抗菌肽及其模拟物的临床应用研究进展

抗菌肽,作为一种新型的抗生素替代药物,近年来得到了极大关注。本文概述了抗菌肽及其模拟物的抗菌特性及优势特点,着重阐述了其临床研究进展和临床应用面临的挑战。抗菌肽具有不同于传统抗生素的独特抗菌机制,能够杀灭多重耐药菌且不易诱导产生抗药性,数十种抗菌肽已进入了临床试验阶段,但是毒性作用、不稳定性及成本昂贵使其临床应用受到限制。针对上述缺陷,研究者尝试合理改造抗菌肽的结构,并着手研发抗菌肽模拟物。相信在未来,抗菌肽及其模拟物会在对抗耐药菌方面发挥重要的作用。     

人朊病毒多肽抗体的制备及应用

目的 利用人工合成人朊病毒蛋白（ＰｒＰ）多肽制备特异性抗ＰｒＰ抗体,以期用于朊病毒相关疾病的临床诊断。方法 根据ＰｒＰ基因编码的氨基酸序列合成多肽,与载体偶联合免疫动物,所制备的抗血清用ＥＬＩＳＡ及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定。结果 ＥＬＩＳＡ检测表明所制备的抗血清可同多种ＰｒＰ发生一反应;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ结果显示抗血清可与正常组织ＰｒＰ＾ｃ和病理组织的ＰｒＰ＾ｓｃ反应;用蛋白酶Ｋ处理,可     

胞内抗体研究进展及临床应用前景

胞内抗体(intracellular antibody,intrabody)是一类在细胞内表达、特异性地靶向胞内抗原以期实现对相应功能的调节甚至阻断的新型基因工程抗体。最常见的胞内抗体形式为单链抗体(ScFv)。通过相应定位信号肽序列,胞内抗体能定位于胞浆、胞核、内质网、线粒体、高尔基体、细胞膜和过氧化酶体等各种细胞器,以实现对靶标抗原的功能性调控。其应用也由早先的干扰病毒复制和抑制肿瘤生长,逐渐拓展至治疗中枢神经系统退行性疾病、自身免疫病以及抑制免疫排斥等方面。本文对胞内抗体的作用机制、筛选策略、优缺点、应用及跨膜抗体作一综述。     

Smac模拟物的抗肿瘤作用机制研究进展

肿瘤细胞对治疗因素产生耐受是治疗疗效受限的主因.凋亡抑制蛋白(IAPs)家族的高表达是肿瘤细胞产生治疗抗性的重要因素.Smac作为一种有效的促凋亡蛋白,可明显提高肿瘤细胞对放化疗的敏感性,促进肿瘤细胞凋亡;但是,外源Smac蛋白及其活性基团均不能进入细胞而发挥功能.因此,对于Smac模拟物的研发及其作用机制的探索成为研究人员关注的焦点.针对近年来Smac模拟物及其作用机制的研究进展进行综述.     

抗Resistin合成多肽抗体的制备及鉴定

目的制备抵抗素合成肽及其抗体.方法根据人抵抗素cDNA编码的氨基酸序列合成抵抗素分子22～34位的13个氨基酸的多肽(CSMEEAINERIQE),并利用MBS双功能试剂将人工合成多肽成功地与KLH进行偶联,免疫家兔制备抗抵抗素合成多肽的抗体,并经亲和层析进行了纯化.结果对此抗体进行鉴定的结果表明,抗人抵抗素合成多肽抗体可与天然抵抗素分子发生特异性反应,并可用于免疫沉淀和Western blot.结论该抗体的制备为Resistin分子功能的研究及肥胖和2型糖尿病的机制研究提供了有用的工具.     

