尿病性勃起功能障碍模型,40只SPF级SD雄性大鼠,先按时间随机分为两组（每组20只）,分别是注射STZ后7周组和4周组,再按处理因素即给予大鼠腹腔注射STZ（60mg／kg）是否成模,分为对照组（未注射STZ,5只）、成糖尿病性勃起功能障碍模型组、成糖尿病性非勃起功能障碍组、未成模组。利用免疫组化SP染色法对不同处理组的标本进行α-肌动蛋白的研究,利用免疫组化SABC染色法对不同处理组的标本进行肌间线蛋白的研究,利用原位杂交技术检测不同组别骨桥蛋白（OPN）mRNA含量的改变。图像分析利用彩色图文分析系统,第三人进行图像分析及数据采集,测量随机每高倍镜视野下累积光密度（IOD）,以IOD的值反映组织切片中相应阳性物质的表达程度。结果糖尿病性勃起功能障碍组IOD均小于对照组、糖尿病非勃起功能障碍组及未成模组（均P〈0．05）,糖尿病非勃起功能障碍组的IOD小于对照组和未成模组（P〈0．05）,不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F＝3．801,P＝0．62）,交互效应不显著（F＝1．549,P=0．225）。免疫组化染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=0．052,P=0．821）,各处理组间的IOD不存在显著性差异（F=0．045,P=0．987）,交互效应不显著（F=0．572,P=0．639）。OPN mRNA原位杂交染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=1．288,P=0．266）,交互效应不显著（F=1．819,P=0．168）,糖尿病性勃起功能障碍组的IOD均大于其余三组（P均〈0．001）。糖尿病非勃起功能障碍组的IOD大于对照组和未成模组（P均〈0．001）。对照组的IOD与未成模组未见显著差异（P=0．873）。结论糖尿病可以引起阴茎海绵体平滑肌的表型转化;阴茎海绵体平滑肌表型转化可以导致勃起功能障碍。     

糖尿病性ED大鼠建模优化

目的 探讨优化建立糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型高成模率的方法.方法 41只8~10周龄雄性SD大鼠,随机分为对照组(n=9)和实验组(n=32),实验组大鼠又分为糖尿病(DM)组和糖尿病未成模组(NDM组).实验组大鼠腹腔注射65 mg/kg的链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),对照组腹腔注射相应剂量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液.注射后第3天(即造模第4天),4、8、12 周全部大鼠尾静脉采血测随机血糖和体重.12周后,应用阿扑吗啡(apomorphin,APO)100 μg/kg全部大鼠皮下注射后观察阴茎勃起情况而筛选出勃起功能障碍(ED)模型.结果 (1)STZ致糖尿病大鼠的一次成模率90.6%(29/32),阿扑吗啡筛选DM组大鼠ED模型的成模率为84.6%(22/26);(2)DM组在注射STZ后各时间点的随机血糖均显著高于NDM组、对照组(P<0.05);同一时间点体重相比较:除造模第4天,其余时间点,DM组体重水平显著低于NDM组、对照组(P<0.05),NDM组与对照组相比无差异(P＞0.05);(3)阴茎质量及睾丸质量比较,DM组显著低于NDM组、对照组(P<0.05).结论 采用各种措施可优化糖尿病ED大鼠模型的建立,12周可作为APO筛选ED模型的最佳时间.     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的建立

目的 探讨利用链脲佐菌素(STZ)建立理想糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型.方法 30只SD大鼠.随机分为5组,分别为对照组、注射STZ 40 mg/kg组、60 mg/kg组、80 mg/kg组、100 mg/kg组,每组6只,分别记录4 d、1周、2周、3周的空腹血糖、阿朴吗啡诱导阴茎的勃起次数及体质量.结果 4个时间点间的空腹血糖有显著性差异(P=0.001),不同STZ注射组别间的空腹血糖、勃起次数及体质量改变存在显著性差异(P<0.001,P=0.045及P<0.001).阿朴吗啡阴茎勃起实验的勃起次数及体质量的改变在4个时间点间不存在显著性差异(P=0.306和P=0.628).结论 最佳成糖尿病模型的STZ注射剂量应为60 mg/kg.筛选糖尿病性勃起功能障碍模型的阿朴吗啡勃起实验筛选时间应定在注射STZ后的2周左右.     

