高效液相色谱法检测人血浆中替加环素的浓度

目的：建立一种有效、灵敏、准确的可用于检测人血浆中替加环素浓度的方法。方法：色谱柱：Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：乙腈-0.1%甲酸（4：96）,进行梯度洗脱,流速：1 mL·min^-1,紫外检测波长：246 nm,内标：雷尼替丁,柱温：40℃,进样量：20 μL。结果：替加环素峰与杂质峰及其他药物峰分离良好,不受血浆内源性物质干扰。血浆标准曲线下替加环素峰面积与内标峰面积的比值与血浆中两者浓度比值在0.028~5.600 μg·mL^-1内呈线性关系,回归方程Y=0.994 316X+0.007 455 29,r²>0.999 98,最低定量限为0.028 μg·mL^-1。替加环素和内标保留时间分别为13 min和15 min。日内和日间RSD小于10%,加样回收率均在95%以上,符合检测要求。结论：此方法具有较高可行性,准确度高,适用于血浆中替加环素浓度检测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中替加环素的浓度

目的：建立人血清中替加环素浓度的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定方法。方法：以[叔丁基-d9]替加环素为内标,将待测血清样品经氢氧化钠碱化后,加乙酸乙酯-二氯甲烷（4∶1,V/V）提取,上清液经真空干燥,得到的残渣经流动相复溶后进样。进样液经Agilent Eclipse plus C₈（4.6 mm×100 mm,5 μm）色谱柱分离,甲醇-水（30∶70,V/V,含0.005 mol·L^-1甲酸铵和0.25%甲酸）为流动相,流速0.5 mL·min^-1,进行洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为替加环素m/z586.4→513.3和[叔丁基-d9]替加环素m/z595.4→514.3。结果：血清中替加环素的浓度与峰面积比在10~2 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,定量下限为10 ng·mL^-1,提取回收率大于70.04%,日内日间精密度小于4.54%。结论：该法简单、灵敏、快速,分离效果良好,可用于人体血药浓度测定和PK/PD研究。     

RP-HPLC法测定替加环素的有关物质

目的建立高效液相色谱法测定替加环素的有关物质.方法方法 1:色谱柱:采用安捷伦Agilent ZORBAXSB-C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.2 mol爛L-1醋酸铵溶液(含0.01 mol爛L-1乙二胺四乙酸二钠)-N,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃(67∶29∶4)(用三乙胺调pH值至7.9);检测波长为254 nm.方法 2:色谱柱:采用岛津Shim-pack VP-ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.01 mol爛L-1磷酸二氢钠缓冲液(含0.02 mol爛L-1辛烷磺酸钠及0.5%三乙胺,以磷酸调节pH值至3.0)-乙腈(75∶25);检测波长为246 nm.流速均为1 mL爛min-1;进样体积均为20μL.结果使用方法 1,杂质与替加环素能达到基线分离,替加环素与相邻峰的分离度为3.4,理论塔板数为3 446.线性范围为0.49～19.42μg爛mL-1,r=0.999 9.结论采用反相高效液相色谱法,专属性强,能准确、快速检测替加环素的有关物质,可用于替加环素的质量控制.     

二维液相色谱法测定脑脊液中替加环素浓度及其临床应用

目的 建立二维液相色谱法检测人脑脊液中替加环素浓度,用于颅内感染患者的药物浓度监测。方法 采用外标法定量,第一维色谱柱为Aston SNX5苯基色谱柱（50 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为磷酸铵（氨水调pH7.5）-甲醇（45:55,V/V）,流速1.0 ml/min。第二维色谱柱为Aston SC5 C₁₈色谱柱（275 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为磷酸铵（氨水调pH7.4）-磷酸铵（氨水调pH3.0）-乙腈（30:50:20,V/V/V）,流速1.2 ml/min。检测波长340 nm,色谱柱温40 ℃,进样量：200 μl。结果 脑脊液中替加环素64.5～1 290.0 ng/ml内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 8）;日内、日间精密度RSD<5%,准确度为98.80%～106.51%。结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏,适用于临床人脑脊液替加环素的浓度监测,可为颅内感染患者的个体化给药提供科学依据。     

