软骨皮瓣预制后行血管吻合游离移植的实验研究

目的：研究软骨皮瓣预制后行血管吻合游离移植的可能性，为临床提供耳鼻缺损修复新的方法。方法：将大白鼠耳中心动静脉及耳软骨植入颈部皮下，预制软骨皮瓣。分别在术后二、四周，进行血管吻合游离软骨皮瓣移植，并检查软骨成活，血管网形成及皮瓣成活情况。结果：在软骨皮瓣预制后四周进行游离移植，组织瓣成活率较高。在植入血管束周围新软骨细胞形成较多。结论：软骨皮瓣在预制四周后行血管吻合游离移植，成活率较高。     

预构血管化软骨与非血管化软骨移植的对比研究

目的：建立血管化软骨预制的动物模型,研究血管化与非血管化软骨移植的不同,为临床提供必要的依据。方法：选用新西兰白兔24只,为自身对照。左侧为实验组,将耳中央动静脉植入耳软骨与皮肤之间进行血管化软骨预制,术后4周进行软骨皮瓣移植。右侧为对照组,单纯进行软骨移植,在术后1,2,3,4周进行酶组织化学技术、血管墨汁灌注及放射自显影等实验手段进行检测。结果：移植后1－2周实验组在软骨膜下可见到新生的软骨细胞。酶组织化学显示代谢增强,血管束周围可见到血管网。3－4周新生软骨细胞趋于正常软骨细胞,软骨皮瓣血运已重新构成。结论：预制血管化软骨移植后,软骨成活明显增高,成活能力增强。     

扩张术对血管束移位预构带软骨的复合组织瓣的影响

目的：研究扩张术对血束移位预构带软骨复合组织皮瓣的预构进程成活面积的影响。方法采用雄性日本大耳白兔３０只,分为扩张组、硅胶膜衬垫组及正常预构组,每组１０只,血管束移位后,在肉膜深面分别植入扩张囊及硅胶膜,扩张囊组１ｗｋ后开始注水５０ｍＬ,２ｗｋ后再补注５０ｍＬ。３ｗｋ后形成仅以预构血管为蒂的岛状皮瓣,观察记录其成活面积,并行钼钯Ｘ线造影观察新生血管情况。结果３组动物形成的预构皮瓣成活面积经方差分析     

血管束预构带软骨复合组织皮瓣的成活机制(Ⅰ)

目的　探讨预构带软骨复合组织皮瓣成活机制 .方法　将日本大耳白兔分为 5组 ,每组 5只 ,取股动静脉血管束 6 cm,置入同侧下腹部 ,并植入 3 cm× 2 cm耳软骨 ,分别于7,10 ,14,2 1和 2 8d行 10 0 g· L- 1 荧光素钠活体染色 ,ECT照像及皮瓣成活面积观察 .结果　随着时间推移 ,荧光素钠染色面积增加 ,ECT照像计数上升 ,到 4wk皮瓣可成活 .结论　采用兔股动、静脉血管束预构下腹部带软骨的复合组织皮瓣 4wk即可成活     

兔血管束预构带软骨复合组织瓣成活的机制(Ⅱ)

目的 探讨预构带软骨复合组织瓣成活的解剖学基础。方法 采用雄在耳白兔３７只，将Ａ组２０只于预后旋糖酐液灌注，活体观察皮瓣的染色范围，Ｂ组１０只，手术后７，１０，１４，２１和２８ｄ行乳胶、硫酸钡、铅丹造影，Ｃ组７只，于 ７，１０，１４，２１和２８ｄ行预构复合组织瓣及任意皮瓣、轴型皮瓣，ＥＣＴ照像检查复合组织瓣血流变化情况。结果 Ａ组活体染色，２ｗｋ始近蒂部染色，渐向皮瓣远端，４ｗｋ皮瓣基本染色完全，     

