补体C3对神经病理性疼痛模型脊髓星形胶质细胞的影响

目的:观察补体C3对神经病理性疼痛模型脊髓星形胶质细胞的影响。方法:81只补体C3基因敲除小鼠随机分三组(n=27):A组:假手术组;B组:慢性坐骨神经结扎模型(CCI)组;C组:CCI模型补体C3干预组。测定小鼠的热痛阈值和机械痛阈值,并取腰5、6脊髓节段测定GFAP mRNA和GFAP表达。结果 :术前三个组小鼠热和机械痛阈无明显差异,术后1天A组热和机械痛阈下降,其后恢复。B组和C组继续下降,C组下降幅度更大(P<0.05)。术后第1天,B组和C组胶质细胞激活轻微,术后第3、7天B组和C组脊髓组织GFAP mRNA和GFAP表达量逐渐增加,且C组其表达量明显高于B组。结论 :补体C3的存在与神经病理性模型小鼠星形胶质细胞激活显著相关,并由此影响到慢性疼痛状态的出现和维持。     

补体抑制剂对大鼠神经病理性疼痛模型的作用研究

目的:观察补体抑制剂对神经病理性疼痛(NPP)发病的影响,并初步探讨其机制.方法:18只SD大鼠随机分成三组:A组:假手术+术后生理盐水静脉注射;B组:慢性坐骨神经结扎模型(CCI)+术后生理盐水静脉注射;C组:CCI模型+术后眼镜蛇毒因子(CVF)静脉注射.大鼠致伤模型建立后第一天开始根据分组每日尾静脉注射CVF 50μg/kg或等量的生理盐水.分别于术前和术后1、3、5、7天测定大鼠的热痛阈值和机械痛阈值,并于术后7天处死大鼠取腰6、7脊髓节段,测定SOD和MDA的组织含量.结果:CCI模型大鼠术后第1天均出现痛阈下降,给于补体抑制剂CVF干预后大鼠痛阈逐渐恢复而生理盐水对痛阈无影响;与A组相比,B组大鼠术后第7天脊髓SOD活力明显降低而MDA显著升高;C组SOD和MDA变化幅度显著小于B组.结论:CVF显著改善了CCI模型大鼠痛敏状态,可能的机制是CVF维护了脊髓氧化一抗氧化平衡,从而呈现出对脊髓组织的保护作用.     

两种不同神经病理性疼痛模型中自噬的改变

目的:通过观察坐骨神经压迫模型CCI(chronic constriction injury,CCI)和脊神经结扎SNL(spinal nerve ligation,SNL)两种经典的神经病理性疼痛模型中自噬特异性蛋白表达,探讨两种神经病理性疼痛中自噬的改变。方法:雄性SD大鼠(200~250 g)分为CCI假手术组(sC组),CCI组(C组),CCI+腹腔注射生理盐水组(C+V组),CCI+腹腔注射氯喹组(C+C组),SNL假手术组(sS组),SNL组(S组),SNL+腹腔注射生理盐水组(S+V组),SNL+腹腔注射氯喹组(S+C组)。各组术前以及术后1、3、5、7天进行疼痛行为学测试。在术后7天sC组、C组取脊髓L4~6,sS组、S组取脊髓L4~5进行LC3、p62蛋白质免疫印迹检测。C+C组、C+V组、S+C组、S+V组检测LC3表达水平。结果:CCI模型和SNL模型产生明显的神经病理性疼痛行为学改变,注射氯喹导致机械痛阈降低;CCI模型中LC3-II、p62与假手术组相比升高;SNL模型与相应假手术组相比LC3-II升高,p62升高。C+C组和对照组相比LC3升高,S+C组与相应的对照组相比LC3升高。结论:不同神经病理性疼痛模型中自噬发生的改变不尽相同,并且抑制自噬可以增加神经病理性疼痛。增强自噬可以成为神经病理性疼痛治疗方法。     