HPLC法测定人血清中甲氨蝶呤的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血清中甲氨蝶呤浓度的方法。方法:色谱柱为WatersC18,流动相为乙腈-pH7.2的磷酸盐缓冲液(12∶88),柱温为30℃,流速为1.0mL.min-1,检测波长为303nm。结果:甲氨蝶呤血药浓度在0.5～80μg.mL-1范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9994);方法回收率均>90%,日内、日间RSD分别为3.03%～3.52%、2.57%～4.05%。结论:本方法简便、快速、准确、灵敏,适用于甲氨蝶呤体内血药浓度测定和药动学研究。     

UPLC法测定人血清中雷公藤甲素浓度

目的:建立测定人血清中雷公藤甲素浓度的方法。方法:采用超高效液相色谱法,内标为艾司唑仑。色谱柱为Waters Acquity C18柱,流动相为乙腈-水(30:70,V/V),流速为0.2ml/min,柱温为室温,检测波长为220nm,进样量为5μl。结果:雷公藤甲素血药浓度在13.13～840.00ng/ml范围内同雷公藤甲素与内标物峰面积比值线性关系良好;日内、日间RSD均<15%,方法回收率为88.25%～99.33%。结论:该方法快速、灵敏、准确,可用于雷公藤甲素的血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC法测定人血清中拉莫三嗪浓度的方法改进

目的:对测定人血清中拉莫三嗪(LTG)浓度的方法进行改进。方法:血清样品经甲醇处理后以高效液相色谱(HPLC)法进行测定,色谱柱为Hypersil BDS C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-KH2PO4(45∶55,V/V),检测波长为250 nm,流速为1ml/min,柱温为35℃。结果:LTG血药浓度在0.5~30.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 9),日内、日间RSD均<5%,方法回收率为101.96%~102.74%。结论:改进后的方法简便、快速、准确,适合临床常规监测LTG血药浓度及LTG的药动学研究。     

HPLC法测定人血清中5-氟尿嘧啶浓度

目的建立人血清中5氟尿嘧啶(5FU)浓度的HPLC测定法。方法色谱柱为C18ODS柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为甲醇-水(15∶85),流速为1.0mL/min,紫外检测波长为267nm,内标为替加氟。血清样品用乙酸乙酯提取,氮气吹干,残留物用流动相溶解后进样测定。结果以5FU峰和内标峰的面积比为纵坐标,5FU浓度为横坐标,5FU在2～30mg/L浓度范围线性关系良好(r=0.9991),日内和日间RSD分别小于3.0%和6.0%,日内和日间的平均回收率分别为95.6%～103.6%和95.9%～102.5%。血清杂质对样品测定无干扰。结论该法简便、快速,但有待进一步确证。     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度的方法。方法:血清样品以20%偏磷酸溶液沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样测定。其中,色谱柱为Hypersil C18,流动相为乙腈-0.0125mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(10∶90),流速为0.8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为236nm。结果:万古霉素血药浓度在2.0～170.0mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测浓度为2.0mg·L-1;低、中、高(2.5、30.8、150.4mg·L-1)3种浓度的平均相对回收率分别为99.8%、101.1%、98.9%,日内及日间RSD均<2.5%(n=5)。结论:本方法简便、准确、快速,适用于人血清万古霉素浓度的监测和药动学研究。     

HPLC法测定人血清中奈达铂浓度

目的:建立高效液相色谱法测定奈达铂的血清浓度。方法:采用色谱柱为Spherisorb NH2柱(4.0 mm×300 mm,10μm);流动相:40 mmol·L-1磷酸二氢钾-乙腈(8∶2);流速:0.8 mL·min-1;检测波长:210 nm。结果:奈达铂浓度在5～50μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),奈达铂浓度为5、20、40μg·mL-1时日内和日间平均回收率结果分别为:96.7%、97.2%、97.8%和98.4%、98.2%、99.6%,日内、日间RSD分别为2.09%、1.98%、3.19%和2.27%、2.13%、1.92%(n=5)。结论:该方法具有样品处理简单、稳定性高等特点,适用于奈达铂的药动学研究和治疗药物监测。     

替加环素与3种输液配伍稳定性研究

目的:研究替加环素与0.9%氯化钠、果糖和5%葡萄糖注射液配伍稳定性.方法:模拟临床用药浓度(1.0mg/mL和0.5mg/mL),用高效液相色谱法测定替加环素与3种输液配伍于室温、4℃下0、4、8、12、24h的含量.结果:4℃组替加环素(1.0mg/mL)含量(≥98.9%)高于室温组(≥95.6%),4℃组替加环素(0.5mg/mL)含量(≥97.0%)明显高于室温组(≥92.6%),RSD均小于2.0%.结论:同一条件下高浓度较低浓度稳定,替加环素8h内稳定性为5%葡萄糖>果糖>0.9%氯化钠,稳定性受温度影响较明显.     