预构扩张皮瓣的形态学观察

目的观察兔股动静脉血管束预构扩张皮瓣的成活及光镜、电镜的形态学结构改变。方法30只健康成年雄性新西兰兔随机分为A，B，C3组，每组10只，A组为实验组，B，C组为对照组。将各组新西兰兔股动静脉血管束移位后，A组在肉膜深面植入50ml扩张器，1周后开始注水扩张；B组仅在肉膜深面植入50ml扩张器不注水扩张；C组则单纯股动静脉血管束预构。定期对3组皮瓣取样进行光镜及电镜观察。第57天A组扩张完成后，3组分别形成仅以预构股动静脉血管束为蒂的岛状皮瓣，原位缝合后1周观察记录3组皮瓣成活面积并取样进行光镜及电镜观察。结果A组岛状皮瓣成活面积明显大于B，C组（P〈0．05）。预构术后57d，光镜观察3组血管分布密度均增高，A组密度大于B，C组；电镜观察3组毛细血管内皮细胞的胞体、胞核明显增大，胞浆内粗面内质网、线粒体及质膜小泡明显增多，A组较B，C组明显。结论扩张术能增加新生毛细血管密度，提高预构皮瓣微循环灌注，增大皮瓣成活面积，从而提高皮瓣移植的安全性。     

关节软骨损伤组织工程修复的实验研究

目的：（1）研究不同体外培养时间软骨的生物学特性，探讨运用于软骨组织工程中软骨种子细胞的最适宜培养时间和条件。（2）应用组织工程技术探讨运用自体关节软骨细胞修复关节软骨缺损的可行性。（3）应用组织工程技术探讨应用同种异体软骨细胞修复关节软骨缺损的可行性。（4）研究修复关节软骨缺损的软骨细胞来源。方法：（1）取新西兰兔关节软骨细胞体外培养，观察软骨细胞的形态学变化，生长曲线，酸性粘多糖及胶原分泌情况。（2）建立关节软骨缺损模型，应用自体关节软骨细胞复合生物支架Pluronic修复关节软骨缺损，观察修复效果。（3）应用同种异体软骨细胞复合生物支架Pluronic修复关节软骨缺损，观察修复效果。（4）应用3H－TdR放射自显影方法，确定修复关节软骨缺损的细胞来源。结果：（1）体外培养第四代软骨细胞的增殖能力达到高峰，而第二代软骨细胞分泌基质能力最强。（2）自体或同种异体软骨细胞复合Pluronic修复关节软骨缺损，12周后缺损表面较平滑，与正常软骨界面愈合较好，MASSON三色染色显示胶原分布已较均匀， 骨细胞呈柱状排列，II型胶原在细胞周围阳性表达，而空白对照和材料对照组未见明显修复。（3）3H－TdR放射自显影方法证实修复软骨组织的细胞来源于体外移植细胞，软骨细胞植入体内早期仍进行有丝分裂，而在中后期软骨细胞以分泌基质为主，植入的细胞与周围软骨细胞间存在物质交换。结论：（1）软骨细胞在体外培养2－3周左右是作为软骨组织工程种子细胞的最佳时机。（2）自体或同种异体组织工程化软骨是修复关节软骨缺损的较好方法。（3）组织工程化软骨修复关节软骨缺损的细胞来源于体外移植的软骨细胞。     

预构扩张皮瓣的实验研究

目的:研究预构扩张皮瓣的成活及其机制、微循环灌注量动态变化、超微结构改变。方法：选取成年雄性新西兰白兔36只,随机分为预构扩张组(A组)、扩张器衬垫预构组(B组)及预构组(C组),每组12只。股动静脉血管束移位后,前两组分别在肉膜深面植入50?ml扩张器,预构扩张组7?d后开始注水。定期对3组皮瓣进行微循环检测,并取样进行血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体、光镜及超微结构的检测与观察。第52天扩张完成后,形成仅以预构血管为蒂的岛状皮瓣,观察记录成活面积。结果：A组微循环灌注量明显高于B、C组（P＜0.05), 皮瓣成活面积占原始皮瓣面积的百分比大于B、C组（P＜0.05),VEGF、bFGF及其受体含量亦明显高于B、C组(P＜0.05),血管密度加大,超微结构改变显著。结论：预构扩张皮瓣能增大皮瓣成活面积,增加皮瓣移植的安全性。VEGF、bFGF及其受体含量的增加促进预构扩张皮瓣血管化进程。     