神经病理性疼痛大鼠脊髓IL-33蛋白表达的变化

目的:观察外周神经慢性压榨性损伤(chronic constrictive injury,CCI)大鼠脊髓白介素-33(interleukin-33,IL-33)表达的变化规律。方法:雄性Wistar大鼠60只,分为手术组和假手术组,每组30只,于CCI前1天、CCI后第1、4、7、14、21天各时间点测定机械痛阈及热痛阈后立即处死大鼠,每个时间点5只,取L4~6脊髓,采用Western blot方法测定IL-33的蛋白表达变化。结果:手术组大鼠术侧机械痛阈及热痛阈明显降低,脊髓IL-33水平表达增加,明显高于对侧和假手术组术侧;IL-33蛋白水平于CCI后第1天开始增加,第7天达到高峰(P<0.01),于CCI后第21天仍维持于较高水平(P<0.05)。结论:CCI致大鼠脊髓IL-33活化,参与神经病理性疼痛的调控过程。     

NMDA受体NR2B特异性拮抗剂Ifenprodil对CCI大鼠神经病理性疼痛的预防作用

目的:观察预先给予ifenprodil是否可以预防坐骨神经慢性压榨性损伤(CCI)大鼠的神经病理性疼痛。方法:体重在180～200g的雄性SD大鼠随机分为4组:假手术 生理盐水组、假手术 ifenprodil组、CCI 生理盐水组及CCI ifenprodil组。建立外周神经慢性压榨性损伤(CCI)动物模型,假手术组大鼠同样分离坐骨神经,但不结扎神经。假手术 ifenprodil组及CCI ifenprodil组大鼠在术前30min及术后第1、2d连续三天腹腔内注射ifenprodil(10mg/kg);假手术 生理盐水组及CCI 生理盐水组大鼠则以同体积生理盐水代替ifenprodil进行腹腔内注射。使用vonFrey纤维测量大鼠手术侧机械痛阈。比较各组大鼠手术前后的机械痛阈。结果:CCI 生理盐水组大鼠的机械痛阈在术后第7d及14d均明显低于术前(P<0.05);其余各组大鼠的机械痛阈在术后较术前无显著性差异(P>0.05);CCI ifenprodil组大鼠术后7d及14d的机械痛阈显著高于CCI 生理盐水组(P<0.05)。结论:预先给予选择性作用于NR2B亚基的NMDA受体拮抗剂(ifen-prodil)可有效预防外周神经损伤所导致的神经病理性疼痛。因此NR2B的活化在神经病理性疼痛的形成过程中起重要作用。     

大鼠坐骨神经慢性压迫后脊髓背角GCH1基因表达与疼痛的关系

目的:探讨大鼠坐骨神经慢性压迫(chronic constriction injury,CCI)后,脊髓背角内三磷酸鸟苷环化水解酶1 (GTP cyclohydrolase 1,GCH1)基因的表达变化与神经病理性疼痛产生的关系.方法:wistar大鼠64只被随机分为CCI组和Sham组,每组32只.对CCI组大鼠行右侧坐骨神经结扎;建立CCI模型,Sham组仅暴露坐骨神经不结扎,于术前1天及术后1、3、7、10、14、21、28天测定大鼠机械痛阈值,并分别在术后3、7、14、28天职腰4～6段脊髓,进行免疫组化和Western Blotting检测,观察脊髓背角GCH1表达的变化情况.结果:CCI组大鼠术后各时间点后肢机械痛阈值均显著低于Sham组(P＜0.05),术后第1天开始疼痛阈值便明显降低,直至术后第28天,均低于术前水平(P＜0.05).免疫组化结果显示:CCI组大鼠术后脊髓背角神经元GCH1的表达呈先升高后降低的趋势;与Sham组相比,术后各时间点GCH1的表达均明显增高(P＜0.05).Western Blotting检测与免疫组化结果基本一致,CCI组术后3天、7天、14天GCH1表达均高于Sham组(P＜0.05).结论:周围神经损伤引起的痛觉过敏随脊髓背角内GCH1表达升高而增强,随其表达降低而减轻,可以认为GCH1可能参与了神经病理性疼痛的形成.     

