表儿茶素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及抗氧化能力的影响#br#

摘要：目的　研究表儿茶素（EC）对大鼠脑缺血再灌注后的保护作用及抗氧化能力的影响。方法　取90只雄性清洁级SD大鼠,按随机数字表法分为6组,每组15只,分别为假手术组（Sham组）、CIRI模型组（I/R组）、EC 5 mg/kg组、EC 10 mg/kg组、EC 20 mg/kg组、依达拉奉（ED）3 mg/kg组。除Sham组外,其余组采用线栓法构建大脑中动脉栓塞（MCAO）模型,缺血2 h,于再灌注后0、12、24 h给药,12、24 h进行Longa法神经功能损伤评分,36 h取脑行氯化三苯基四氮唑（TTC）染色检测缺血侧脑组织梗死面积,HE染色观察缺血侧脑组织形态学变化,比色法检测血清和缺血侧脑组织中的丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力以及脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）的活力。结果　与Sham组比较,I/R组神经功能损伤评分升高,梗死面积百分比增大（P＜0.05）,组织形态明显改变,血清和脑组织中MDA含量增多、SOD活力降低（P＜0.05）,脑组织中GPx活力降低（P＜0.05）。与I/R组比较,EC 10 mg/kg、EC 20 mg/kg、ED 3 mg/kg组神经功能损伤评分降低,梗死面积百分比减少（P＜0.05）,组织损伤有所改善,血清和缺血侧脑组织中MDA含量减少、SOD活力升高,EC 10 mg/kg、EC 20 mg/kg、ED 3 mg/kg组脑组织中GPx活力升高（P＜0.05）。结论　EC能提高脑抗氧化能力,对抗大鼠脑缺血再灌注损伤,且在一定范围内呈剂量依赖性。     

依达拉奉联合奥扎格雷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

目的观察依达拉奉联合奥扎格雷对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法将50只SD雄性大鼠随机分为5组,即假手术组、缺血/再灌注组、生理盐水对照组、奥扎格雷组和依达拉奉联合奥扎格雷组。采用线栓大鼠大脑中动脉法建立局灶性脑缺血/再灌注模型,观察依达拉奉联合奥扎格雷对各组大鼠的神经行为、脑梗死面积,脑组织中IL-1,TNF-α的含量的影响。结果与假手术组比较脑缺血/再灌注组大鼠神经功能缺陷严重,脑梗死面积大,脑组织中IL-1,TNF-α的含量明显增多,差异具有显著性(P<0.05);与奥扎格雷组相比脑组织中IL-1含量明显减少,差异具有显著性(P<0.05),其它指标无差异。结论依达拉奉联合奥扎格雷对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,可以改善大鼠神经功能,减少梗死面积,降低脑组织中IL-1,TNF-α的含量,其机制可能与其抑制了IL-1,TNF-α的表达有关。     

依达拉奉对脑缺血再灌注损伤

［摘要］目的研究自由基清除剂依达拉奉对脑缺血 再灌注损伤大鼠的抗细胞凋亡和神经保护作用。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血 再灌注模型。将SD大鼠分为假手术组、再灌注组和依达拉奉组。再灌注组和依达拉奉组按再灌注2，6，12，24，48 h分为5个亚组。依达拉奉组在缺血2 h后解除栓塞，给予依达拉奉3 mg·kg-1静脉注射，首次给药24 h后相同剂量再次给药。再灌注组给予0.9%氯化钠溶液，给药剂量、时间和方法同依达拉奉组。应用硫代巴比妥酸(TBA)比色法检测各组血清丙二醛(MDA)浓度，免疫组化染色及原位细胞凋亡检测法(TUNEL法)测定脑组织bcl 2蛋白表达和凋亡细胞数，并测量各组脑梗死体积。结果依达拉奉组再灌注后6，12，24，48 h的梗死体积、血清MDA浓度、TUNEL阳性细胞数均明显小于再灌注组（均P＜0.05），各时间点bcl 2蛋白表达均高于再灌注组（P＜0.01）。结论依达拉奉可以降低羟自由基水平，对抗细胞凋亡，对脑缺血 再灌注损伤大鼠有明显保护作用。     

