Wnt/β-catenin信号通路对哮喘大鼠气道平滑肌细胞迁移能力的影响

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路在哮喘大鼠气道平滑肌细胞中的表达及其对细胞迁移能力的影响。方法建立哮喘大鼠模型,原代培养大鼠气道平滑肌细胞(ASMC),采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot方法分别检测正常大鼠平滑肌细胞和ASMC中β-catenin信号通路mRNA和蛋白表达水平;采用Transwell迁移实验检测ASMCs的迁移能力,并分析应用β-catenin siRNA对其迁移能力的干预作用。结果 RT-PCR和Western blot结果显示哮喘大鼠ASMCs中β-catenin的mRNA和蛋白表达水平较对照组显著升高;β-catenin特异性siRNA能够降低ASMCs中β-catenin mRNA和蛋白表达水平;沉默β-catenin能够显著降低ASMCs的迁移能力。结论哮喘大鼠模型ASMCs的迁移能力显著增强,β-catenin信号通路的异常激活可能参与了这一生物学事件。     

KIF18B在胃癌细胞增殖、迁移中的作用及机制研究

目的 探究驱动蛋白超家族18B(KIF18B)对胃癌细胞增殖、 迁移的影响及潜在调控机制.方法 采用qRT-PCR和Western印迹分析胃癌组织和细胞(MKN-28、AGS、HGC-27)中KIF18B的表达水平;通过CCK-8、克隆形成以及划痕实验检测胃癌细胞的增殖、迁移情况;Western印迹法检测迁移蛋白(E-...     

胡椒碱抑制AngⅡ诱导大鼠气道平滑肌细胞增殖和迁移

目的探究胡椒碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和迁移的影响。方法用改良组织块和胰蛋白酶消化联合培养原代细胞ASMCs。MTT检测AngⅡ及其受体拮抗剂losartan对细胞增殖活性的影响。AngⅡ和不同浓度胡椒碱作用ASMCs后,MTT、流式细胞术和Transwell分别检测细胞增殖、细胞周期以及细胞迁移;ERK1/2抑制剂PD98059和losartan干预后,Western blot检测cyclin D1、MMP-9、p-ERK1/2、ERK1/2和β-actin等蛋白表达。结果 AngⅡ(10~(-8)、10~(-7)、10~(-6)和10~(-5)mol/L)作用24 h后,可浓度依赖性地促进ASMCs增殖(P0.05),其中10~(-7)mol/L AngⅡ促进效果最为显著;losartan处理则抑制AngⅡ诱导的ASMCs增殖(P0.05)。10~(-7)mol/L AngⅡ处理组ASMCs增殖活性、S期细胞分布比例、细胞迁移数目和蛋白质(cyclin D1、MMP-9和p-ERK1/2)表达均明显增加(P0.05);而胡椒碱(10、25、50和100μmol/L)处理可浓度依赖性地减轻AngⅡ诱导的上述效应。并且,PD98059和losartan亦能阻断AngⅡ对ASMCs p-ERK1/2、cyclin D1和MMP-9的上调作用。结论胡椒碱能通过ERK1/2通路抑制AngⅡ诱导的大鼠ASMCs增殖和迁移。     

miR-95对结肠癌细胞系SW620侵袭和迁移的影响及机制

目的探讨小分子非编码RNA-95(miR-95)表达对结肠癌细胞系SW620侵袭、迁移能力的影响及其机制。方法将miR-95干扰慢病毒转入结肠癌细胞系SW620,用qRT-PCR检测细胞中miR-95表达,用Transwell小室和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;MTT法检测细胞同种、异种细胞黏附能力;用Western印迹检测3组细胞的EMP1,VEGFC和MMP2蛋白表达。结果 SW620转染miR-95干扰慢病毒72 h后,转染率较高;与空病毒组和对照组比较,转染组miR-95的表达降低(P0.05);侵袭和迁移能力减弱(P0.05);同种黏附能力增强(P0.05);异种黏附能力减弱(P0.05);同时转染组EMP1蛋白表达明显增高,VEGFC、MMP2蛋白表达明显降低(P0.05)。结论 miR-95能够促进SW620细胞侵袭和迁移能力,可能是通过EMP1、VEGFC和MMP2实现的。     

miR-186介导YAP1调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨miR-186介导的YAP1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 采用qRT-PCR和Western blot法检测miR-186、YAP1蛋白在正常乳腺细胞MDA-kb2及人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达；利用Lipofectamine 2000试剂将miR-186 mimic转染至乳腺癌细胞，荧光显微镜下观察转染效率；采用CCK-8法检测乳腺癌细胞的增殖能力；细胞划痕实验检测细胞的迁移能力；Transwell细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力；Western blot法检测YAP1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-186与YAP1的靶向关系。结果 与正常乳腺细胞相比，乳腺癌细胞中miR-186表达量显著减少(P<0.01),YAP1蛋白表达量显著增加(P<0.01)。与对照组相比，miR-186过表达可明显降低乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05),同时降低了YAP1蛋白表达(P<0.01)。miR-186和野生型YAP1载体共转染细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.01)。结论 miR-186在乳腺癌细胞中表达下...     

