长链非编码RNA在肿瘤发生发展中作用机制的研究

最新研究发现真核细胞基因组中不仅编码序列能够参与生命活动,非编码序列同样在生理进程中发挥重要作用。Cheetham等[1]利用全基因组关联分析技术（genome-wide association study,GWAS）共筛选出301个癌症相关的基因位点,发现这些位点大部分（84%）位于非编码序列中,这些位于非编码序列中的位点大部分通过转录为RNAs（non-coding RNA, ncRNA）发挥作用。     

长链非编码RNA在甲状腺癌中的研究进展

甲状腺癌是近年来发病率快速增长的内分泌肿瘤。人类恶性肿瘤与环境因素密切相关,环境改变可诱导机体内某些致病基因发生变化,从而促进了疾病的发生。在对人类的基因转录组的研究过程中,发现了一类长度超过200个核苷酸的非编码RNA,即长链非编码RNA（LncRNAs）,其通过调节基因表达参与细胞分化、增殖、凋亡、迁移和侵袭等肿瘤的发生发展。越来越多的研究发现LncRNAs与甲状腺癌关系密切,许多LncRNAs对甲状腺有致癌或抑癌作用,但其具体功能和作用机制尚不明确。笔者对LncRNAs在甲状腺癌中的最新研究进展进行综述,为探讨LncRNAs在甲状腺癌中的作用机制及其临床应用价值提供依据。     

长链非编码RNA在非酒精性脂肪性肝病中作用机制的研究进展

随着肥胖和糖尿病的高发,非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）现已成为我国常见的慢性肝病之一,严重危害人民健康。在NAFLD的发生发展过程中,细胞中各种物质代谢失调是重要原因。长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）可调控多种基因表达进而影响细胞内物质代谢,参与NAFLD的发生发展。作者综述了lncRNA在NAFLD中作用机制的研究进展。     

长链非编码RNA在癌症诊断中的应用

人类基因组中蛋白质非编码基因占大多数,这些非编码基因与癌症的发生、发展有密切联系。非编码基因转录形成的RNA称作非编码RNA。其中的长链非编码RNA(long non coding RNA,lncRNA)具有重要的基因调控功能并由此受到重视。由于部分lncRNA在各类型的癌症中表达异常,因此可以作为癌症的标志物用以诊断癌症。本文对lncRNA的分类、基因调控机制以及在癌症中的作用进行介绍,并对现有的以及部分潜在的癌症标志物lncRNA进行详细阐述。随着基因测序技术及微阵列技术的发展,更多的lncRNA会被发现并且能够成为重要的诊断肿瘤的标志物。     

长链非编码RNA在动脉粥样硬化“损伤-应答”中的作用机制研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类序列长度大于200 bp的非蛋白编码RNA,通过调节前转录、转录、翻译及翻译后修饰而调控生物的表观遗传性状。动脉粥样硬化是因大、中动脉发生粥样病变而逐渐狭窄、闭塞,从而使靶器官出现缺血缺氧的血管病变。动脉粥样硬化的始动、进展机制可概括为“损伤-应答”学说,涉及脂质沉积、血管内膜炎症、细胞增殖与凋亡过程。有研究报道,lncRNA可通过调控不同的基因及分子表达来调控“损伤-应答”的发生发展。本文针对lncRNA调控“损伤-应答”的机制进行综述,旨在为相关的基础研究及临床诊疗提供参考。     

电离辐射损伤相关长链非编码RNA研究进展

长链非编码RNA（lncRNAs）是一类新的功能分子,可通过影响基因转录、蛋白质翻译以及蛋白质稳定性等方式调节下游靶基因,在生长发育、免疫应答、代谢调控以及肿瘤形成等生物学事件中发挥重要作用。已有研究表明lncRNAs可以通过电离辐射诱导表达,并参与细胞对电离辐射的应答反应以及细胞损伤修复过程。通过对电离辐射相关lncRNAs的研究有助于加深对电离辐射损伤应答机制的认识和了解。笔者对lncRNAs的结构功能、调控靶基因方式以及对电离辐射相关lncRNAs的功能和作用方式进行综述。     

