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1.
[目的]探讨伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,A.a)与人口腔颊黏膜上皮细胞之间的关系,加深对A.a侵入颊黏膜上皮细胞能力的了解.[方法]运用荧光原位杂交技术和激光共聚焦扫描显微镜对12例侵袭性牙周炎患者(AgP)、30例慢性牙周炎患者(CP)和12例牙周健康者频黏膜上皮细胞中的细菌进行定位及半定量.[结果]受检者口腔颊黏膜细胞内均检测出细菌.分别有11名AgP患者、27名CP患者和1名牙周健康者上皮细胞内检测出A.a;颊黏膜上皮细胞内A.a占全细菌相对比例为60%~100%处比较时,AgP组与CP组之间的差异具有显著性意义(P<0.01).[结论]A.a能够黏附和侵袭口腔颊黏膜上皮细胞.  相似文献   

2.
目的用伴放线放线杆菌诱导母鸡产生特异性IgY抗体,以及抑制其生长。方法应用免疫接种法,水稀释法及盐析法提取和纯化IgY抗体,液体培养抑菌法测定抗伴放线放线杆菌IgY抗体对伴放线放线杆菌的抑制作用,以及ELISA法测定IgY抗体效价。结果(1)85.63%~90.35%纯度的IgY结合抗原的效价达1∶32 000;(2)细菌浓度为5×105CFU/mL,IgY抗体浓度为5.0 mg/mL,1.0 mg/mL时,培养24 h抑菌率分别为31.60%、10.24%明显高于对照组的0.00%(P<0.01,P<0.05);培养72 h抑菌率分别为64.20%、53.21%明显高于对照组的0.00%(P<0.01);(3)细菌浓度为1×105CFU/mL,IgY抗体浓度为5.0 mg/mL,1.0 mg/mL时,培养24 h抑菌率分别为35.71%、30.95%明显高于对照组的0.00%(P<0.01,P<0.05);培养72 h抑菌率分别为65.11%、54.04%明显高于对照组的0.00%(P<0.01)。结论伴放线放线杆菌能够诱导母鸡产生高效价的特异性IgY;特异性抗伴放线放线杆菌IgY抗体在一定的浓度内有抑制伴放线放线杆菌生长的作用。  相似文献   

3.
菌影是完整的革兰阴性细菌的空菌体,不含核酸、核糖体等细胞内容物,但保持了活菌所具有的天然形态及所有结构,具有良好天然佐剂特性,可诱导免疫系统的固有免疫和适应性免疫应答;菌影又是外源性蛋白抗原或DNA的高效递送的载体。菌影可通过口腔、眼、鼻腔或支气管等进行黏膜免疫,这是疫苗最理想的免疫方式。本文综述菌影作为蛋白亚单位疫苗和DNA疫苗的载体的特性及其在人类疫苗和动物疫苗应用领域的研究进展。  相似文献   

4.
[目的]研究日本血吸虫卵黄铁蛋白DNA免疫在两种处理小鼠诱导的免疫应答及其保护作用.[方法]免疫小鼠分两大组进行实验Ⅰ组小鼠有预感染,实验Ⅱ组小鼠没有预感染.将构建的携带日本血吸虫卵黄铁蛋白基因的重组质粒pLXSN-Fer1经左后腿肌肉注射BALB/c小鼠,共免疫2次,间隔2周.末次免疫后5周以血吸虫尾蚴攻击感染,6周后剖杀小鼠,计数成虫负荷及肝组织虫卵数.设空载质粒免疫组为对照组.[结果]免疫小鼠后在实验Ⅰ组主要诱生IgG1和IgG3,在实验Ⅱ组主要诱生IgG2a和IgG2b;实验组产生较高水平的IgA和IFN-γ应答.pLXSN-Fer1免疫小鼠获得一定程度的减虫率(26.47%,34.08%)和减卵率(40.02%,36.83%).[结论]日本血吸虫卵黄铁蛋白在两种不同处理小鼠均能产生一定程度的保护作用,有可能成为有价值的疫苗候选分子,值得进一步深入研究.  相似文献   