自体软骨细胞移植修复关节软骨缺损的基础及临床应用研究

目的:探讨自体软骨细胞移植修复关节软骨缺损的疗效。方法:自体软骨细胞取自大白兔左股骨外髁,体外增殖后接种于胶原海绵支架上,后移植于兔膝关节软骨缺损处。取同一大白兔双膝关节内外髁分3组作自身对照研究,右股骨内髁作自体软骨细胞移植实验组,左膝股骨内髁作胶原海绵移植对照组,右膝股骨外髁作空白组。移植术后不同时间分批处死,进行大体、组织学观察。临床对8例软骨缺损患者先行关节镜下取软骨,然后制备种植了软骨细胞的胶原膜,再将其植入软骨缺损处,最后进行系统康复治疗。结果:实验组修复组织以透明软骨为主,对照组和空白组以纤维软骨修复为主。临床病例随访半年以上,患者症状消失,核磁共振或关节镜复查见软骨缺损已修复。结论:自体软骨细胞移植可修复关节软骨缺损,有良好的应用前景。     

利用PLGA细胞支架再生人关节软骨的实验研究

目的：研究人关节软骨细胞在PLCA三维支架上的贴附和生长情况，利用组织工程技术培养工程化关节软骨。方法：制作PLGA三维细胞支架。分离培养成人关节软骨细胞，体外扩增后种植到PLGA支架中。在体外和裸鼠体内分别培养软骨细胞一支架复合物，分期终止培养，进行组织学染色、扫描电镜、Ⅱ型胶原免疫组织化学及cDNA探针原位杂交检测。结果：体外培养发现，软骨细胞支架材料内贴附生长良好，长期培养仍保持软骨细胞特性，棵鼠体内培养8周后可形成软骨样组织。结论：PLGA三维支架适合软骨细胞贴附生长和分泌软骨外基质，可作为软骨组织工程的细胞载体。利用组织工程的方法可获得适于移植的工程化关节软骨。     

带血管蒂骨膜瓣转位修复关节软骨缺损的应用解剖

目的:为临床运用关节周围带血供骨膜瓣转位修复关节软骨缺损提供解剖学依据。方法:在经动脉灌注红色乳胶的成人防腐标本上,解剖观测40侧肩胛冈血管网、40侧肩关节血管网、37侧肘关节血管网、30侧膝关节血管网以及32侧髂嵴前部血管的组成、起始、走行、外径、分布及其吻合情况。结果:可设计肩胛上动脉冈下支为蒂的肩胛骨骨膜瓣;旋肱前动脉外侧降支和(或)内侧降支为蒂的肱骨上段骨膜瓣;桡侧返动脉为蒂带桡侧副动脉吻合支、尺侧返动脉为蒂带尺侧下副动脉吻合支、骨间返动脉为蒂带桡侧副动脉吻合支的肱骨远端骨膜瓣;膝降动脉关节支为蒂的股骨内髁骨膜瓣、其隐支为蒂的胫骨上段骨膜瓣;以旋股外侧动脉升支髂嵴支为蒂髂骨骨膜瓣,转位修复附近关节的软骨缺损。结论:可利用关节周围细小动脉为蒂切取骨膜瓣转位修复相应关节软骨缺损。     

