CD28／CD152：CD80／CD86分子在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞上的表达

目的探讨共刺激分子CD28／CD152：CD80／CD86在强直性脊柱炎（AS）患者外周血淋巴细胞上的表达及与免疫功能的关系。方法流式细胞仪检测AS患者及健康体检者T细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19的表达及CD28／CD152和CD80／CD86在外周血T、B淋巴细胞上的表达水平；采用速率散射比浊法、酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及C-反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果CD3^＋CD4^＋T细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显高于健康对照组（P〈0．05），而CD3^＋CD8^＋T细胞则明显低于健康对照组（P〈0．05）；CD4^＋和CD8^_T细胞上CD28和CD19^＋B细胞上CD80、CD86的表达均较健康对照组增高（P〈0．05），而CD152在CD4^＋T淋巴细胞上的表达也比健康对照组显著增加，但在CD8%＋T淋巴细胞上的表达却显著降低（P〈0.05）；血清IgG、IgA及CRP、IL-6水平均较健康对照组显著增高（P〈0．05）。结论AS患者外周血淋巴细胞CD28／CD152：CD80／CD86分子的异常表达与其免疫功能紊乱有密切关系。     

CD28分子在系统性红斑狼疮患者Tc/Ts淋巴细胞上异常表达的研究

目的：研究CD28^＋、CD8^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^-淋巴细胞在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞中的表达情况.方法：应用CD3CD4CD8三标抗体和CD8CD28双标抗体对SLE患者淋巴细胞进行标记,用流式细胞仪测定CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD28^＋、CD8^＋CD28^＋和CD8^＋CD28^-淋巴细胞的表达.结果：SLE患者外周血CD3^＋淋巴细胞明显高于健康对照组（P＜0.05）.CD4/CD8T淋巴细胞比例明显倒置（P＜0.01）,CD3^＋CD8^＋淋巴细胞比健康对照组显著增加（P＜0.01）,其中以CD8^＋CD28^-的T淋巴细胞增加为主（P＜0.01）,而CD8^＋CD28^＋淋巴细胞增加不明显（P＞0.05）,SLE患者外周血CD28^＋T淋巴细胞比健康对照组明显降低（P＜0.05）.结论：SLE患者存在明显的T细胞功能失调.CD28^＋、CD8^＋CD28^＋（Tc）、CD8^＋CD28^-（Ts）T淋巴细胞在SLE的发病机制和组织损伤中起重要作用.     

慢性乙型肝炎外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD25+和CD8+/CD28-的研究

目的 通过对慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+/CD25+和CD8+/CD28-调节性淋巴细胞的分析,探讨其与慢性乙型肝炎患者临床状态的关系.方法 采用流式细胞技术多色荧光分析法,对280例慢性乙型肝炎患者、28例慢性病毒携带者以及22例健康体检者外周血中CD4+/CD25+和CD8+/CD28-淋巴细胞测定.结果 慢性病毒携带者外周血中CD4+/CD25+调节性淋巴细胞为(3.23±1.37)%,明显高于慢性乙型肝炎患者(1.85±1.38)%和正常健康对照(1.59±0.54)%(P＜0.05),但慢性乙型肝炎患者与正常健康对照差别无统计学意义(P＞0.05);而且HBeAg阴性慢性乙型肝炎(1.66±1.09)%与HBeAg阳性慢性乙型肝炎(1.96±1.43)%比较,差别无统计学意义(P＞0.05).慢性乙型肝炎患者和慢性病毒携带者外周血中CD8+CD28-调节性淋巴细胞分别为(79.53±16.07)和89.30±5.12)%,均明显高于正常健康对照(63.93±7.85)%(P＜0.05);另外,HBeAg阳性慢性乙型肝炎组(87.47±17.82)%,也明显高于HBeAg阴性慢性乙型肝炎组(64.90±15.26)%(P＜0.05).结论 慢性病毒携带者处于病毒携带状态可能与体内调节性淋巴胞CD4+/CD25+和CD8+/CD28-的升高有关.     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测与意义

目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋CD25＋调节性T细胞（Treg）频率的变化及其意义。方法：分离20例慢性乙型肝炎（CHB）患者和10例健康者的外周血单个核细胞,以CD4、CD25、CD127单克隆抗体标记细胞后以流式细胞仪检测并分析Treg频率。采用实时荧光定量RT—PCR检测血清HBVDNA载量。结果：CHB组的Treg频率高于健康对照组（P〈0．05）,HBeAg阳性CHB组Treg频率高于HBeAg阴性CHB组（P〈0．01）,乙型肝炎肝硬化组Treg频率高于无肝硬化CHB组（P＜0．01）;CHB患者的Treg频率与HBVDNA载量成直线正相关（r=0．87,P＜0．01）。结论：慢性乙型肝炎患者外周血Treg频率明显升高,且与病毒复制和肝脏慢性病变程度有关。     

