Buerger病中雌激素对血管内皮细胞的作用研究

目的:研究Buerger(血栓闭塞性脉管炎)病患者体内雌激素水平的变化及其对动脉内皮细胞的作用.方法:采用免疫组织化学染色S-P法检测30例男性Buerger病患者动脉血管和30例正常男性动脉血管内皮细胞的ER(雌激素受体)、NF-kappaBP65(基因多显性核转录因子)蛋白、ICAM-1(细胞间粘附分子-1)、VCAM-1(血管内皮细胞粘附分子-1)、CD59(补体调节蛋白)和IgG(抗体)的表达水平.结果:(1)Buerger病患者截肢动脉血管内皮细胞ER、NF-kappa BP65蛋白、ICAM-1、VCAM-1及CD59表达水平均较正常动脉血管内皮细胞显著性增强(P＜0.001);而IgG在Buerger病患者截肢动脉血管内皮细胞膜表达水平却较正常动脉血管内皮显著性减弱(P＜0.001),但IgG在Buerger病患者截肢动脉血管内膜下表达却显著强于正常动脉血管内皮细胞(P＜0.001).(2)从60例动脉血管内皮细胞检测数据提示ER和NF-kappa B蛋白表达呈直线回归关系(B=0.706,P＜0.001);ER和IgG抗体表达是呈直线回归关系(b=-0.594,P＜0.001);CD59和IgG抗体表达是呈直线回归关系(b=-0.547,P＜0.001);ER在动脉血管内皮细胞上的表达和IgG在动脉血管内膜下的表达是呈直线回归关系(b=0.649,P＜0.001).结论:(1)Buerger病患者体内高水平的雌激素导致NF-kappa B的激活,引起ICAM-1和VCAM-1表达增强,加速了动脉内皮细胞的损伤.(2)Buerger病患者血管内皮细胞显著分泌CD59,对由体内高水平雌激素导致增多IgG等抗体引起血管内皮细胞的免疫损伤起到了保护作用.     

复方丹参滴丸、普罗布考对动脉损伤后内膜增殖与血管重塑的影响

目的：探讨复方丹参滴丸、普罗布考对兔髂动脉损伤后内膜增殖、血管重塑及血管内皮生长因子表达的影响。方法：雄性日本大耳白兔40只,随机平均分为对照组、普罗布考组、复方丹参滴丸组和联合组,高脂喂养两周后行髂动脉球囊内皮拉伤术,从术前3d开始对照组予单纯高脂喂养,治疗组分别以普罗布考（1．0g／只·d^-1）、复方丹参滴丸（300mg／只·d^-1）及两药联合灌喂至术后4周,取病变血管行病理形态学观察,免疫组化检测血管内皮生长因子（VEGF）和增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平。结果：与对照组比较,普罗布考组、复方丹参滴丸组增殖内膜面积明显减小（P〈0．05）,普罗布考组内弹力膜包绕面积增大（P〈0．05）;与单独用药组比较,联合组内弹力膜包绕面积明显增大（P〈0．05）,但增殖内膜面积无改变（P〉0．05）;各治疗组VEGF、PCNA表达均较对照组明显减少（P〈0．05）。结论：复方丹参滴丸、普罗布考均可抑制动脉损伤后平滑肌细胞增殖,减轻内膜增生;普罗布考兼有改善血管重塑的作用,两药联合使用可取得改善血管重塑的协同效应,其机制可能与减少VEGF在血管内、中膜的表达水平有关。     

CD34、CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿中的表达及意义

目的研究阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者骨髓CD34^＋细胞比率及外周血粒、红细胞CD59表达阳性率并探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测20例PNH患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中CD34^＋细胞比率及外周血中粒、红细胞CD59表达阳性率。结果PNH患者CD34^＋细胞比率显著低于正常人（P〈0．01）;其中增生减低组CD34^＋细胞比率低于增生活跃、增生明显活跃组（P均〈0．05）,而后两组之间差异无显著性（P〉0．05）。正常人外周血粒、红细胞CD59表达阳性率均〉95％,其中粒细胞CD59表达稳定性较好;PNH患者外周血粒、红细胞CD59表达阳性率与正常对照组相比均显著减低（P〈0．01）;粒细胞CD59在不发、偶发、频发组中表达逐渐减低且差异均有显著性（P〈0．05）,红细胞CD59表达则在三组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论CD34^＋造血干细胞减少可能参与PNH发病;外周血粒、红细胞CD59检测是诊断PNH的特异性及敏感性方法,其中粒细胞CD59缺失程度对判断病情严重与否具参考价值。     