神经生长因子干预对大鼠糖尿病性勃起功能障碍的影响

目的:通过使用神经生长因子(NGF)干预糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠,检测海绵体内压(ICP)和阴茎海绵体组织中含神经型一氧化氮合酶(nNOS)神经纤维的变化,以探讨NGF干预糖尿病性ED的作用机制.方法:将成年雄性SD大鼠分为5组:A组为正常对照组(6只),B组为糖尿病性ED无干预组(15只),C组为糖尿病性ED单用NGF干预组(14只),D组为糖尿病性ED单用胰岛素干预组(12只),E组为糖尿病性ED联用NGF、胰岛素干预组(13只)(胰岛素通过颈部皮下注射给药,NGF通过腹腔内注射给药).采用腹腔注射STZ法制作糖尿病模型,造模8周后从糖尿病大鼠中筛选出合并勃起功能障碍大鼠:B(n=8),C(n=8),D(n=6),E(n=6),经药物干预后8周所有大鼠测ICP,并取阴茎海绵体组织用免疫组化EnVision法观察nNOS神经纤维的变化.结果:与B组相比,C、D、E组ICP水平均显著升高(P＜0.05),其阴茎组织中含nNOS神经纤维水平也显著升高(P＜0.05).结论:给予外源性NGF可能有助于糖尿病性ED局部神经病变减轻和勃起功能改善,NGF在糖尿病性ED的发病中可能具有重要作用.     

糖尿病ED大鼠建模优化

[摘要] 目的 探讨优化建立糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型高成模率的方法。方法 41只8~10周龄雄性SD大鼠,随机分为对照组（n=9）和实验组（n=32）,实验组大鼠又分为糖尿病（DM）组和糖尿病未成模组（NDM组）。实验组大鼠腹腔注射65 mg／kg的链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),对照组腹腔注射相应剂量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。注射后第3天（即造模第4天）,4、8、12 周全部大鼠尾静脉采血测随机血糖和体质量。12周后,应用阿扑吗啡(apomorphin,APO)100μg／kg全部大鼠皮下注射后观察阴茎勃起情况而筛选出ED模型。结果 (1)STZ致糖尿病大鼠的一次成模率90.6%(29／32)。阿扑吗啡筛选DM组大鼠勃起功能障碍（ED）模型的成模率为84.6%(22／26)。(2)DM组在注射STZ后各时间点的随机血糖均显著高于NDM组、正常对照组（P<0.05）;同一时间点体质量相比较：除造模第4天,其余时间点,DM组体质量水平显著低于NDM组、正常对照组（P <0.05）,NDM组与正常对照组相比无差异（P >0.05）。(3)阴茎质量及睾丸质量比较,DM组显著低于NDM组、正常对照组（P <0.05）。结论 采用各种措施可优化糖尿病ED大鼠模型的建立,12周可作为APO筛选ED模型的最佳时间。     

糖尿病性阴茎勃起功能障碍动物模型的建立

目的：探讨糖尿病性阴茎勃起功能障碍动物模型的建立方法。方法：应用雄性SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）制造糖尿病动物模型。饲养8周，16周，再通过观察各组大鼠注射阿朴吗啡（APO）后的阴茎勃起情况来评价其勃起功能。结果：与C组（对照组）相比，D组（糖尿病组）阴茎勃起次数明显降低，C组与STZ组（注射STZ后不成模组）各病程大鼠的阴茎勃起率为100%，且两组的阴茎勃起次数无显性差异。结论：阿朴吗啡诱发大鼠阴茎勃起实验可用于评价糖尿病大鼠的勃起功能。     