原花青素对脑缺血再灌注损伤羟自由基含量和肿瘤坏死因子-α表达影响

目的：观察葡萄籽原花青素（GSP）对大鼠脑缺血再灌注损伤中羟自由基含量和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法 Wistar大鼠48只随机分为四组：假手术组、缺血再灌注模型组、GSP大剂量（40 mg/kg）组、GSP小剂量（10 mg/kg）组,每组12只,应用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型（MCAO）,缺血2 h再灌注24 h。假手术组手术过程相同但不栓塞大脑中动脉。其中GSP大剂量组、小剂量组术前7 d分别腹腔注射2 ml/kg葡萄籽原花青素,模型组大鼠术前7 d腹腔注射2 ml/kg生理盐水,1次/d,再灌注前15 min加注1次。MCAO模型制作完成后首先进行神经功能评分,然后利用生物化学技术检测大鼠血清羟自由基含量和一氧化氮合酶活性,免疫组织化学染色检测半暗带区颞顶部脑皮质神经细胞TNF-α的表达。结果 GSP对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用。其机制可能与降低NOS活性、脑组织羟自由基含量,降低脑组织TNF-α的表达,抑制神经细胞凋亡等有关。结论 GSP对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,具有临床研究价值。     

依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Fas及细胞凋亡的影响

目的观察依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Fas及细胞凋亡的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为三组：假手术组（SH组）、缺血再灌注组（IR组）、依达拉奉治疗组（EDA组）,每组8只。IR组和EDA组线栓法制备脑缺血再灌注模型;SH组栓线只进入颈外动脉。EDA组于再灌注前30min和再灌注12h经腹腔注射依达拉奉3mg/kg,SH组和IR组在相同时间点注射等容量生理盐水。再灌注24h取血清测超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量;取脑组织检测缺血半暗带Fas的表达及细胞凋亡情况;于再灌注3h和24h,参照Zealonga五级神经功能缺损评分标准评价神经功能损伤情况。结果与SH组比较,IR组和EDA组再灌注24h血清SOD活力降低（P〈0.01）,IR组SOD活力低于EDA组（P〈0.01）。与SH组比较,IR组和EDA组再灌注24h时血清MDA含量升高（P〈0.01）;IR组MDA含量高于EDA组（P〈0.05）。SH组脑组织无或仅有少量细胞Fas表达呈阳性,IR组与EDA组缺血半暗带均有大量Fas表达;EDA组平均灰度值较IR组大（P〈0.01）。SH组脑组织仅有少量凋亡细胞,IR组与EDA组缺血半暗带可见大量凋亡神经细胞;EDA组凋亡细胞数较IR组少（P〈0.01）。SH组各时点无神经损伤症状,再灌注3h,IR组与EDA组大鼠神经功能损伤差异无显著性（P〉0.05）;再灌注24h,与IR组比较EDA组大鼠神经功能损伤减轻（P〈0.05）。结论脑缺血再灌注后,大鼠血清SOD活力降低、MDA含量升高、大脑皮层半暗带Fas表达及凋亡细胞数明显增多。依达拉奉可保护SOD活力,降低MDA含量,减少缺血再灌注大脑皮层半暗带Fas的表达及细胞凋亡,从而减轻神经功能损伤,对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。     

脑心通对大鼠神经功能评分及梗死体积的影响

目的：观察脑缺血再灌注损伤后SD大鼠不同时间点神经功能评分及梗死体积的变化,探讨脑心通对它们的影响。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,选用健康雄性SD大鼠68只,随机分成四组：假手术组;MCAO模型组;MCAO＋脑心通胶囊低剂量组;MCAO＋脑心通胶囊高剂量组。每组再按照脑缺血再灌注后第3d、第7d、第14d和第21d 4个不同时间点进行神经功能评分及2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色测定大鼠脑缺血再灌注后梗死体积。结果除假手术组外,其余三组实验鼠在缺血再灌注后4个不同时间点之间比较神经功能评分具有差异（P〈0.01）;不同剂量脑心通组与MCAO模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;但脑心通高、低剂量组之间比较无明显差异（P〉0.05）。 TTC染色发现缺血再灌注后第7d各组大鼠脑梗死体积最大;不同时间点之间比较差异有统计学意义（P〈0.05）;不同剂量的脑心通实验组与模型组之间比较,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论脑心通胶囊对改善缺血再灌注损伤后实验鼠神经功能评分和减轻梗死体积有促进作用,但对神经功能评分的影响与药物剂量不相关。     