乳腺癌中雌、孕激素受体和p53表达的临床意义

目的：探讨乳腺癌组织中雌激素受体（ER）孕激素受体（PR）和p53的表达与乳腺癌临床分期、腋淋巴结转移和预后的关系。方法：采用链霉菌抗生物素蛋白挝氧化物酶链接法（SP法）检测96例乳腺癌组织和10例乳腺良性增生病变组织中ER、PR和p53的表达，并对不同临床分期和有无腋淋巴结转移乳腺癌组织中ER、PR和p53的阳性表达率进行比较。结果：乳腺癌组织中ER、PR和p53阳性表达率分别为60．4％、62．5％、59．4％，乳腺良性增生病变组织中ER、PR和p53阳性表达率分别为80．0％、80．0％、0，乳腺良性增生病变组织和乳腺癌组织中ER、PR阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05），而p53的阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05）；不同临床分期乳腺癌组织中ER和PR的阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05），随着临床分期的增加，p53的阳性表达率明显升高（P〈0．05）；无腋淋巴结转移者ER和PR的阳性表达率明显高于有腋淋巴结转移者（P〈0．05），p53的阳性表达率明显低于有转移者（P〈0．05）。结论：联合检测乳腺癌组织ER、PR和p53的表达对于判断乳腺癌预后和指导治疗具有临床价值。     

C-erbB-2蛋白在子宫内膜病变中的表达及临床意义

目的研究C-erbB-2蛋白在子宫内膜病变中的表达规律度其在子宫内膜癌的发生、预后评估的临床价值。方法用免疫组化法（S-P）检测增生期、分泌期正常子宫内膜各15例作为对照组。子宫内膜增殖症30例、非典型增生30例、子宫内膜癌高、中、低分化各30例，共150例作为实验组，观察C-erbB-2蛋白及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）在正常子宫内膜及不同内膜病变中的阳性表达。结果C-erbB-2蛋白和ER、PR在子宫内膜增殖症、非典型增生中阳性表达与对照组相比无统计学差异（P〉0．05）。在子宫内膜癌中，C-erbB-2蛋白的阳性表达明显升高，有统计学意义（P〈0．01）；在子宫内膜癌中ER、PR阳性表达降低。与对照组比较有意义。C-erbB-2蛋白阳性表达率与临床分期（P〈0．05）、组织分化程度（P〈0．05）、淋巴转移（P〈0．01）和ER、PR（P〈0．05）有关。结论C-erbB-2蛋白、ER、PR与子宫内膜癌的发生密切相关，C-erbB-2蛋白表达增加、ER及PR表达减少提示子宫内膜病变恶性程度高，且预后不良。     

血管生成素-2在肝癌中的表达及意义

目的探讨血管生成素-2（Ang-2）在晚期原发性肝癌组织和正常肝脏组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学染色SP法检测50例晚期肝癌（HCC）组织切片（其中36例直径〉5cm,14例直径〈5cm;12例伴有区域淋巴结转移,38例无区域淋巴结转移）和20例正常肝脏组织（对照组）中Ang-2抗体的表达水平。结果肿瘤直径〉5cm肝癌组中Ang-2表达均强于直径〈5cm肝癌及对照组（P〈0．05）,肿瘤直径〈5cm肝癌组Ang-2表达强于对照组（P〈0．05）;有区域淋巴结或肝内转移组Ang-2表达强于无转移组（P〈0．05）。结论在肝癌发展中,患者肝脏内Ang-2表达明显增加,其增加的程度与肿瘤生长和侵袭转移密切相关。     

CD105和CD34染色在胃癌组织新生血管检测中的差异及其意义

①目的比较以CD105和CD34为血管内皮细胞标记物在胃癌新生血管研究中的差异，并分析其意义。②方法采用免疫组化SABC法分别对55例新鲜切除的胃癌组织标本进行CD34和CD105染色。并比较其肿瘤的微血管密度（IMD）。③结果CD105染色极易将胃癌组织切片中的新生血管与非新生血管区分开来；而CD34染色切片中非新生血管亦有着色。以CD34为内皮细胞标记物计得的肿瘤内IMD值显著高于CD105组（t=12．08，P〈0．001）；以CD34计数肿瘤远处转移组IMD值与无肿瘤转移组无明显差异（t=0．59，P〉0．05）；而以CD105计数所得肿瘤远处转移组IMD值高于无远处转移组（t=2．58，P〈0．05）。④结论CD105是一种较CD34更好的肿瘤性血管内皮细胞标记物，适用于肿瘤新生血管的研究。     

