雷公藤红素对大鼠脑缺血后血管新生和神经保护作用的机制研究

目的观察雷公藤红素(CSL)在脑缺血后对血管新生的作用及CSL在脑缺血后的神经保护作用。方法将80只SD大鼠随机分入24 h和7 d两大组,分别再分为假手术组,试剂对照组,低剂量CSL组(0.5 mg/kg)、中剂量组(2 mg/kg)、高剂量组(5 mg/kg),每组8只大鼠。除假手术组仅进行手术而不造成缺血状态外,其余各组均建立大鼠大脑中动脉闭塞模型。在缺血90 min再灌注30 min首次灌胃给药,每日一次给予相应剂量的CSL。对大鼠行为学进行评估,脑组织切片染色综合评价大鼠脑缺血再灌注损伤程度,检测脑组织炎症因子IL-1β的含量,观察细胞凋亡率的改变,采用免疫组化染色观察大脑皮层微血管密度改变,ELISA法检测VEGF和MMP-9的含量。结果 (1)与对应假手术组比较,各干预组各指标差异均有统计学意义(P0.05)。(2)神经功能评分、梗死体积、细胞凋亡率和VEGF、MMP-9水平:与试剂对照组同时点比较,CSL中、高剂量组差异有统计学意义(P0.05);CSL中、高剂量组同时点比较差异有统计学意义(P0.05)。(3)CD31:与试剂对照组同时点比较,CLS中、高剂量组CD31阳性率减少(P0.05);CLS中、高剂量组24 h与CLS中、高剂量组7 d比较,CD31阳性率差异有统计学意义(P0.05)。(4)IL-1β:7 d干预时与试剂对照组比较,CSL低、中、高剂量组差异均有统计学意义(P0.05);在24 h和7 d干预时,CSL高、中、低剂量组组间差异均有统计学意义(P0.05)。结论一定剂量范围内,CSL在脑缺血再灌注急性期存在两种相反的作用,即通过抗炎和抗细胞凋亡产生神经保护作用和抑制血管新生作用,并且其抑制血管新生的作用随着时间的推移可能更加显著。在脑缺血急性期,CSL抑制炎性因子,减轻细胞凋亡的作用是占有主导地位的,这并不受其抑制血管新生作用的影响。     

血府逐瘀汤促急性心肌缺血大鼠心肌血管新生及对血管内皮细胞生长因子的影响

目的探讨血府逐瘀汤对急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生的影响及其分子学机制。方法雄性SD大鼠,结扎冠状动脉左前降支复制急性心肌缺血模型,随机分为模型组、血府逐瘀汤组、麝香保心丸组,并设假手术组。造模后24h各组灌胃给予相应药物或蒸馏水,每日1次,连续7d,于第7日灌胃后1h断头处死动物,取出心脏。用免疫组化法测定缺血心肌内皮细胞数和微血管密度,检测缺血心肌局部血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。结果血府逐瘀汤组内皮细胞数、微血管密度及VEGF表达均明显升高,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血府逐瘀汤能够促进心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生,对缺血心肌具有保护作用,其作用机制可能与上调心肌局部VEGF蛋白表达有关。     

复肝丸调控miR-424表达抑制肝窦内皮细胞血管新生的体外研究

目的观察复肝丸调控miR-424表达以抑制肝窦内皮细胞血管新生的作用及其机制。方法以不同剂量(0～2 000 mg/L)的复肝丸与人肝窦内皮细胞(HHSEC)共孵育,CCK8法检测复肝丸对细胞活力的影响,分析复肝丸对细胞无毒性作用的剂量范围,并以此作为后续药效及机制评价的剂量。以CoCl_2诱导HHSEC血管新生模型,分为正常组、模型组、miR-424抑制剂组及复肝丸组,除正常组外,其余各组以CoCl_2诱导细胞血管新生,miR-424抑制剂组及复肝丸组分别以miR-424抑制剂及复肝丸(200 mg/L)与细胞共孵育24 h。采用CCK8法检测细胞活力与增殖情况;Transwell观察细胞迁移变化情况;Matrigel管腔生成实验评价细胞管腔形成情况;定量RT-PCR检测miR-424、HIF-1α、vWF、CD31基因表达;Western blot法检测HIF-1α、vWF、CD31蛋白表达。结果复肝丸剂量小于400 mg/L对HHSCE无明显细胞毒性。与正常组比较,200μmol/L CoCl_2可诱导肝窦内皮细胞缺氧损伤模型,且模型组miR-424、HIF-1α表达增加,细胞迁移和管腔生成增多,vWF、CD31表达增加(P0.01);与模型组比较,miR-424抑制剂与200 mg/L复肝丸干预后,miR-424与HIF-1α表达均不同程度降低,细胞迁移和管腔生成受抑制,vWF、CD31表达降低(P0.01);且复肝丸组综合疗效与miR-424抑制剂相当。结论复肝丸具有良好的抑制肝窦内皮细胞血管新生的作用,其作用机制与抑制miR-424表达相关。     