低强度聚集超声对小鼠神经病理性疼痛的疗效及可能机制研究

目的探讨低强度聚集超声(LIFU)对小鼠神经病理性疼痛(NP)的疗效, 以及对星形胶质细胞活化和促炎细胞因子表达的影响。方法选择36只雄性C57BL/6J小鼠, 并按随机数字的方法分为假手术(Sham)组、模型(CCI)组和治疗(CCI+LIFU)组, 各组12只。采用坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)的方法建立NP模型。CCI+LIFU组于术后第7 d给予前扣带回皮层(ACC)LIFU治疗, 分别于术前和术后3, 6, 12, 18, 24, 27 d测量各组小鼠患侧机械性缩爪反射阈值(MWT), 采用HE染色观察ACC脑区的病理形态学变化, 采用Western Blot和免疫荧光检测ACC脑区水通道蛋白4 (AQP4)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平, 采用酶联免疫吸附测定法检测ACC脑区促炎细胞因子IL-1β和TNF-α表达水平。结果与Sham组相比, CCI组小鼠于术后第3 d机械痛阈出现降低且维持到术后第27 d(均P<0.05);与CCI组相比, CCI+LIFU组小鼠机械痛阈于术后第24 d出现升高, 并在术后第24和第27 d显著高于CCI组(均P<0....     

不同波形电针对脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响

目的:比较不同波形电针对脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响,并初步探讨相应机制。方法:将48只健康成年大鼠均制成T9水平脊髓损伤模型,随机分为疏密波电针组(A组)、连续波电针组(B组)、断续波电针组(C组)、造模组(D组)4组,每组12只。于术后第1天、第3天、第7天对各组大鼠进行后肢功能的BBB评分、斜板试验、血清中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定。结果:大鼠脊髓损伤后第1天,A、C组BBB评分优于造模组(P<0.05),斜板试验角度A组优于造模组(P<0.05)和C组(P<0.01);第3天,BBB评分A、B、C组优于造模组(P<0.05),斜板试验角度A组显著优于造模组(P<0.05);第7天,BBB评分A、B、C组优于造模组(P<0.05),斜板试验角度A、B、C组均优于造模组(P<0.05),其余两组间比较无显著性差异。大鼠脊髓损伤后第1天,SOD活性A、B、C组较造模组明显增高(P<0.05),MDA含量较造模组显著降低(P<0.01);第3天,A、B、C组较造模组SOD活性显著升高(P<0.05),A组明显高于C组(P<0.05),A、B、C组MDA含量低于造模组(P<0.05);第7天,A、B、C组SOD活性优于造模组(P<0.05),MDA含量低于造模组(P<0.05),其余两组间比较无显著性差异。结论:三种波形电针对于脊髓损伤大鼠运动功能的恢复均具有促进作用,其中疏密波能明显通过促进脊髓损伤大鼠神经的再生和修复,加快自由基的清除,加强血液循环,减少脊髓损伤的继发损伤等方面促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复。     

利多卡因硬膜外阻滞对CCI模型大鼠脊髓c-fos表达的影响

目的:观察利多卡因硬膜外阻滞后神经病理性疼痛大鼠行为学和热痛阈的变化及对脊髓后角c-fos表达的影响.方法:雌性Wistar大鼠24只,随机分为三组,每组8只(n=8).(1)假手术组(S组):右侧坐骨神经只暴露5分钟,未结扎,术后第4天起硬膜外注入生理盐水0.1 ml,每日1次,连续10天;(2)对照组(C组):右侧坐骨神经结扎,术后第4天起硬膜外注入生理盐水0.1ml,每日1次,连续10天;(3)利多卡因组(L组):右侧坐骨神经结扎,术后第4天起硬膜外注入1%利多卡因0.1ml,每日1次,连续10天.分别于术后第1,4,7,10,14天观察行为学变化.于术前及术后第4,7,10,14天用JL-F数显式光热测痛仪测定双后肢热痛阈.术后第14天处死大鼠取出腰段脊髓,石蜡包埋,病理切片,免疫组化法检测c-fos免疫阳性细胞(FLI).结果:(1)C组、L组与S组比较术后下肢运动评分均有非常显著差异(P＜0.01),C组与L组之间无显著差异(P＞0.05).(2)C组、L组与S组比较各实验点热痛阈均有显著差异(P＜0.05或P＜0.01);L组与C组间各实验点相比差异无显著意义(P＞0.05).(3)C组、L组与S组相比,各层FLI细胞数差异均具有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01);L组各层FLI细胞数与C组相比无显著差异(P＞0.05).结论:应用利多卡因进行硬膜外阻滞对CCI模型大鼠脊髓c-fos的表达抑制不明显.     

