不同片段的Dig－HBV－DNA探针在检测血清HBV－DNA的比较

本文运用分子克隆技术、随机引物法用非放射性Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记制备ｐＢＲ３２２－ＨＢＶ－ＤＮＡ全基因探针（７．５ｋｂ）、单纯ＨＢＶ－ＤＮＡ全基因探针（３．２ｋｂ）及经ＢｇＬⅡ限制性内切酶切割后片段ＨＢＶ－ＤＮＡ探针（２．４ｋｂ）。通过检测１３０份血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，比较三种探针的敏感度和特异性。     

荧光探针定量PCR检测HBV—DNA

本文采用荧光探针定量（ＦＱ－ＰＯＣＲ）法准确定量检测ＨＢＶ－Ｍ阳性标志中的ＨＢＶ－ＤＮＡ数量。结果显示：ＨＢｅＡｇ（＋组（３２份）的阳性率为１００％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝数范围在１０＾５－１０＾９／ｍｌ之间。ＨＢｅＡｂ（＋）组（４７份）的阳性率为２３．４％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝范围在１０＾３－１０＾５．７／ｍｌ之间;ＨＢｓＡｂ（＋）组（３７份）的阳性率为２．７％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝数为１０＾５／ｍｌ。     

Dig─HBV DNA探针检测血清HBV─DNA与临床应用

Ｄｉｇ─ＨＢＶＤＮＡ探针检测血清ＨＢＶ─ＤＮＡ与临床应用谢春元，林德裕，许建平（广东汕头市中心医院５１５０３１）乙型肝炎（乙肝）病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶ－ＤＮＡ）位于乙肝病毒的核心，是乙肝病毒活性复制的指标［２］。应用Ｄｉｇ－ＨＢＶＤＮＡ探针（随机引...     

PCR—ELISA检测HBV DNA方法学建立及初步临床应用

建立ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ检测ＨＢＶ ＤＮＡ的方法学，探讨其最佳实验条件并初步评价其临床应用价值。常规ＰＣＲ引物用地高辛标记，使扩增产物带有地高辛标记成份，再通过亲合素－生物素系统把生物素标记探针包被在固相聚苯乙烯小孔中，通过固相探针与ＨＢＶＤＮＡ扩增产物进行杂交，与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体反应，经ＮＰＰ显色，根据其Ａ４０５ｎｍ值大小，推算样品中ＨＢＶ ＤＮＡ模板含量。建立ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ的最     

PCR检测HBV—DNA与乙型型肝炎病毒不同血清标志的对比分析

为探讨ＨＢＶ－ＤＮＡ在乙肝炎病毒血清不同标志模式中的分布状况及临床意义。方法：应用聚合酶链反应技术在４８５例血清标本进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测，并与血清五项免疫指标对比分析。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗－ＨＢｃ阳性模式中，阳性率最高达９２．８６％；其次是ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ及ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｃ，阳性率分别为６６．２５％和６８．８３％；除单项抗－ＨＢｓ和免疫指标     

e抗原阴性乙肝患者HBV—DNA检出率与临床疾病状态的关系

研究肝病患者ｅ抗原转阴后病毒复制情况以及ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率与临床疾病状态的关系。方法采用ＰＣＲ技术对１０８例ｅＡｇ阴性、ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者进行血清ＨＢＶ－ＤＮＡ分析，同时进行肝功能指标检测。结果５０．９％的患者体内仍存在乙肝病毒复制。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性无症状携带者２７．８％、慢迁肝４５．８％、慢活肝７７．８％、肝硬化５６．５％、肝癌３７．５％。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组ＡＬＴ值为１３８．６±１０２．８ＩＵ，而ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性组为３４．２±３０．２ＩＵ。结论ｅＡｇ阴性乙肝病毒感染者中仍有相当一部分存在乙肝病毒复制。慢性活动性肝炎患者ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率最高。但是疾病发展到晚期，病毒复制能力又开始下降。     

