大鼠慢性脑缺血后Chat表达特征及丁基苯酞的影响

目的 研究大鼠慢性脑缺血后大脑皮质和海马中胆碱乙酰基转移酶(Chat)表达特征及丁基苯酞(dl-butyphthalide,NBP)的影响.方法 健康wistar大鼠60只,雌雄不拘,随机分为4组,每组15只.A组:对照组(假手术 溶剂);B组:单纯缺血组(手术 溶剂);C组:缺血低剂量治疗组(手术 低剂量NBP 溶剂);D组:缺血高剂量治疗组(手术 高剂量NBP 溶剂).对照组除不结扎双侧颈总动脉外,其他的处理同模型组.C组和D组造模2月后分别按60mg/kg、120 mg/kg给予丁基苯酞每日灌胃,丁基苯酞用花生油稀释至2ml,A组和B组每日给予花生油2ml,各组皆连续灌胃一个月,用免疫组织化学SABC法在光镜下观察各组皮层和海马chat的表达.结果 B组皮质和海马chat表达与A组相比明显减少.C组、D组和B组相比chat表达增多,D组和C组相比chat表达明显增多,差异有统计学意义.结论 慢性脑缺血后大鼠皮层和海马chat表达减少,丁基苯酞通过对慢性脑缺血大鼠神经细胞凋亡有明显的抑制作用使chat表达增多.     

丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠海马区NO表达的影响

目的研究丁基苯肽对慢性脑缺血大鼠海马区一氧化氮（NO）表达的影响。方法 80只大鼠随机分为假手术组、模型组、预处理组、处理组。根据硝酸还原酶法和β-NADPH组织化学染色法,又将每个小组分为两个亚组。模型组、预处理组和处理组利用双侧颈总动脉永久结扎术制备动物模型,假手术组不结扎双侧颈总动脉。预处理组在造模前及造模后均给予丁基苯酞,处理组在造模后给予丁基苯酞,假手术组和模型组在造模后给予同等剂量的生理盐水,4组分别在造模后1个月处死大鼠取材。用硝酸还原酶特异性还原NO产物的方法测定大鼠前脑缺血模型中海马NO释放量的异常变化。β-NAD-PH组织化学染色显示一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元,光镜下观察。结果模型组、预处理组及处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目与假手术组相比均有明显增加。与模型组相比,预处理组和处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目减少。与处理组相比,预处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目减少更明显。结论慢性脑缺血缺氧能使大鼠海马区NO含量明显增加,丁基苯肽（NBP）能减轻这种变化。     

丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中NMDA受体亚单位NR2B及突触素表达的影响

目的 观察丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚单位(NR2B)及突触素表达的影响.方法 采用免疫组化方法观察丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中NR2B及突触素表达的影响.结果 B组与A组比较,海马CA1区、CA3区及齿状回NR2B及突触素的表达明显减少(P＜0.05),C、D组大鼠海马各区NR2B及突触素的表达与单纯缺血组比较均不同程度增加(P＜0.05);D组与C组比较,NR2B及突触素的表达增加更明显(P＜0.05).结论 慢性缺血3个月后,大鼠海马CA1区、CA3区及齿状回中NR2B 及突触素的表达明显减少,而丁基苯酞能改善这种缺血改变,增加NR2B 及突触素的表达.     

慢性间断性缺氧后一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的表达及维生素E和左旋丁基苯酞对其影响

目的 研究慢性间断性缺氧后一氧化氮 (NO)和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)在皮层和海马的表达及不同剂量维生素E(VitE)和左旋丁基苯酞 (L NBP)对其影响。方法 将 6 0只SD大鼠随机分成 6组 ,建立慢性间断性缺氧模型 ,并给予大、小剂量L NBP和VitE。其中 ,大剂量VitE和L NBP的剂量为 5 0mg/kg。小剂量VitE和L NBP的剂量为 2 5mg/kg。用免疫组织化学方法和生化方法分别检测皮层iNOS的表达和海马NO的水平。 结果对照组可检测到微弱的iNOS阳性染色。缺氧组大脑iNOS阳性染色显著增加 (P <0 .0 1)。与缺氧组相比 ,各治疗组阳性细胞均明显减少 (均P <0 .0 1)。与对照组相比 ,缺氧组NO的生成显著增多 (P <0 .0 1)。各治疗组与缺氧组相比 ,VitE大剂量组与缺氧组相比NO的生成无显著性差异 (P >0 .0 5 )。L NBP大剂量与L NBP小剂量及VitE小剂量组的NO含量均显著减少 (P <0 .0 1)。结论　 慢性间断性缺氧后iNOS表达增多 ,同时NO的合成增多。治疗性给予L NBP和VitE能够显著抑制iNOS表达。治疗性给予大、小剂量L NBP和小剂量VitE能够显著抑制NO的合成。大剂量VitE对于NO的合成无影响。     