电针“阳陵泉”、“环跳”对神经病理性疼痛大鼠脊髓SOCS3的影响

目的:观察电针对神经病理性疼痛大鼠痛行为学及脊髓细胞因子信号转导抑制蛋白3(SOCS3)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组、非电针组,每组10只。采用坐骨神经结扎压迫建立慢性限制性损伤(CCI)神经痛模型,电针组选取双侧"阳陵泉"、"环跳"穴进行电针治疗,观察大鼠痛行为学和脊髓SOCS3、IL-6基因表达的变化,检测脊髓SOCS3神经细胞定位情况。结果:与模型组相比,电针可显著提高CCI大鼠机械痛及热痛阈值(P<0.01);与正常组相比,模型组大鼠脊髓SOCS3、IL-6 m RNA表达显著上调(P<0.01),而电针可显著降低IL-6m RNA表达,并进一步上调脊髓SOCS3表达水平(P<0.01)。在CCI大鼠中,SOCS3主要表达于脊髓星形胶质细胞和小胶质细胞中。结论:电针可能通过下调IL-6基因表达,并上调SOCS3表达,减轻神经痛大鼠痛敏反应。     

3-Methylcrotonylglycine excretion in 3-hydroxy-3-methylglutaric aciduria

1. 3-Methylcrotonylglycine was identified in urine from an infant with 3-hydroxy-3-methylglutaric aciduria. 2. The concentration of 3-methylcrotonylglycine in urine was approximately one sixth of that of the other metabolite of 3-methylcrotonyl-CoA, 3-hydroxyisovaleric acid. 3. The presence of both metabolites in the infant's urine indicates an inhibition of 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase activity in tissues of the infant.     

3-hydroxy-3-methylglutaric aciduria: Deficiency of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme a lyase

A marked deficiency of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A lyase activity is present in cultured skin fibroblasts from a baby with 3-hydroxy-3-methylglutaric aciduria.     

3-Hydroxy-3-methylglutaric aciduria: 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A lyase levels in leucocytes.

3-Hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A lyase activity in leucocytes from a baby with 3-hydroxy-3-methylglutaric aciduria is markedly deficient when compared to controls. Both parents have reduced levels of the enzyme in leucocytes.     

Angptl3(angiopoietin-like 3)

Angiopoietin-like 3(Angptl3)-deficiency results in abnormally low lipid levels in mice. Angptl3-deficient mice showed enhanced very low density lipoprotein(VLDL) clearance compared with wild-type mice. Recombinant human ANGPTL3 protein inhibited lipoprotein lipase(LPL) activity in vitro, suggesting that Angptl3 affects VLDL triglyceride clearance by interfering with LPL activity. Liver X receptor(LXR) ligands and LXR-retinoid X receptor complex increased the promoter activity of Angptl3 gene. LXR ligand treatment did not increased plasma triglyceride levels in Angptl3-deficient mice at all, suggesting that hypertriglyceridemia associated with LXR ligand treatment is due to overproduction of Angptl3. Angptl3-deficiency decreases both plasma lipid levels and aorta atherogenic lesions in apoE-deficient mice, suggesting that repression of ANGPTL3 could decrease plasma lipid levels and could be protective against atherosclerosis.     

Pharmacokinetics of 3''-fluoro-3''-deoxythymidine and 3''-deoxy-2'',3''-didehydrothymidine in rats.

Concentrations of 3'-fluoro-3'-deoxythymidine (FDT) and 3'-deoxy-2',3'-didehydrothymidine (D4T) in plasma declined in a biexponential fashion. Total clearance of D4T (1.75 +/- 0.22 liters/h/kg; mean +/- standard deviation) was significantly greater than that of FDT (1.19 +/- 0.19 liters/h/kg) owing to greater renal and nonrenal clearances of the former. Steady-state volumes of distribution of FDT (1.20 +/- 0.12 liters/kg) and D4T (1.07 +/- 0.15 liters/kg) were similar.