长链非编码RNA H19与肿瘤耐药的相关性研究进展

长链非编码RNA (LncRNA)是一类由于缺乏开放阅读框而丧失蛋白编码能力的RNA序列,临床上与多种疾病的发生相关,大量研究表明LncRNA在肿瘤耐药过程中起着关键调控的作用,已经证实相关LncRNA如H19的异常表达与肿瘤的耐药有关,因此,LncRNA与肿瘤耐药的相关性研究意义重大。本文就LncRNA介导肿瘤耐药过程的发生机制及LncRNA H19与肿瘤耐药中的相关研究进展进行综述。     

长链非编码RNA CAF调节阿霉素诱导的心肌细胞毒性机制的研究

目的阿霉素（doxorubicin,DOX）作为化疗药物广泛用于治疗各种肿瘤。然而,限制其临床应用的主要因素是心脏毒性,调节DOX诱导的心脏毒性的分子组分和详细机制仍然在很大程度上不明。本研究旨在探索长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)调节DOX诱导的心肌细胞毒性机制。方法采用高通量lncRNAs基因芯片研究与对照组样品相比较,2 μmol/L DOX诱导的细胞样品中的lncRNA的差异性表达谱。同时采用实时荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）方法对差异表达的lncRNA分子进行验证。6只健康纯种雄性8周龄小鼠,通过DOX注射制作心脏毒性模型小鼠（模型组）;6只健康C57BL/6J小鼠饲以基础饲料为对照组;小鼠原代心肌细胞根据转染情况分为阴性对照组,心肌细胞凋亡因子（cardiac apoptosis factor,CAF）组和CAF siRNA组。通过荧光定量PCR测定模型组与对照组小鼠MIEF1基因的表达。通过合成lncRNA的小干扰RNA作为反向对照抑制MIEF1在小鼠原代心肌细胞中的表达,应用实时荧光定量PCR验证MIEF1表达情况。结果①对lncRNA基因芯片结果进行差异性分析,实时定量PCR检测结果显示,与正常组相比较,DOX处理组中被命名为CAF的lncRNA表达显著上调（n=4;t=7.79,P<0.01）。②DOX诱导的小鼠心肌细胞毒性模型造模成功。荧光定量PCR显示,与空白对照组相比,模型组MIEF1 mRNA的表达量明显降低（n=3;t=14.978,P<0.01）;不同浓度DOX处理细胞24 h 后,DOX浓度越高,MIEF1 mRNA的表达量显著降低（n=4;t2 μmol/L=33.423,P<0.01;t4 μmol/L=36.120,P<0.01;t6 μmol/L=40.205,P<0.01）。CAF siRNA组MIEF1下调（n=4;t=12.909,P<0.01）,CAF组上调（n=4;t=33.634,P<0.01）。③蛋白印迹法显示CAF组MIEF1蛋白表达水平明显低于阴性对照组（n=4;P<0.01）,然而CAF siRNA组MIEF1蛋白表达水平高于阴性对照组（n=4;t=4.892,P<0.01）。结论LncRNA CAF在心脏细胞和小鼠的心脏响应DOX的治疗下调。用DOX治疗后MIEF1的表达水平显著降低。LncRNA CAF直接靶向 51 kDa的MIEF1,并抑制其在转录水平的表达。本研究确定了一种由lncRNA CAF和MIEF1组成的新途径,其介导DOX心脏毒性,为治疗心脏保护提供了有希望的治疗策略。     

长链非编码RNA肿瘤抑制因子对阿霉素诱导的A549细胞凋亡的影响

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)对阿霉素（doxorubicin,DOX）诱导的肺癌细胞系A549细胞凋亡的影响。方法 采用高通量lncRNAs基因芯片技术,筛选出2 μmol/L的DOX处理组中差异表达的lncRNAs,同时通过实时荧光定量PCR技术进行复筛,得到差异表达最显著的lncRNA,lnc-ZMYM6-2-1,我们命名为lncRNA肿瘤抑制因子（tumor inhibitory factor,TIF）。进一步比较19对肺癌组织和癌旁组织样本中lncRNA TIF的表达差异。通过MitoTracker线粒体染色法检测lncRNA TIF对细胞线粒体分裂与融合的影响,通过流式细胞仪检测lncRNA TIF对细胞凋亡的影响。结果 ①通过基因芯片与实时荧光定量PCR检测发现,与不做处理的对照组相比,DOX处理组中lncRNA TIF表达显著上调（n=3;t=6.4,P<0.01）;②与癌旁组织比较lncRNA TIF在肺癌组织样本中低表达（n=19;t=18.5,P<0.01）;③敲低lncRNA TIF能够抑制DOX引起的线粒体分裂和细胞凋亡。结论 化疗药物DOX能够诱导lncRNA TIF的表达进而诱导细胞凋亡,其机制可能通过促进线粒体分裂来促进细胞凋亡。     