勃起功能障碍糖尿病大鼠模型的建立

目的 建立勃起功能显著低于正常水平的糖尿病(DM)大鼠模型.方法 30只10周龄SD雄性大鼠随机分成对照组(n=12)和实验组(n=18).实验组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液60 mg/kg,对照组腹腔注射相应剂量的0.1 M pH4.5枸椽酸钠溶液.注射后3 d,于尾静脉采血测血糖,后每2 wk测血糖1次.STZ注射后10 wk,测定两组大鼠体重和基础阴茎内压(ICP)及神经刺激诱导ICP.结果 (1)一般情况STZ注射后第5 wk有1只大鼠死亡.2只大鼠于第8、10 wk血糖未达糖尿病标准,糖尿病表现不明显,判为STZ抵抗.18只大鼠中DM模型制作成功15只(定为DM组),成功率83.3%;(2)血糖、体重DM组STZ注射后各时间点的血糖水平均显著高于对照组(P＜0.001);STZ注射前DM组和对照组的体重无显著性差异(P＞0.05),而注射后10 wk DM组的体重显著低于对照组(P＜0.001),平均体重较对照组低31.9%;(3)两组大鼠间ICP比较STZ注射后10 wk,DM组的基础ICP和神经刺激诱导ICP分别为8.9±3.5和56.3±15.8 cmH2O,分别显著低于对照组的36.8±11.2和156.3±38.4 cmH2O(P＜0.001),DM组的基础ICP和神经刺激诱导ICP较对照组分别低75.8%和64.0%.结论 以STZ60 mg/kg腹腔注射建立DM大鼠模型操作方便、成功率高,而且所制作的DM大鼠模型阴茎的基础ICP和神经刺激诱导ICP均显著低于正常大鼠,能成为理想的DMED研究的动物模型.     

糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中核因子κB表达的研究

目的:观察糖尿病雄性SD大鼠阴茎海绵体组织中核因子-κB(NF-κB)活性的变化以及分布,探讨糖尿病性勃起功能障碍(ED)发病机制.方法:将成年雄性SD大鼠40只分为3组:A组为正常对照组(10只),B组为糖尿病4周组(14只),C组为糖尿病12周组(16只),采用腹腔注射STZ法制作糖尿病模型.B组大鼠于4周后,A组、C组大鼠于12周后通过注射阿朴吗啡后评价勃起功能,并取阴茎海绵体组织免疫组化EnVision法分析NF-κB的分布与表达,同时采用电泳迁移率变动分析法(EMSA)进行NF-κB活性检测.结果:B组、C组大鼠勃起功能水平较A组显著降低(P＜0.05),其海绵体组织中NF-κB活性显著高于A组(P＜0.05),且NF-κB表达随病程延长呈现逐渐增强趋势;糖尿病性大鼠阴茎海绵体组织中NF-κB主要分布在内皮细胞中,平滑肌细胞和其他细胞中分布较少.结论:糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中NF-κB活性及分布与正常相比有明显差异,且与糖尿病病变程度有密切关系,提示NF-κB在糖尿病性ED发病中可能起重要作用.     

粉防己碱对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响

目的探讨粉防己碱(tetrandrine,Tet)对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响及机制。方法 24只糖尿病性勃起功能障碍(Erectile dysfunction,ED)大鼠随机分为Tet组(n=8)、罂粟碱组(n=8),另选取8只大鼠作为阴性对照组,Tet组和罂粟碱组分别在阴茎海绵体注射Tet和罂粟碱,阴性对照组注射等容量生理盐水,观察各组大鼠阴茎海绵体内压的改变以及环磷酸腺苷(cAMP)的变化,观察各组阴茎勃起次数和勃起率的改变。结果罂粟碱组和Tet组阴茎海绵体内压和cAMP含量明显高于阴性对照组(P<0.05),ED对照组、罂粟碱组和Tet组平均勃起次数和勃起率均明显低于阴性对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 Tet行阴茎海绵体注射可有效松弛阴茎海绵体平滑肌,改善阴茎勃起功能,其机制可能与提高阴茎海绵体内cAMP含量有关。     