脑脉泰对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤NOS和氧自由基的影响

目的研究脑脉泰对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤NOS和氧自由基的影响。方法大脑中动脉线拴法（MCAO）制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型：60只雄性SD大鼠随机分为假手术组（sham）、脑缺血再灌注模型组（MCAO）、脑脉泰大、中、小（2．24、1．12、0．56g／kg）剂量组和尼莫地平组（10mg‘kg）,每组10只大鼠。术后取梗死侧脑组织做成匀浆,检测脑组织中丙二醛（MDA）、乳酸（LA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）含量。免疫组化染色检测缺血半暗带iNOS和eNOS蛋白表达。结果脑组织匀浆生化指标检测发现缺血脑脉泰能显著降低脑组织中MDA和IA含量;升高SOD和GSH含量,脑缺血半暗带的eNOS蛋白表达明显增加,iNOS表达显著减少,与MCAO模型组比较,有显著性差异（P〈0．05）。结论脑脉泰能减少脑缺血／再灌注损伤,其保护作用与增加脑组织的抗氧化能力和eNOS／iNOS有关。     

依达拉奉对大鼠脑缺血急性期内质网应激的保护作用

目的：研究依达拉奉对大鼠脑组织缺血急性期引起的内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）的保护作用。方法：采用线栓法制备大鼠右大脑中动脉供血区缺血模型,通过脑组织含水量的测定和神经功能缺损评分来评价不同剂量（3．0、10．0mg／kg）依达拉奉的脑保护作用,并通过进一步检测与ERS相关的分子葡萄糖调节蛋白-78（GRP78）和caspase-12的表达量变化,来观察依达拉奉的脑保护作用与脑组织ERS的相关性。结果：不同剂量依达拉奉均可以使脑缺血急性期水肿的脑组织含水量减少,使大鼠神经功能评分改善,使大鼠脑缺血后高表达的GRP78出现下调,caspase-12的激活也受到抑制。结论：依达拉奉具有一定的脑保护作用,其机制可能与抑制脑组织缺血时的ERS有关。     

依达拉奉合用尼莫地平对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用

目的:观察合用依达拉奉与尼莫地平对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及机制,并与单用时比较。方法:SD大鼠60只随机分成假手术组,局灶性脑缺血再灌注模型组,依达拉奉组,尼莫地平组及依达拉奉与尼莫地平合用组5组。3个用药组大鼠于缺血再灌注即刻分别静脉滴注依达拉奉0．5 mg·kg~(-1)(溶解于氯化钠注射液中30 min滴完)、腹腔内注射尼莫地平1 mg·kg~(-1)及合用2药(剂量及用药途径同上);模型组与假手术组不给药。在再灌注后12 h,再给药一次,剂量及给药途径同上。采用末端标记法(TUNEL)及硝酸还原酶法分别检测脑组织神经细胞凋亡数及一氧化氮(NO)含量。结果:大鼠脑组织神经细胞凋亡数及 NO含量:模型组显著高于假手术组(P<0．01);依达拉奉组、尼莫地平组及合用组显著低于模型组(均P< 0．05);合用药组显著低于单用药组(均p<0．05)。结论:依达拉奉、尼莫地平及2种药物合用均可通过降,氐缺血再灌注后脑组织NO含量和减少神经细胞凋亡发挥脑保护作用,而2种药物合用效果更佳。     

依达拉奉对大鼠局灶性脑缺血再灌注后p-Bad的作用

目的:探讨促凋亡蛋白Bad的磷酸化p-Bad在局灶性脑缺血再灌注中的表达及依达拉奉的作用机制.方法:建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型;HE染色观察脑组织形态病理学变化;免疫组织化学法测定大鼠脑缺血再灌注不同时间磷酸化Bad的平均光密度值(A值).结果:与假手术组比较,p-Bad在缺血再灌注2 h明显升高,于4 h达到峰值(P＜0.05),随灌注时间延长表达逐渐减少并低于假手术组;依达拉奉干预组阳性表达在各时间点明显增加(P＜0.05).结论:脑缺血再灌注损伤可能导致Bad磷酸化活性增强,依达拉奉可通过上调p-Bad来发挥脑保护作用.     