丁基苯酞联合阿司匹林治疗脑梗死的疗效观察

目的观察丁基苯酞联合阿司匹林治疗脑梗死的疗效。方法 60例脑梗死患者随机分为2组,治疗组予丁基苯酞＋拜阿司匹林,对照组单用拜阿司匹林;在治疗开始、第2周末和第4周末时进行神经功能缺损程度（CSS）、改良巴氏指数（MBI）。结果第24、周末治疗组CSS、MBI改善和疗效均优于对照组。结论丁基苯酞联合阿司匹林治疗脑梗死疗效确切,值得临床推广。     

复方丹参片对慢性脑缺血大鼠脑内VEGF表达的影响

目的研究中药复方丹参对慢性脑缺血大鼠脑内VEGF表达的影响,探讨复方丹参治疗慢性脑缺血的作用机制。方法采用永久性双侧大鼠颈总动脉结扎术(2VO)制备大鼠慢性脑缺血模型。术后每日给予复方丹参0.75mg/kg灌胃,对照组给予同等量蒸馏水,1次/d,共8周。用免疫组化法观察2VO大鼠脑内VEGF表达。结果药物组大鼠脑内VEGF表达明显增强。结论复方丹参片可显著增加2VO大鼠脑内VEGF的表达,提示复方丹参片可促进VEGF在大鼠脑内表达,促进慢性脑缺血的代偿修复。     

丁基苯酞对大鼠骨髓间充质干细胞氧化应激损伤保护机制的研究

目的 研究丁基苯酞(DL-3-n-butylphthalide,NBP)对双氧水(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stem cells,rBMSCs)氧化应激损伤的保护机制.方法 采用H2O2制作rBMSCs氧化应激损伤模型.实验分为对照组、H2O2损伤组、不同浓度NBP预处理组(0.1μmol组、1μmol组、10μmol组、100μmol组).不予H2O2及NBP处理的细胞为对照组;H2O2损伤组以终浓度为600μmol的H2O2处理4h制作氧化应激损伤模型;NBP处理组以不同浓度NBP预处理rBMSCs 24h后,再予以终浓度为600μmol的H2O2处理4h.采用MTT法检测各实验组的细胞活力;油镜观察各组细胞形态;流式细胞仪检测各实验组的细胞凋亡率;Westem bolt法检测各实验组Caspase-3的表达情况.结果 NBP可明显降低H2O2对rBMSCs的损伤作用、抑制rBMSCs的凋亡、下调Caspase-2的表达.结论 NBP对H2O2诱导的rBMSCs氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与NBP的抗凋亡作用有关.     

丁基苯酞治疗血管性痴呆的临床疗效观察

目的探讨丁基苯酞对血管性痴呆(VD)疗效和作用机制。方法96例VD患者随机分成丁基苯酞治疗组和胞二磷胆碱注射液对照组,分别在治疗10、21d进行简易精神状态评分(MMSE)和长谷川评分(IDS),同时测定与记忆有关的乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性。结果丁基苯酞治疗组患者21d的MMSE和IDS评分均高于治疗前和一般治疗组(P<0.01),且丁基苯酞治疗组VD患者的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性降低和血浆乙酰胆(Ach)含量升高(P相似文献   

丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤后HSP10表达的影响

目的研究丁苯酞干预对大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时点脑组织中热休克蛋白10(HSP10)表达的影响,并探讨丁苯酞对缺血性脑血管病保护作用的机制。方法采用夹闭双侧颈总动脉的方法制作大鼠前脑缺血再灌注模型;H&E染色和NSE免疫组化染色神经元,观察脑组织的形态变化和记数各组神经元数目;免疫组织化学检测对照组、缺血再灌注组及丁苯酞干预组大鼠脑组织HSP10的表达水平变化。结果脑缺血再灌注后丁苯酞干预组及缺血再灌注组HSP10表达水平于再灌注后6h开始上调,3d达到高峰,丁苯酞干预组各时间点HSP10阳性表达指数均高于缺血再灌注组,丁苯酞干预组脑组织的损伤程度明显轻于脑缺血再灌注组(P<0.05)。结论丁苯酞可能通过上调大鼠缺血再灌注损伤后脑组织HSP10的表达,从而抑制前脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡,减少神经元死亡,减轻缺血再灌注后脑组织的损伤。     

