Hepsin基因对前列腺癌PC3细胞侵袭和增殖能力的影响

目的:研究Hepsin基因对前列腺癌PC3细胞生物学特性的影响。方法:用脂质体介导的基因转染技术,将pHepsin-IRES2质粒转染前列腺癌PC3细胞,用G418(600mg/L)筛选出阳性克隆。实时PCR检测转染前后Hepsin表达;MTT法和BrdU法检测细胞生长曲线;Boyden小室和划痕法观察转染前后细胞侵袭力的变化。结果:建立稳定表达Hepsin基因的PC3细胞系;转染Hepsin基因的PC3细胞的生长速度和转染空载体的对照组没有显著差异;转染Hepsin基因后前列腺癌PC3细胞的侵袭力显著增加(P<0.05)。结论:Hepsin基因对前列腺癌PC3细胞的增殖无显著作用,可明显促进PC3细胞的侵袭力。     

缺氧通过下调miR-132表达促进前列腺癌细胞的体外生长和侵袭

目的:探讨miR-132在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞生长和侵袭的调节作用,以及缺氧条件下前列腺癌细胞中miR-132水平的变化及其生物学行为的改变。方法:荧光定量PCR分析前列腺癌组织中miR-132的表达水平,分析其与临床分期和Gleason评分的关系,及体外缺氧对人前列腺癌细胞株PC3中miR-132表达的影响;磺酰罗丹明B(SRB)比色法和Matrigel侵袭实验分别检测缺氧和miR-132 mimic质粒转染对PC3细胞活力和侵袭的体外影响。结果:相对于对照组癌旁组织,前列腺癌组织中miR-132水平降低至对照组的52.38%(T1~T2期)(P0.01)和21.59%(T3~T4期)(P0.01)。缺氧培养下,PC3细胞的miR-132水平明显降低(P0.01)。miR-132 mimic质粒转染48 h和72 h后,PC3细胞活力显著降低(P0.05或P0.01);转染后48 h,PC3细胞侵袭力降低了57.5%(P0.01)。然而,miR-132 mimic质粒转染PC3细胞后,常氧和缺氧培养两种方式间的细胞活力和侵袭力均无明显差异(P0.05)。结论:miR-132的表达降低与前列腺癌的临床分期和Gleason评分密切相关;缺氧通过下调miR-132表达,可在体外促进前列腺癌细胞的活力和侵袭,可能进一步促进前列腺癌的生长和转移。     

微小RNA-185对前列腺癌细胞侵袭能力的影响及其机制

目的:观察前列腺癌(PC)细胞(DU145)中miR-185对活化素受体样激酶4(ALK4)基因的调控作用,及其对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:收集河北省中医院泌尿外科2019年1月至2020年6月20例前列腺癌及其癌旁组织标本。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测前列腺癌组织中miR-185及ALK4基因的...     

miR-152对前列腺癌细胞株迁移和侵袭能力的影响

目的研究miR-152在前列腺癌、前列腺正常组织中的表达情况及其在前列腺癌细胞系中的作用。方法采用TaqMan荧光定量RT—PCR方法检测8例前列腺癌和8例前列腺正常组织的样本中miR-152的表达水平。运用Transwell细胞迁移实验及侵袭实验评估miR一152对前列腺细胞系PC-3和DU145细胞功能的影响。结果与正常前列腺组织相比,miR-152在前列腺癌组织中的表达水平显著下调（P〈0．05）。体外实验中上调miR152的表达可以显著降低前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力（P〈O．05）。结论miR-152在前列腺癌中可作为一种肿瘤抑制因子,影响前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力。     