抗GAM合成多肽抗体的制备和鉴定

根据ＧＡＭ ｃＤＮＡ所编码的氨基酸序列合成了ＧＡＭ分子羧基端２３个氨基酸的多肽，并利用ＧＭＢＳ双功能试剂将人工合成多肽成功地与ＯＶＡ进行了交联，免疫家兔制备了抗ＧＡＭ合成多肽的抗体，并经亲和层析进行了纯化。对此抗体进行鉴定的结果表明，抗ＧＡＭ合成多肽的抗体可与天然ＧＡＭ分子发生特异性反应，并可用于免疫沉淀和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ，为ＧＡＭ分子功能的研究提供了有力的工具。     

人PrP特异性多肽抗体的鉴定和应用

目的 为了进一步检测制备的人PrP特异性多肽抗体的免疫反应性和特异性。方法 构建人PrPN端缺失原核表达质粒,表达并纯化N端缺失的PrP蛋白;Western blot检测多肽抗体与纯化的各种人全长、N端缺失以及C端缺失PrP蛋白的反应能力;免疫荧光法检测多肽抗体与真核表达的人PrP蛋白反应能力;提取Creutzfeldt-Jakob病（CJD）病人以及Scrapie感染的仓鼠脑组织,Westen blot检测多肽抗体与致病性PrP－res蛋白的反应能力。结果 所制备的PrP多肽抗体能与原核及真核细胞表达的各种不同长度的PrP蛋白反应,同时还能特异性识别Scrapie感染鼠脑组织中和CJD病人脑组织中的PrP－res蛋白。结论 多肽抗体具备良好的免疫反应性和特异性,可以应用于临床CJD病人的检测。     

抗β-淀粉样多肽抗体治疗阿尔茨海默病研究进展

阿尔茨海默病（Alzheimerdisease,AD）是中枢神经系统一种常见的进行性神经退行性疾病,也是痴呆的常见类型,以记忆障碍和认知功能损害为突出临床表现。AD三大特征性病理改变为：老年斑（senile plague,SP）、神经纤维缠结（neurofibrillary tangles,NFT）和神经元（尤其是胆碱能神经元）缺失。其中老年斑的主要成分是B-淀粉样多肽（beta-amyloid peptide,A母）聚集形成的纤维,[第一段]     

fgl2凝血酶原酶多肽抗体的制备和应用

目的　利用人工合成多肽制备针对人源、鼠源fgl2凝血酶原酶 (hfgl2、mfgl2 )的特异性多克隆抗体 ,以期用于与fgl2表达异常密切相关的疾病的研究和诊治。方法　根据mfgl2、hfgl2基因编码的氨基酸序列合成多肽 3(Pep3)和多肽 4 (Pep4 ) ,并用化学方法与匙孔血蓝蛋白 (KLH)连接 ,纯品Pep3 KLH和Pep4 KLH免疫动物 ,所制备的抗血清用ELISA、Westernblot和前凝血质活性 (PCA)实验鉴定 ,并采用免疫组化法应用于乙型肝炎患者肝组织中hfgl2的检测。结果　ELISA检测表明 ,所制备的抗血清可分别与Pep3和Pep4发生特异性免疫反应 ;Westernblot结果显示 ,抗血清可识别MHV 3感染BALB cJ小鼠腹腔巨噬细胞特异性条带 ,相对分子质量 (Mr)为 6 5× 10 3;PCA实验提示 ,抗血清具有中和mfgl2分子酶活性的作用。对病毒性乙型肝炎患者肝组织免疫组织化学染色发现hfgl2仅在重型乙型肝炎患者高表达 ,而在慢性乙型肝炎和肝硬化患者的肝组织中无表达。结论　所制备的fgl2的多肽抗体 (多克隆抗体 )可识别mfgl2和hfgl2分子 ,具有与抗原特异性结合、中和其酶活性的特征 ,为深入研究这一新发现的分子提供了有力的科学手段。     