慢性脑缺血老龄大鼠海马中突触素的表达特征

目的 研究老龄大鼠慢性脑缺血后大脑海马中突触素表达特征.方法 应用免疫组化染色技术检测大鼠脑海马中CA1区、CA3区和齿状回中突触素的表达.结果 缺血组海马CA1区、CA3区和齿状回三处突触素灰度值均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05.结论 老龄大鼠海马结构内CA1区、CA3区及齿状回内突触素和NR2B的表达明显减少.     

慢性脑缺血老龄大鼠海马NMDA受体亚单位NR2B表达的特征

目的研究老龄大鼠慢性脑缺血后大脑海马中NR2B表达特征。方法应用免疫组化染色技术检测大鼠脑海马中CA1、CA3区和齿状回中NR2B的表达。结果缺血组海马CA1、CA3区和齿状回三处NR2B灰度值均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论老龄大鼠海马结构内CA1、CA3区及齿状回内NR2B的表达明显减少。     

诱生型血红素氧合酶mRNA、诱生型一氧化氮合酶mRNA在脑缺血中的表达

目的观察诱生型血红素氧合酶(HO-1)mRNA、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA在局灶性脑缺血中的表达及其不同作用。方法采用逆转录酶多聚酶链反应(RT-PCR)方法,测定HO-1mRNA、iNOSmRNA在局灶性缺血脑组织中不同时间点的表达变化。结果iNOSmRNA的表达在缺血后2 h出现,24 h达最高峰,以后逐渐下降。HO-1mRNA表达在缺血后2 h即出现,缺血后12 h达最高峰。结论脑缺血的病理生理过程中存在着一氧化氮(NO)及一氧化碳(CO)两种信使系统之间的相互作用。HO-1mRNA及iNOSmRNA的表达上调并具有时相性。缺血后期HO-1mRNA仍然维持在一定的水平,可能具有对抗后期iNOSmRNA增高所产生的NO毒性作用。     

慢性脑低灌注大鼠海马Arc低表达与其认知功能障碍的相关性研究

目的 探讨慢性脑低灌注大鼠海马活性调节的细胞骨架相关蛋白(activity-regulated cytoskeletal-associated protein,Arc)的低表达与其认知功能障碍的相关性。方法 大鼠慢性脑低灌注模型使用持久性双颈总动脉结扎术(2-vessel occlusion,2-VO); 大鼠随机分成假手术组和2-VO组,每组各6只。术后第8周行Morris水迷宫评价其认知功能; 实时定量聚合酶链式反应(Real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及蛋白免疫印迹法检测大鼠海马Arc mRNA及蛋白表达水平。结果(1)2-VO组大鼠第2～5 d的逃逸潜伏期比假手术组明显延长(P<0.01)及其在原平台区域游泳时间明显比假手术组短(P<0.01);(2)2-VO组大鼠海马Arc mRNA水平及免疫反应条带相对灰度值分别比假手术组明显降低(P均<0.01);(3)空间探索实验中2-VO大鼠在原平台区域游泳时间与海马Arc免疫反应条带相对灰度值呈正相关(r=0.7085,P<0.05)。结论 慢性脑低灌注大鼠的认知功能障碍可能与海马Arc的低表达相关。     

尼美舒利对大鼠慢性脑缺血损害的保护作用

目的　探讨诱导型环氧和酶 (COX -2 )抑制剂尼美舒利对慢性脑缺血损害的保护作用。方法　大鼠随机分为对照组、缺血组和治疗组 ,治疗组于术后 2 4h开始以尼美舒利 (6mg/kg)每日灌胃 ,连续 60d ,各组于 60d后做病理染色、GFAP免疫组化染色及脑组织内MDA和SOD含量的测定。结果　与对照组相比 ,缺血组GFAP阳性细胞明显增多 ;脑内的SOD含量下降 ,MDA含量增多。治疗组以上变化明显减轻 ,且有显著性差异。结论　COX -2抑制剂尼美舒利对慢性脑缺血损伤有脑保护作用。     

