胃癌患者外周血CD133 mRNA检测及其临床意义

目的 探讨胃癌患者外周血CD133 mRNA表达情况及其临床意义.方法 抽取10名健康志愿者（组1）、5例胃溃疡穿孔患者（组2）,18例胃癌术前患者（组3）及19例胃癌术后患者（组4）外周静脉血2 ml,分离单核细胞,采用半定量RT-PCR检测CD133 mRNA表达水平.结果 组3患者外周血CD133 mRNA灰度值显著高于组1和组2（P=0.001）.组4患者中12例复发转移者外周血CD133mRNA灰度值显著高于7例无复发转移者（P=0.042）.CD133 mRNA表达与淋巴结转移和肿瘤分期有关（P＜0.05）.CD133 mRNA灰度值与淋巴结转移率呈正相关（P=0.007）.结论 胃癌患者外周血高表达CD133 mRNA,其表达与淋巴结转移率正相关.胃癌术后外周血高表达CD133mRNA提示肿瘤复发或转移.     

胃癌组织中CD133的表达及其临床意义

目的研究胃癌组织中CD133表达的相互关系,重点明确术前、术后外周血单核细胞中CD133mRNA表达的临床意义及其与胃癌原发灶CD133表达的关系。方法 50例胃癌、10例胃溃疡穿孔及10名健康自愿者入组研究。胃癌患者术前和术后1周抽外周静脉血各4 ml,密度梯度离心法分离单核细胞,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CD133 mRNA表达水平。胃溃疡穿孔患者术前抽外周静脉血、健康自愿者抽晨血各4 ml。胃癌原发灶及癌旁正常胃黏膜组织分别行RT-PCR、免疫组织化学染色检测CD133 mRNA和蛋白的表达。分析CD133表达对各临床病理特征和预后的影响。结果健康自愿者及术前胃溃疡患者及胃癌患者外周血中CD133 mRNA的半定量值分别为0.029±0.060、0.059±0.099及0.270±0.163(P=0.000)。胃癌患者术前外周血CD133 mRNA表达与肿瘤组织分化程度、淋巴管浸润、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均有关(P<0.05)。相关分析显示,胃癌患者术前外周血中CD133 mRNA半定量值与淋巴结转移率(rs=0.422,P=0.002)、癌转移淋巴结枚数(rs=0.398,P=0.004)呈正相关,并与胃癌原发灶中CD133 mRNA的表达呈正相关(rs=0.337,P=0.017)。胃癌原发灶中CD133蛋白表达阳性者,术前外周血中CD133 mRNA的半定量值较CD133蛋白表达阴性者高(Z=-2.539,P=0.011)。50例胃癌患者行胃癌根治术后1周,其外周血中CD133 mRNA半定量值明显高于术前CD133 mRNA的表达水平(P=0.021)。胃癌浸润深度较深者,术后CD133 mRNA表达升高更明显(Z=-1.978,P=0.039)。术后外周血中CD133 mRNA高表达者较低表达者预后更差(χ2=6.193,P=0.013)。结论胃癌患者术前外周血高表达CD133 mRNA,其与肿瘤分化程度、淋巴管浸润、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及胃癌原发病灶CD133蛋白表达有关,且与淋巴结转移率、癌转移淋巴结枚数及胃癌原发灶中CD133 mRNA的表达呈正相关。术后患者外周血中CD133 mRNA半定量值较术前明显升高,这一升高提示肿瘤浸润程度较深,患者预后较差。     