兔抗人CXCR3-B分子N端多肽多克隆抗体的制备与初步应用

目的:获得兔抗人CXCR3-B分子N端第1~19、第17~35及第33~51个氨基酸多肽的多克隆抗体,并对多克隆抗体进行初步鉴定和应用。方法:应用Fmoc法化学合成CXCR3-B分子N端第1~19、第17~35及第33~51个氨基酸多肽,经C18的RP-HPLC纯化后,通过高碘酸钠法将纯化的CXCR3-B分子的多肽与KLH交联;皮下注射抗原免疫日本大耳白兔,加强免疫得到抗血清,应用蛋白G纯化获得多克隆抗体。对纯化的抗体进行ELISA、免疫印迹、免疫组化等初步鉴定和应用。结果:分别化学合成CXCR3-B分子N端第1~19、第17~35及第33~51个氨基酸多肽,纯化后多肽纯度分别为98%、88.54%及80%,达到免疫用抗原标准。多肽与KLH交联,用于免疫动物。经纯化后的抗体效价分别为1∶32000(0.1mg/L),1∶4000(3mg/L)和1∶1000(10mg/L)。3种多肽的抗体可特异识别胎心组织中相对分子质量(Mr)约为50的CXCR3-B分子,相应抗原定位于3种多肽的抗体可特异识别胎心组织中的血管内皮细胞。结论:所制备的多克隆抗体可应用于ELISA、免疫印迹和免疫组化等实验,为确定CXCR3-B分子的组织及细胞分布和定位、寻找CXCR3-B相互作用的分子提供了有力的工具。目的:获得兔抗人CXCR3-B分子N端第1~19、第17~35及第33~51个氨基酸多肽的多克隆抗体,并对多克隆抗体进行初步鉴定和应用。方法:应用Fmoc法化学合成CXCR3-B分子N端第1~19、第17~35及第33~51个氨基酸多肽,经C18的RP-HPLC纯化后,通过高碘酸钠法将纯化的CXCR3-B分子的多肽与KLH交联;皮下注射抗原免疫日本大耳白兔,加强免疫得到抗血清,应用蛋白G纯化获得多克隆抗体。对纯化的抗体进行ELISA、免疫印迹、免疫组化等初步鉴定和应用。结果:分别化学合成CXCR3-B分子N端第1~19、第17~35及第33~51个氨基酸多肽,纯化后多肽纯度分别为98%、88.54%及80%,达到免疫用抗原标准。多肽与KLH交联,用于免疫动物。经纯化后的抗体效价分别为1∶32000(0.1mg/L),1∶4000(3mg/L)和1∶1000(10mg/L)。3种多肽的抗体可特异识别胎心组织中相对分子质量(Mr)约为50的CXCR3-B分子,相应抗原定位于3种多肽的抗体可特异识别胎心组织中的血管内皮细胞。结论:所制备的多克隆抗体可应用于ELISA、免疫印迹和免疫组化等实验,为确定CXCR3-B分子的组织及细胞分布和定位、寻找CXCR3-B相互作用的分子提供了有力的工具。     

进行性系统性硬皮病患者ENA多肽抗体检测

本文对96例进行性系统性硬皮病(PSS)患者用免疫印迹技术(IBT)及以人喉癌上皮细胞(HEP-2细胞)为基质片进行可提取核抗原(ENA)多肽抗体谱和免疫荧光抗核抗体(IFAN-A)配对检测。结果显示:IFANA阳性67例(68.8％),其荧光核型以颗粒型为主,有57例(85.0％),其它核型中核仁型7例(10.4％),着丝点型3例(4.5％),未见周边型和均质型。ENA多肽抗体检测阳性58例(60.4％),其中以抗Scl-70为主,占阳性患者的44.8％(26例)。由于抗Scl-70与IFA-NA颗粒型密切相关(p相似文献   

风湿病患者ENA多肽抗体检测的临床评价

本文用免疫印迹技术检测122例风湿病患者的ENA多肽抗体。其中SLE阳性率为74.0％（37／50）；MCTD阳性率为100％（24／24）；SS阳性率为85.0％（17／20）；PSS阳性率为61．1％（11／18）；PM／DM阳性率为30.0％（3／10）。试验结果认为，检测ENA多肽抗体，对以上五种风湿病的诊断、预后有一定的临床价值。     

