用^3H—TdR释放法测定小鼠NK细胞的辐射敏感性

用~3H—TdR释放法测定C_(57)BL/6小鼠脾细胞对YAC-1细胞林的NK活性,首次将该法应用于研究NK细胞对γ线的辐射敏感性,得出如下结论:(1)小鼠整体照射后24h脾脏NK活性的D_(37)约为17Gy,D_0约为11Gy;在24～32Gy范围内仍保留着30%的NK活性,存活曲线为反“S”形,验证了NK细胞总体对辐射的相对耐受性。(2)脾细胞离体或整体照射1～2Gy后即刻NK活性均迅速下降,在2～24Gy内,离体和整体照射组的NK活性分别维持在40%～80%和50%,前者高于后者,说明NK细胞对离体照射比对整体照射更不敏感。(3)小鼠整体照射后24h,全脾细胞数在较小剂量(<4Gy)内急剧下降,然后随剂量增大变化平缓。可以推测NK活性的变化与脾细胞总数的改变有一定关系。(4)综合分析本实验结果,可以设想NK细胞本身可能存在着辐射敏感性不同的亚群。(5)用~3H—TdR释放法测定NK细胞的辐射敏感性,自然释放率低,重复性好,可靠易行。     

小剂量全身单次照射对小鼠脾脏空斑形成细胞的刺激作用

用液相单层溶血空斑技术研究了小剂量X线全身照射对小鼠脾脏空斑形成细胞(PFC)的影响。结果表明: Swiss小白鼠受0.025和0.05Gy照射后9小时用绵羊红细胞(SRBC)免疫者,PFC计数分别为对照组的112%和150;C57BL/6纯系小鼠受0.025,0.05、0.075Gy照射后同样免疫者,PFC计数分别为对照的110%,143%和174%。同时用酸性α-乙酸荼酯酝酶细胞化学染色的颗粒分型作为细胞内标志,检查小鼠外周血T淋巴细胞亚组的变化,未发现各剂量组间有显著差异。     

CD4~ T细胞在受照小鼠体内的分裂需要的肽不同于胸腺的选择

目的:探讨不同MHCII类分子结合肽对输注给T细胞缺失小鼠体内的CD4 T细胞分裂的影响。方法:小鼠受到450cGy(137　Cs)照射前或照射后36h静脉输注从不同品系小鼠的淋巴结或脾脏中采集、纯化并标记羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)的T细胞,通过分析小鼠CD4 T细胞荧光强度的直方图来反映其分裂程度。结果:源于B6.PL(Thy1.1 )小鼠的T细胞输注7d后,未受照B6(Thy1.2 )小鼠淋巴结及脾脏的T细胞几乎未出现分裂,而受照小鼠的CD4 和CD8 T细胞同时开始分裂。将BALB/c及B6.PL小鼠的T细胞分别输注给RAG2敲除(RAG2KO)及TCR-βKO…     

大剂量γ射线照射对小鼠免疫系统损伤远期影响的研究

目的 探讨亚致死剂量6Gyγ射线一次性全身照射小鼠免疫细胞对脂多糖刺激反应性的远期影响.方法 将实验小鼠分为假照射组和照射组,假照射组不接受照射,照射组给予6 Gyγ射线照射.照射后10周,分别将假照射组和照射组小鼠按组别腹腔注射脂多糖(20 mg/kg),对照组注射等量的生理盐水.分别于24 h和1 h后取材,进行外周血白细胞计数及CD4、CD8、B220细胞比例检测.取脾脏和胸腺称重,计算脏器指数.冲洗单侧股骨进行有核细胞计数.结果 与假照射刘照组小鼠相比,照射对照组小鼠的CD4细胞比例显著升高(t=2.940,P＜0.05),CD8和B220细胞比例显著下降(t=6.485和4.351,P均＜0.01).照射+脂多糖1h组小鼠的CD4 (t=2.510,P＜0.05)、CD8(t=2.862,P＜0.05)和B220(t=7.074,P＜0.01)细胞比例较假照射+脂多糖1h组小鼠显著降低,差异有统计学意义.与假照射+脂多糖24 h组小鼠相比,照射+脂多糖24 h组小鼠单侧股骨有核细胞计数显著升高,差异有统计学意义(t=2.078,P＜0.05).结论 6 Gyγ射线一次性全身照射后10周,小鼠免疫系统尚未完全恢复;与假照射组相比,在接受脂多糖刺激后照射组小鼠胸腺指数和外周血中CD8和B220细胞比例未见显著变化.辐射对小鼠免疫系统损伤的远期影响有待进一步研究.     