趋化因子受体CXCR4在胃癌中的表达及其意义

目的 探讨趋化因子受体CXCR4在胃癌和腹腔内转移灶中的表达及其意义.方法 免疫组化法检测胃痛原发灶、淋巴转移灶、腹膜转移灶以及正常胃黏膜组织中的CXCR4表达情况.RT-PCR半定量检测胃癌原发灶、淋巴转移灶、腹膜转移灶以及正常胃黏膜组织中CXCR4 mRNA表达水平.结果 免疫组化结果 显示CXCR4在胃癌原发灶中的表达与肿瘤的分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P＜0.05).RT-PCR结果 显示早期胃癌中,进展期胃癌组织、淋巴结转移灶和腹膜转移灶中的CXCR4 mRNA表达呈依次增强,各分组间CXCR4的表达差异有显著性(P＜0.05).结论 CXCR4在原发灶中的表达与胃癌分期、肿瘤的浸润深度及淋巴结转移有关.表达CXCR4高的胃癌细胞更具侵袭性和转移性.     

非小细胞肺癌淋巴结转移和预后与CD133和CD147表达的关系

目的观察肿瘤干细胞标志物CD133和CD147在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学方法检测77例NSCLC组织中CD133与CD147的表达，分析其与患者肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果77例NSCLC组织中CD133与CD147的阳性表达率分别为51．9％（40／77）和67．5％（52／77）。CD133和CD147的表达与淋巴结转移呈正相关（r=0．246，P〈0．05；r=0．295，P〈0．05）；CD133和CD147的表达均与患者术后生存时间呈负相关（P〈0．05）。CD133和CD147的表达与肿瘤大小、组织学类型和组织分化程度均无明显相关（P〉0．05）。CD133与CD147的表达之间呈正相关（r=0．315，P〈0．05）。结论肿瘤干细胞标志物CD133和CD147的表达与NSCLC的淋巴转移和患者预后密切相关，它们的高表达提示预后不良。     

RNA干扰抑制KATO-Ⅲ CD133阳性胃癌细胞CD133基因表达及对其生物学特性的影响

目的 探讨CD133基因表达被抑制后对胃癌细胞增殖、侵袭、克隆球形成及化疗药物敏感性的影响.方法 通过免疫磁珠分选KATO-Ⅲ胃癌细胞中的CD133阳性细胞,将合成的CD133小干扰核糖核酸分子（siRNA）转染至KATO-ⅢCD133阳性胃癌细胞内,使用荧光标记的siRNA （FAM-siRNA）检测转染效率,通过RT-PCR、Western-blot方法检测CD133基因表达的沉默效果及上皮-间质转化（EMT）相关因子（E-cadherin、Snail和N-cadherin）的蛋白表达,采用CCK-8、Transwell侵袭实验、单克隆球形成实验和CCK- 8等方法分别检测细胞增殖、侵袭、克隆球形成能力及对化疗药物5-氟尿嘧啶（5-FU）的敏感性.结果 转染24 h后,转染效率可达到（87.7±8.1）％.干扰组CD133 mRNA及蛋白的表达显著低于阴性对照组（P＜0.01）.转染24、48和72 h后,与阴性对照组比较,干扰组细胞的增殖活性均得到显著抑制,差异均有统计学意义（P＜0.01）;转染72 h,干扰组细胞的增殖活性较阴性对照组降低了（52.1±8.0）％.与阴性对照组比较,干扰组的细胞侵袭数减少[（41.7±6.0）比 （130.3±11.0）,P＜0.05],克隆球形成率降低[（24.3±4.3）％比（45.1±6.4）％,P＜0.01],Snail和N- cadherin蛋白表达降低（P＜0.01）,而E-cadherin蛋白表达增高（P＜0.01）.干扰组细胞对化疗药物5-FU的敏感性显著增强,5-FU对干扰组细胞的抑制率为（62.4±3.3）％,较阴性对照组的（21.5±2.2）％增加（P＜0.01）.结论 CD133基因在胃癌细胞的增殖、侵袭、克隆球形成和化疗抵抗性等方面具有重要作用,可能是胃癌干细胞新型标志物,有望成为胃癌生物治疗的新靶点.     