2型糖尿病微生物感染与颈动脉粥样硬化关系研究

目的 探讨2型糖尿病（DM）患者微生物感染与动脉粥样硬化（AS）的关系。方法 101例2型糖尿病患者和44例正常对照用彩色多普勒检测颈动脉中膜厚度（IMT）及粥样斑块,糖尿病患者分为颈动脉AS组（DMA组）与颈动脉正常组（DMB组）,检测血清抗巨细胞病毒（HCMV）抗体、抗疱疹病毒（HSV）抗体、抗EB病毒（EBV）抗体、抗肺炎衣原体（Cpn）抗体、抗腺病毒（HAV）抗体,高灵敏C反应蛋白（hs—CRP）,血脂、血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）等。结果 （1）DMA组抗HCMV IgG阳性率显著高于DMB组（P〈0．01）和对照组（P＜0．01）;DMB组抗HCMV IgG阳性率也高于时照组（P〈0．05）。DMA组和DMB组抗HSV IgG阳性率显著高于对照组（P＜0．01、P〈0．05）。（2）DMA组血清hs-CRP浓度显著高于DMB组（P〈0．01）和对照组（P＜0．01）,DMB组血清hs—CRP浓度也显著高于对照组（P＜0．01）。（3）AS与hs-CRP（r=0．532,P＜0．05）、抗HCMV IgG（r=0．478,P＜0．05）、HbA1c（r=0．452,P〈0．05）呈显著正相关,与HDL呈显著负相关（r=0．432,P〈0．05）。结论 2型糖尿病更容易发生微生物感染,微生物感染、炎症反应可能参与了糖尿病AS的发生、发展。     

转录因子激活蛋白-1在Buerger’s病中的表达与意义

目的：观察转录因子激活蛋白-1（activator protein-1,AP-1）在Buerger’s病患者腰交感神经元内的表达。方法：收集2011年1月至2012年3月行腰交感神经节切除术的Buerger’s病男性患者腰交感神经节标本,Buerger’s病患者组：23例,对照组：12例。应用免疫组化、RT-PCR、Western blot技术测定对照组腰交感神经节神经元AP-1的表达水平并比较其表达差异。结果：Buerger’s病患者腰交感神经节神经元中AP-1的基因表达（P=0.045 9）、蛋白表达（P=0.028 3）,高于对照组。结论：AP-1在调节Buerger’s病细胞增殖和血管炎症反应中发挥着作用。     

VEGF、bFGF与Graves病甲状腺组织血管形成的相关性研究

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在Graves病（GD）甲状腺组织中的表达及其与血管形成的关系。方法：应用免疫组织化学法检测28例GD甲状腺组织和19例正常甲状腺组织中VEGF、bFGF的表达，抗CD34单克隆抗体显示血管内皮细胞．根据CD34阳性的血管内皮细胞计数测定甲状腺组织内的微血管密度（MVD）。结果：VEGF、bFGF在GD甲状腺组织的表达明显高于在正常甲状腺组织的表达（均P〈0．01），二者的表达与GD甲状腺组织内微血管密度呈正相关（r=0．71，r=0．49，均P〈0．01）；VEGF、bFGF在GD甲状腺组织的表达存在相关性（P〈0．05）。结论：VEGF、bFGF与GD患者甲状腺内血管形成有关。     