木犀草素抑制JAK2/STAT3信号通路减轻大鼠脑缺血 再灌注损伤作用的研究

目的 观察木犀草素减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用并探讨其潜在机制。方法 SD大鼠按随机数字 表法分为假手术组、大脑中动脉栓塞（MCAO）组、木犀草素低剂量组（50 mg/kg）、木犀草素高剂量组（100 mg/kg）及尼 莫地平组（15 mg/kg）,灌胃给药,共7 d。采用线栓法建立MCAO大鼠模型,比较神经功能损伤评分、脑组织含水量、 脑梗死体积,测定各组肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6、IL-1β、B细胞淋巴瘤因子2（Bcl-2）、Bcl-2相关 X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）含量及磷酸化Janus蛋白酪氨酸激酶2（p-JAK2）、磷酸化信号转导及转 录激活蛋白3（p-STAT3）蛋白表达等变化情况。结果 与假手术组比较,MCAO组大鼠神经功能损伤评分、脑组织含 水量、脑梗死体积、脑组织TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平均明显增加（P＜ 0.05）,而脑组织Bcl-2含量明显降低（P＜0.05）;与MCAO组比较,木犀草素低、高剂量组及尼莫地平组大鼠神经功能 损伤评分、脑组织含水量、脑梗死体积、脑组织TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量及JAK2、STAT3蛋白磷酸化 水平均明显降低（P＜0.05）,而脑组织Bcl-2含量明显增加（P＜0.05）。结论 木犀草素具有减轻大鼠脑缺血再灌注 损伤的作用,该作用与抑制JAK2/STAT3信号通路活化,进而减弱炎症反应及减少细胞凋亡有关。     

Antagonistic effects of ultra-low-molecular-weight heparin against cerebral ischemia/reperfusion injury in rats.

Heparin and low-molecular-weight heparin have long been proposed for stroke treatment. This study was conducted to demonstrate the antagonistic effects of ultra-low-molecular-weight heparin (ULMWH) on cerebral ischemic injury in rats and the mechanisms underlying the effects. Male Wistar rats were subjected to middle cerebral artery occlusion (MCAO) for 2h followed by reperfusion for 24h. ULMWH (0.5, 1 mg kg(-1), i.v.) was administered after the MCAO and reperfusion. Twenty-four hours after the reperfusion, neurological deficit scores, body weight and infarct volume were assessed. Spectrophotometric assay was used to determine the activity of superoxide dismutase (SOD) and content of malondialdehyde (MDA) of the brain. Furthermore, the intracellular Ca(2+) concentration ([Ca(2+)]i) was measured. The results showed that vein injection of ULMWH at doses of 0.5 and 1.0 mg kg(-1) exerted significant neuroprotective effects on rats with focal cerebral ischemic injury via significantly decreasing neurological deficit scores, increasing body weight, reducing the infarct volume. At the same time, ULMWH significantly decreased MDA content, and increased SOD activity in ischemic brain. Compared with model group, ULMWH decreased the intracellular calcium concentration remarkably. All these findings suggest that ultra-low-molecular-weight heparin might act as a neuroprotective agent useful in the treatment in focal cerebral ischemia.     

大鼠脑缺血再灌注早期过氧化物酶体增殖物激活受体γ 活化与细胞焦亡的关系

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）活化在大鼠脑缺血再灌注损伤中与细胞焦亡的关 系。方法 40只SPF级雄性SD 大鼠随机分为假手术组（sham组）、模型组（MCAO组）、给药组（PGZ组、PGZ+GW9662 组）,每组10只;采用Zea-Longa评分法进行神经功能评分,TTC染色测量脑梗死面积,运用Western blot 技术分析大 鼠脑组织中PPARγ,焦亡关键蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（caspase-1）、Gasdermin D（GSDMD）及炎症因子白细 胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）的表达变化。结果 与 sham 组比较,缺血再灌注 24 h 后 MCAO 组中 PPARγ 表达明显降低（P＜0.05）,焦亡关键蛋白 caspase-1、GSDMD 及炎症因子 IL-1β、IL-18 水平显著增高（P＜ 0.05）,神经功能评分明显增加,脑梗死面积增大（P＜0.01）;与MCAO组比较,PGZ组中PPARγ显著升高（P＜0.05）, 焦亡关键蛋白caspase-1、GSDMD及炎症因子IL-1β、IL-18水平降低（P＜0.05）,神经功能评分显著下降,脑梗死面积 减少（P＜0.01）;而PGZ+GW9662组中,PPARγ的作用被逆转。结论 在脑缺血再灌注损伤早期PPARγ激活可通过 抑制细胞焦亡产生从而减轻神经细胞损伤。     