胃癌组织中CD133蛋白表达及其临床意义

目的研究胃腺癌组织中CD133蛋白表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色方法检测99例胃癌患者手术切除的原发灶及正常胃黏膜组织中CD133蛋白的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果 29例(29.29%)患者肿瘤组织中CD133蛋白表达阳性,正常胃黏膜组织中均为阴性(P=0.000)。肿瘤直径>5 cm者CD133蛋白表达阳性率显著高于≤5 cm者(P=0.041);CD133蛋白表达与TNM分期有关(P=0.044);有淋巴结转移(P=0.017)、淋巴管浸润(P=0.000)和血管浸润(P=0.000)者,CD133蛋白表达显著增高。logistic回归分析显示:肿瘤浸润深度(P=0.011)、淋巴结转移(P=0.043)和TNM分期(P=0.049)分别是CD133蛋白表达阳性的独立危险因素。CD133蛋白表达阳性患者的术后生存时间短于表达阴性患者(P=0.046)。Cox比例风险回归模型分析显示,有淋巴结转移(P=0.042)、TNM分期(P=0.046)及CD133蛋白表达阳性(P=0.046)分别是胃癌患者预后的独立危险因素。结论胃癌组织中CD133蛋白的表达与胃癌的发展、转移及预后密切相关。     

趋化因子受体 CXCR4在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨CXCR4在胃癌组织中的表达及意义。方法应用RT-PCR法和免疫组织化学方法检测30例正常胃组织、86例胃癌组织中CXCR4的表达,其中86例胃癌中包括60例淋巴结转移和8例腹膜转移。结果 CXCR4蛋白在胃正常组织未见表达,在86例胃癌组织中的阳性表达率高达66.2%（57/86）。CXCR4的表达与胃癌患者的年龄、性别、胃癌组织类型无关,而与临床转移有关。结论 CXCR4m RNA及蛋白在胃癌组织、胃癌转移淋巴组织和胃癌腹膜转移组织中的表达上调与胃癌侵袭转移的发生和淋巴结及腹膜转移有关,CXCR4很可能是协同胃癌进展、胃癌淋巴结转移,尤其是腹膜侵袭转移的一个重要分子。     

乳腺癌中CD44v6与CXCR4 mRNA表达及临床意义

目的:研究乳腺癌组织中细胞表面黏附分子拼接变异体-6(CD44v6)和趋化因子受体4(CXCR4)m RNA的表达,探讨其表达相关性及与临床病理之间的关系。方法:应用q RT-PCR检测60例乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中CD44v6和CXCR4 m RNA的表达,分析两者表达、相关性及其与临床病理学特征的关系。结果:乳腺癌癌组织CD44v6和CXCR4 m RNA表达水平高于癌旁正常乳腺组织(P0.05);CD44v6和CXCR4的m RNA阳性表达率分别为56.67%(34/60)和61.67%(37/60),均明显高于癌旁正常乳腺组织(P0.01),且两者表达具有正相关性(r=0.399,P0.05);CD44v6与CXCR4 m RNA表达与乳腺癌的临床TNM分期及淋巴结转移有关(P0.01,P0.05),与患者的年龄、肿瘤大小及病理类型无关(P0.05)。结论:CD44v6和CXCR与乳腺癌发展和转移密有关,可作为乳腺癌的重要分子标志物和治疗靶点,联合检测两者的m RNA表达对乳腺癌的临床诊断及预后判断具有一定的指导意义。     