5.
目的 研究牙周致病菌和致龋菌对羟基磷灰石(HA)的附着能力.方法 将与牙周病和龋病发生密切相关的6种国际参考标准菌株(牙龈卟啉单胞菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌、变形链球菌、血链球菌、黏性放线菌),分别接种于模拟口腔环境的改良MD-300恒化器中培养,1 h后分离培养HA表面附着的细菌,检测各菌种对HA的附着能力及其相互作用.结果 检测菌种中,血链球菌对HA的附着能力最强,其他依次为黏性放线菌、变形链球菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌和牙龈卟啉单胞菌.血链球菌和黏性放线菌均能增强牙周致病菌对HA的附着能力,变形链球菌降低牙龈卟啉单胞菌的附着能力;所有牙周致病菌均降低血链球菌对HA的附着能力,而对变形链球菌和黏性放线菌无明显影响.结论 牙周致病菌对HA的附着能力明显弱于致龋菌,其借助早期定植菌成为牙周生态系的优势菌和牙周病的主要病原菌.  相似文献   

6.
目的研究牙周致病菌和致龋菌对羟基磷灰石(HA)的附着能力。方法将与牙周病和龋病发生密切相关的6种国际参考标准菌株(牙龈卟啉单胞菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌、变形链球菌、血链球菌、黏性放线菌),分别接种于模拟口腔环境的改良MD-300恒化器中培养,1 h后分离培养HA表面附着的细菌,检测各菌种对HA的附着能力及其相互作用。结果检测菌种中,血链球菌对HA的附着能力最强,其他依次为黏性放线菌、变形链球菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌和牙龈卟啉单胞菌。血链球菌和黏性放线菌均能增强牙周致病菌对HA的附着能力,变形链球菌降低牙龈卟啉单胞菌的附着能力;所有牙周致病菌均降低血链球菌对HA的附着能力,而对变形链球菌和黏性放线菌无明显影响。结论牙周致病菌对HA的附着能力明显弱于致龋菌,其借助早期定植菌成为牙周生态系的优势菌和牙周病的主要病原菌。  相似文献   

7.
[目的] 探讨铝佐剂 Aβ 42及其 C端亚单位肽 Aβ 36~ 42疫苗接种大鼠能否产生特异性抗 Aβ 42抗体.[方法] 24只 SD大鼠随机分为 Aβ 42肽疫苗、 Aβ 36~ 42肽疫苗和对照组,每组 8只.将 Aβ 42肽疫苗及 Aβ 36~ 42与七聚赖氨酸耦联制成的亚单位疫苗分别接种于 SD大鼠,对照组用等体积 PBS加铝佐剂.用间接 ELISA法检测大鼠血清和脑匀浆上清液中特异性抗体的滴度;用 Morris水迷宫测试大鼠的行为学变化;用 HE染色观察大鼠的脑、肝、脾和肾组织学变化;用接种后血清与老年性痴呆患者的脑片作免疫组织化学染色.[结果]第 3次接种后 Aβ 42和 Aβ 36~ 42组鼠的血清均开始有抗 Aβ 42抗体产生,抗体滴度随接种次数的增多而增高,第 6次接种后两组鼠血清的抗 Aβ 42抗体滴度均达到 1∶ 1 600以上,同时脑匀浆上清液也检测到低滴度的抗 Aβ 42抗体,血和脑匀浆的抗体滴度与对照组相比,差异有显著性 (P< 0.01);对照组、 Aβ 42组和 Aβ 36~ 42组鼠逃避潜伏期分别为 54.81± 17.06、 43.18± 18.70和 52.27± 15.13,差异均无显著性( P >0.05);对照组、 Aβ 42组和 Aβ 36~ 42组鼠平台象限游泳距离占总游泳距离百分比分别为 59.78± 5.68、 65.14± 4.98和 61.34± 4.19,各组间差异也无显著性( P >0.05); 3组鼠的脑、肝、脾和肾均未出现病理性变化; Aβ 42组鼠的血清能结合 AD患者脑组织中的老年斑,而 Aβ 36~ 42组鼠的血清则不能结合老年斑.[结论] 铝佐剂 Aβ 42和 Aβ 36~ 42疫苗均有效诱导 SD大鼠产生特异性的抗 Aβ 42抗体,但两者与老年斑结合的特性不同;实验证实两种疫苗均有良好的安全性.  相似文献   