HPLC法测定人血清中头孢噻利的浓度

目的:建立并优化一种简单、快速、高灵敏和高选择性测定人体血清中头孢噻利浓度的方法。方法:以万古霉素为内标,血清样品用20%硫酸锌沉淀蛋白后取上层水相直接进样,以高效液相色谱(HPLC)法测定,色谱柱为AgilentTC-C18(2)和填充相同材料的预柱AgilentTC-C18柱,流动相为乙腈-0.05 mg/L磷酸二氢钾(10∶90),流速为1.0 ml/min,紫外检测波长为254 nm。结果:头孢噻利血药浓度在1²00 mg/L范围内线性关系良好(r=0.999 8);平均方法回收率、平均提取回收率分别为99.67%和76.17%,日内、日间RSD均小于9%。结论:本法简便、快速、准确可靠、灵敏度高,适合临床常规血药浓度的监测和实验课题的研究。     

HPLC法测定人血清中头孢拉定浓度

目的：建立测定人血清中头孢拉定浓度的高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）。方法：血清经高氯酸处理后进样,采用Ｂｉｏ－Ｒａｄ－Ｃ１８不锈钢柱,以甲醇一醋酸盐缓冲液（２５∶７５,ｖ／ｖ）为流动相,茶碱为内标,在波长２５４ｎｍ处测定。结果：头孢拉定的线性范围为５～１００ｍｇ／Ｌ,平均回收率为（１００３±２３）％,日内、日间精密度ＲＳＤ均小于３％。结论：本法简便、可靠、适用于临床监测。     

HPLC法测定人血清中甲氧氯普胺的含量

目的:建立HPLC法测定人血清中甲氧氯普胺的浓度。方法:采用地西泮为内标,血清经碱化后,乙酸乙酯提取。色谱柱为Hypersil ODS C_(18)(250mm×4.0mm,5μm),流动相为含0.03%三乙胺的甲醇-水(75:25),流速1.0ml·min~(-1),紫外276 nm波长检测。结果:甲氧氯普胺血清浓度在3.7～660.0ng·ml~(-1)内具有良好线性关系,定量限为2.0ng·ml~(-1),方法回收率为92.7%～97.9%,日内、日间RSD均<10%。结论:本法简便、准确、灵敏,适用于甲氧氯普胺血药浓度监测和药物动力学研究。     

HPLC法测定人血清中左乙拉西坦的浓度

目的:建立测定人血清中左乙拉西坦浓度的方法。方法:血样经甲醇去蛋白处理后,采用高效液相色谱法进样测定。色谱柱为SunFire C18,流动相为50 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH4.5)-乙腈(93.5∶6.5),流速为1.0ml/min,检测波长为205nm。结果:左乙拉西坦血药浓度在2.0～60.0mg/L范围内线性关系良好(r=0.9997),最低检测限为0.5mg/L;低、中、高3种质量浓度血样平均回收率为97.72%、97.67%、97.82%,日内RSD为2.74%、1.86%、1.63%,日间RSD为4.21%、1.88%、2.24%。18例患儿[给药量:左乙拉西坦片30～60mg(/kg·d)]血药浓度测得值为2.8～20.1mg/L,平均为(9.53±6.12)mg/L,个体差异大。结论:本方法精密、准确、特异性强、回收率高。     

梯度洗脱高效液相色谱法检测注射用替加环素的有关物质

目的建立测定注射用替加环素有关物质的梯度洗脱反相高效液相色谱法。方法采用Wa-ters C18色谱柱(5μm,416 mm×250 mm),以磷酸盐缓冲液-乙腈(95∶5)为流动相A,以磷酸盐缓冲液-乙腈(50∶50)为流动相B。梯度洗脱条件:0~40 min,A:85%→57%;40~55 min,A:57%→0%;55~56 min,A:0%→85%;以1.0 mL/min的流速进行梯度洗脱,检测波长为248 nm。结果在上述色谱条件下,替加环素与各中间体杂质及降解杂质均能有效分离,分离度大于2.0;检测限为3.6 ng,精密度良好(RSD为0.7%)。结论本方法操作简便,专属性强,灵敏度高,可用于注射用替加环素有关物质的测定。