糖尿病大鼠血清睾丸酮水平的变化及其与勃起功能障碍的相关研究

目的:探讨糖尿病大鼠血清睾丸酮水平的变化及其在糖尿病性勃起功能障碍发病机制中的作用.方法:应用雄性SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)制造糖尿病动物模型,用胰岛素对糖尿病大鼠进行干预治疗8、16周,通过勃起试验来评价其勃起功能,并用放免法测定血清睾丸酮水平.结果:与健康对照组相比,糖尿病组大鼠(DM组)血清睾丸酮水平明显降低,胰岛素治疗组糖尿病大鼠(DI组)的睾丸酮水平较DM组高.大鼠血清睾丸酮水平与HbA1c呈明显负相关(r=-0.816,P<0.01),而与阴茎勃起次数呈明显正相关(r=0.785,P<0.01).结论:糖尿病大鼠的血清睾丸酮水平降低,血清睾丸酮水平降低可能是糖尿病性勃起功能障碍发病机制的重要环节.     

5型磷酸二酯酶抑制剂对勃起功能障碍大鼠阴茎白膜病变的治疗作用

目的 观察高脂、高胆固醇饮食诱导勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎白膜的变化,明确长期小剂量给予5型磷酸二酯酶抑制剂(PDE-5Ⅰ)他达拉非后的治疗作用,研究白膜组织在阴茎正常勃起过程中的作用及其意义.方法 30只2月龄雄性SD大鼠随机分成3组,每组10只.对照组:喂以正常饮食16周;高脂组:喂以高脂、高胆固醇饮食(正常饮食中加入2%胆固醇+10%猪油)16周;治疗组:在喂以高脂、高胆固醇饮食16周的基础上,从第13周起给予他达拉非2 mg·kg-1·d-1灌胃1个月.各组大鼠经血脂测定后,测定海绵体内压及平均动脉压比值(ICP/MAP)以评估阴茎勃起功能,运用维多利亚蓝-丽春红对阴茎白膜弹力纤维染色,最后对标本进行显微镜图像分析.结果 高脂组勃起功能(ICP/MAP:0.49±0.05)明显低于对照组(0.82±0.06,P<0.01);治疗组大鼠勃起能力(ICP/MAP:0.60±0.02)高于高脂组(P<0.05).高脂组白膜弹力纤维(468±152)明显低于对照组(3292±1123,P<0.01),治疗组白膜弹力纤维(2062±560)高于高脂组(P<0.05).结论 高脂、高胆固醇饮食可诱导大鼠发生ED,大鼠阴茎白膜弹力纤维减少是导致ED的机制之一,PDE-51可以在一定程度上逆转这种变化.     

糖尿病对雄性大鼠性行为学的影响

目的:探讨糖尿病(DM)对SD雄性大鼠性行为学的影响。方法:采用阿普吗啡(APO)阴茎勃起实验和交配实验于造模后第3、9周对正常对照组、DM组、链脲佐菌素(STZ)组大鼠进行性行为学检测。结果:(1)阴茎勃起率:第3周各组均为100%,第9周DM组显著低于正常对照组和STZ组(P<0.01)。阴茎勃起所需时间第3周与第9周DM组均显著长于正常对照组和STZ组(P<0.01),且DM组于第9周较第3周显著延长。(2)插入次数:第3周DM组显著少于正常对照组和STZ组(P<0.01),第9周则不能插入;STZ组与正常对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:DM可严重影响大鼠阴茎勃起所需时间及勃起次数,并可随病程的延长最终导致DM性阴茎勃起功能障碍。     

艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起功能及AGEs影响的研究

目的 研究艾灸对糖尿病(DM)性阴茎勃起功能障碍(ED)的作用及其对阴茎晚期糖基化终产物(AGEs)的影响.方法 以链脲佐菌素(STZ)诱导DM大鼠模型,再以阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验筛选DM性ED大鼠模型,随机分为模型组、艾灸组,另设一正常对照组.艾灸组取肾俞穴、三阴交穴,以麦粒灸施治,观察艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起、血糖、阴茎晚期糖基化终产物(AGEs)的影响.结果 艾灸对DM性ED大鼠血糖有一定的改善作用;能较明显改善其阴茎勃起功能;能改善阴茎中AGEs水平.结论 艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起功能有一定作用,这种作用与艾灸改善血糖及阴茎AGEs水平有一定相关性.     