8.
[目的 ]探讨贯众水提取液对感染柯萨奇B3 病毒的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用 .[方法 ]实验取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞 ,培养 48h后接种 10 3 TCID50 的柯萨奇B3 病毒做为实验性病毒性心肌炎模型 .[结果 ]贯众水提取液和炙甘草汤的同时加药组和 1h后加药组大鼠心肌细胞释放的乳酸脱氢酶和天冬氨酸转氨酶活性明显降低 ,感染 12h后加药组效果明显减弱 ,而 2 4h后加药组则无效 .[结论 ]贯众水提取液对感染柯萨奇B3 病毒的SD大鼠培养心肌细胞具有抗病毒和保护作用 ,应早期应用  相似文献   

9.
目的构建以SARS冠状病毒(severe acutere spiratory syndrome coronavlrus,SARs.c0V)S蛋白3个保守片段基因的组合为抗原基因DNA疫苗,采用肌肉注射的方法接种小鼠后观察机体产生免疫应答的情况。方法将人工合成的S蛋白3个保守片段基因组合(称为Sa)克隆至真核表达载体pcDNA3、1(-),随之将重组质粒进行小鼠肌肉免疫,定期检测血清中抗SARS—CoV的病毒特异性抗体水平,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型变化,PCR法检测质粒分布,免疫组化检测抗原表达。结果疫苗注射后15d就能在血清中检测出病毒特异性抗体,并且疫苗能在机体中持续表达抗原引发机体持续的免疫应答,直到注射后45d免疫应答都不见减弱;以CTLT淋巴细胞为主的CD8+T淋巴细胞的百分比含量增加极显著,引起强大的体液免疫和细胞免疫;而空载体质粒对照组未检测出明显的特异性免疫应答。结论以S蛋白3个保守片段基因组合为抗原基因的DNA疫苗通过肌注能诱导小鼠针对SARS病毒强大的免疫应答。  相似文献   

10.
Aβ42及其亚单位疫苗接种正常成年大鼠的行为学观察   总被引:8,自引:3,他引:5  
[目的]探讨Aβ42及其亚单位肽疫苗接种正常成年大鼠后对其认知行为的影响.[方法]采用固相肽合成法和肽疫苗技术制备Aβ42 N端1~15和C端36~42亚单位片段疫苗和Aβ42全肽疫苗.①Aβ42及C端亚单位肽疫苗接种:32只SPF级成年雄性SD大鼠随机分为MAP36-42组,牛血清白蛋白组(BSA组),Aβ42组和对照组,每组8只.②Aβ42亚单位片段多联疫苗接种:同样条件的SD大鼠随机分为MAP1-15组,多联疫苗组Ⅰ,多联疫苗组Ⅱ和对照组.应用Morris水迷宫检测免疫接种后大鼠的认知行为能力.[结果]SD大鼠接种Aβ42及其亚单位疫苗后,其平均逃避潜伏期以及平台象限的游泳距离的百分比,与对照组大鼠的比较,差异均无显著性(P>0.05).[结论]Aβ42及其亚单位肽疫苗接种后对正常成年SD大鼠的认知行为无影响.  相似文献   

