CD4+ CD25high T细胞和FOXP3在不明原因复发性自然流产中的作用

 【目的】 检测不明原因复发性自然流产(URSA)患者外周血及蜕膜的CD4+ CD25high T细胞和FOXP3的表达,探讨CD4+ CD25high T细胞和FOXP3在母胎免疫耐受中的作用&;#65377;【方法】 选择从2005年9月至2006年6月就诊的154例URSA患者根据就诊时的妊娠状态分成未孕组129例,早期流产组25例;正常早孕要求人工终止妊娠的妇女组50例及正常未孕女性组42例为对照组&;#65377;收集所有研究对象的外周血及由于计划外妊娠要求行人工流产者和已确认胚胎停育的URSA患者行清宫术后的新鲜蜕膜组织,采用流式细胞仪分析外周血及蜕膜组织CD4+ CD25+ 调节性T细胞及其亚群的比例及FOXP3表达&;#65377; 【结果】 ①外周血及蜕膜中CD4+ CD25high T细胞的比例:正常早孕妇女外周血CD4+ CD25high T细胞高于正常未孕妇女及URSA流产组, 差异有统计学意义(P < 0.01),URSA未孕患者外周血CD4+ CD25high T细胞也显著低于正常未孕女性及URSA流产患者(P < 0.01);URSA流产患者蜕膜CD4+ CD25high T细胞低于正常早孕妇女蜕膜(0.62 ± 0.27 vs. 1.41 ± 0.31, P < 0.01)&;#65377;②外周血及蜕膜中FOXP3表达比例:正常早孕妇女外周血CD4+ CD25high T细胞中FOXP3的表达比例为(95.6 ± 3.6),高于正常未孕妇(92.1 ± 3.4)及URSA流产患者,差异有统计学意义(P < 0.01;P < 0.05);URSA未孕组患者外周血中FOXP3的表达与正常未孕妇女及URSA流产组之间相比无统计学差异(P > 0.05);URSA流产患者蜕膜CD4+ CD25high T细胞中FOXP3的表达比例低于正常早孕妇女蜕膜,差异有统计学意义(94.3 ± 3.1 vs. 97.1 ± 2.2, P < 0.01)&;#65377;【结论】 CD4+CD25high T细胞在维持正常妊娠中发挥重要作用,URSA的发生与CD4+CD25high T细胞的减少有关,URSA患者CD4+ CD25high T细胞比例下降与FOXP3表达的降低有关&;#65377;     

正常早孕及稽留流产患者NK细胞中整合素αvβ3的表达分析

目的分析正常早孕妇女和稽留流产患者外周血及蜕膜组织中CD56+CD16-和CD56+CD16+自然杀伤(NK)细胞比率以及细胞表面整合素αvβ3的表达。方法分别采集15例正常早孕妇女和7例稽留流产患者外周血和蜕膜组织,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞的比率以及其细胞表面αvβ3表达。结果 与早孕妇女外周血相比,蜕膜组织中CD56+CD16-NK细胞比率增高而CD56+CD16+NK细胞的比率却降低(P<0.01);正常早孕妇女及稽留流产患者外周血和蜕膜组织中CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞的比率均无差异(P>0.05)。与正常早孕妇女相比,稽留流产患者蜕膜组织CD56+CD16-NK细胞表面αvβ3阳性表达率降低而其平均荧光强度(GM)值却增高(P<0.05)。结论 NK细胞及其所表达的整合素αvβ3在早孕期胚胎植入及胎盘形成过程中发挥重要作用,稽留流产患者NK细胞表面整合素αvβ3的表达异常,可能是稽留流产发生的免疫致病因素。     

新生儿败血症患者外周血CD14~+CD16~+单核细胞亚群检测及意义

目的:探讨新生儿败血症患者外周血中CD14+CD16+单核细胞亚群的比例及其临床意义。方法:用流式细胞术检测抗感染治疗前后新生儿败血症患者及健康新生儿外周血中CD14+CD16+单核细胞亚群的比例。结果:抗感染治疗前败血症组CD14+CD16+单核细胞亚群比例明显高于健康新生儿组(P<0.05);抗感染治疗后败血症组CD14+CD16+单核细胞亚群比例下降,与健康新生儿组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对感染新生儿行外周血CD14+CD16+单核细胞亚群检测有助于新生儿败血症的诊断及疗效的观察。     