慢性乙型肝炎组织HBV—DNA检测与肝脏超声显像关系的研究

以自行设计的可调式自动活检装置（ＡＡＢＤ），在超声导向下对１２例血清ＨＢＶ标记物阳性的慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）病人肝脏进行活检，组织标本进行ＨＢＶＰＣＲ和Ｄｏｔ－Ｂｌｏｔ杂交检测并与超声显像参数做相关关系的研究。１２例ＣＨＢ中，５例血清及肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性，血清ＡＬＴ均≤４５ｕ／Ｌ（ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性组）；７例血清及肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，血清ＡＬＴ均≥６８ｕ／Ｌ（ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组）。超声检查肝实质回声直方图的像素均值（ＡＶ）及其标准差（ＳＤ），两组差异显著（Ｐ＜０．０５）；慢性肝炎中两组分别与正常对照组比较，超声检查的多项指标的差别具有显著性意义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。多元线性回归与相关分析发现，ＣＨＢ病人的肝实质回声及其直方图的ＡＶ和ＳＤ，以及肝内血管走行情况与肝内ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出存在相关关系（ｒ＝０．５１２，Ｐ＝０．０２１，各偏回归系数的Ｐ值亦均＜０．０５），并计算出多元回归方程。     

乙肝患者血清HBV DNA检出率分析

探讨ＰＣＲ技术测定ＨＢＶ ＤＮＡ的临床应用价值。用ＰＣＲ法与ＥＬＩＳＡ法测定乙国清标志物。结果表明ＨＢＶ ＤＮＡ在乙肝患者血清平均检出率５４．８％。人为ＨＢＶ ＤＮＡ的检出率与乙现毒所处的临床阶段,基因的整合与突变及抗病毒药物的应用相关。     

荧光定量PCR检测HBV—DNA的临床意义

本文采用荧光定量ＰＣＲ法对本院临床和门诊血清标本2 0 0份进行ＨＢＶ ＤＮＡ含量测定 ,探讨ＨＢＶ ＤＮＡ含量与肝病变发展的关系。1　材料和方法1 1　材料　标本取自确诊或怀疑乙肝的患者及无症状体检者 ,共检测 2 0 0例。试剂∶荧光定量ＨＢＶ ＤＮＡ试剂盒由匹基公司提供。仪器∶ＰＥ5 70 0ＰＣＲ仪。1 2　方法　ＨＢＶ ＤＮＡ定量分析采用荧光定量ＰＣＲ法。按操作说明书进行。1 3　统计学方法　各组ＨＢＶ ＤＮＡ含量均数比较采用ｔ检验。遇有阴性结果不参加平均值的统计。2　结果2 1　ＨＢＶ ＤＮＡ、ＦＱ ＰＣＲ标准曲线　ＨＢＶ …     

乙型肝炎表面抗原阳性血清经不同方法消毒后用PCR法对HBV—DNA…

经用ＰＣＲ法技术检测，以辐照度值〉１０５μＷ／ｃｍ＾２的紫外线对ＨＢｓＡｇ阳性血清照射８小时，对ＨＢＶ－ＤＮＡ有一定灭活作用。煮沸１０分钟，或者以７５％乙醇作用１小时，对ＨＢＶ－ＤＮＡ灭活能力较差。     

乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞及血清内HBV－DNA的检测及其意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测急性和慢性乙肝患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率为６３．８％。其中，急肝患者阳性率为７８．６％；慢迁肝患者为５６．３％；慢活肝患者为５７．１％。ＰＢＭＣ中ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ和ｅ抗原有一致性，但ＨＢｅＡｇ阴性者中也有部分患者的ＰＢＭＣ中有ＨＢＶ－ＤＮＡ存在。本法消除了血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＰＢＭＣ自身ＤＮＡ的干扰，并且与传统分子杂交方法相比，工作量大大减少。     

聚合酶链反应检测HBV相关抗体阳性血清中HBV－DNA的意义

聚合酶链反应检测ＨＢＶ相关抗体阳性血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的意义湖南医科大学附属湘雅医院甘晓明谭德明胡国龄李铁钢ＨＢＶ血清学标志和ＨＢＶ－ＤＮＡ检测是目前诊断ＨＢＶ感染常用的指标。用ＥＬＩＳＡ检测血清ＨＢＶ血清学标志，因方法简便易行而被广大基层医院所采用...     