X射线照射诱导小鼠junB基因的表达

目的探讨整体照射和不同剂量X射线离体照射后小鼠脾细胞和白血病细胞junB基因的表达。方法3Gvx射线小鼠全身照射及不同剂量X射线照射离体脾细胞和白血病细胞，提取RNA，Northern杂交，定量分析junB mRNA。结果3Gyx射线全身照射后，小鼠脾细胞junB基因增强明显并迅速，C3H／He小鼠30min达高峰，BALB／c小鼠60min达高峰；不同剂量X射线照射离体脾细胞和白血病细胞后，junB基因也迅速被诱导，30～60min达峰值，240min逐渐降回假照组水平。结论junB基因是一个辐射敏感基因，照射后立即表达，有可能在信号传递中起重要作用。     

X线照射对人离体淋巴细胞亚群的影响

本文以不同剂量(1～25Gy)X线照射15例健康人(年龄21～25)离体外周血淋巴细胞,在照射前和照射后不同培养时间(2、24、48、72小时)测定每毫升培养液中存活的总淋巴细胞数,与绵羊红细胞自发形成花环细胞(ERFC)和活性花环形成细胞(AERFC)、与结合了活性补体受体的绵羊红细胞形成花环的细胞(EACRFC)、与小鼠红细胞自发形成花环的细胞(MERFC);观察照射前后裸细胞群的变化;测定不同淋巴细胞亚群的D_0值,以观察射     

电离辐射对小鼠脾细胞中调节性T细胞及其相关分子表达的影响

目的 观察不同剂量X射线照射后不同时间小鼠脾细胞中调节性T细胞和叉头状转录因子(Foxp3)的表达变化,探讨X射线对调节性T细胞以及相关因子Foxp3的影响。方法 112只雄性ICR小鼠,随机平均分为低剂量(0.075 Gy)组和高剂量(2 Gy)组,用X射线深部治疗机分别进行0.075和2 Gy全身照射,于照射后0、4、8、16、24、48和72 h处死,取脾脏,分别应用流式细胞术和RT-PCR法检测调节性T细胞和Foxp3的表达水平。结果 0.075和2 GyX射线全身照射后,小鼠脾细胞CD4+CD25+Treg 细胞百分比均在照射后8 h达高峰,随后一直保持较高水平,高于照射前水平(2 Gy,在8、16、48、72h时,t=4.65、4.28、3.71、2.88,P<0.05; 0.075 Gy,在8、16、24、72h时,t=8.73、10.55、4.21、4.65,P<0.05)。Foxp3在mRNA水平,0.075 Gy照射后变化不明显,而2 Gy照射后于24 h形成峰值。Foxp3在蛋白质水平,0.075 Gy照射后并未有显著变化;而2 Gy照射后于16 h形成峰值,随后略有下降,但仍保持较高水平。结论 调节性T细胞及相关分子Foxp3的不同变化可能成为高、低剂量X射线诱导不同免疫效应的原因之一。     

低剂量率低水平辐射对机体某些免疫功能的影响

用⁶⁰CoY源, 剂量率0.068mGy/分, 对C57BL/6小鼠进行全身照射, 照射剂量为24.4、48.8,73.2,97.6和122.0mGy.照射后检测小鼠脾脏抗体形成细胞(PFC),胸腺细胞³H-TdR自发掺入率。脾脏及胸腺有核细胞数, 脾细胞酸性α醋酸蒙酯酶(ANAE)染色的变化。结果表明, 当照射荆瑶为24.4mGy时, 胸腺细胞自发掺八率明显增高, 当照射剂量为73.2mGy时, 脾脏PFc明显增加。以上低剂量率小剂量作用下呈现出的机体某些免疫功能的刺激作用, 并非由于调节性T细胞数量的变化所致。讨论了引起不同免疫学多数刺激效应均不同辐射剂量与各参数辐射敏感住之闻的可能关系。     

人外周血γ线离体照射后T、B淋巴细胞的改变

本文主要观察38名健康男性成年受试者,其外周血经γ线离体照射后T、B淋巴细胞的改变。使用的照射剂量分别为2及4Gy,研究结果指出,γ线离体照射后12小时(37℃保温情况下),受试者外周血T淋巴细胞百分数有一定程度的增加,而B淋巴细胞百分数则明显下降。此外,还就照射后人外嗣血T、B淋巴细胞改变的不同报道作了初步讨论.     

大剂量rhG-CSF早期单次给药对60Co γ射线照射小鼠的治疗作用

目的观察大剂量rhG-CSF早期单次给药对60Coγ射线照射小鼠的治疗作用,为细胞因子治疗急性放射病提供实验依据。方法雄性C57小鼠,经8.0Gy60Coγ射线全身照射后于0.5、24h各皮下注射一次不同剂量rhG-CSF(2、1mg/kg和0.5mg/kg),观察致死剂量照射小鼠的30d存活率及平均生存时间。小鼠经6.0Gy60Coγ射线全身照射后,通过不同给药方案及不同剂量rhG-CSF早期干预,观察亚致死剂量照射小鼠的外周血象和骨髓有核细胞数的变化。结果大剂量rhG-CSF早期干预明显提高致死剂量照射小鼠的30d存活率,延长受照射小鼠的平均生存时间。照射后0.5h单次给予大剂量rhG-CSF(1mg/kg)为最佳给药方案。大剂量rhG-CSF早期单次给药可以明显改善6.0Gy照射小鼠外周血中白细胞、红细胞、血小板及骨髓有核细胞的恢复。结论大剂量rhG-CSF早期单次给药对60Coγ射线照射小鼠有良好的治疗作用。