一氧化氮合酶在大鼠糖尿病性勃起功能障碍中的作用研究

目的:研究一氧化氮合酶(NOS)在糖尿病性勃起功能障碍中的作用。方法:对正常对照组(n=10)、糖尿病组(DM组,n=10)和链脲佐菌素组(STZ组,n=10)大鼠于造模9周后进行阿朴吗啡阴茎勃起实验,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测阴茎组织中一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:DM组大鼠阴茎勃起率较正常对照组及STZ组明显降低(P<0.01),NOS活性亦显著降低(P<0.01),但正常对照组与STZ组之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:糖尿病可引起勃起性功能障碍,NOS活性的下降可能参与了DM时勃起性功能障碍的发生。     

艾灸对糖尿病性ED大鼠血清AGEs影响的研究

目的 研究艾灸对糖尿病(DM)性阴茎勃起功能障碍(ED)血糖及血清晚期糖基化终产物(AGEs)的影响.方法 以链脲佐菌素(STZ)诱导DM大鼠模型,再以阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验筛选DM性ED大鼠模型,随机分为模型组、艾灸组,另设一正常对照组.艾灸组取肾俞、三阴交穴,以麦粒灸施治,观察艾灸对DM性ED大鼠血糖、血清AGEs的影响.结果 艾灸能降低DM性ED大鼠血糖、血清AGEs水平.结论 艾灸能改善DM性ED大鼠血糖及血清AGEs水平,可能是对DM性ED大鼠勃起功能治疗效应的作用机制之一.     

加味桃红四物汤联合凯时治疗糖尿病患者勃起功能障碍的疗效观察

【目的】观察加味桃红四物汤联合凯时(脂化前列腺素E1)治疗糖尿病患者勃起功能障碍的疗效。【方法】采用随机数字表法将66例勃起功能障碍(ED)的糖尿病患者随机分为凯时组30例和凯时+中药组36例。全部患者均予糖尿病教育,饮食控制,口服降糖药和(或)胰岛素控制血糖,凯时组仅给予阴茎海绵体注射治疗,凯时+中药组在凯时组基础上同时服用加味桃红四物汤(桃红四物汤加生黄芪、刺五加)治疗,治疗前后根据国际勃起功能指数表(IIEF-5)由患者进行自我评分。【结果】治疗后2组的IIEF-5量表评分均有显著改善,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.01),且凯时+中药组对IIEF-5量表评分的改善作用显著优于凯时组,治疗后2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】凯时治疗糖尿病患者ED具有良好效果,加味桃红四物汤与凯时具有协同作用。     

2 型糖尿病小鼠不同时间点的病理生理变化

目的 检测不同时间点2 型糖尿病（T2DM）小鼠模型代谢指标、血清胰岛素、心功能等指标,明确T2DM 小鼠模型发生病理改变的时间。方法 雄性8 周C57BL/6 小鼠采用高脂联合链脲佐菌素（STZ）方法复制T2DM 动物模型,在STZ 注射不同时间点,罗氏血糖仪测量小鼠空腹血糖。用Elisa 试剂盒检测小鼠血清胰岛素,应用小动物超声检测小鼠左心室功能。苏木素- 伊红染色及Masson 染色观察心脏大小形态及心肌纤维化情况。结果 STZ 注射1 周后实验组小鼠空腹血糖升高,2 周后出现糖耐量和胰岛素耐量异常;8 周时,清胰岛素异常及左心室舒张功能障碍,并出现左心室肥厚和纤维化;12 周时出现左心室扩张,纤维化加重。结论 STZ 注射2 周小鼠空腹血糖升高,8 周时血清胰岛素降低,并发生左心室肥厚及舒张功能下降,12 周时左心室收缩功能下降,为研究T2DM 的发病机制及干预治疗提供了实验依据。