生长抑素对人胆管癌SK-ChA-1细胞生长和侵袭能力的影响

胆管癌的预后恶劣 ,其治疗手段主要依赖于早期手术。化疗和放疗通常缺乏明显的疗效 ,为此迫切需要寻找一种新的有效的治疗方法。本研究应用ＭＴＴ、3 Ｈ 胸腺嘧啶脱氧核苷 (3 Ｈ ＴｄＲ)掺入法和人工基底膜技术 ,观察人工合成的八肽生长抑素(ＳＭＳ2 0 1 995 ,ＳＭＳ)对一株生长抑素受体阳性的胆管癌细胞株(ＳＫ ＣｈＡ 1 )增殖和侵袭的影响。材料与方法1 .人胆管癌细胞株 (ＳＫ ＣｈＡ 1 )由ＫｎｕｔｈＡ教授惠赠。ＳＭＳ由Ｓｕｔｅｒ教授惠赠。本实验设对照组和实验组 ,在 96孔培养板接种细胞悬液 1 0 0 μｌ(5 0 0 0个 /孔) ,实验组加入…     

NDRG2基因对前列腺癌细胞株PC-3M侵袭转移能力的影响

目的 观察NDRG2基因对人前列腺癌细胞株PC-3M侵袭转移能力的影响.方法 以携带人NDRG2基因的腺病毒感染体外培养的PC-3M细胞株,采用Western blot及明胶酶谱实验检测NDRG2、MMP-2、MMP-9蛋白表达情况及相关酶活性的变化.平板克隆实验、细胞生长实验检测NDRG2对PC-3M增殖能力的影响.Transwell实验检测NDRG2对PC-3M细胞体外侵袭能力的影响.结果 Ad-NDRG2感染后,PC-3M细胞中NDRG2表达明显增加,而MMP-2和MMP-9表达水平及活性均降低.噻唑蓝(MTT)比色法(抑制率24 h为16.2%、48 h为24.4%、72 h为43.7%)及平板克隆实验(3组分别为56.3%、55.2%和36.7%)显示NDRG2对PC-3M细胞的生长有明显抑制作用.Transwell显示对照组及Ad-LacZ组穿入下室面的细胞数明显多于Ad-NDRG2组(3组分别为93.0、94.8和50.4).结论 NDRG2对人前列腺癌PC-3M细胞株侵袭能力有明显抑制作用,提示NDRG2可能在前列腺癌的侵袭及转移中发挥重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the effect of NDRG2 gene expression on the cell migration and invasion of human prostate cancer cell line PC-3M.Methods Recombinant adenovirus vectors carrying human NDRG2 gene (Ad-NDRG2) were infected into prostate cancer cell line PC-3M.The protein expression and enzymatic activities of NDRG2,MMP-2 and MMP-9 were determined by Western blotting and gelatin zymography respectively.Methylthiazol tetrazolium (MTT) assay and plate colony formation were used to determine the effect of proliferation of PC-3M cells.Invasion of PC-3M cells was measured by Transwell chamber assay.Results After infection by Ad-NDRG2,it had been verified that the protein expression of NDRG2 in PC-3M cells was obviously increased,and the expression and enzymatic activities of MMP-2 and MMP-9 were reduced.The MTT assay (inhibition ratio: 24 h,16.2%,48 h,24.4%,and 72 h,43.7% respectively) and plate colony formation (56.3%,55.2% and 36.7% in control group,Ad-LacZ group and Ad-NDGR2 group respectively) revealed that NDRG2 could significantly inhibit the growth and proliferation of PC-3M cells.The number of PC-3M cells that invaded the lower chamber in the Ad-NDRG2 group was significantly decreased as compared with the control group and the Ad-LacZ group (93.0,94.8 and 50.4 respectively).Conclusion NDRG2 gene can significantly inhibit invasion of the PC-3M cells,which may paly an important role in metastasis of prostate cancer.     

微小RNA-17通过抑制波形蛋白表达影响上皮-间充质转化对前列腺癌细胞侵袭能力的影响及其机制

目的:观察前列腺癌(PC)细胞中微小RNA(miR)-17对波形蛋白(Vimentin)表达的影响,及与上皮-间充质转化(EMT)及细胞侵袭间的关系。方法:收集河北省中医院泌尿外科2019年1月至2020年12月间20例前列腺癌组织及其癌旁组织标本;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测miR-17的表达水平...     