米非司酮下调不全流产患者蜕膜雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)表达

 目的  了解不同剂量米非司酮对人工流产术后不全流产残留物中绒毛膜促性腺激素-β(β-human chorionic gonadotrophin,β hCG)及雌激素受体(estrogen receptor ,ER)、孕激素受体(progesterone receptor ,PR)表达的影响。 方法  60例2009年1至9月自愿在复旦大学附属妇产科医院计划生育门诊就诊的早孕人工流产术后不全流产妇女,随机分为4组:A、B、C组术前分别服用米非司酮1 400 mg (100 mg,bid×7d)、700 mg (50 mg,bid×7d) 、350 mg (25 mg,bid×7d),D组为对照组,每组各15例。除D组直接行清宫术,其他组于停药后行清宫术。应用免疫组织化学EnVision法染色,半定量测定残留物中β hCG及ER、PR水平。结果  4组β hCG在绒毛滋养叶细胞胞质的表达差异无统计学意义(P>0.05)。ER、PR在蜕膜上皮细胞和间质细胞核中的表达,实验组较对照组表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。经两两秩和检验(修正α=0.05):ER在蜕膜上皮细胞核中的表达为A组较C、D组明显降低,差异有统计学意义(P <0.05);ER在蜕膜间质细胞核中的表达为A组较其他组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C组较D组表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。PR在蜕膜上皮细胞核中,A、B、C组较D组表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。PR在蜕膜间质细胞核中的表达A组较其他组表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);B组较C、D组表达降低,差异有统计学意义(P <0.05)。结论  不同剂量的米非司酮对人工流产术后不全流产残留物中β-hCG的表达影响不明显。对蜕膜细胞中的ER、PR表达有抑制作用,此抑制作用可能是米非司酮治疗不全流产的作用机制之一。1 400 mg米非司酮治疗效果最显著。     

先天性心脏病术后肺部感染与Th17/Treg细胞的相关性

目的探讨Th17/Treg细胞及其细胞因子在先天性心脏病术后肺部感染患儿中的变化及意义。方法选取先天性心脏病行手术治疗的患儿69例,其中术后发生肺部感染47例为肺部感染组,根据严重指数（PSI）分为轻度感染组、重度感染组,无感染组22例。采用流式细胞分析法检测外周血中 Th17 细胞、Treg 细胞占 CD4+T 细胞的比例,酶联免疫吸附法（ELISA）检测所有研究对象血清白细胞介素（IL）-6、IL-10、IL-17、IL-21、转化生长因子-β（TGF-β）含量,检测凝血指标,并记录患者入院第1天血清C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、红细胞沉降率（ESR）、白细胞（WBC）计数等实验室指标;应用Pearson法分析分析 Th17 细胞与 Treg 细胞的比例与肺部感染指标的相关性;采用logistic回归分析法评估先天性心脏病患者术后肺部感染影响因素。结果与无感染组相比,轻度感染组CD4+Th17细胞比例、Th17/Treg细胞比显著升高（P<0.05）,重度感染组CD4+Th17、CD4+CD25+Treg细胞比例、Th17/Treg细胞比均显著升高（P<0.05）;与轻度感染组相比,重度感染组CD4+Th17、CD4+CD25+Treg细胞比例、Th17/Treg细胞比均显著升高（P<0.05）;与无感染组相比,轻度感染组与重度感染组IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β水平升高 （P<0.05）;与轻度感染组相比,重度感染组IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β水平升高（P<0.05）;Pearson分析显示：CD4+Th17比例与CRP、PCT、BNP呈正相关（r=0.570、0.623、0.515,P＜0.05）;CD4+、CD25+Treg比例与BNP呈正相关（r=0.513,P<0.05）,与CRP、PCT呈一般正相关（r=0.315、0.360,P<0.05）;Th17/Treg比例与CRP、PCT、BNP呈显著正相关（r=0.562、0.613、0.596,P<0.05）。结论Th17/Treg 细胞失衡可能直接参与先天性心脏病术后肺部感染,并与病情发展相关。     

应用高迁移率族蛋白B1与单核细胞上Toll样受体4探索系统性红斑狼疮的病情活动

目的通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及其外周血单核细胞上Toll样受体4(TLR4)的表达,评价其在SLE病情进展中的作用。方法随机选取SLE患者40例,活动期与稳定期各20例,健康对照组20名,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中HMGB1蛋白的表达,采用流式细胞术(FCM)分析外周血单核细胞上TLR4的表达。统计学分析其与SLE临床及实验室指标间的相关性。结果 SLE活动组血清HMGB1表达水平较稳定组SLE和健康对照组明显增高(P<0.05),而SLE稳定组和健康对照组之间血清HMGB1表达水平差异无统计学意义(P>0.05);活动组SLE患者外周血单核细胞TLR4的表达较稳定组SLE和健康对照组相比呈上调趋势,而TLR4的表达模式在SLE稳定组和健康对照组之间差异无统计学意义;血清中HMGB1的表达水平与单核细胞表面TLR4的表达呈正相关。结论血清HMGB1和外周血单核细胞表面TLR4均参与了SLE的病情发展过程,且其在SLE发病机制中可能具有协同作用。     