不明原因早期复发性自然流产患者蜕膜组织CD158受体的表达

目的 探讨不明原因早期复发性自然流产(RSA)患者和正常对照组早孕子宫蜕膜组织中杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)CD158表达的特征。方法 选择2009年1月至2010年6月就诊的RSA患者和同期计划生育门诊因计划外孕行人工流产术者各30例,并根据孕周分组,流式细胞术检测蜕膜组织细胞表面标记,比较RSA患者和对照者CD56、CD16、CD158a(KIR2DL1/S1)、CD158b(KIR2DL2/S2)表达的变化规律。结果 ① RSA患者CD56+细胞数显著少于对照者(P=0.007),CD56+/CD16-细胞较对照组降低(P＜0.05);② RSA患者CD158a在CD56+/CD16-细胞表面的表达显著降低(P=0.026);③ 按孕周分组分析显示,孕7~10周患者CD56+/CD16-细胞表面表达CD158a较同期对照者显著降低(P=0.010);④ 正常早孕蜕膜组织CD158a、CD158b与CD56表达呈显著正相关(P＜0.01)。结论 早孕蜕膜组织CD56+/CD16-细胞减少可能为不明原因自然流产的发病机制之一。 CD56+/CD16-细胞表面CD158a表达下降与不明原因自然流产有关,且其变化与早孕孕周相关。     

弓形虫感染致早孕蜕膜自然杀伤细胞亚群的变化

目的 通过检测弓形虫感染后早孕蜕膜自然杀伤(NK)细胞亚群的变化,探讨其与弓形虫感染致不良妊娠结局的相关性. 方法 无菌获取10例正常健康早孕孕妇蜕膜组织,分离并纯化蜕膜NK细胞,培养24 h后平均分为2组:实验组细胞与弓形虫强毒株(RH株)共培养48 h,对照组加等量生理盐水.流式细胞分析实验组和对照组蜕膜NK细胞亚群的变化. 结果 实验组蜕膜NK细胞CD56+CD16-亚群所占比例为(48.83±21.99)%,对照组为(57.70±18.97)%;实验组CD56+CD16+亚群所占比例为(11.48±10.70)%,对照组为(4.45±4.24)%;实验组CD56+ CD16-/CD56+CD16+比值为(10.92±17.84)%,对照组为(23.37±19.98)%;以上差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组蜕膜NK细胞CD56+亚群所占比例为(60.31±22.53)%,对照组为(62.16±19.76)%,两组之间无统计学差异(P＞0.05). 结论 早孕期弓形虫感染可致蜕膜NK细胞CD56+CD16-亚群所占比例下降,且CD56+CD16+亚群所占比例上升,打破了正常妊娠时两者之间的平衡状态,这可能是早孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子机制.     

骨髓增生异常综合征患者免疫功能检测的临床意义

①目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者免疫功能的变化及临床意义。②方法采用流式细胞术检测23例确诊但未治疗的MDS患者及20例健康志愿者的外周血淋巴细胞亚群,包括CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+的比值、B淋巴细胞(CD3-CD19+)和NK细胞[CD3-(CD16+/CD56+)]亚群比例。③结果与健康对照组相比,MDS患者外周血T淋巴细胞计数明显减低,亚群比例失衡,以CD4+的T辅助细胞亚群减低为主,CD8+的抑制性T细胞阳性率增加,CD4+细胞与CD8+细胞比例倒置,具有杀伤肿瘤细胞作用的NK细胞和B细胞数量亦低于正常人。④结论 MDS患者的免疫功能降低,检测MDS患者外周血淋巴细胞亚群表达可用于MDS患者的免疫监测。     

反复自然流产患者外周血T淋巴细胞亚群比率的变化与作用

目的 探讨T淋巴细胞亚群在反复自然流产患者体内的比率变化及作用.方法 采用流式细胞仪对59例反复自然流产病人,60例正常早孕妇女妇女外周血T淋巴细胞亚群进行检测.结果 反复自然流产病人外周血CD3+T淋巴细胞比率明显高于正常早孕妇女(P＜0.05);CD4+T淋巴细胞比率明显高于正常早孕妇女(P＜0.05);CD4+/CD8+比值明显高于正常早孕妇女(P＜0.05).结论 T淋巴细胞CD3+、CD4+比率及CD4+/CD8+比值升高与反复自然流产的发生有关.     