Bikunin抑制前列腺癌细胞PC3体外侵袭的实验研究

目的:探讨bi kuni n对前列腺癌细胞侵袭能力的影响及其相关的分子机制。方法:利用bi kuni n处理前列腺癌细胞系PC3,采用t r ans wel l实验检测其对细胞侵袭能力的影响。同时,利用west ern印迹技术检测PI3K/AKT信号通路在此过程中的作用。结果:Bi kuni n能够显著降低PC3细胞的侵袭能力;Bi kuni n能够抑制PI3K和AKT的活性;PI3K和AKT的抑制剂能够抑制PC3细胞的侵袭;组成型活化的PI3K能够阻断bi kuni n的抑制作用。结论:Bi kuni n可能通过调节PI3K/AKT信号通路来抑制前列腺癌细胞的侵袭;Bi kuni n具有一定的临床应用前景。     

中药紫龙金对转移性前列腺癌体外增殖及侵袭能力的影响

中国传统医药紫龙金(原名“复方白龙片”)是近年来由北京市肿瘤防治研究所研制开发的抗肿瘤药物。PC-3M-1E8(以下简称“1E8”)细胞^[1]是由北京大学病理学系构建的一株高转移前列腺癌细胞亚系，它来源于PC-3M前列腺癌细胞系。本研究探讨了紫龙金对1E8细胞体外增殖和侵袭能的影响，探索中药在治疗前列腺癌中的作用机理。     

γ-干扰素对前列腺癌细胞粘附和侵袭能力影响的初步研究

目的：探讨γ-干扰素对前列腺癌细胞粘附和侵袭行为的影响。方法：用纤维粘连蛋白和层粘连蛋白处理细胞培养板，检测γ-干扰素对前列腺癌细胞系LNCaP和PC-3粘附作用的影响；用Transwell小室，以Matrigel和纤维粘连蛋白构建基底膜，检测γ-干扰素对前列腺癌细胞侵袭人工基底膜能力的影响；应用Western-blot法检测γ-干扰素对前列腺癌细胞膜粘连蛋白-2（annexin-2）表达的影响。结果：γ-干扰素未处理的两种人前列腺癌细胞系细胞LNCaP、PC-3粘附率分别为46％和40％，γ-干扰素处理的两种细胞系细胞LNCaP、PC-3粘附率分别为21％和23％，同种细胞系γ-干扰素处理组与未处理组间差异有显著性（P均〈0．05）。在相同细胞系γ-干扰素处理组较未处理组前列腺癌细胞24h侵袭能力明显降低（P均〈0．05）。Western印迹结果表明γ-干扰素可显著抑制annexin-2蛋白的表达（P〈0．05）。结论：γ-干扰素可能通过下调annexin-2的表达来抑制前列腺癌细胞的粘附和侵袭。     

RNAi抑制PSA表达对前列腺癌22RV1细胞增殖和侵袭力的影响

目的 研究PSA表达对去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞增殖和侵袭的影响.方法 构建含有针对PSA基因特异性短发夹RNA(shRNA,分别为shPSA1、shPSA2、shPSA3、shPSA4)和阴性对照序列(NC)的慢病毒载体并由慢病毒颗粒包装后,分别感染去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞并筛选稳定表达PSA特异性shRNA的shPSA1-、shPSA2-、shPSA3-、shPSA4-和表达NC序列的NC-22RV1细胞.分别应用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测shRNA对22RV1细胞中PSA mRNA及蛋白表达的影响;采用CCK-8法、Transwell侵袭试验和流式细胞术检测PSA基因沉默后的22RV1细胞增殖、侵袭和凋亡情况.结果 与NC-22RV1细胞相比,shPSA3-22RV1细胞的基因和蛋白表达水平的沉默效果最好;shPSA2组在24、48、72 h的吸光度值分别为(0.1564±0.0225)、(0.2438±0.0358)、(0.3641±0.0205),shPSA3组分别为(0.1069±0.0120)、(0.1588±0.0192)、(0.2534±0.0289),与NC组比较差异均有统计学意义(P<0.01);shPSA1、shPSA2、shPSA3组侵袭力分别为NC组的77.35%(P=0.002)、54.35%(P<0.001)、42.21%(P<0.001);shPSA2、shPSA3组凋亡率分别为(27.97±4.28)%(P=0.001)、(43.03±3.19)%(P<0.001),高于NC组[(16.77±0.59)%].结论 PSA具有促进去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞的增殖和侵袭效应,抑制PSA表达后前列腺癌22RV1细胞凋亡增加.     