利多卡因通过LncRNA H19/miR-671-5p分子轴调控胃癌细胞增殖、迁移及侵袭北大核心CSCD

目的:探讨利多卡因对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对LncRNA H19/miR-671-5p的调控机制。方法:体外培养胃癌细胞AGS,使用不同浓度的利多卡因处理细胞;MTT检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;qRT-PCR检测H19及miR-671-5p的表达量;双荧光素酶报告实验验证H19与miR-671-5p的靶向关系;将pcDNA-H19及其阴性对照pcDNA转染至AGS细胞,使用利多卡因处理细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭;Western blot检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达量。结果:与Con组相比,利多卡因不同剂量可明显降低细胞活力和Ki-67、PCNA、N-cadherin蛋白水平及H19的表达量(P<0.05),并可减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05),提高E-cadherin蛋白水平及miR-671-5p的表达量(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实H19可靶向结合miR-671-5p;H19过表达可明显逆转利多卡因对细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论:利多卡因可能通过抑制H19表达及促进miR-671-5p表达从而抑制胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

lncRNA RGMB-AS1在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA RGMB-AS1在卵巢癌组织和细胞系中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 GEPIA数据库分析RGMB-AS1表达水平与卵巢癌患者生存期的关系。采用qRT-PCR技术检测RGMB-AS1在卵巢癌组织及其癌旁组织、卵巢癌细胞系(OC3、A2780、SKOV-3、HO-8910)和正常卵巢上皮细胞系IOSE80中的表达。利用Lipofectamine 3000将阴性对照质粒(NC组)和RGMB-AS1质粒(RGMB-AS1组)分别转染至RGMB-AS1表达最少的细胞系。CCK-8法和细胞划痕愈合实验检测各组细胞的增殖活力和迁移能力。利用生物信息学方法预测和双荧光素酶活性报告基因实验验证RGMB-AS1的靶向基因。qRT-PCR和Western blot法检测RGMB-AS1靶向基因的表达。结果 RGMB-AS1低表达的患者总生存期明显低于RGMB-AS1高表达患者(P<0.01)。RGMB-AS1在卵巢癌组织中的相对表达量(1.51±0.41)明显低于癌旁组织(5.28±0.63),差异有统计学意义(P<0.01)。卵巢癌细胞系(OC3...     

微小RNA-448抑制剂对人前列腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的观察特异性微小RNA-448抑制剂对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响及其分子机制。方法 qRT-PCR检测正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)和癌细胞株(DU-145、PC-3、C4-2B和LNCa P)中miR-448的表达,选取表达量的最高的癌细胞株进行后续实验。利用脂质体转染试剂将miR-448抑制剂或miR-NC转入前列腺癌细胞中,qRT-PCR检测miR-448及人趋化素样因子超家族成员3(CMTM3)mRNA的表达水平,Western blot检测细胞相关蛋白表达。MTT法检测细胞的增殖活性,Transwell实验检测细胞的迁移能力。结果 RWPE-1细胞中miR-448的表达显著低于癌细胞(P0.01),DU-145细胞中的表达最高(P0.01)。miR-448抑制剂转染48 h后,DU-145细胞miR-448表达下调(P0.01),CMTM3 mRNA表达上调(P0.01),CMTM3、E-cadherin和β-catenin蛋白表达上调,N-cadherin和Snail蛋白表达下调;细胞增殖活性降低(P0.05);细胞迁移能力降低(P0.01)。结论 miR-448在前列腺癌细胞中明显高表达,miR-448抑制剂可下调DU-145细胞中miR-448表达,上调CMTM3蛋白的表达,抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移,在前列腺癌的分子治疗中具有潜在功能。     

集缩素NCAPG对非小细胞肺癌增殖和凋亡的影响及其可能机制

目的 探讨非小细胞肺癌细胞中集缩素NCAPG表达对A549与H1299细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 构建shRNA-NCAPG慢病毒载体转染A549及NCI-H1299细胞,实时定量PCR法(qRT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)验证两种细胞中NCAPG表达情况.应用CCK-8方法检测对照组及下...     