变应原对哮喘患者外周血CD4+T细胞功能的影响

目的 探讨CD4+T细胞增殖以及白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平与过敏性哮喘发病之间的关系.方法 制备粉尘螨抗原作为变应原.以25例哮喘患者和15名健康者为研究对象.采集静脉血样本后分为空白对照组、变应原组和自体对照组.流式细胞术检测各组CD4+细胞增殖及CD4+/IL-10+、CD4+/TGF-β+1、CD4+/IL-10+/TGF-β+1细胞亚群分布情况.结果 哮喘患者和健康者之空白对照组的外周血样本中几乎不能检测到CD4+/IL-10+、CD4+/TGF-β+1 和CD4+/IL-10+/TGF-β+1 细胞.健康者变应原组外周血CD4+T细胞增殖明显,CD4+ 、CD4+/IL-10+ T细胞所占比例均较其自体对照组明显增高,而CD4+/TGF-β+1 和CD4+/IL-10+/TGF-β+1亚群所占比例无显著性增加.哮喘患者变应原组外周血CD4+T细胞及CD4+/IL-10+、CD4+/TGF-β+1 和CD4+/IL-10+/TGF-β+1亚群所占比例与其自体对照组比较均未见明显增加.变应原刺激后,哮喘患者外周血CD4+/IL-10+亚群明显少于健康者(P＜0.05),但两者间CD4+T细胞及CD4+/TGF-β+1、CD4+/IL-10+/TGF-β+1亚群所占比例无显著性差异.结论 哮喘患者受特异性变应原刺激后,CD4+T细胞产生的IL-10水平不能相应提高,可能是导致或加重哮喘发病的原因之一.TGF-β1在支气管哮喘发病中的作用尚不明确,有待进一步研究.     

妊娠早期CD56brightCD16- NK细胞CD49d和CD11b的表达分析

目的  探讨早期妊娠和稽留流产患者外周血CD56brightCD16- NK细胞及蜕膜组织子宫自然杀伤(uNK)细胞中整合素α4（CD49d）和αm (CD11b)的表达。方法  采集18例早期妊娠妇女外周血（其中14例另取蜕膜组织）和9例稽留流产妇女外周血,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56brightCD16- NK细胞中CD49d和CD11b表达。结果  CD49d和CD11b在早期妊娠蜕膜CD56brightCD16- NK细胞表达显著低于早期妊娠妇女外周血CD56brightCD16-NK细胞(P＜0.01);稽留流产患者外周血CD56brightCD16- NK细胞的表达较早期妊娠妇女显著降低(P＜0.05)。结论  CD49d和CD11b可能在妊娠早期uNK细胞的募集中起重要作用,同时也可能参与了正常妊娠的维持。     

重症肌无力患者外周血T淋巴细胞亚群分布特点及临床意义

目的重症肌无力(myasthen ia gravis,MG)是T细胞依赖的、抗体介导的自身免疫性疾病。文中探讨MG患者外周血T细胞亚群分布特点及其与预后的相关性。方法采用流式细胞技术测定例MG患者外周血CD4+、CD8+细胞亚群百分比,分析不同年龄、性别、临床分型MG患者外周血T细胞亚群分布特点。随访MG患者经胆碱酯酶抑制剂、糖皮质激素及胸腺扩大切除术3种不同治疗方案后3~14个月的治疗效果,分析MG患者T淋巴细胞亚群异常与其临床转归的相关性。结果与正常对照组相比,MG患者外周血CD8+T细胞百分比明显降低,CD4+/CD8+比值异常升高,2组间CD4+T细胞百分比无差异。不同性别、临床分型MG患者外周血T细胞亚群分布无明显差异。但随着年龄的增加CD4+/CD8+比值升高。仅服用胆碱酯酶抑制剂患者预后与外周血T细胞亚群百分比无关。治疗前患者T细胞亚群紊乱明显,即CD8+百分比下降、CD4+/CD8+比值升高明显者,经糖皮质激素及胸腺扩大切除术疗效较好。结论 MG患者体内存在T淋巴细胞亚群分布异常,且随着年龄的增加越明显,而与性别、临床分型无关。治疗前患者T细胞亚群紊乱者糖皮质激素及胸腺扩大切除术疗效明显。检测外周血T淋巴细胞亚群百分比对于临床指导治疗、判断预后有重要意义。     

外周血及蜕膜组织中CD4加CD25加调节性T细胞比例与原因不明复发性流产的关系研究

目的：：探讨外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例与原因不明复发性流产的关系。方法：随机选取自2012年6月到2015年6月,我院门诊部与住院部的原因不明复发性流产患者62例(观察组)和正常妊娠妇女62例(对照组)作为研究对象。采用流式细胞四色荧光法测量两组研究对象外周血及蜕膜组织中的 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例。分析比较两组研究对象外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例情况。结果：观察组患者外周血中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例低于对照组患者外周血中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞的比例,且两组差异具有统计学意义( t ＝2.669,P ＝0.015);观察组患者蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例低于对照组患者蜕膜组织中CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例,两组差异具有统计学意义(t ＝4.986,P ＝0.001)。结论：外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例在早孕期显著升高,参与了正常妊娠的维持,有可能是调控母胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素;外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例降低可能与 URSA 的发生有关。     