半胱氨酰白三烯受体拮抗剂pranlukast对小鼠局灶性脑缺血的治疗作用

目的　观察半胱氨酰白三烯受体拮抗剂pranlukast(ONO 10 78)在小鼠局灶性脑缺血后的治疗作用。方法　采用大脑中动脉阻塞造成小鼠持续性局灶性脑缺血 ,缺血后1、6、2 4h分别给小鼠腹腔注射 pranlukast或依达拉奉 ,观察药物对缺血 2 4、4 8h后的神经功能缺损症状 ,4 8h后的脑梗死体积、两侧大脑半球比值、神经元密度的影响。结果　Pranlukast 0 1、0 2mg·kg-1及依达拉奉 3、10mg·kg-1均能减轻神经症状、减小脑梗死体积、降低缺血侧 /非缺血侧大脑半球比值、减轻海马CA1区、皮层和纹状体的神经元密度降低。结论　Pranlukast脑缺血后给药对脑损伤有治疗作用 ,提示有治疗缺血性脑卒中的临床前景。     

Protective effect of edaravone against renal ischemia/reperfusion injury and compared with ischemic postconditioning in rats

The aim of this study is to clarify whether edaravone postconditioning had protective effect against renal ischemia/reperfusion injury and to compare the protective effect between ischemic postconditioning and edaravone postconditioning. Rats were subjected to 45 min ischemia followed by 24 h reperfusion. The rats were randomly assigned to seven groups: a sham-operated control group, an ischemia/reperfusion group, an ischemic postconditioning group, a normal saline vehicle postconditioning group and an edaravone postconditioning (1, 3, and 6 mg x kg(-1)) group. Renal function was assessed by serum creatinine and BUN concentration, while histological damage of renal tissue was assessed with HE staining. MDA content and SOD activity of renal tissue were determined. TUNEL staining was performed to analyze the apoptosis of the tubular epithelial cells, the protein level of Bcl-2 and Bax in renal tissue was examined by Western blotting. Compared to the ischemia/reperfusion group, edaravone postconditioning significantly decreased serum creatinine and BUN concentration, and ameliorated histological damage of renal tissue. MDA was less after 24 h reperfusion in the edaravone postconditioning group than that in the ischemia/reperfusion group, consistent with an increase in SOD activity. In addition, edaravone postconditioning decreased TUNEL-positive cells and Bax expression, and increased Bcl-2 expression. Results detected in the edaravone postconditioning group showed no significant difference from the ischemic postconditioning group. Edaravone administered during the last 3 min of ischemia, prior to reperfusion induces a pharmacological postconditioning in vivo against renal ischemia/reperfusion injury in rats. This protection is similar to that observed with ischemic postconditioning.     

白三烯受体拮抗剂ONO-1078对大鼠短暂性全脑缺血的神经保护作用

AIM: To determine whether ONO-1078 {pranlukast, 4-oxo-8-[p-(4-phenylbutyloxy)benzoyl-amono]-2-(tetrazol-5-yl)-4H-1-benzopyran hemihydrate), a potent leukotriene receptor antagonist, possesses a neuroprotective effect on global cerebral ischemia in rats, and to explore its possible mechanism of action. METHODS: Transient global cerebral ischemia was induced by four-vessel occlusion for 10 min and followed by 72-h reperfusion. ONO-1078(0.03-0.3mg/kg) and edaravone (MCI-186, 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one, a neuroprotective agent) 10 mg/kg were ip injected 30 rain before ischemia and 1 h after reperfusion, and once a day afterward. Neurological outcome was evaluated before ischemia and 24, 48, 72 h after reperfusion. Neuron density, the expressions of N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor subunit proteins (NR1, NR2A, NA2B) and vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM-1) in the cerebral cortex and hippocampus were measured at 72h after reperfusion. RESULTS: ONO-1078 (0.1,0.3mg/kg) and edaravone (10 mg/kg) improved ischemia-induced neurological deficiency and reduced neuron death.ONO-1078 (0.1, 0.3mg/kg) significantly inhibited the enhanced expression of NMDA receptor subunit protein NR2A in the cortex and VCAM-1 in the hippocampus of ischemic rats. CONCLUSION: ONO-1078 possesses a neuroprotective effect on global cerebral ischemia in rats, and its mechanism may be partly related to the inhibition of the upregulation of NR2A and VCAM- 1 in different regions of the brain.     