微小RNA-138-5p在前列腺癌细胞中的表达及对其侵袭能力的影响

目的:探讨微小RNA(miR)-138-5p在前列腺癌(PCa)中的表达及对前列腺癌侵袭、迁移、凋亡等能力的影响。方法:miR-138-5p模拟物转染正常前列腺上皮细胞(RWPE)-1、DU145细胞,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)用于检测转染前后细胞miR-138-5p的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8...     

The effects of prostate cancer on intimate relationships

Prostate cancer (PCA) represents an intensely ‘personal’ medical condition. PCA and its treatments affect intimate aspects of a man's bodily and psychological function, aspects that only the man himself and his partner can fully appreciate. There is growing evidence that the diagnosis of PCA has important adverse psychosocial effects on both the patient and his partner. An understanding of the ways in which a patient's female partner is affected by PCA is beginning to emerge. In this review several key issues for future psychosocial research are outlined and discussed: adjusting to the challenge of the PCA diagnosis, the impact on the couples’ relationship, the dilemma of treatment choice, the desire to conceal treatment side-effects, the effect of gender on the reaction of patients and female partners, and the unique problems facing same-sex couples. Pulling these issues together, the conclusion is drawn that psychosocial interventions designed to help the couple face this ‘relationship disease’ together are the most likely to be acceptable and effective for those affected by this common cancer.     

微小RNA-23a-p21活化激酶6通路对前列腺癌细胞迁移与侵袭能力的影响

目的 探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA(miRNA)与前列腺癌侵袭及迁移的关系.方法 生物信息学预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Western blot 法及实时定量逆转录-聚合酶链反应( Real-time PCR)检测PC-3细胞PAK6的表达,荧光素报告酶实验检测预测miRNA对PAK6的调控,并行体外迁移及侵袭实验,检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响.结果 生物信息学预测miRNA-23a可能是调控PAK6的靶miRNA. Western blot检测转染miRNA-23a组PAK6表达量下降79％,而转染miRNA-23a抑制剂组PAK6表达量上升40％,差异均有统计学意义(P＜0.05).荧光素报告酶实验结果显示,转染miRNA-23a后野生型PAK6组荧光素酶活性下降32％,而突变组差异无统计学意义(P＞0.05).Real-time PCR检测3组PAK6 mRNA的表达,差异无统计学意义(P＞0.05).体外迁移及侵袭实验示,转染miRNA-23a组迁移细胞数减少57％,侵袭的细胞数减少91％.结论 微小RNA-23a通过下调靶蛋白PAK6的表达从而引起前列腺癌迁移及侵袭能力下降.     