11.
目的 探讨甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)、乙型肝炎疫苗(Hbv)以及HepA-1、Hbv分别与佐剂硫酸乙酰肝素(HS)联合对树鼩进行免疫后树鼩体液免疫应答的影响.方法 按照疫苗种类、佐剂以及免疫途径将树鼩随机分组,同时设空白对照组,分别于末次免疫后的4周、8周、12周、16周和20周尾静脉采血,用ELISA法检测树鼩血清中的特异性IgG抗体水平.结果 除空白对照组外,实验组均在末次免疫的第四周检测到抗甲型肝炎病毒(HAV)及抗乙型肝炎病毒(HBV)抗体,抗体水平随着免疫时间延长而逐渐升高并于12周达到峰值,此后逐渐下降.同时,联合HS佐剂组的体液免疫效果均优于单纯疫苗免疫组.并且不同抗原以及联合佐剂采用不同的免疫途径免疫树鼩其免疫效果存在显著性差异.结论 通过对树鼩进行疫苗免疫原性和增强免疫效果检测,证实以树鼩作为动物模型进行疫苗评价的可行性.  相似文献   

12.
目的 研究人参皂苷Re作为防龋亚单位疫苗rPAc佐剂的免疫保护效应.方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组:防龋疫苗(rPAc)组,人参皂苷Re( Re)组,Re+rPAc组和生理盐水( NS)组,分别用rPAc、Re、Re+rPAc、生理盐水经鼻黏膜免疫.2 周后加强免疫1 次.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清和唾液中特异性抗体的水平.脾细胞刺激实验检测细胞因子分泌水平.将24只定植了变形链球菌的Wistar大鼠随机分为4组:rPAc组,Re组,Re+rPAc组和NS组,分别用rPAc、Re、Re+rPAc、生理盐水经鼻黏膜免疫.2周后加强免疫1 次.龋齿记分评价防龋保护效能.结果 Re+rPAc组血清特异性抗PAc IgG、IgG1、IgG2a水平及唾液中特异性抗PAc IgA抗体水平均明显高于其他组( P<0. 01). Re+rPAc组较其他组脾淋巴细胞白细胞介素4和γ干扰素表达增强(P<0. 05).大鼠龋齿保护实验显示Re+rPAc组定菌鼠釉质龋(E)、牙本质浅龋(Ds)和牙本质中龋(Dm)均显著低于其他组( P<0. 05).结论 Re作为防龋亚单位疫苗rPAc的佐剂可提高防龋疫苗的血清和唾液中特异性抗体的水平及防龋保护效能,具有作为防龋疫苗rPAc免疫佐剂的可行性.  相似文献   

13.
霍乱弧菌O139菌毛微球疫苗制备初探   总被引:2,自引:1,他引:1  
为寻求O139型霍乱弧菌菌毛疫苗研制的新途径,用高分子聚乳酸-聚乙二醇共聚物(DL-PLG)包裹毒素共调菌毛(TCP)抗的,进行免疫学研究,结果表明微轩比游离疫苗诱导的抗体水平高,其中小鼠血清IgG以皮下MS-TCP组最高,唾液中的sIgA以口服MS-TCP组最高,口服组主要诱导粘膜免疫,皮下组主要导全身性免疫,TCP是霍乱弧菌的共同抗原之一,可作为霍乱疫苗的候选抗原。  相似文献   

14.
Objective To evaluate the effect of intranasal immunization with CTA1-DD as mucosal adjuvant combined with H3N2 split vaccine. Methods Mice were immunized intranasally with PBS(negative control), or H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) alone, or CTA1-DD(5 μg/mouse) alone, or H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) plus CTA1-DD(5 μg/mouse). Positive control mice were immunized intramuscularly with H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) and alum adjuvant. All the mice were immunized twice, two weeks apart. Then sera and mucosal lavages were collected. The specific HI titers, IgM, IgG, IgA, and IgG subtypes were examined by ELISA. IFN-γ and IL-4 were test by ELISpot. In addition, two weeks after the last immunization, surivival after H3N2 virus lethal challenge was measured. Results H3N2 split vaccine formulated with CTA1-DD could elicit higher Ig M, Ig G and hemagglutination inhibition titers in sera. Furthermore, using CTA1-DD as adjuvant significantly improved mucosal secretory Ig A titers in bronchoalveolar lavages and vaginal lavages. Meanwhile this mucosal adjuvant could enhance Th-1-type responses and induce protective hemagglutination inhibition titers. Notably, the addition of CTA1-DD to split vaccine provided 100% protection against lethal infection by the H3N2 virus. Conclusion CTA1-DD could promote mucosal, humoral and cell-mediated immune responses, which supports the further development of CTA1-DD as a mucosal adjuvant for mucosal vaccines.  相似文献   