前列腺癌中非编码RNA与雄激素受体信号间调控的研究进展

雄激素受体（androgen receptor,AR）及其下游信号在前列腺癌的发生发展中发挥着关键性的作用。微小RNA（microRNA,miRNA）和长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）等非编码RNA不仅影响AR信号的调控网络,而且参与前列腺癌的发展进程。作者重点就前列腺癌中miRNA、lncRNA与AR信号间调控网络的研究进展进行综述。     

长链非编码RNA双特异性磷酸酶5假基因1对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的作用

目的 探讨长链非编码RNA （long non-coding RNA,lncRNA）双特异性磷酸酶5假基因1（dual-specificity phosphatase 5 pseudogene 1,DUSP5P1）对三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer,TNBC）细胞生物学行为的作用。方法 采用实时荧光定量PCR法检测TNBC细胞系MDA-MB-231、4T1、MDA-MB-468及正常人乳腺导管上皮细胞MCF-10A中lncRNA DUSP5P1的表达水平;将MDA-MB-231细胞系分为对照组、sh-vector组和sh-DUSP5P1组,分别不感染慢病毒、只感染空载质粒及感染sh-DUSP5P1-慢病毒（lentivirus,lenti）。采用MTT实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western Blot实验检测上皮标志物E-cadherin和间质标志物Vimentin、Snail的表达。结果 TNBC细胞系MDA-MB-231、4T1及MDA-MB-468中lncRNA DUSP5P1的表达水平均明显高于正常人乳腺导管上皮细胞系MCF-10A（F=65.10,P<0.05）。细胞培养12、24、48、72 h后,sh-DUSP5P1组吸光度值（OD490值）明显低于对照组和sh-vector组（分别F=33.62,90.72,41.17,77.94;均P<0.05）。细胞培养7 d后,与对照组和sh-vector组比较,sh-DUSP5P1组克隆形成数明显下降（F=575.1,P<0.05）。敲减DUSP5P1后,TNBC细胞系MDA-MB-231侵袭和迁移能力明显下降（分别F=933.30,160.20;均P<0.05）,上皮标志物E-cadherin明显上升（F=6.21,P<0.05）,间质标志物Vimentin和Snail明显下降（分别F=100.11,227.37;均P<0.05）。结论 LncRNA DUSP5P1可能通过上皮间质转化过程促进TNBC细胞侵袭和迁移。     

非编码RNA调控动脉粥样硬化发生的研究进展

动脉粥样硬化是一种严重危害人类健康的心血管疾病,动脉粥样硬化的发生与很多因素有关。近年来研究发现非编码RNA在动脉粥样硬化发生过程中发挥重要的调控作用,其中主要包括微小RNA、长链非编码RNA和环状RNA。非编码RNA主要通过引起血管内皮细胞或巨噬细胞的分化、迁移以及凋亡等过程调控动脉粥样硬化的发生。作者总结了微小RNA、长链非编码RNA和环状RNA的一些基本特征以及近几年关于它们调控动脉粥样硬化发生的研究进展。     

创伤后长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1对机体调控机制的研究进展

创伤状态下机体处于一种十分复杂的病理生理状态,包括缺血缺氧,感染、组织坏死引起的炎症,以及代谢废物堆积等.转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)参与调控多种细胞行为,如增殖、凋亡、分化、迁移、上皮-间充质转化、自噬和形态维持等.在创伤状态下,MALAT1表达明显增高,在不同的损伤模型中,MALAT1的作用略有区别,具体...     