妊娠早期外周血和蜕膜CD4~+CD25~+FoxP3~+/CD127~-T细胞检测及意义

目的 研究妊娠早期外周血和蜕膜组织中CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞的数量变化,并探讨相关性.方法 17例原因不明复发性流产(URSA)患者(URSA组)和20名正常健康早孕者(对照组)于人工流产时分别采集外周血和蜕膜组织,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,分别加入CD4-PE-Cy5.5、CD25-FITC或CD25-APC和细胞表面标记CD127-PE或细胞内标记FoxP3-PE,流式细胞仪检测样本中CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞的百分比,并进行线性相关分析.结果 与对照组比较,URSA组蜕膜组织中CD4+CD25+ FoxP3+和CD4+CD25+ CD127-T细胞百分比明显降低(均P<0.05);两组间外周血CD4+CD25+ FoxP3+和CD4+CD25+ CD127-T细胞百分比比较差异无统计学意义.组内比较显示,两组外周血和蜕膜组织中CD4+CD25+FoxP3+与CD4+CD25+CD127-T细胞百分比比较,差异均无统计学意义(均P﹥0.05).相关分析显示,两组CD4+CD25+ FoxP3+与CD4+CD25+ CD127-T细胞的百分比在外周血(r=0.9858, r=0.6870)和蜕膜组织(r=0.6089, r=0.9583)均呈显著正相关(均P﹤0.05).结论 URSA的发生可能与蜕膜CD4+CD25+ 调节性T细胞数量减少有关,而外周血CD4+CD25+调节性T细胞可能不参与URSA的免疫发病机制.细胞表面标记CD127可能成为鉴定和分离CD4+CD25+调节性T细胞的一种新的特异性标记物.     

正常妊娠孕妇外周血中CD4+CD25+T细胞比例的变化

目的:研究正常妊娠不同孕期孕妇外周血及脐血中CD4+CD25+T细胞的比例变化,探讨CD4+CD25+T细胞在妊娠中的作用。方法:应用流式细胞技术检测孕妇外周血中CD4+CD25+T细胞的比例变化。结果:正常妊娠过程中孕妇外周血中CD4+CD25+T细胞比例呈周期性变化:妊娠早期较高,中期升至最高,分娩时降至最低,低于正常孕龄非妊娠妇女(P<0.05)。结论:CD4+CD25+T细胞在正常妊娠的免疫耐受中发挥重要作用。     

小鼠孕早期暴露量子点对妊娠结局和CD4+ CD25+ Treg细胞的影响

目的  探讨小鼠孕早期暴露硫化锌量子点（QDs）对妊娠结局和外周血CD4+ CD25+ Treg细胞的影响。方法  制备成年健康孕鼠并将其随机分为高剂量QDs组、低剂量QDs组和对照组,分别于妊娠第3～5天尾静脉注射0.50和0.05μmol/L QDs,以及生理盐水各100μl,于妊娠第15天观察妊娠结局,并采用流式细胞术分析孕鼠外周血CD4+ CD25+ Treg细胞比例。结果  QDs可引起流产、吸收胎和死胎等不良妊娠结局,高剂量QDs使胚胎平均着床数、胎鼠均重及胎盘均重低于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）;且QDs暴露孕鼠外周血CD4+ CD25+ Treg细胞的比例低于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。结论  小鼠孕早期暴露QDs具有胚胎毒性,且其毒性机制可能与降低外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞比例、扰乱妊娠免疫耐受有关。

     

蜕膜自然杀伤细胞在人早孕期基蜕膜和壁蜕膜的分布比较

目的对比蜕膜自然杀伤(decidual natural killer,dNK)细胞在人早孕期同一个体基蜕膜和壁蜕膜中的分布,探讨其在早孕期的可能作用。方法采用HE染色和免疫组织化学方法标记细胞角蛋白7阳性细胞以区分壁蜕膜和基蜕膜,进而检测CD56的表达,从而显示壁蜕膜和基蜕膜中dNK细胞的数量。结果基质中有细胞角蛋白7阳性的绒毛外滋养层细胞的是基蜕膜标记;CD56呈阳性反应的dNK细胞在基蜕膜中的数量明显多于(P<0.01)壁蜕膜。结论蜕膜自然杀伤细胞在人正常早孕蜕膜中的分布不同,其可能与滋养层细胞的侵入有关。     