胃癌患者肿瘤组织和外周血中细胞毒性T细胞的相关性分析

目的研究胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD8^＋CD28^＋细胞及CD8^＋CD28^-细胞数量与外周血CD8^＋CD28^＋细胞及CD8^＋CD28^-细胞数量的相关性。方法采用流式细胞术对60例胃癌患者的肿瘤浸润淋巴细胞及外周血淋巴细胞的CD8^＋CD28^＋细胞及CD8^＋CD28^-细胞进行检测，采用直线相关分析两者的相关性。结果胃癌患者外周血淋巴细胞CD8^＋CD28^-、CD8^＋CD28^＋细胞分别为（26．13±8．17）％和（8．15±4．00）％；肿瘤组织中肿瘤浸润淋巴细胞CD8^＋CD28^-、CD8^＋CD28^＋细胞分别为（36．98±15．30）％、（6．02±4．37）％。两者之间具有正相关性（r分别为0．602、0．387，P〈0．01）。结论胃癌患者外周血CD8^＋CD28^-、CD8^＋CD28^＋细胞的检测对了解患者的免疫状况具有一定的价值。     

类风湿性关节炎患者淋巴细胞CD45RO、CD45RA的表达及临床意义

目的检测类风湿性关节炎（RA）患者CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO和CD45RA亚群的变化并探讨其临床意义。方法采用双色流式细胞术（FCM）检测28名正常人外周血、43例RA患者外周血和15例关节液的CD4^＋、CD8^＋细胞CD45RO、CD45RA的表达。结果RA患者关节液CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于RA患者外周血和正常人外周血（P〈0.01）;RA患者外周血CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于正常人外周血（P〈0.01）。活动期RA患者血液CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于非活动期RA患者（P〈0.05,P〈0.01）。结论CD45RO^＋淋巴细胞是参与RA病理过程的主要淋巴细胞。     

慢性乙肝患者外周血CD4+细胞HLA-DR、CD8+细胞CD28表达的检测及其意义

目的 检测乙肝患者外周血CD4^＋淋巴细胞表面HLA-DR和CD8^＋淋巴细胞表面CD28的表达情况,评价乙肝患者的细胞免疫状态。方法 荧光抗体CD4-PECY5、HLA-DR-FITC和CD8-PE、CD28-FITC标记淋巴细胞,流式细胞仪分别测定患者CD4^＋淋巴细胞表面HLA-DR和CD8^＋淋巴细胞表面CD28表达的百分率,并与HBV-DNA结果比较。结果 ①与正常对照组比较,乙肝患者组外周血CD4^＋淋巴细胞表面HLA-DR的表达显著升高（P〈0.001）,CD8^＋淋巴细胞表面CD28的表达显著降低（P〈0.01）;②乙肝患者DNA阳性（〉4000拷贝/ml）与阴性（〈4000拷贝/ml）组CD4^＋淋巴细胞表面HLA-DR和CD8^＋淋巴细胞表面CD28的表达比较均无显著性差异（P〉0.1）。结论 乙肝患者外周血CD4^＋细胞的免疫活化增强,CD8^＋细胞与抗原递呈细胞结合的作用减弱;淋巴细胞的活化情况与病毒复制情况及含量多少无关。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD8淋巴细胞的亚型分析

目的 探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD8淋巴细胞亚型与其临床状态及HBV复制的关系。方法 采用流式细胞技术多色荧光分析法,检测了18名健康体检者和107例慢性乙型肝炎患者外周血CD8淋巴细胞CD45R0、CD45RA和CD28的表达及病毒载量检测。结果 慢性病毒携带、慢性活动性肝炎患者CD8淋巴细胞与正常对照比较均无明显差别。慢性活动性肝炎组CD3 CD8 /CD45RO 淋巴细胞百分率为(15.7±3.35)％,明显高于正常对照(P<0.05),其CD3 CD8 /CD45RA 淋巴细胞百分率为(12.3±4.39)％,明显低于正常对照(p<0.05)。慢性活动性肝炎组CD3 CD8 CD28 细胞百分率为(23.7±3.35)％,明显高于正常对照(P<0.05),而慢性病毒携带组CD3 CD8 CD28-细胞百分率为(16.3±4.37)％,明显高于正常对照(P<0.05)。高病毒载量与低病毒载量患者的CD3 CD8 /CD45RO 亚型、CD3 CD8 /CD45RA 亚型均无明显差别,CD3 CD8 CD28 亚型和CD3 CD8 CD28-亚型亦无明显差别。结论 慢性乙型肝炎患者病情的进展与CD8淋巴细胞总量无关;可能是由于机体免疫功能增强,CD3 CD8 CD45RO 亚型、CD3 CD8 CD28 亚型淋巴细胞数升高,诱发细胞毒性淋巴细胞(CTL)作用的结果。但血清中病毒载量的变化与外周血中CD8淋巴细胞亚型无明显相关性。     

CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞在重型乙型肝炎发病中的作用

目的探讨CD4＋、CD25＋调节性T细胞（CD4＋、CD25＋ Tr）在重型乙型肝炎病人发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测重型乙型肝炎病人及对照组外周血CD4＋、CD25＋ Tr的水平及应用PCR测定重型乙型肝炎病人及对照组外周血中HBVDNA滴度。结果重型乙型肝炎组外周血CD4＋、CD25＋ Tr的百分率为（2.63±0.83）%,较慢性乙型肝炎组的（4.15±1.17）%差异有显著性（P〈0.05）,较无症状HBV携带者组及健康对照组差异有非常显著性（P均〈0.01）;重型乙型肝炎组外周血HBVDNA滴度为1.2×10^4copies/ml,较慢性乙型肝炎组（2.3×10^6copies/ml）和无症状HBV携带者（7.8×105copies/ml）差异有非常显著性（P均〈0.01）;不同乙型肝炎病人外周血CD4^＋、CD25^＋ Tr的百分率与HBVDNA滴度正相关。结论CD4^＋、CD25＋^ Tr能抑制T细胞对HBV的免疫反应;重型乙型肝炎患者发病与CD4^＋、CD25^＋ Tr表达过低有关。     

协同刺激分子CD28/CTLA-4:B7在胃癌患者中的表达及临床意义

目的研究胃癌患者外周血共刺激分子CD28和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4,CD152）及B7分子的表达水平,以探讨胃癌患者共刺激通路是否异常以及在胃癌发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测56例胃癌患者外周血淋巴细胞表面的CD28、CD152、CD3、CD4、CD8及B7分子的表达,并与健康对照组及胃良性肿瘤组作比较。结果胃癌患者外周血中CD3^＋、CD4^＋、CD3^＋CD28^＋、B7-1（CD80）、B7～2（CD86）的表达水平及CD4^＋／CD8^＋低于健康对照组及良性肿瘤组,CD3^＋、CD152^＋和CD8^＋水平显著增高。结论胃癌患者外周血淋巴细胞低表达CD28和B7分子,高表达CTLA-4分子,导致了胃癌患者B7：CD28／CTLA-4共刺激通路异常,影响了T细胞彻底清除肿瘤细胞,从而使肿瘤逃避机体的免疫监视、免疫抑制,发生转移。     

CD8^＋CD28^-T细胞在原发性肝癌患者外周血的表达及意义

目的探讨原发性肝癌（PHc）患者外周血中CD8^＋CD28^-T细胞在PHC细胞免疫中所发挥的作用。方法采用流式细胞技术对38例PHC患者及40例健康对照人群外周血中的CD8^＋T细胞表面CD28分子的表达进行检测。结果38例PHC患者与40例正常对照组外周血测定结果比较发现：PHC患者外周血中CD8^＋测定值较正常对照组显著增高;CD8^＋CD28^-较正常对照组明显增高;而PHC患者外周血中CD8^＋CD28^＋与正常组比较明显下降,统计学差异均具有显著性。结论CD8^＋CD28^-T细胞在PHC患者外周血中增生活跃,提示高表达的CD8^＋CD28^-T细胞在肝癌免疫应答中具有重要意义。     

慢性乙型肝炎患者病程中CD5^＋B细胞及CD4／CD8的变化研究

目的研究CD5^＋B细胞和CIM／CD8在慢性乙型肝炎发病中的作用，以及他们之间的相关性。方法采用免疫荧光双标记技术和流式细胞仪对48例慢性乙型肝炎患者发病前后周围血中CIM／CD8比例和CD5^＋B细胞的百分率和37例健康对照者进行比较。结果在慢性乙型肝炎患者发病高峰期周围血CIM／CD8比例显著低于病情恢复期，且和健康对照组比较差异有显著性；而CD5^＋B细胞在慢性乙型肝炎患者发病高峰期，显著高于健康对照组和慢性乙型肝炎患者恢复期，差异有显著性。结论慢性乙型肝炎的发病和T细胞免疫功能的紊乱相关，而CD5^＋B可能在乙型肝炎的慢性化机制中发挥作用。     