用通用引物PCR检测HBV DNA的研究

本文设计一对ＨＢＶ亚型通用的ＰＣＲ引物，用于检测血清ＨＢＶ ＤＮＡ。ＰＣＲ扩增后，产物经２％琼脂糖凝胶电泳分析与ＥＩＡ法有较高的阳性符合率。阳性扩增条带单一清晰，扩增产物的分子量可靠，可测出８０ｆｇ／ｍｌ的微量ＨＢＶ ＤＮＡ。本法准确、敏感，可用于临床常规检测ＨＢＶ ＤＮＡ。     

乙肝患者粪便中HBV－DNA的检测

乙肝患者粪便中ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测刘家秀，刘兴祥，曹维克（江苏省淮阴卫生学校）本文采用ＰＣＲ检测１５０例乙肝患者粪便中ＨＢＶ－ＤＮＡ，以了解各型肝炎患者粪例中ＨＢＶ－ＤＮＡ的确切情况及传染性如何，并对其临床意义作了一些探讨。１材料与方法１１５０例肝炎...     

乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞及血清内HBV—DNA的检测及…

应用聚合酶链反应检测急性和慢性乙肝患者外周血单个核细胞中的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率为６３．８％。其中，急肝患者阳性率为７８．６％；慢迁肝患者为５６．３％；慢活肝患者为５７．１％。ＰＢＭＣ中ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ和ｅ抗原有一致性。但ＨＢｅＡｇ阴性者中也有部分患者患者的ＰＢＭＣ中有ＨＢＶ－ＤＮＡ存在。     

207例乙肝患者血清HDV RNA和HBV DNA检测及其意义探讨

对２０７例急性，慢性，亚急重型乙型肝炎患者的外周血进行了丁肝病毒（ＨＤＶ）ＲＮＡ和乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的检测，结果检出ＨＤＶＲＮＡ阳性２８例（１３．５％）。其中，在抗－ＨＢｅ阳性者和ＨＤＶＲＮＡ检出率较高，为１８．９％，ＨＢｅＡｇ阳性者中的ＨＤＶＲＮＡ检出率较低，为７．９％，在本文２８例ＨＤＶＲＮＡ阳性的患者中６例（２１．４％）检出ＨＢＶＤＮＡ；而在其余１７９例ＨＤＶＲＮＡ阴性病例中，则有６５     

快速反应杂交法检测HBV DNA

为建立一种简便快速的该酸探针杂交法检测产产物中的ＨＢＶ ＤＮＡ,将ＰＣＲ上游引物用生物素标记后进行扩增;核酸探针固定于硝酸纤维素膜上,与带有生物素的ＰＣＲ扩增产物杂交,杂交信号用链霉亲和素－酶结合物显色检测。结果表明,该法检测的敏感性为５ｆｇ,杂交时间为４０分钟。２００例临床标本检测的阳性率（２７．５％）高于琼脂糖电流法（２４．５％）。同时具有操作简便的特点,可作为ＰＣＲ扩增产物中ＨＢＶ ＤＮＡ的     

用PCR检测慢性乙肝患者唾液、尿液中HBV－DNA

用ＰＣＲ检测慢性乙肝患者唾液、尿液中ＨＢＶ－ＤＮＡ龚希平，徐乾（南京市钟阜医院，２１００７０）本文通过应用ＰＣＲ技术对慢性乙肝患者的唾液、尿液进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，以了解唾液、尿液中ＨＢＶ－ＤＮＡ的确切情况及其传染性如何，并就其临床意义作了一些探...     

乙型肝炎患者HBV－DNA和HBeAg检测的比较

乙型肝炎患者ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ检测的比较上海第二医科大学（２０００２５）刘丹，支立民，徐伯忠本文应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和酶联免疫吸附法对６６例确诊为乙型肝炎患者的血清，分别检测ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ、ＨＢｓＡｇ，现将结果报道如下。一、...     

乙型肝炎病毒感染性病人及携带者的HBV DNA诊断研究

核酸分子杂交技术，能直接从血清中检出１０－１Ｐｇ的ＨＢＶＤＮＡ，最近发展起来的聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术能检出１０－３Ｐｇ的ＨＢＶＤＮＡ。本文所介绍的ＰＣＲ与染色技术的结合于１９９７年８月检测４１６人ＨＢＶＤＮＡ，并与溴化乙锭（ＥＢ）染色进行对比分...