内质网应激介导的Kupffer细胞源性TNF-α经TNFR/caspase 8途径诱导肝星状细胞凋亡

目的 探讨Kupffer细胞（KCs）内质网应激以及KCs细胞源性肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在肝星状细胞凋亡中的作用。方法 建立大鼠肝纤维化模型,按随机数字表法分为4组,15只/组：对照组：腹腔注射生理盐水（2 mg/kg）;肝纤维化组：腹腔注射40%CCl4溶液（花生油制成,2 mg/kg）;内质网应激组：腹腔注射40% CCl4溶液（2 mg/kg）和衣霉素（1 mg/kg）;KCs封闭组：腹腔注射40% CCl4溶液（2 mg/kg）和衣霉素（1 mg/kg）后,经腹腔注射氯膦酸脂质体（50 mg/kg）。以上4组注射处理均为2次/周,共8周。在动物模型基础上,建立KCs、LX2共培养细胞系,随机分为4组：对照组：分离培养对照组大鼠肝脏KCs,与LX2细胞共培养;肝纤维化组：分离培养肝纤维化组大鼠肝脏KCs,与LX2细胞共培养;ER-stress组：分离培养ER-stress组大鼠肝脏KCs,与LX2细胞共培养;肿瘤坏死因子受体（TNFR）阻断组：在ER-stress大鼠基础上,经门静脉注射anti-rat TNFR mAb（0.35 mg/kg）后,按照分离大鼠肝脏KCs,与LX2细胞共培养,收集细胞和上清液。运用肝功能检测、天狼星红染色、ELISA、免疫荧光、RTPCR,检测各组大鼠肝功能水平、肝纤维化程度、KCs极性、炎症因子表达以及活化肝星状细胞数量。运用ELISA、RT-PCR、Western blot,检测各组细胞极性、炎症因子表达、LX2凋亡程度、TNFR/caspase 8通路蛋白表达。结果 体内实验结果显示,与对照组相比,肝纤维化组的谷氨酸转氨酶（AST）、天冬氨酸转氨酶(ALT)水平、天狼星红染色阳性区域、结蛋白阳性细胞（活化肝星状细胞）数量均显著增多（P<0.05）,CD16阳性细胞、TNF-α表达和mRNA水平显著下降（P<0.05）;与肝纤维化组相比,ER-stress组ALT和AST水平、天狼星红染色阳性区域、结蛋白阳性细胞数量均明显降低（P<0.05）,CD16阳性细胞、TNF-α表达和mRNA水平均明显增多（P<0.05）;与ER-stress组相比,KCs封闭组ALT和AST水平、天狼星红染色阳性区域、结蛋白阳性细胞数量均显著增多（P<0.05）,CD16阳性细胞、TNF-α表达和mRNA水平均显著下降（P<0.05）。体外实验结果显示,与对照组相比,肝纤维化组内TUNEL阳性的LX2细胞、CD16阳性细胞、KCs内TNFR、cleaved-caspase 8、cleaved-caspase 3的表达均明显降低（P<0.05）,但结蛋白阳性的LX2细胞显著增加（P<0.05）;与肝纤维化组相比,ER-stress组内TUNEL阳性的LX2细胞、CD16阳性细胞、KCs内TNFR、cleaved-caspase 8、cleaved-caspase 3的表达均明显增加（P<0.05）,但结蛋白阳性的LX2细胞显著减少（P<0.05）;同时,在阻断TNFR后,与ER-stress组相比,虽然TNFR表达未见明显变化,但下游cleaved-caspase 8、cleaved-caspase 3的表达均显著下降（P<0.05）。结论 KCs内质网应激促进了其M1型极化,并增加了KCs源性TNF-α的表达。KCs源性TNF-α经TNFR/caspase 8途径诱导了肝星状细胞的凋亡。     

腹腔镜行胰体尾切除术患者术后对脾脏中免疫功能及脾脏血液供应的影响

目的:探讨腹腔镜行胰体尾切除术患者术后对脾脏中免疫功能及脾脏血液供应的影响.方法:回顾性分析80例保脾胰体尾切除术患者临床资料,比较开腹胰体尾切除术(对照组)与腹腔镜胰体尾切除术(观察组)后患者免疫功能变化及脾脏血流供应情况.结果:两组患者手术后IgG水平及CD4+、CD8+T细胞分数均低于手术前(P<0.05);观察组术后1d IgG水平明显高于对照组,且CD4+、CD8+T细胞分数低于对照组(P<0.05).两组患者术后均存在动静脉通畅性降低(P<0.05);在术后,观察组患者动静脉通畅性明显高于对照组(P<0.05).术后1月,观察组患者脾脏灌注情况明显优于对照组(P<0.05).结论:腹腔镜胰体尾切除术的短期预后优于开腹组,对患者的免疫功能影响较小.     