脂清冲剂对高脂饮食大鼠血管内皮细胞功能影响的实验研究

目的：观察脂清冲剂对实验性高脂大鼠血管内皮细胞功能的影响。方法：SD大鼠，给予高脂饲料同时口服脂清冲剂浸膏20、10、5g/kg，连续2个月，另设正常对照组和高脂模型组，测定血液中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、6-酮-前列腺素(PGF1a)以及血栓素(TXB2)等的含量。结果：脂清冲剂使饮食性高脂模型大鼠血中NO含量略有升高，但明显降低ET水平，使TXB2的含量稍有下降，但明显升高6-keto-PGF1a的含量，从而使两者比值显著下降至趋于正常。结论：脂清冲剂明显改善高脂大鼠血中NO／ET和TXB2／6-keto-PGF1a的平衡，从而使高脂大鼠血管内皮细胞功能得到恢复，这可能是其抗动脉粥样硬化作用的机制之一。     

补阳还五汤对心肌梗死后大鼠心肌微血管密度及血管内皮细胞生长因子-C表达的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠心肌梗死后左室非梗死区心肌微血管新生的影响。方法雄性Wistar大鼠,结扎左冠状动脉主干造成心肌梗死模型,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组及补阳还五汤低、中、高剂量组,加上假手术组,共5组,每组12只。补阳还五汤低、中、高剂量组分别按9.25、18.5、37 g/（kg.d）给予补阳还五汤水煎剂灌胃,假手术组、模型组给予0.2 mL/10 g生理盐水灌胃。连续给药12周后处死大鼠。免疫组化法检测心肌Ⅷ因子的表达,Westren blot及免疫组化法检测血管内皮细胞生长因子-C（VEGF-C）的表达。结果假手术组和不同剂量补阳还五汤组血管密度和VEGF-C的表达明显高于模型组（P〈0.001）;补阳还五汤中剂量组VEGF-C的表达与假手术组相当（P〉0.05）,补阳还五汤高剂量组VEGF-C表达高于假手术组（P〈0.01）。结论补阳还五汤可以促进心肌梗死后大鼠左室非梗死区血管新生,并且呈剂量依赖性,补阳还五汤促血管新生作用可能与升高VEGF-C表达有关。     

益气活血方促心梗后大鼠缺血心肌血管新生的实验研究

目的：观察益气活血方对心梗后大鼠缺血心肌局部血管新生的影响。方法：建立心梗模型后，分为五组，即益气活血方大剂量组、益气活血方小剂量组、麝香保心丸组、假手术组、模型组，灌胃6周后处死动物，取心肌组织，用免疫组化法（CD34）测定心梗边缘区新生血管数及微血管密度。结果：与假手术组相比，模型组大鼠心梗边缘区新生血管数及微血管密度明显升高（P〈0.05）；所有治疗组对新生血管数及微血管密度均有不同程度的促进作用，与模型组比较均有显著差异（P〈0．05），其中大剂量组和麝香保心丸组的作用尤为明显（P〈0.05）。结论：益气活血方能够促进心梗后大鼠缺血心肌局部血管新生，对缺血心肌具有保护作用。     

补肾活血中药对实验性血瘀证大鼠内皮细胞功能的影响

目的：观察补肾活血中药对实验性血瘀证大鼠血管内皮细胞功能的影响。方法：采用补肾活血中药药液灌服实验性血瘀证大鼠模型，将动物随机分为对照组、模型组、大剂量和小剂量共4组，每组10只。造模成功后，给药组灌服药物40天，然后下腔静脉取血，测定各观察指标和主动脉血管壁组织学变化。结果：补肾活血中药组血脂、血流变、内皮功能、凝血纤溶各项指标及组织形态学均有明显变化，接近正常组，与模型组有显著差异。结论：补肾活血中药有降低血液黏度、调节血脂和改善血管内皮细胞功能的作用。     

小承气汤对大鼠肝脏作用的实验研究

本工作就小承气汤对四氯化碳(CCl_4)肝损伤大鼠肝脏作用进行组织形态学、组织化学、定量分析及电镜观察等方面的实验研究。结果小承气汤组与CCl_4肝损伤组比较,肝小叶损伤区缩小,肝细胞脂滴减少,RNA增多,糖原增加;SDH等酶活性增强,经图象分析仪测定,小承气汤组SDH活性为0.4079±0.0512(平均积分光密度/μm~2),与肝损伤组的0.133±0.0340相比,p<0.001;血清SGPT测定,小承气汤组为66.33±54.20,与肝损伤组的131.7±89.38相比,p<0.05;电镜观察示小承气汤组粗面内质网排列密集,线粒体结构恢复正常,数量增加等。以上结果提示以大黄为主的小承气汤对CCl_4肝损伤可能有一定的修复作用。其作用机理可能通过阻止内质网、线粒体的损伤,促进蛋白质合成及提高细胞的有氧代谢,从而促进细胞的修复,恢复肝细胞的功能,     