胃癌浸润性树突状细胞CD83和S100的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤组织浸润树突状细胞（tumor infiltrating dendriticcells,TIDCs）在胃癌组织的表达及临床意义.方法采用免疫组化、原位杂交及流式细胞术分别检测45例胃癌组织的TIDCs的S100,CD83及CD83 mRNA表达,并分析它们与临床病理特点的关系.结果免疫组化显示胃癌组织（42/45）中有S100＋DCs不均一表达,CD83表达于癌旁及正常黏膜.原位杂交显示CD83mRNA有少量（7/45）表达.流式细胞术可检测到较低水平CD83表达（4%）.S100和CD83 mRNA表达数量与患者年龄、性别、肿瘤部位、浸润深度、病理分期及淋巴结转移情况无显著相关性.免疫组化检测CD83表达与TNM呈负相关（r=-0.924,P＜0.01）;流式细胞术检测CD83与TNM分期及淋巴结转移呈负相关（r=-0.879,P＜0.01;r=-0.7 82,P＜0.05）.结论胃癌TIDCs以未成熟状态为主,S1 00表达提示其数量,CD83表达提示其功能,且与胃癌TNM分期及淋巴结转移有关,是更好的临床观测指标.     

早期胃癌淋巴转移的影响因素和缩小型手术治疗

分析影响淋巴转移的高危因素,探讨剖腹缩小手术的适应证。方法对５２０例早期胃癌手术病理标本进行研究,比较粘膜内癌（ｍ癌）和粘膜下层癌（ｓｍ癌）大体分类、浸润深度、溃疡伴发和病灶大小以及病理类型与淋巴转移的关系,同时探讨剖腹缩小手术（保留大网膜的Ｄ１＋７廓清术）和Ｄ２廓清术的手术死亡率和并发症。结果在２７５例ｍ癌和２４５例ｓｍ癌中,Ⅱｃ型淋巴转移最多。小于２０ｍｍ的ｍ癌,均无淋巴转移;大于２０ｍｍ的１５３例（５５６％）中,淋巴转移有４例（Ｐ＜０．０１）。无溃疡病灶的１４６例中,仅１例（０７％）有淋巴转移;但伴有溃疡病灶的１２９例中,有３例（２３％）有淋巴转移（Ｐ＜０．０５）。Ｄ１＋７式（６６例）术后肠梗阻的发生率较Ｄ２式（２５９例）有明显下降（１５％比１５％;Ｐ＜０．０１）。而手术死亡率和长期生存率则无明显变化。结论本组结果提示ｓｍ癌较ｍ癌易发生淋巴转移,而ｓｍ癌伴有溃疡时更易发生Ｎ２淋巴转移。因此剖腹缩小手术（Ｄ１＋７廓清术）的适应证宜为２０ｍｍ以下未伴有溃疡的ｍ癌。确定缩小手术适应证的前提是术前高精度的浸润深度的确定和术中准确的病理形态学诊断     

CD 133 and CXCR4 colon cancer cells as a marker for lymph node metastasis

Introduction

Colorectal cancer (CRC) stem cells or tumor-initiating cells (Co-TIC) are implicated in both cancer recurrence and extranodal metastasis. CD133 and CXCR4 are specific cell surface markers that are indicators of Co-TIC. The presence of lymph node (LN) metastases is one of the strongest negative prognostic factors for CRC patients. We examined the relationship between the Co-TIC markers CD133 and CXCR4 and LN involvement in CRC.

Methods

CRC cells were isolated via enzymatic digestion. CD133⁺, CXCR4⁺, and double-positive CRC cells were detected by fluorescence-activated cell sorting analysis. The percentages of CD133⁺, CXCR4⁺, and double-positive cells were identified and correlated to the number and percentage of positive LN on staging.

Results

Twenty-seven samples underwent fluorescence-activated cell sorting analysis. The mean percentage of CD133⁺ cells was 3.94% (range 0.15%–19.06%). The mean percentage of CXCR4⁺ cells was 6.15% (range 0%–27.11%). The mean percentage of CD133⁺CXCR4⁺ cells was 0.45% (range 0%–2.08%). Thirteen patients had LN metastasis: 8 N1 disease and 5 N2 disease. The correlation coefficients between the percentage of Co-TIC marker–positive cells and percentage of positive LN were r = 0.58 (P = 0.0016) for CD133⁺ cells, r = 0.36 (P = 0.5868) for CXCR4⁺ cells, and r = 0.56 (P = 0.0022) for double-positive cells.