长链非编码RNA ZFAS1在食管癌中的表达及作用机制研究

目的探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1（zinc finger antisense 1,ZFAS1）在食管癌中的表达及作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法分别检测癌旁组织和食管癌组织、正常食管上皮细胞和食管癌细胞的ZFAS1表达水平,通过细胞增殖活性检测、细胞划痕实验及流式细胞仪检测细胞凋亡技术,评价干扰食管癌细胞表达ZFAS1对细胞增殖、迁移及凋亡的影响,采用荧光素酶报告基因验证微小RNA（microRNA,miRNA）miR-302b-3p是ZFAS1的作用靶点,Western蛋白印迹法检测ZFAS1及miR-302b-3p作用下c-Jun氨基末端激酶2（c-Jun N-terminal kinase 2,JNK2）、胰岛素样生长因子1受体（insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R）、白细胞介素-1受体相关激酶4（interleukin-1 receptor-associated kinase 4,IRAK-4）和上皮细胞激酶（epithelial cell kinase 2,EphA2）蛋白的表达变化。结果与癌旁组织相比,食管癌组织表达ZFAS1水平升高（t=19.40,P<0.001）,与正常食管上皮细胞相比,食管癌细胞表达ZFAS1水平增加（t=13.80,P<0.001）,通过抑制细胞表达ZFAS1发现,与NC干扰组相比,显著降低ZFAS1干扰组细胞增殖活性（t值分别=2.933,8.568,10.04,均P<0.05,）及迁移能力（t=13.96,P<0.001）,且细胞凋亡率升高（t=10.68,P<0.001）。ZFAS1可通过靶向miR-302b-3p调节JNK2、IGF-1R、IRAK4和EphA2蛋白的表达。结论ZFAS1在食管癌组织中表达显著增加,具有促进食管癌细胞增殖、迁移,抑制凋亡的能力,且ZFAS1可通过靶向miR-302b-3p激活JNK2、IGF-1R、IRAK4和EphA2,有望成为治疗食管癌的潜在靶点。     

长链非编码RNA linc00152在急性肾衰大鼠肾组织中表达及影响

目的探讨急性肾衰大鼠肾组织中长链非编码RNA linc00152的表达情况及其对急性肾衰的影响。方法选取雄性SD大鼠72只,采用随机数字表法分为对照组(n=6)与模型组(n=66)。模型组建立庆大霉素诱导的急性肾衰大鼠模型,对照组注射同体积生理盐水。采用实时定量聚合酶链式反应(PCR)法检测对照组及分别于第1、3、7、14、21天自模型组选取的6只大鼠肾组织中血清尿素氮、肌酐、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶含量以及linc00152的表达、分布情况。将剩余36只模型组大鼠分为生理盐水组(n=12)、1 mg/kg siRNA组(n=12)及2 mg/kg siRNA组(n=12)。1 mg/kg siRNA组与2 mg/kg siRNA组分别尾静脉注射1 mg/kg、2 mg/kg linc00152-siRNA以达到活体水平阻断linc00152表达的目的,生理盐水组注射等体积生理盐水,分别于阻断后24、72 h检测linc00152表达水平、血清生化指标及尿液成分。结果模型组第1天血清尿素氮、肌酐、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶含量显著上升,第3天继续上升,第7天达到峰值,第21天基本恢复至正常水平。正常大鼠肾组织中linc00152主要表达于皮质;模型组linc00152表达在皮质和髓质中均为第1天显著上升,第3天继续上升,第7天达到峰值,第21天基本恢复至正常水平,其中,皮质中linc00152水平变化幅度更明显。1 mg/kg、2 mg/kg linc00152-siRNA干预后24 h,急性肾衰大鼠肾皮质中linc00152表达水平分别下降约40%、70%;1 mg/kg、2 mg/kg linc00152-siRNA干预后72 h,急性肾衰大鼠肾皮质中linc00152表达水平分别下降约50%、80%。1 mg/kg、2 mg/kg linc00152-siRNA干预后24、72 h,急性肾衰大鼠血清总蛋白、白蛋白、尿素氮、肌酐、K~+、尿蛋白及尿酮体水平均较生理盐水组显著降低,Na~+水平均较生理盐水组显著升高,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);2 mg/kg linc00152-siRNA干预后24、72 h,急性肾衰大鼠血清总蛋白、白蛋白、尿素氮、肌酐、K~+、尿蛋白及尿酮体水平较1 mg/kg siRNA组显著降低,Na~+水平较1 mg/kg siRNA组显著升高,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 linc00152在庆大霉素诱导的急性肾衰大鼠的肾组织中表达显著增加,活体水平阻断linc00152的表达对急性肾损伤有防治作用。