食管癌CD34 VEGF表达与CT强化幅度的关系

目的:分析食管癌CD34、VEGF表达与CT强化幅度的关系.方法:采集我院收治的40例食管癌患者和20例健康人群的食管粘膜组织,应用免疫组化的方法检测粘膜组织中CD34和VEGF的蛋白表达水平,并对MVD值进行计数,测量CT增强扫描癌灶的CT强化值,进一步分析各指标之间的关系及其与肿瘤临床分期的关系.结果:与健康对照组相比,患病组组织CD34和VEGF的表达阳性率均较高(P<0.05),且二者的表达呈正相关(r=0.451,P<0.05);食管癌组织中VEGF的表达和MDV均与食管癌的浸润深度、淋巴结转移情况、细胞分化程度和TNM分期相关(P<0.05);食管癌组织中VEGF(r=0.434,P<0.05)和MVD(r=0.463,P<0.05)均与螺旋CT强化幅度呈正相关,差异均具有统计学意义.结论:食管癌组织中CD34和VEGF均呈高表达,并且与CT强化幅度呈正相关,联合检测CD34和VEGF的表达可以作为食管癌的侵袭转移和预后评估的重要指标.     

自然杀伤细胞联合他莫昔芬对乳腺癌细胞的杀伤作用及其机制

目的：通过体外实验观察自然杀伤细胞（NK细胞）联合他莫昔芬（TAM）对乳腺癌细胞（BCC）的协同杀伤作用,初步探讨其作用机制。方法：选用3种受体表达程度不同的BCC,设置空白对照组及TAM各浓度/时间梯度实验组,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,并确定最终实验浓度为5 μmol·L^-1。设自然释放组、最大释放组、TAM组、NK细胞组和联合实验组（BCC+NK细胞+TAM）,钙黄绿素-AM释放法观察不同效靶比下两者的联合杀伤作用。设空白对照组（NK细胞）、NK细胞+TAM组、NK细胞+BCC组和联合实验组,ELISA法检测各组NK细胞中TNF-α和IFN-γ水平。设空白对照组（NK细胞）、NK细胞+TAM组、NK细胞+BCC组和联合实验组,流式分析法分别检测NK活化性受体（NKp46）、NK抑制性受体（CD158a、CD158b、CD158b2和CD158e）表达水平。设空白对照组（BCC）、BCC+TAM组、BCC+NK细胞组和联合实验组,流式细胞术检测各组细胞中活化性配体（MICA、ULBP1和ULBP2）的表达水平。结果：MTT法检测,TAM对3种BCC的增殖抑制率具有明显的时间和浓度依赖性（P<0.05）。钙黄绿素-AM释放法检测,随着效靶比的增加,与NK细胞组比较TAM组BCC杀伤率明显升高（P<0.01）,且联合组杀伤率明显高于NK细胞组和TAM组（P<0.05）。ELISA法检测,与空白对照组比较,各实验组无论有无BCC存在,NK细胞中分泌TFN-α和IFN-γ水平均升高（P<0.05或P<0.01）,且与TAM联合后TFN-α和IFN-γ水平明显升高（P<0.05）。流式细胞术检测,与空白对照组比较,各实验组NK细胞中NKp46表达水平均升高（P<0.05）;各实验组NK细胞中CD158a、CD158b、CD158b2和CD158e表达水平均明显下降（P<0.05）;各实验组BCC中MICA、ULBP1和ULBP2表达水平均明显升高（P<0.05）。结论：NK细胞与TAM联合体外杀伤BCC具有协同作用,其协同作用机制可能为TAM能够通过促进NK细胞分泌 TNF-α和IFN-γ而增强其杀伤能力;通过增加NK细胞活化性受体和活化性配体表达水平、降低NK细胞抑制性受体表达水平,进而增加NK细胞的杀伤能力。     