TRPC6在PDGF诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

 目的：探讨经典瞬时受体电位通道6 (TRPC6) 对血小板源性生长因子 (PDGF) 诱导的气道平滑肌细胞 (ASMCs) 增殖的影响。方法：组织贴块联合酶消化法培养原代大鼠ASMCs。间接免疫荧光法鉴定平滑肌细胞及检测TRPC6在ASMCs上的表达。CCK-8法检测PDGF诱导ASMCs的增殖。Real-time PCR 检测PDGF作用后TRPC6 mRNA的表达。Western blotting检测PDGF作用后TRPC6蛋白的表达。CCK-8法检测TRPC6阻断剂对PDGF 诱导ASMCs增殖的作用。结果：细胞免疫荧光显示：TRPC6广泛存在于气道平滑肌细胞。CCK-8法检测细胞的增殖发现,20 μg/L PDGF作用后 ASMCs发生增殖 (P<0.05);PDGF与TRPC6阻断剂SKF96365共同作用于ASMCs,ASMCs的增殖较单独使用PDGF组减弱 (P<0.05),且减弱的程度具有剂量及时间依赖性。Real-time PCR结果显示：PDGF分别作用于ASMCs 12 h、24 h和48 h后,TRPC6 mRNA表达与相应的对照组比较明显升高 (P<0.05)。Western blotting检测结果显示：PDGF分别作用ASMCs 24 h和48 h后,TRPC6蛋白表达与相应的对照组比较明显升高 (P<0.05)。结论：TRPC6参与了PDGF诱导ASMCs增殖的过程,PDGF促进ASMCs增殖可能与其上调TRPC6 mRNA和蛋白表达相关。     

基因沉默PRDX1 表达对人结直肠癌SW480 细胞侵袭迁移的影响

目的:探讨RNA 干扰过氧化还原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDX1)表达对人结直肠癌SW480 细胞侵袭转移能力的影响。方法:筛选RNA 干扰PRDX1 的慢病毒质粒,与阴性对照慢病毒质粒分组转染结直肠癌SW480 细胞,转染后的SW480 细胞可分为PRDX1 基因沉默组(si-PRDX1)和阴性对照组(Vector)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测两组细胞中PRDX1 mRNA 和蛋白表达;采用Transwell 侵袭和迁移实验检测基因沉默PRDX1 表达对结直肠癌细胞侵袭及迁移能力的影响;通过Western blot 检测两组细胞中基质金属蛋白酶(MMP)家族部分蛋白表达水平。结果:基因沉默PRDX1 表达可有效抑制结直肠癌SW480 细胞中PRDX1 mRNA 和蛋白水平的表达,与阴性对照组相比(Vector),差异均具有统计学意义(P<0.01),说明基因沉默PRDX1 的SW480 细胞系构建成功;Transwell 侵袭和迁移实验显示si-PRDX1组细胞的侵袭及迁移能力较对照组均明显降低(P<0.01);Western blot 结果显示,与Vector 组相比,si-PRDX1 组细胞中组织基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达明显增加,而MMP-2 及MMP-9 的表达显著下降,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:基因沉默人结直肠癌SW480 细胞的PRDX1 表达可有效抑制细胞的侵袭、迁移及转移能力,其机制可能会通过调控TIMP-2、MMP-2 及MMP-9 的表达介导。     

ERK1/2MAPK通路在Eca109细胞体外增殖和迁移中的作用及其机制

目的观察ERK1/2 MAPK通路在食管鳞状细胞癌(ESCC)Eca109细胞系增殖和迁移中的作用并探讨其作用机制。方法使用MAPK(ERK1/2)抑制剂U0126处理Eca109细胞;细胞计数检测细胞增殖;倒置显微镜下观察细胞形态;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ERK1/2 mRNA;Western blot检测总ERK1/2(t-ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2);MTT和细胞划痕实验检测细胞增殖和迁移能力;qRT-PCR检测MicroRNA-21(miR-21)。结果20μmol/L浓度的U0126可抑制Eca109细胞生长(P<0.05),破坏细胞正常形态,ERK1/2 MAPK通路的活化在蛋白质水平被抑制(P<0.05),Eca109细胞增殖和迁移明显减弱(P<0.05),显著下调miR-21的表达(P<0.05)。结论ERK1/2 MAPK信号通路抑制可减弱Eca109细胞增殖和迁移,其可能的作用机制之一与其抑制miR-21表达有关。     