Th17细胞和Treg细胞与不明原因复发性流产的关系

目的:探讨Th17/Treg细胞在不明原因复发性流产患者外周血、子宫蜕膜组织中的变化以及Th17细胞相关细胞因子IL-17、IL-6的表达情况。方法:应用流式细胞术检测20例不明原因复发性流产患者（实验组）、20例正常早期妊娠人工流产患者（对照组）外周血、子宫蜕膜组织中Th17细胞和Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比...     

系统性红斑狼疮患者妊娠期外周血中的T淋巴细胞亚群的变化

目的：探讨系统性红斑狼疮（ＥＬＥ）孕妇外周血中的Ｔ淋巴细胞亚群的改变。方法：采用流式细胞仪对１４例系统性红斑狼疮患者妊娠后（ＳＬＥ＋ＮＰ组）的外周血Ｔ淋业九进行检测，并以１８例系统性红斑狼疮非行娠妇女（ＳＬＥ组），２０例正常非妊娠妇女（ＮＮＰ组）作对照。结果：ＳＬＥ＋ＮＰ组的ＣＤ３、ＣＤ８百分率与ＳＬＥ，ＮＮＰ组比较无显著性差异，而ＣＤ４的百分率和ＣＤ４／ＣＤ８的比值都低于ＳＬＥ和ＮＮＰ组。结论：     

Onset of Coronary Heart Disease is Associated with HCMV Infection and Increased CD14~+CD16~+ Monocytes in a Population of Weifang,China

Objective To investigate the relationship between human cytomegalovirus(HCMV) infection and peripheral blood CD14~+CD16~+ monocytes in the pathogenesis of coronary heart disease(CHD), and to elucidate the mechanism of pathogenesis in CHD by analyzing the correlation between infection,inflammation, and CHD, to provide a basis for the prevention, evaluation, and treatment of the disease.Methods In total, 192 patients with CHD were divided into three groups: latent CHD, angina pectoris,and myocardial infarction. HCMV-IgM and-IgG antibodies were assessed using ELISA; CD14~+CD16~+monocytes were counted using a five-type automated hematology analyzer; mononuclear cells were assessed using fluorescence-activated cell sorting; and an automatic biochemical analyzer was used to measure the levels of triglyceride, cholesterol, high-and low-density lipoprotein cholesterols,lipoprotein, hs-CRp and Hcy.Results The positive rates of HCMV-IgM and-IgG were significantly higher in the CHD groups than in the control group. HCMV infection affects lipid metabolism to promote immune and inflammatory responses.Conclusion HCMV infection has a specific correlation with the occurrence and development of CHD.The expression of CD14~+CD16~+ mononuclear cells in the CHD group was increased accordingly and correlated with acute HCMV infection. Thus, HCMV antibody as well as peripheral blood CD14~+CD16~+mononuclear cells can be used to monitor the occurrence and development of CHD.     

妊娠梅毒患者外周血T/B/NK淋巴细胞亚群检测及分析

目的:检测妊娠梅毒患者外周血中淋巴细胞亚群及NK细胞的表达情况,探讨其在妊娠梅毒发病机制中的作用。方法:采用流式细胞仪对12例未经驱梅治疗的妊娠梅毒患者及16例血清固定的妊娠梅毒患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD19+、NK细胞进行检测,并与12例梅毒非妊娠女性、32例健康孕妇、25例健康非妊娠女性进行比较。结果:与其他4组相比,血清固定组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+细胞比例均显著降低（P＜0.05）,CD8+细胞比例显著升高（P＜0.05）;未治疗组CD4+细胞比例低于健康孕妇组（P＜0.05）,CD8+细胞比例高于梅毒非孕妇组、健康孕妇组和健康非孕妇组（P＜0.05）;未治疗组和血清固定组CD19+细胞比例均高于梅毒非孕妇组、健康孕妇组和健康非孕妇组（P＜0.05）;血清固定组NK细胞比例高于未治疗组（P＜0.05）;梅毒非孕妇组、健康孕妇组和正常非孕妇组各项淋巴细胞亚群水平无统计学差异（P＞0.05）。结论:妊娠梅毒患者存在细胞免疫抑制,体液免疫受到影响;血清固定组出现免疫失衡,NK细胞水平下降,引起机体对梅毒螺旋体的清除能力下降。