传染性单核细胞增多症患儿早期危险因素的识别

目的检测EB病毒感染的传染性单核细胞增多症（infectious mononucleosis,IM）患儿外周血淋巴细胞亚群、免疫球蛋白定量、乳酸脱氢酶（LDH）及乳酸（LAC）的表达变化并分析其临床意义。方法选取90例感染EB病毒致IM患儿作为回顾研究对象,IM患儿常规抗病毒支持治疗不能控制或合并较重并发症44例作为观察组,IM患儿常规抗病毒支持治疗病情顺利缓解46例作为对照组。入院后第1~2天检测患儿外周血淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD19+、NK细胞）、免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、LDH及LAC水平。结果与对照组比较,观察组患儿外周血CD3+、CD8+、LDH表达升高,CD4+、NK细胞表达降低（P<0.05~P<0.01）;2组CD3-CD19+、LAC、IgG、IgA和IgM表达差异均无统计学意义（P>0.05）。结论关注IM患儿外周血淋巴细胞亚群,尤其是CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞以及LDH的表达,有助于早期识别IM患儿病情的严重程度,指导积极合理治疗,避免错过最佳治疗时机。     

ZBTB20在SLE患者外周血B细胞中的表达和临床意义

目的 研究锌指和BTB结构域蛋白20 (ZBTB20)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血B细胞中的表达,并探讨ZBTB20在SLE中的临床意义.方法 采用RT-PCR技术检测36例SLE患者(SLE组)和30例健康对照者(对照组)外周血CD19+B细胞中ZBTB20 mRNA的表达水平;Western blot检测分析外周血ZBTB20蛋白水平;流式细胞术检测B细胞亚群所占比例.分析SLE患者B细胞中ZBTB20 mRNA的表达与B细胞亚群比例变化的关系及与临床指标(抗ds-DNA抗体、抗核抗体、免疫球蛋白IgG、抗ENA抗体)的相关性.结果 SLE组外周血CD19+B细胞中ZBTB20 mRNA的表达明显高于对照组(P＜0.05);SLE组患者外周血ZBTB20蛋白水平高于对照组(P＜0.05).与对照组相比,SLE患者外周血B细胞亚群,CD19+B细胞比例降低(P＜0.05),CD19-CD138+浆细胞/CD19+B细胞之间的比值及CD19-CD138+浆细胞比例明显增高(P＜0.05);SLE患者B细胞中ZBTB20 mRNA的表达水平与CD19-CD138+浆细胞/CD19+B细胞的比值呈正相关(P＜0.05);ZBTB20 mRNA与抗ds-DNA抗体、免疫球蛋白IgG、抗核抗体、抗ENA抗体均呈正相关(P＜0.05).结论 ZBTB20可能通过促进B细胞分化从而参与SLE发病.     

IGF-1受体和雌激素受体在胚胎移植失败患者子宫内膜中的表达及其与子宫内膜容受性的关系

目的 探讨胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）、雌激素受体（ER）在胚胎移植失败患者子宫内膜中的表达及其与子宫内膜容受性的关系。方法 选取2015年9月至2018年7月于首都医科大学附属北京妇产医院生殖中心就诊,且胚胎移植3次均失败的86例患者为研究对象（观察组）,同时期选取首次冷冻胚胎移植获得临床妊娠的73例患者作为对照（对照组）。采用qRT-PCR法检测患者子宫内膜IGF-1R、ER mRNA表达水平;采用扫描电镜观察子宫内膜胞饮突发育状况,记录发育完全的胞饮突数目;采用Pearson法分析IGF-1R、ER与发育完全胞饮突数量的相关性。结果 两组促性腺激素（Gn）用量、Gn使用天数、基础卵泡刺激素（FSH）、获卵数、移植日内膜厚度、移植胚胎数目、移植优质胚胎数目、受精率比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;观察组子宫内膜IGF-1R、ER mRNA水平低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。对照组子宫内膜胞饮突发育完全例数较多,观察组胞饮突发育中/退化例数较多;观察组子宫内膜胞饮突完全发育数目低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。IGF-1R、ER与完全发育的胞饮突数量均呈正相关（r=0.699、0.650,P均<0.05）。结论 IGF-1R、ER表达水平与胚胎移植失败患者子宫内膜容受性有密切联系。