15.
目的采用明胶为空肠弯曲菌死疫苗的佐剂,灌胃免疫小鼠,评价佐剂全菌死疫苗的免疫原性。方法采用空肠弯曲菌全菌死疫苗肌肉注射(A组),用明胶为佐剂全菌死疫苗(B组),全菌死疫苗(C组)及PBS(正常对照组)灌胃免疫Balb/c小鼠;接种3次,间隔7d,末次接种1周后收集小鼠血清和小肠粘液。采用ELISA间接法检测各组血清抗体IgGI、gAI、gM和肠道粘液抗体SIgA水平。结果A、B、C组血清抗体IgGI、gAI、gM和肠道粘液抗体SIgA水平均高于正常对照组,B组明显高于C组有统计学差异(P<0.05),A组与B组间没有统计学差异(P>0.05)。结论明胶作佐剂的全菌死疫苗口服具有良好的免疫原性,可作为口服疫苗佐剂后选。  相似文献   

16.
目的 探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂联合对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其复合佐剂效应.方法 分别将三种不同剂量的INCB024360类似物(150 μg,100 μg,50 μg)与Al(OH)3(300 μg)复合后与HepA-1共同免疫ICR小鼠分别作为复合佐剂1组,2组,3组,同时设空白对照组、单纯疫苗组、铝佐剂对照组和单一INCB024360类似物(100 μg)组,共免疫一次,于免疫后4周、8周、12周、16周进行尾静脉采血,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清抗甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体水平.结果 除空白对照组外,各组小鼠免疫后4周、8周、12周、16周,均产生抗HAV IgG抗体,抗体水平随免疫时间的延长逐渐升高,于12周达到峰值.复合佐剂2组[HepA-118 EU+Al(OH)3 300 μg+INCB024360类似物100 μg]产生的抗体水平最高且持续时间较长,在8周和12周时,其对HepA-1的免疫增强效应显著高于单一佐剂组以及铝佐剂对照组(P<0.05,t值分别为3.169、2.439).4周、8周、12周、16周,单一佐剂组与单纯疫苗组差异均不具有统计学意义(P>0.05).结论 IDO抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂复合后具有较强的复合佐剂效应,免疫增强效应优于铝佐剂对照组;但是单一的INCB024360类似物不具有显著佐剂效应.  相似文献   

17.
Objective To construct the eukaryotic expression recombinant plasmid, pcIFN-γ, as a gene tic adjuvant and observe the immune responses elicited by pcDNA3-rhoptry protei n 1 (pc-ROP1) combined with pcIFN-γ against Toxoplasma gondii (T.go ndii) infection in mice.Methods A fragment of the IFN-γ gene was directly inserted into the pcDNA3 plasmid and identified by two restriction endonucleases digestion.pcIFN and pcROP1 DNA wa s injected into the left leg muscle of mice at a dosage of 100 μg, and a boost er vaccination was given at the same dosage after two weeks.Control groups wer e injected with pcDNA3 blank plasmid or normal saline.At 30, 50 and 70 days af ter booster injection, kinetic tests were carried out: MTT assay for the prolife ration response of T lymphocyte cells and the activity of NK cells, sandwich ABC -ELISA for the determination of IFN-γ, IL-2 and IL-10; a serum enzymetic aa ssay for nitric oxide (NO) in sera and ELISA for the titer of IgG antibody in sera.Results The recombinant plasmid, pcIFN-γ was constructed.The proliferation response of spleen T lymph cells, NK cell killing activity, and serum levels of IFN- γ, IL-2 and NO in mice injected with pcROP1 and pcIFN-γ were higher than in those injected with pcROP1 alone.There was no difference in IgG antibody level s between the two groups. Conclusion The genetic adjuvant, pcIFN-γ, could enhance the cellular immune response indu ced by DNA vaccine of pcROP1 in mice against Toxoplasma gondii infection.  相似文献   