黄芪甲苷对体外培养内皮细胞影响的实验研究

从体外培养HUVEC内皮细胞系为出发点,运用中药血清药理学体外实验方法,对黄芪甲苷含药血清进行体外药理学实验研究,综合评价该含药血清对受损内皮细胞的增殖能力、迁移能力的影响     

六黄合剂对胰岛素抵抗大鼠血管内皮细胞的影响

目的观察六黄合剂对胰岛素抵抗(IR)大鼠血管内皮细胞的影响,探讨其保护血管内皮的作用机制。方法健康SD大鼠32只,按体质量随机分为正常组、模型组、罗格列酮组和六黄合剂组,每组8只。应用地塞米松诱导IR大鼠模型,造模同时灌胃给药,罗格列酮组和六黄合剂组分别给予罗格列酮3 mg/(kg.d)和六黄合剂6.3 g/(kg.d)干预,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,14 d后应用化学比色法测定大鼠脂代谢指标及血清一氧化氮(NO)的水平,应用透射电镜观察胸主动脉内皮细胞超微结构的变化。结果与模型组比较,六黄合剂组血清三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和游离脂肪酸(FFA)水平明显下降(P<0.01),血清总胆固醇(TC)水平下降(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平升高(P>0.05),血清NO水平明显升高(P<0.01)。电镜观察,IR大鼠胸主动脉内皮细胞超微结构发生明显病理改变。六黄合剂干预后,胸主动脉内皮细胞超微结构明显改善。结论六黄合剂能有效调节IR大鼠血脂水平,增加血清NO含量,改善IR早期大动脉内皮细胞的病理损害。     

菊科植物Chrysanthellum indicum水提取物对大鼠肝门静脉钙转移及活化的影响

菊科植物C．indicum Linn．Vatke(CI)是广泛生长于西非的芳香草本植物。作者研究了CI水提取物对大鼠肝门静脉钙转移及活化的影响。     

乳香酸可抑制前列腺肿瘤

中药也可提炼出抑制前列腺肿瘤的单体成分。华东师大生命医学研究所刘明耀教授率领的课题组,从中药乳香中提取出一种名为“11-羰基-13-乙酰乳香酸”的成分,可通过抑制肿瘤血管新生来抑制肿瘤的生长。这一成果近日发表在《癌症研究》上,揭示出植物药单体化合物在抑制肿瘤生长方面的巨大潜力。     

肝平胶囊对慢性酒精性肝病大鼠肝脏保护作用的实验研究

目的:研究肝平胶囊对慢性酒精肝性大鼠肝脏功能的保护作用。方法:将健康60只SD大鼠随机分为6组,空白对照组、模型组、肝平胶囊高剂量组、肝平胶囊中剂量组、肝平胶囊低剂量组、西药组,采用56°白酒灌胃复制慢性酒精性肝病模型,同时各治疗组相应给予肝平胶囊高、中、低剂量及西药硫普罗宁治疗,8周后观察大鼠血清中谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的变化。结果:肝平高、中、低剂量组与硫普罗宁组GGT、ALT、AST、ALP、TC、TG均明显低于模型组(P<0.05);而肝平各干预组与西药组相比各项指标无明显差异(P>0.05),但肝平高剂量组各项转氨酶及血脂的降低具有一定的优势。结论:肝平胶囊对慢性酒精肝性大鼠肝脏功能具有明显的保护作用,能防治慢性酒精肝。     

黄芪配伍当归对气虚血瘀模型大鼠血管内皮和肝窦内皮细胞CD54表达的影响

目的:探讨黄芪配伍当归(QG)对气虚血瘀模型大鼠心肺血管内皮和肝窦内皮细胞CD54表达的影响。方法:用饥饿 游泳制造"气虚血瘀"大鼠模型,灌胃给药15d后测定心肺血管内皮和肝窦内皮细胞CD54的表达。结果:气虚血瘀模型大鼠心肺血管内皮和肝窦内皮细胞CD54的表达明显增高,QG能显著降低其过度表达。结论:QG益气活血作用与降低心肺血管内皮和肝窦内皮细胞CD54的过度表达有关。     