慢性乙型肝炎患者CD28的表达及细胞毒性、免疫抑制性T细胞的研究

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD28、CD8+CD28+(细胞毒性T细胞,CTL)和CD8+CD28-(免疫抑制性T细胞,Ts)细胞分子的表达。方法采用HLA-A2限制的HBVcore18-27抗原表位五聚体(MHCpentamers)法结合流式细胞技术分析46例慢性乙型肝炎(CHB组)、23例乙型肝炎肝硬化(LC组)患者和23例健康体检者[健康对照(NC)组]外周血CD28、CD8+CD28+、CD8+CD28-细胞的表达变化,比较他们在CHB分度中的作用;并分析其与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平和HBV DNA载量的关系。结果 CD8+CD28-在CHB和LC组中明显升高,与NC组差异有统计学意义;CD8+CD28+百分比在CHB轻、中、重度中逐渐升高,而CD8+CD28-百分比逐渐下降;ALT水平和HBV DNA载量与CD8+CD28+、CD8+CD28-有一定的关系。结论 CD28对慢性乙肝免疫调节有重要作用,但与肝脏的炎症程度无关;CTL应答随炎症程度的增高而增强,炎症程度越高细胞毒反应越明显,更有利于病毒的清除。Ts具有免疫抑制作用,且Ts的抑制作用随炎症程度的增高而降低;ALT水平和HBV DNA载量与Ts有一定的关系。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化与病毒复制的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化与乙型肝炎病毒（HBV）复制的关系。方法用流式细胞术对81例慢性乙型肝炎患者和30名健康对照者进行外周血T淋巴细胞亚群检测,用荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定血清中的HBV DNA含量。结果慢性乙型肝炎患者外周血CD3＋、CD4＋T细胞百分率及CD4＋/CD8＋比值较健康对照者显著降低,而CD8＋T细胞百分率显著升高。与健康对照组相比,HBV DNA阴性患者只有CD4＋/CD8＋比值变化显著;HBV DNA阳性患者CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞百分率及CD4＋/CD8＋比值有显著改变,但高拷贝组和低拷贝组相比,差异无统计学意义。结论慢性乙型肝炎患者感染HBV后免疫功能下降与病毒复制有关,HBV复制可进一步加重免疫功能紊乱。     

慢性丙型肝炎患者HCV-RNA含量与CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的相关性研究

目的探讨慢性丙型肝炎（CHC）患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞含量与HCV-RNA的相关性。方法用流式细胞仪检测80例CHC患者和30例健康对照者外周血CD4＋CD25＋Treg细胞表达,荧光定量PCR检测HCV-RNA含量。结果 CHC患者外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞明显高于健康对照组（P〈0.01）,且随HCV-RNA载量增高,患者外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞的含量逐渐升高（P〈0.01）。CD4＋CD25＋Treg细胞与HCV-RNA取对数后呈正相关（r=0.588,P〈0.01）,与ALT呈正相关（r=0.306,P〈0.01）。结论 CHC患者外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞增高,且与HCV-RNA含量及ALT升高具有一致性。     

慢性乙肝患者CD4~+ CD25~+ T细胞对外周血树突状细胞成熟的作用

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者CD4+CD25+Treg细胞对外周血树突状细胞成熟的影响。方法对2013年6月至2013年12月就诊的15例CHB患者和18例健康对照各抽取外周血20 ml,分离外周血单个核细胞(PBMC),于体外培养获得树突状细胞(DC)及免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg细胞;分别将CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25-T细胞与DC共培养后采用流式细胞仪检测DC表面标志CD83、CD80、CD86、HLA-DR的表达。结果健康对照组,加入Treg后,相比于DC对照组及DC与CD4+CD25-T细胞共培养组,DC的CD83、CD80、CD86表达下降,差异有统计学意义。CHB患者组,加入Treg后,相比于DC对照组,DC的CD83、CD80、CD86表达下降,差异均有统计学意义;与DC和CD4+CD25-T细胞共培养组相比,Treg对DC的CD83、CD80表达抑制率较高,差异有统计学意义。CHB患者组的Treg对DC的CD83、CD80、CD86表达抑制率均高于健康对照组,差异均有统计学意义。结论 CHB患者外周血Treg细胞能够抑制DC的成熟,抑制效应强于健康对照。