非小细胞肺癌相关多肽IgY抗体的制备及其ELISA检测研究

目的 制备抗非小细胞肺癌(NSCLC)相关多肽的IgY抗体,并进行NSCLC酶联免疫吸附分析(ELISA)实验研究. 方法用人工自动合成仪合成2条肽段(长度分别为64 AA和36 AA),并分别偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)作为抗原免疫鸡产生IgY抗体,水稀释-辛酸法结合硫酸铵沉淀法分离提取IgY,亲和层析进一步纯化特异性IgY,间接非竞争ELISA检测抗体效价,棋盘滴定法选择ELISA的最适工作条件.将抗64 AA肽IgY抗体(Ab1)和抗36 AA肽IgY抗体(Ab2)联合,用ELISA检测96例NSCLC患者和102例正常人的血清. 结果成功制备了NSCLC相关多肽IgY抗体,效价Ab1为1 ∶ 104,Ab2为1 ∶ 105.用Ab1和Ab2组合作联合检测,以临界值0.241为阳性判断标准,96例肺癌患者血清中,阳性58例,敏感度为60.4 %;102例正常人血清中,阳性19例,特异度81.4 %.结论 运用IgY技术可以高效、大量制备多肽抗体,NSCLC相关多肽IgY抗体的ELISA检测实验表明IgY技术可在肺癌诊断中有较好的应用前景.     

HIV感染者体内抗小分子多肽抗体与病情发展的初步研究

目的 研究HIv感染者体内抗—R7v含量与病情发展的关系。方法 用ELISA、中和沉淀等方法检测HIv感染者、长期生存者、艾滋病患者等的抗—R7v含量。结果 抗—R7v检出率在无症状组和长期生存组较高，在进展者和艾滋病患者中较低，溶解处理标本后抗—R7v含量及阳性率明显提高。结论 抗—R7V主要通过于扰HIV与CCB5、CxCR4结合，使HIV不能进入CD4^ T淋巴细胞内，并阻止病毒的复制。     

大豆多肽开发应用前景

大豆蛋白资源丰富，氨基酸组成比较完全，是最优良的植物蛋白，是食品加工中的重要原料。为了进一步改善大豆蛋白的营养功能及其加工特性，拓宽其应用领域，充分发挥大豆蛋白质在维系人体健康方面的重要作用，提高大豆产品的附加值，把大豆蛋白有限水解，生成大豆多肽已成为许多研究者的选择。大豆多肽是指大豆蛋白质经过水解分离精制等过程而获得的通常由3～6个氨基酸组成的相对分子量低于1000的低肽混合物，     

细胞内抗体应用的研究进展

细胞内抗体是近几年发展起来的具有良好应用前景的抗体工程领域，是指在细胞内表达并被定位于亚细胞区室(如胞核、胞浆或某些细胞器)，与特定的靶分子作用(干扰或阻断靶分子的加工、分泌或功能)从而发挥其生物学功能的一类新的工程抗体。主要应用在抑制病毒复制特别是HIV-1复制、肿瘤基因治疗方面，已经逐渐拓展到中枢神经系统疾病、移植排斥和自身免疫性疾病等领域，本文对细胞内抗体的研究进展作一综述。     

细胞内抗体应用的研究进展

细胞内抗体是近几年发展起来的具有良好应用前景的抗体工程领域 ,是指在细胞内表达并被定位于亚细胞区室 (如胞核、胞浆或某些细胞器 ) ,与特定的靶分子作用 (干扰或阻断靶分子的加工、分泌或功能 )从而发挥其生物学功能的一类新的工程抗体。主要应用在抑制病毒复制特别是HIV 1复制、肿瘤基因治疗方面 ,已经逐渐拓展到中枢神经系统疾病、移植排斥和自身免疫性疾病等领域 ,本文对细胞内抗体的研究进展作一综述     

抗体药物偶联物研究进展

近年来抗肿瘤抗体药物在基础研发、临床应用等方面都得到了快速发展。但现有抗体药物单独使用抗肿瘤疗效有限,临床上多与化疗药物联合应用,且多数初始接受抗体治疗有效的患者易产生耐药。抗体药物偶联物(antibody drug conjugates,ADCs)在提高抗体药物的治疗效果、克服耐药和充分利用抗体靶向性方面具有独特优势。目前,ADCs俨然已成为新型抗肿瘤抗体药物研发的重点。本文拟对现有ADCs研究现状作一简要概述。