Discussion

Our results show CD133⁺ and CD133⁺CXCR4⁺ cancer cells correlate with the presence of LN metastasis in CRC. Further studies will examine whether these markers can give consistent prognostic information and may help to develop novel diagnostic and therapeutic options.     

CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的研究

目的观察胃癌细胞CDl33表达与胃癌侵袭的关系,进而探讨其是否通过上皮间质转化（EMT）促进胃癌侵袭和转移。方法通过免疫磁珠分选技术,将KATO-Ⅲ细胞分为CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞,利用Transwell小室法检测其侵袭能力,并通过Western blot和RT-PCR方法检测siRNA干扰CDl33基因沉默前后其EMT相关因子的表达差异。Western blot法检测50例胃癌组织及癌旁组织CDl33和EMT相关因子的表达．并分析其相关性。结果CDl33阳性组穿膜细胞数（67．7±10．5）显著高于CDl33阴性组（13．3±6．8,P=0．001）。CDl33阳性细胞中Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达显著高于CDl33阴性细胞．而E-cadherin表达则明显低于CDl33阴性细胞（均P〈0．05）。siRNA干扰后,Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达明显下调,而E-cadherin表达则显著上升（均P〈0．05）。胃癌组织中CDl33、Snail及N-cadherin蛋白相对表达为0．635±0．119、0．599±0．114及0．754±0．154,明显高于癌旁组织的0．485±0．116（P=0．029）、0．259±0．108（P=0．020）和0．329±0．134（P=0．001）,而E-cadherin蛋白表达相对表达为0．378±0．123,明显低于癌旁组织的0．752±0．156（P=O．003）。相关分析显示,Snail及N-cadherin的表达与CDl33表达呈正相关（P〈0．05）,而E-cadherin的表达则与CDl33表达呈负相关（P〈O．05）。结论CDl33阳性胃癌细胞具有更强的侵袭能力,并可能通过EMT促进胃癌的侵袭和转移。     

分化型黏膜下胃癌淋巴结转移的危险因素探讨

目的 探讨分化型黏膜下胃癌淋巴结转移的危险因素,为EMR术后病理学诊断为黏膜下癌的患者制定合理术式提供理论依据.方法 回顾性分析70例分化型黏膜下癌的临床病理资料,分析临床病理特征与淋巴结转移的关系.结果 多因素分析表明,淋巴管癌栓和癌灶中存在未分化癌细胞成分(危险因素)与淋巴结转移有关,两指标组间差异有显著性(P<0.05).两危险因素都存在者,淋巴结转移率为75.0%,无危险因素者,淋巴结转移率为0.在11例26个淋巴结转移的患者中,17个淋巴结转移在N1,9个淋巴结转移超过N1 .结论 淋巴管癌栓和癌灶中存在未分化癌细胞成分是分化型黏膜下癌淋巴结转移的独立危险因素.对于黏膜内癌行EMR术后病理学检查是黏膜下癌的患者,上述危险因素可作为判断是否需要进行附加手术的简单标准.     

胃癌卵巢转移：附17例报告

目的 探讨胃癌卵巢转移的临床病理特点、诊断方法和治疗经验.方法 回顾分析33年间17例经手术治疗及病理证实的胃癌卵巢转移患者的临床资料.结果 胃癌卵巢转移患者的平均年龄48.41岁,常以卵巢转移灶为首发表现.超声检查以混合性肿块或实质性肿块为主要表现,多伴有腹腔积液,双侧卵巢转移多见（13例）.该病术前诊断困难,本组术前误诊率64.7%.本组均采用手术治疗,但预后较差,平均生存时间仅11.6个月.结论 胃癌卵巢转移预后差,对于双侧卵巢肿瘤患者应注意检查胃部情况.根治性切除原发灶的同时一并切除子宫及双附件,术后采取综合治疗有助于改善预后.     