栀子苷减轻幼年哮喘小鼠气道炎性反应并下调TLR4/NF-κB活性

目的探讨栀子苷(Gen)对幼年哮喘小鼠气道炎性反应和平滑肌细胞(ASMCs)损伤的保护作用。方法将小鼠分为对照组、哮喘组(Ova)和Gen组(Ova+Gen,80 mg/kg)(每组n=10)。苏木精-伊红(HE)和阿辛兰-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色观察肺组织病理变化(细胞浸润和杯状黏液细胞分泌);观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性反应细胞嗜酸粒细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数目;ELISA检测BALF中TLR4及Th2型细胞因子IL-4,IL-5及IL-13表达。体外分离和培养ASMCs,分为对照组、哮喘组(Ova)、低剂量Gen组(20 mg/L)、中剂量Gen组(50 mg/L)和高剂量Gen组(100 mg/L)(每组n=8)。qRT-PCR和Western blot检测TLR4和NF-κB P65表达;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测ASMCs增殖。结果体内实验发现,Gen可显著降低肺部细胞浸润和杯状黏液细胞分泌;减少炎性反应细胞增多(P0.01);降低TLR4和Th2型细胞因子表达(P0.01)。体外实验发现,Gen可抑制TLR4/NF-κB表达;抑制ASMCs增殖。结论 Gen可能通过抑制TLR4/NF-κB活化减轻幼年哮喘小鼠气道炎性反应和SMCs损伤。     

沉默UHMK1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨干扰乳腺癌细胞系中UHMK1的表达对乳腺癌细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法应用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰乳腺癌细胞株MDA-MB-231中UHMK1的表达,分别采用qRT-PCR和Western blot实验检测shRNA的干扰效率。应用MTT实验检测细胞活力;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力。结果UHMK1-shRNA可显著干扰乳腺癌细胞MDA-MB-231中UHMK1的表达(P<0.01)。与对照组Plko.1相比,干扰UHMK1表达可使乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖、迁移及侵袭能力显著下调(P<0.01)。结论UHMK1表达可能参与乳腺癌生物学行为的调控。     

半夏提取物通过AMPK/FOXO3a信号通路对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡的影响

目的：探讨半夏提取物（EP）对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡的影响及作用机制。方法：采用卵清蛋白致敏和激发方式构建哮喘大鼠模型，分离并培养大鼠ASMCs，免疫荧光染色鉴定ASMCs中的α-肌动蛋白（α-actin），符合ASMCs特征后将ASMCs分为对照组、模型组、EP组、Compound C组、EP+Compound C组，MTT检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡；ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-6、TNF-α水平；Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原（PCNA）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、p-AMPK、叉头框蛋白O3a(FOXO3a)、p-FOXO3a蛋白表达。结果：免疫荧光染色显示98%细胞的细胞质中呈现绿色荧光的肌丝，α-actin呈阳性表达，证明培养的细胞为ASMCs。与对照组比较，模型组细胞OD490、CyclinD1、PCNA蛋白表达及上清中IL-6、TNF-α水平显著升高，细胞凋亡率、Bax、Caspas...     

miR-582-5p对顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响及其机制

目的探讨miR-582-5p对顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响及其机制。方法培养鼻咽癌顺铂耐药细胞株HNE1/DDP, 分为对照组和miR-582-5p组;对照组转染miR-582-5p阴性对照试剂, miR-582-5p组转染miR-582-5p模拟物。2组细胞转染后培养48 h, 收集细胞采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-582-5p、苏氨酸激酶3(AKT3)mRNA的表达, 细胞计数(CCK)-8实验检测细胞活力, 集落形成实验检测细胞增殖能力, 划痕实验检测细胞运动能力, Transwell小室检测细胞侵袭及迁移能力, Western blot检测AKT3蛋白的表达情况。结果 (1)qRT-PCR检测对照组、miR-582-5p组miR-582-5p mRNA相对表达量分别为1.02±0.08、3.01±0.05, 差异有统计学意义(t=38.76, P<0.001)。(2)细胞活力检测结果显示, 与对照组比较, miR-582-5p组细胞培养0 h光密度(OD)值差异无统计学意义(P=1.000), 培养24、48、72 h时的OD值均降...     