血红素氧合酶-1在大鼠实验性脑出血中的作用机制

目的探讨血红素氧合酶-1（HO-1）在大鼠实验性脑出血（ICH）脑损伤中的作用。方法采用立体定向法将自体浓缩红细胞注入大鼠基底节制作实验动物模型，通过免疫组化、干湿重法观察术后各个时间点血肿周围脑组织HO-1的表达及脑组织含水量的变化并进行神经功能缺损评分。结果血肿周围脑组织HO-1在6h即开始表达，24h明显增多，48-72h达高峰；脑组织含水量在24h无明显变化，48h有所增加，72h显著增加并达到高峰，随后逐步下降；二者呈正相关（r=0．760，P％0．05）。ICH后各时间点神经功能缺损评分与相应时间点血肿周围脑组织HO-1表达的水平呈正相关（r=0．669，P〈0．05）。结论HO-1的表达在红细胞致ICH后迟发性脑损伤和脑水肿的形成过程中起着重要作用。     

艾斯能对慢性低灌注大鼠认知功能的影响

目的探讨艾斯能对慢性低灌注大鼠认知功能的影响及其作用机制。方法将112只大鼠随机分为正常组、低灌注组、盐水组、艾斯能组。除正常组外,其他3组大鼠予双侧颈总动脉结扎制模。4周后艾斯能组应用艾斯能治疗,盐水组予等量生理盐水,低灌注组及正常组常规喂养。6周后进行水迷宫试验、事件相关电位(ERP)测定、胆碱酯酶(AchE)浓度及胆碱(Ach)纤维密度测定,并进行组间比较。结果与正常组相比,低灌注组和盐水组水迷宫完成时间显著延长,错误次数显著增多,ERP潜伏期(PL)显著延长,AchE浓度及Ach纤维密度也显著下降(均P<0.05);艾斯能组AchE浓度及Ach纤维密度较低灌注组和盐水组进一步下降,但水迷宫试验结果较低灌注组和盐水组显著好转,ERP各波的PL均显著低于低灌组和盐水组(均P<0.05);低灌组和盐水组水迷宫试验结果、ERP结果、AchE浓度及Ach纤维密度无差异。结论艾斯能对慢性低灌注造成的大鼠认知功能损害有改善作用,可能与其抑制AchE、提高脑组织中Ach浓度有关。     

依达拉奉对慢性脑低灌注大鼠脑自由基代谢及海马CA1区HIF-1α表达的影响

目的:观察依达拉奉对慢性脑低灌注大鼠前脑组织SOD、MDA代谢变化及海马CA1区HIF-1α表达的影响,并探讨其意义。方法:实验分假手术组,模型组及依达拉奉组,后两组采用永久性大鼠双侧劲总动脉结扎术(2-vesselocclusion,2VO)制备慢性脑低灌注模型,各组在术后八周后行水迷宫试验后断头,取前脑组织制备成10%脑组织匀浆检测其SOD活性及MDA含量,并采用免疫组化技术观察海马CA1区HIF-1α表达变化。结果:模型组与假手术组相比水迷宫完成时间显著延长(P<0.05),前脑组织SOD活性降低,MDA含量增加(P<0.01),海马CA1区可见HIF-1α少量表达。依达拉奉组较模型组水迷宫结果显著改善(P<0.01),前脑组织SOD活性增加,MDA含量减少(P<0.01),且海马CA1区可见HIF-1α大量表达。结论:慢性脑低灌注可显著损害大鼠空间学习记忆能力,依达拉奉可能通过抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶活性,降低羟自由基的浓度,促进HIF-1α表达等多种途径改善血管性认知障。     

老龄大鼠慢性脑灌注不足脑内白细胞和T细胞的入侵

目的 探讨白细胞和Ｔ细胞在慢性脑灌注不足脑损害中的活动。方法 ７０只老龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠持久性双侧颈总动脉结扎（２ＶＯ）,其中１２只接受环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）治疗。免疫组化法检测白细胞和Ｔ细胞。实现研究为持久性２Ｖ０１～４月。结果 大鼠慢性脑灌注不足造成了明显的脑损害与白细胞和Ｔ细胞的入侵。１～４月,白细胞在皮层、白质和海马的活动均减少,而Ｔ细胞的活动在皮层下白质增多,在皮层和海马减少。同时脑损害加重。ＣｓＡ治疗后白细胞和Ｔ细胞的活动明显减弱,脑损害减轻。结论 慢性脑灌注不足的病理损害,尤其白质损害中,Ｔ细胞伴有重要作用,白细胞仅起次要作用。ＣｓＡ能抑制白细胞和Ｔ细胞的活动,从而防治了脑损害。