贲门癌食管旁淋巴结转移的特点与手术切口的选择

目的：探讨贲门癌临床病理特征与食管旁淋巴结转移之间的关系，以便选择合理的手术切口。方法：回顾性分析448例经胸或胸腹联合切口施行手术治疗的贲门癌患者的临床资料。结果：下胸段食管旁淋巴结总体转移率为10.94％（49/448）。男性患者转移率为10.23％，女性患者转移率为13.54％，（P>0.05）。低、未分化腺癌转移率为17.83％，高、中分化腺癌转移率为1.58％，（P<0.001）；肿瘤直径≥4 cm转移率为25.16％，肿瘤直径＜4 cm转移率为3.11％，（P<0.001）；肿瘤侵犯至胃浆膜层转移率为22.09％，肿瘤未侵犯至浆膜层转移率为3.99％，（P<0.001）；Borrmann分型为III，IV型转移率为19.90％，Borrmann分型为I，II型转移率为3.31％，（P<0.001）；肿瘤大小≥4cm者转移率为25.16%，<4cm为3.11%；肿瘤侵犯浆膜者转移率为22.09%。未侵犯浆膜者为3.99%；肿瘤侵犯食管长度≥2 cm转移率为29.41％，＜2 cm转移率为4.26％，（P<0.001）。结论：肿瘤病理类型、直径、侵犯深度、Borrmann分型以及食管侵犯长度与食管旁淋巴结转移有显著关系。在一定情况下选择经腹手术切口是可行的。     

进展期胃腺癌淋巴转移与相关基因表达关系

目的 探讨进展期胃腺癌胃周区域淋巴结(LN)和腹主动脉旁LN转移规律.方法 行survivin, p53, C-erbB-2, PCNA, Ki-67, MMP-2, MMP-7及MMP-9免疫组化染色.单因素和多因素分析上述指标与胃腺癌胃周区域LN和腹主动脉周围LN的转移的关系.结果 238例中转移LN平均(5.61±0.68)枚/例,平均总LN转移度(27.78±24.45)%.238例中的207例有LN转移,总转移率86.97%.D3术53例中,13例(24.53%)有16组LN转移.手术切除的16组LN数平均(6.36±1.83)枚/例,转移LN有58枚,平均(4.46±2.05)枚/例.16组LN转移度为24.52%.单因素分析显示,LN转移与p53阳性和survivin阳性的联合表达有非常显著性关系(P＜0.01).多因素分析显示,p53和survivin阳性的联合表达是影响胃周区域淋巴转移的独立危险因素.Ki-67增殖指数(LI)及MMP-2表达提示16组LN转移(均P＜0.05);Ki-67LI和MMP-2表达是影响16组LN转移的独立危险因素.结论 p53阳性和survivin阳性的联合表达或可预示LN转移.Ki-67LI和MMP-2是16组LN转移的预测因素,而Ki-67LI和MMP-2表达是16组LN转移的独立危险因素.     

胃癌腹腔微转移的研究及其临床意义

目的运用细胞学及RT-PCR方法检测胃癌患者术中腹腔冲洗液和腹膜组织,以探讨这些方法对预测胃癌腹腔微转移的意义.方法收集3 8例胃癌和5例胃良性病变患者的术中腹腔冲洗液,并同时切除少量大网膜、腹膜作为对照.用RT-PCR方法测定冲洗液中游离细胞的CEAmRNA表达,同时作冲洗液细胞学检查（PLC）.结果腹腔冲洗液和腹膜组织中的CEA mRNA的阳性率分别为36.8%（14/38）和39.5%（15/38）,皆高于腹腔冲洗液PLC的26.3%（10/38）.CEA mRNA的阳性率与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、浆膜侵犯深度有关.结论CEART-PCR方法对于检测腹腔微量游离癌细胞较PLC有更高的灵敏度和特异性,是一种检测胃癌腹腔微转移的有效方法.