土鳖虫对大鼠体外血栓形成的实验研究

目的观察土鳖虫对大鼠体外血栓形成的影响。方法以土鳖虫水提液和生药粉悬液对大鼠灌胃7天后进行体外血栓测定。结果土鳖虫水提液组血栓重量和长度较空白对照组均明显增加(P<0.05),生药粉组血栓干重较空白对照组明显增加(P<0.05),土鳖虫对血栓长度的影响与血栓重量基本一致,此结果与以往土鳖虫具有抑制血栓形成的报道不一致。结论土鳖虫破血逐瘀的主要作用可能不在于抗凝血方面。     

染料木素对大鼠生殖毒性的实验研究(Ⅲ)围产期毒性

染料木素系从豆科植物槐角Sophora japonica L．的干燥成熟果实中提取的异黄酮单体成分，是具有弱雌激素样作用又非雌激素类化合物，称之为植物雌激素。流行病调查、动物实验和临床观察均发现，异黄酮通过抑制骨吸收和促进骨形成过程，维持骨代谢的动态平衡，有效地预防骨质疏松。鉴于染料木素是治疗骨质疏松症的有效药物，为了保证其安全使用，本实验对其进行了大鼠的围产期毒性试验。     

肝纤宁颗粒对CCI4所致大鼠肝纤维化模型的影响

肝纤宁颗粒是治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的中药新药，具有舒肝活血、健脾祛湿作用，临床用于肝郁血瘀兼脾虚湿滞型乙型肝炎肝纤维化。本实验采用四氯化碳(CCI4)损伤性肝纤维化模型，探讨肝纤宁颗粒防治肝纤维化的作用机理。     

葛根素对缺氧损伤的大鼠脑微血管内皮细胞凋亡和功能的影响

目的:研究葛根素对缺氧损伤的大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)凋亡和功能的影响及其机制。方法:建立缺氧损伤的rCMEC模型,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT),流式细胞术,酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫印记法(Westernblot),观察葛根素对rCMEC分泌组织型纤溶酶原激活物(t-PA),组织纤溶酶原激活物抑制剂(PAI),一氧化氮(NO),内皮素(ET),表达血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的影响。结果:葛根素可以减轻缺氧损伤对rCMEC的影响,降低其凋亡率,可降低rCMEC胞内钙离子的浓度,提高VEGF和eNOS的表达,并显著提高t-PA/PAI和NO/ET的比值。结论:葛根素对缺氧损伤的脑微血管内皮细胞有保护作用,其机制可能与促进VEGF的表达,激活VEGF受体介导的下游通道有关。     

虫草菌丝中3种活性成分对血管新生与内皮细胞功能的影响

目的探讨虫草菌丝中的3种活性成分(虫草素、腺苷、麦角甾醇)对血管新生和肝内皮细胞功能的影响。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜实验和转基因斑马鱼实验分别观察虫草素、腺苷、麦角甾醇对新生血管面积、功能血管数量及碱性磷酸酶变化的影响;MTT法测定3个化合物对人肝癌SK-HEP-1细胞的细胞毒活性;采用血管内皮生长因子(VEGF)诱导SK-HEP-1细胞增殖为模型,以索拉非尼为阳性对照药,MTT法测定3个化合物对细胞增殖的影响,Transwell法观察细胞迁移,Matrigel管腔形成实验观察细胞管腔形成情况,荧光探针法检测胞内一氧化氮(NO)的量和一氧化氮合酶(NOS)活性。结果虫草菌丝中腺苷、麦角甾醇能够显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管新生、减少转基因斑马鱼功能血管数量,而虫草素能够促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生;与对照组相比,VEGF可诱导SK-HEP-1细胞增殖,促进细胞迁移和管腔形成,并可使其胞内NO水平和NOS活性显著升高;与模型组相比,虫草素、腺苷、麦角甾醇呈剂量依赖性地抑制SK-HEP-1细胞增殖,腺苷、麦角甾醇能抑制SK-HEP-1细胞迁移,3者均可不同程度地抑制SK-HEP-1细胞管腔形成,且剂量依赖性地降低胞内NO水平和NOS活性。结论虫草菌丝中的虫草素、腺苷、麦角甾醇对SK-HEP-1细胞增殖、迁移、管腔形成有不同程度的抑制作用,其中腺苷的作用尤为明显;其机制与抑制细胞内NO水平和NOS活性有关。     

莪术醇对肝窦内皮细胞MAPK信号通路作用的实验研究

目的研究莪术醇对肝窦内皮细胞MAPK信号通路的作用,以此来分析莪术醇抗肝纤维化的作用机制。方法用MTT法检测各种药物干预对细胞增殖率的影响,用免疫印迹和RT-PCR检测MAPK信号通路上关键分子pMAPK、ERK和JNK的表达和含量。结果RT-PCR检测发现莪术醇干预组pMAPK、ERK和JNK表达较阳性对照组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05);WB检测发现莪术醇干预组MAPK信号通路磷酸化p38MAPK、ERK和JNK的表达较阳性对照组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论莪术醇抑制MAPK信号通路的活动,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。