外科延迟对皮神经营养血管蒂岛状瓣成活面积的影响

目的(1)探讨皮神经营养血管蒂岛状瓣的活性及外科延迟在促进该类皮瓣成活中的作用;(2)观察延迟后皮瓣组织内微血管的变化。方法设计大鼠腹壁下神经营养血管蒂岛状瓣模型,比较延迟组与非延迟组皮瓣的成活情况;通过透明标本观察延迟后皮瓣组织内微血管的变化。结果即刻掀起的大鼠腹壁下神经营养血管蒂岛状瓣成活面积很小,延迟组皮瓣平均成活面积大于非延迟组(P<0.05)。透明标本观察见延迟后皮瓣组织内血管明显扩张,血管密度增加。结论经外科手术延迟后,单纯以神经营养血管为蒂的岛状瓣能够有较大面积的成活。延迟后皮瓣组织内既存在现有血管的扩张,也有新生血管的形成。     

甲状旁腺激素相关蛋白对发育中的Meckel’s软骨作用的研究

目的观察SD大鼠下颌骨发育过程中甲状旁腺激素相关蛋白（PTHrP）在Meckel’s软骨上时空的变化,初步探讨PTHrP在Meckel’s软骨发育中的意义.方法用免疫组化染色法及原位杂交染色法检测E13-19dSD胎鼠的下颌骨发育过程中,PTHrP及PTHrPmRNA在Meckel’s软骨上的表达.结果 E13-15d在Meckel’s软骨前段PTHrP蛋白强阳性表达,在细胞核、胞浆均表达,在肥大软骨细胞核上表达更明显,而且PTHrPmRNA强阳性表达的位置与PTHrP蛋白一致.E17-19d Meckel’s软骨前段骨化,E17d在临近成骨处的Meckel’s软骨软骨细胞PTHrP蛋白弱阳性表达,且位于肥大软骨细胞核内,PTHrPmRNA阴性表达.E19dPTHrP临近成骨处蛋白染色阴性表达,PTHrPmRNA阴性表达;在前段远离骨化处PTHrPmRNA,PTHrP蛋白强阳性表达,细胞核上表达明显.结论 PTHrP在Meckel’s软骨前段软骨细胞中的表达存在时空特异变化,提示PTHrP蛋白可能由SD大鼠Meckel＇s软骨软骨细胞合成,并作为一种自分泌因子调节Meckel’s软骨细胞的增殖和分化.     

二种窄蒂穿支型薄皮瓣及其附加血管吻合的扩大移植

目的 介绍枕颈部和肋间部两种窄蒂穿支型薄皮瓣的解剖、设计要点和应用经验。方法 以枕后动脉支的皮穿支为蒂的枕颈部皮瓣根据其远端指向不同分为枕颈肩和枕颈背皮瓣。以4－9肋间动脉皮穿支为蒂的肋间穿支皮瓣可设计成斜型或垂直型。所有皮瓣的蒂宽均在3－5cm,瓣部宽大,同时远端还可继续加长携带旋肩胛血管或腹壁下深血管,使之形成巨大的薄皮瓣。结果 临床共应用51例修复面颈手部,随访1个月至3年,功能与外形均满意,结论 该皮瓣主要优点是蒂窄便于旋转,有双套血供,巨大而薄,较适用于面、颈、手等外露部位的修复。     

鸡胫骨平台骨折不同程度复位对关节软骨修复影响的实验研究

目的:研究胫骨平台骨折关节面塌陷移位后,骨折端不同程度复位对损伤关节软骨修复的影响。方法:将所有动物随机分为A、B、C、D4组,每组9只,制成一型胫骨平台骨折移位模型,然后进行不同程度复位。以胫骨平台全层关节软骨厚度为标准,A组完全复位,B组3/4复位,C组1/2复位,D组全层错位。并将复位骨折块行直径1.0mm克氏针内固定,最后以克氏针纵行贯穿膝关节,代替石膏外固定。制动膝关节4周。于术后4周,8周,12周于每组中随机选择3只进行大体观察,测量膝关节活动范围及修复组织厚度,X光片观察骨折愈合情况,组织学光镜观察和组织学电镜观察。结果:A组与B组软骨修复效果较满意,A组12周更接近正常软骨。结论:膝关节胫骨平台骨折不同程度复位与关节软骨的修复有关,精确复位对软骨的修复有促进作用;其复位标准至少应在1/2复位以上,若能达到3/4复位以上修复更佳。     