18.
目的:观察癌胚抗原(CEA)串联表位-HSP70融合基因疫苗诱导的免疫应答,为开发新型肿瘤特异性基因疫苗奠定基础。方法:在已经构建含有变异热休克蛋白(HSP)序列的基础上,插入重组CEA串联表位的编码片段获得CEA串联表位-HSP融合基因疫苗。3次肌肉注射免疫Balb/c小鼠,设立注射生理盐水的阴性对照组、注射氢氧化铝佐剂混悬CEA串联表位的阳性对照组及注射pCITriCEA625-667-mtHSP70的实验组。FCM分析脾脏T细胞亚群;体外培养脾细胞,ELISA检测培养上清中干扰素γ(IFNγ)的相对含量;同时测定小鼠血清CEA特异性抗体的滴度。结果:阴性对照组脾细胞中CD3+和CD4+T细胞分别为55.1%±6.1%和30.2%±4.1%;实验组脾细胞中CD3+和CD4+T细胞分别为78.7%±9.2%和48.9%±4.7%,两组比较差异有显著性(P<0.01)。其体外特异性抗原肽诱导的IFNγ分泌处于本底水平,可视为生理性参数,体外非特异性和特异性的IFNγ分泌分别增加3和6倍(P<0.01)。血清中CEA表位特异性抗体滴度阴性对照组为0,阳性对照组<1∶500,而融合基因疫苗免疫组达到1∶4 000。结论:CEA串联表位-HSP融合基因疫苗在体内诱导以激发辅助性T细胞为特征的免疫应答。  相似文献   

19.
目的:探讨沙眼衣原体主要外膜蛋白多表位(Ct MOMP168)重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Ct MOMP168免疫小鼠的有效免疫剂量,为体内免疫学效应的研究提供实验依据.方法:在重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Ct MOMP168构建成功的基础上,抽提纯化质粒,分3个免疫剂量组,即50、100和150μg剂量组,同时设PBS对照组.肌肉注射免疫BALB/c小鼠3次,间隔2周,于免疫的0、2、4、6、8周分别尾静脉取血,分离血清,间接ELISA法检测小鼠血清中Ct MOMP多表位特异性抗体IgG的生成量,并于0、1、3、5、7周取小鼠阴道冲洗物,检测Ct MOMP多表位特异性SIgA的生成量,分别进行统计学分析.结果:3个不同免疫剂量组,血清特异性抗体IgG生成量于免疫第4周后均开始随免疫时间延长而逐步增加,150μg剂量组抗体IgG的生成水平高于其他剂量组(P<0.05).免疫小鼠阴道分泌物中特异性抗体SIgA生成较快,免疫开始后1周,150 μg剂量组SIgA的产生水平高于其他组,7周后SIgA开始下降,但150 μg剂量组抗体水平仍高于其他剂量组(P<0.05).结论:重组质粒DNA免疫小鼠的特异性抗体生成显示了剂量依赖关系,高剂量(150μg)免疫组小鼠血清特异性抗体IgG和阴道分泌性特异性抗体SIgA生成水平优势显著.  相似文献   

20.
单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗的免疫研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 构建新型单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗 ,鉴定其在哺乳细胞中的表达 ,检测其激发动物产生免疫反应的能力。方法 RT -PCR鉴定gD基因在COS - 7细胞中的表达 ,ELISA检测血清中中和抗体水平 ,用病毒攻击后检测其保护效率。结果 pVAX -gD能在COS- 7细胞中表达 ,并可激发免疫动物产生高滴度中和抗体 ,有效保护动物免受致死量病毒的攻击。结论 构建的新型单纯疱疹DNA疫苗是一株很有希望的人用生殖器疱疹疫苗  相似文献   

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