4-1BBL基因修饰前列腺癌细胞的体内抗肿瘤作用

目的 观察转染4-1BBL的小鼠前列腺癌细胞株RM-1体内抗肿瘤效应及对免疫功能的影响.方法 用脂质体法将重组质粒pcDNA3和pcDNA3-4-1BBL分别导入小鼠前列腺癌细胞RM-1中,经G418筛选,建立高表达的细胞株.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和间接免疫荧光法检测4-1BBL的表达.将转染前后的肿瘤细胞,分别接种于C57BL/6小鼠的左肋腹侧皮下观察其致瘤性.CCK-8检测其细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性.结果 成功建立高表达4-1BBL的RM-1/4-1BBL细胞株.25 d后,RM-1/4-1BBL组小鼠致瘤体积为(730.0±23.6)mm3较RM-1/pcDNA3组(1490.0±36.4)mm3和RM-1组(1510.0±26.8)mm3均小(P＜0.05).接种RM-1/4-1BBL细胞小鼠的CTL细胞杀伤活性为(35.4±1.6)%,较RM-1/pcDNA3组(12.8土2.0)%和RM-1组(13.7±3.6)%均增强(P＜0.05).结论 4-1BBL基因修饰的小鼠前列腺癌细胞能显著增强小鼠的免疫功能,抑制肿瘤的发展.     

前列腺癌CRMP4基因启动子甲基化研究

目的分析前列腺癌CRMP4基因启动子区CpG岛甲基化状况及其与CRMP4表达下调的关系,设计较为理想的诊断前列腺癌早期转移的分子诊断探针。方法去甲基化药物5-aza-dC分别以0.5μM、5μM及12.5μM三种不同浓度处理前列腺癌细胞,WesternBlot检测药物处理前后CRMP4表达的变化。硫化测序PCR寻找前列腺癌CRMP4基因启动子区甲基化位点,根据测序结果设计并筛选用于诊断前列腺癌早期转移的甲基化特异性PCR引物。结果去甲基化药物处理后,CRMP4蛋白的表达可以重新上调,并且随着使用的5-aza-dC浓度增加,其表达量也逐渐增加。转移性前列腺癌CRMP4基因启动子区存在2个连续甲基化区域,共有10个CpG位点(-848,-841,-690,-680,-678,-674,-671,-665,-660,-658)其甲基化率极高,而局限性前列腺癌及非肿瘤组织这些CpG位点则未甲基化或有偶发的甲基化。筛选出较为理想的诊断前列腺癌早期转移的甲基化特异性PCR引物,多数转移性前列腺癌及局限性进展期前列腺癌均可扩增出M条带。结论转移性前列腺癌CRMP4表达下调与其基因启动子区CpG岛甲基化相关,筛选出较为理想的诊断前列腺癌早期转移的分子诊断探针,有望为临床早期诊断前列腺癌转移提供新的分子生物学诊断方法。     

NK4基因转染对前列腺癌DU145细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

研究HGF拮抗剂NK4在前列腺癌中的作用。将包含NK4cDNA的表达载体pBudCE4．1-EGFP-NK4转染到DU145细胞中。体外实验检测白分泌的NK4对肿瘤细胞增殖、迁移、转移及凋亡的影响。体内实验裸鼠分为三组,分别皮下种植DUl45、空质粒转染的Dul45和NK4转染的DUl45细胞,检测皮下肿瘤的大小、细胞凋亡及细胞增殖情况。体外实验结果显示转染NK4的DUl45细胞可以分泌NK4蛋白。自分泌的NK4抑制HGF诱导的肿瘤细胞增殖、迁移及转移,促进凋亡（P〈0．01）。NK4可以调节HGF受体c－Met及其下游ERKl与Akt1／2蛋白的活性。体内实验显示,NK4转染DUl45细胞组的肿瘤生长及细胞增殖受到抑制,同时肿瘤细胞凋亡增加。本实验显示包含NK4cDNA的表达载体转染前列腺癌细胞可以有效地调节肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡。NK4作用于HGF／c－Met可以作为前列腺癌治疗的一个有效靶点。     

N-myc下游调节基因家族成员3在胃癌细胞增殖和侵袭中的作用

目的:探讨N-myc下游调节基因家族成员3(NDRG3)对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法:实验分NDRG3敲减组和对照组,AGS-NDRG3小发夹状RNA(shRNA)组采用shRNA技术干扰AGS细胞中NDRG3表达,同时设置AGS-Vector对照组转染空白对照病毒;通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)...