核因子-κB对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡及TGF-β1表达的影响

目的: 探讨核因子-κB(NF-κB)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡和转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达的影响。方法: 体外培养ASMCs，以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药,将ASMCs分为对照组、TNF-α组和TNF-α+PDTC组。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β₁ mRNA表达，Western blotting检测NF-κB、TGF-β₁的表达，免疫细胞化学染色法检测PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位，四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMCs增殖，Annexin V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡。结果: （1）TNF-α组ASMCs的NF-κB活性显著高于对照组(P<0.01),TNF-α+PDTC组NF-κB活性显著低于TNF-α组 (P<0.01)。（2）TNF-α组ASMCs增殖显著高于对照组(P<0.01),TNF-α＋PDTC组的增殖反应显著低于TNF-α组(P<0.01)；TNF-α+PDTC组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P<0.01)。（3）TNF-α组ASMCs的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组(P<0.01)，TNF-α+PDTC组的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著低于TNF-α组(P<0.01)。（4）TNF-α组ASMCs的TGF-β₁的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋PDTC组（P<0.01）。结论: NF-κB活化可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β₁的表达和分泌。     

LncRNA TUG1调控miR-142-5p/PD-L1轴促进非小细胞肺癌细胞增殖、迁移与侵袭能力

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, LncRNA)牛磺酸上调基因1(taurine up-regulated gene 1, TUG1)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞生物学行为的影响及分子机制。方法 采用qRT-PCR、Western blot分别检测组织(NSCLC癌组织、癌旁组织)和细胞(人正常气管上皮细胞HBE及NSCLC细胞A549、H2009、H1975)中TUG1、miR-142-5p及PD-L1的表达。将pcDNA-TUG1、si-TUG1、miR-142-5p mimics、si-TUG1+anti-miR-142-5p分别转染于A549,qRT-PCR、Western blot分别检测细胞中TUG1、miR-142-5p及PD-L1表达;CCK-8检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶基因实验分别检测TUG1和miR-142-5p、miR-142-5p和PD-L1的关系;RNA免疫共沉淀检测miR-142-5p与TUG1的相互作用。结果 NSCLC组织中...     

lncRNA COLCA1/miR-423-5p/FAM172A分子轴对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA, lncRNA)COLCA1在皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma, CSCC)组织中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响、分子机制。方法采用qRT-PCR法检测COLCA1在正常皮肤组织和CSCC组织、细胞系及人角质形成细胞系中的表达;选择表达最低的细胞系,分别转染空白质粒(对照组)或COLCA1过表达质粒(实验组);采用MTT法和细胞划痕实验分别检测过表达COLCA1对CSCC细胞系增殖和迁移的影响;通过生物信息学法预测COLCA1潜在的分子机制。采用qRT-PCR和Western blot法检测过表达COLCA1对靶基因表达的影响。结果 CSCC组织中COLCA1的表达显著低于正常皮肤组织(1.01±0.20 vs 5.71±0.78,P<0.01)。CSCC细胞系中COLCA1的表达显著低于人角质形成细胞系(P<0.01),A431细胞系中的表达最低(P<0.01)。与对照组相比,过表达质粒可有效促进COLCA1的表达(1.00±0.04 vs 9.31±0.99,P<0.01)。过表达COLCA1可抑制A431细胞的增殖能力和迁移能力(P均<0.01)。COLCA1可能与miR-423-5p互补结合,miR-423-5p可能与FAM172A mRNA互补结合。与对照组相比,过表达COLCA1可抑制A431细胞中miR-423-5p的表达(1.00±0.05 vs0.20±0.05,P<0.01),并促进FAM172A在mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论 COLCA1在CSCC组织和细胞系中呈低表达,过表达COLCA1可能通过miR-423-5p/FAM172A分子轴抑制CSCC细胞系A431的增殖和迁移能力。     

瘦素对大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨瘦素对大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的影响及其可能的作用机制.方法:体外培养大鼠的ASMCs,分别用RT-PCR和Western blot测定ASMCs中瘦素受体mRNA和该细胞上瘦素受体蛋白的表达.不同浓度的瘦素(0～100 μgL)干预培养的ASMCs不同时间(1～72 h)后,以CCK-8法测定ASMCs的增殖情况.不同浓度的瘦素作用于ASMCs 48 h后,Western blot测定磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)和磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)的表达.结果:不同浓度的瘦素作用不同时间后,均可促进大鼠ASMCs增殖,并呈浓度依赖性(r=0.837,P＜0.01)和时间依赖性(r=0.874,P＜0.01).Western blot的结果显示,不同浓度的瘦素干预后,大鼠ASMCs中p-ERK、PI-3K蛋白的表达较对照组显著增加(P＜0.05),并与瘦素的浓度呈正相关(前者r=0.793,P＜0.01,后者r=0.746,P＜0.01).结论:大鼠ASMCs表面有瘦素受体表达.瘦素可促进体外培养的大鼠ASMCs增殖,其机制可能与激活p-ERK和PI-3K有关.