扩张皮瓣下自体耳廓软骨移植的实验研究

目的:探讨扩张皮瓣对自体移植软骨生长及组织学形态的影响。方法:在10只4周龄新西兰大白兔右侧背部预制扩张皮瓣,取幼兔耳廓中部相对应的两个1 cm×1 cm的软骨(分别用于测量和观察)置于扩张皮瓣下(实验组),左侧背部未扩张区域(对照组)采用同样的方法移植软骨,每周采集1次观察软骨标本,共8周,作组织学观察,第8周末取出测量软骨进行面积测量。结果:实验组软骨增长了76.27%,对照组增长了52.95%(P<0.01)。镜下观察:实验组软骨前2周软骨活力下降、基质分泌减少,第3~8周软骨活力增强,第6周达到高峰,以后软骨活力逐步下降,但仍高于移植前软骨。对照组软骨第1周软骨活性略有下降,第2周软骨形态基本和移植前软骨一致,第3~8周软骨活力增强,在第5周为高峰期。结论:幼兔耳廓软骨自体移植于扩张皮瓣后成活良好,生长呈曲线过程,实验组软骨增长较对照组快。     

带皮瓣耳甲腔软骨转移修复鼻翼软骨缺损的临床研究

目的：研究带皮瓣耳甲腔软骨转移修复鼻翼软骨缺损的疗效。方法：在遵循鼻亚单位组成的美学原则基础上,根据创面大小、形状、部位选择适当的带皮瓣的耳甲腔软骨修复缺损的鼻翼部分,供区创面直接拉拢缝合。结果：患者创面I期愈合13例;1例皮瓣远端部分表皮坏死,经局部换药后创面愈合;1例患者切口轻度感染,经局部换药处理后创面Ⅱ期愈合。术后获随访1—12个月。鼻外形轮廓较好,修复组织色泽、质地与周围皮肤匹配良好,恶性肿瘤无复发。结论：应用带皮瓣的耳甲腔软骨能修复鼻翼缺损创面,且色泽、质地、轮廓等均能达到较好匹配和协调,可获得满意功能和稳定的美学效果。     

骨-骨膜复合组织与软骨下钻孔治疗关节软骨缺损的实验研究

目的 :探讨骨 -骨膜复合组织与软骨下钻孔治疗关节软骨缺损的修复过程。方法 :采用胫骨 -骨膜复合组织植入兔膝关节软骨缺损区与缺损区软骨下钻空 ,观察软骨缺损的修复过程 ,并进行大体观察与组织学观察。结果 :两种修复治疗方法均完全填充关节软骨缺损区 ,修复组织与周围正常关节软骨连接良好 ,并形成类透明关节软骨。结论 :游离骨 -骨膜复合组织和软骨下钻孔治疗关节软骨缺损 ,骨膜组织和红骨髓均能够再生为类透明软骨 ,并可充填关节软骨的缺损区 ,形成修复组织     

点种法同种异体兔软骨移植修复关节软骨缺损的研究

将 30只新西兰纯种兔共 60个膝关节随机分为 3组 :软骨块点种法移植组、软骨细胞点种法移植组和对照组。分别于术后 2、4、1 2、2 4周取标本行大体、光镜、电镜的组织学动态观察 ,并同时对修复组织进行组织学和组织化学质量评估 ,观察点种法软骨移植术修复透明软骨的效果。结果显示 :2种点种法移植组均能获得透明软骨修复 ,而对照组缺损区仅为纤维组织填充 ,并且点种法移植组兔各期平均组织学和组织化学得分均高于对照组 (P <0 .0 1 )。提示 :点种法软骨移植能获得透明软骨修复 ,尤其适用于大面积软骨缺损。