重组人促红细胞生成素鼻腔给药对大鼠慢性脑缺血的保护作用

目的：观察重组人促红细胞生成素（rhE-PO）鼻腔给药对大鼠慢性缺血性脑损伤的保护作用。方法：以大脑中动脉栓塞诱导大鼠局灶性脑缺血,手术当日术前30 min和术后2 h各给药一次,第2天起隔天一次,持续到术后14 d。缺血后1、3、7、14、21、283、5 d进行神经症状评分和斜板试验,缺血后35 d计算脑梗死体积和缺血周边区神经元密度。结果：rhEPO鼻腔给药（24、48 U）、依达拉奉和rhEPO腹腔给药（5000 U/kg）能改善缺血后神经症状评分,提高斜板角度,降低脑梗死体积,增加缺血侧周边区存活神经元密度。结论：rhEPO鼻腔给药对大鼠慢性缺血性脑损伤具有保护作用,其有效剂量范围较腹腔给药低。     

Nrf2调控AIM2炎症小体在大鼠脑缺血再灌注 损伤中的作用

目的 探讨核因子E2相关因子2（Nrf2）对脑缺血再灌注损伤的影响及对黑色素瘤缺乏因子2（AIM2）炎症 小体的调控作用。方法 将108只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、脑缺血再灌注模型组（I/R 组）、Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇（Bru）干预组（Bru组），每组再按随机数字表法进一步分为脑缺血再灌注后8、24、72 h组， 共9组，每组12只。I/R组和Bru组采用线栓法建立大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。于相应时间点对各组行神经功能 缺损评分；采用2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定脑梗死面积；HE染色检测脑组织病理损伤；荧光定量PCR 法检测缺血侧脑组织中AIM2 mRNA表达；Western blot法检测缺血区脑组织中AIM2、Nrf2蛋白的表达；酶联免疫吸 附试验法检测缺血区脑组织中凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-1、白细胞介素（IL）-1β和IL-18 的表达。结果 与Sham组比较，I/R组各时间点神经功能缺损评分升高，脑组织病理损伤显著加重，AIM2 mRNA以 及Nrf2、AIM2、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与I/R组比较，Bru组各时间点神经功能 缺损评分升高，脑组织病理损伤更重，Nrf2蛋白表达水平降低，AIM2 mRNA和蛋白，ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋 白表达水平升高（P＜0.05）。结论 Nrf2在脑缺血再灌注损伤中具有内源性神经保护作用，其机制可能与Nrf2可负 性调控AIM2炎症小体，减少炎性细胞因子的释放有关。     

缺血预适应对肝脏热缺血再灌注损伤保护作用的机制研究

目的 探讨缺血预适应对肝脏热缺血再灌注损伤保护作用的分子机制。 方法 90 只成年清洁级 SD 大鼠随机均分为 3 组, A 组为假手术组, B、C 组建立 SD 大鼠肝脏热缺血再灌注损伤模型, 并对 C 组大鼠进行缺血预适应干预。 于缺血再灌注后 0、2、6、12、24 h 采集血标本测定丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）, 采用酶联免疫吸附（ELISA）技术检测肝细胞中肿瘤坏死因子（TNF）-α 及白细胞介素（IL）-1β 水平; 采集肝组织标本测定丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）, 流式细胞仪测定肝细胞线粒体膜电位。 结果 B、C 组大鼠的血清转氨酶、TNF-α、 IL-1β 及 MDA 水平均明显高于 A 组（P＜ 0.05）; B、C 组大鼠的凝血酶原活动度和胆碱酯酶低于 A 组（P＜ 0.05）; B、C 组大鼠肝脏 SOD 水平明显低于 A 组;C 组大鼠各项指标均优于 B 组（P＜ 0.05）。 缺血再灌注发生后肝细胞线粒体膜电位水平在 0 h 后即达到最低值, 此后呈逐渐上升趋势（P＜ 0.05）, 并且 C 组的肝细胞线粒体膜电位水平在各时段均高于 B 组（P＜ 0.05）。 结论 缺血预适应对肝细胞热缺血再灌注损伤具有一定的保护作用, 缺血预适应可以通过减少炎症因子 TNF-α 及 IL-1β 的释放, 提高 SOD 拮抗自由基的活性, 减轻线粒体损伤等途径发挥其保护作用。