miR-495-3p / WIF1 / Wnt 信号通路轴调节视网膜母细胞瘤细胞 增殖、 迁移和侵袭

目的 分析 miR-495-3p / Wnt 抑制因子 (Wnt inhibitor factor 1, WIF1) / Wnt 信号通路轴调节视网 膜母细胞瘤 (retinoblastoma, RB) 细胞增殖、 迁移和侵袭。 方法 生物信息学分析 WIF1 的差异表达及与 临床不良表型之间的关系, 并预测 miRNA 靶标; 双荧光酶素报告实验验证。 构建稳定过表达 WIF1 的 RB 细胞 (Vector 组、 WIF1 组)。 构建稳定过表达 miR-495-3p 的 RB 细胞 (miR-NC 组、 miR-495-3p 组和 miR495-3p + WIF1 组)。 Western 印迹检测 WIF1 蛋白及 Wnt 通路相关蛋白表达, 并进行体外功能试验。 裸鼠移 植瘤实验分析移植瘤体积重量。 免疫组化分析 WIF1 在 RB 组织中水平。 结果 WIF1 低表达, 与迁移、 侵袭 有关, 为 miR-495-3p 靶标, 双荧光酶素报告实验证实 WIF1 是 miR-495-3p 作用靶点。 WIF1 过表达抑制细胞增 殖、 迁移和侵袭, 影响细胞周期, 诱导凋亡。 体内实验显示 WIF1 在 RB 组织中过表达, 其过表达抑制瘤体生 长。 过表达 WIF1 下调 β-catenin、 c-Myc 蛋白水平 (P< 0. 05)。 过表达 miR-495-3p 下调 WIF1 蛋白水平, 上调 β-catenin 和 c-Myc 蛋白水平, 促进细胞增殖迁移、 迁移和侵袭, 抑制细胞凋亡 (P< 0. 05), 增加 WIF1 表达 可逆转 miR-495-3p 的作用 (P< 0. 05)。 结论 miR-495-3p 靶向 WIF1 通过 Wnt 信号通路抑制 RB 细胞增殖、 迁移和侵袭, 并诱导凋亡。     

CYFIP2过表达对膀胱癌T24细胞的生物学功能和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨细胞质脆性X智力低下蛋白1结合蛋白2(CYFIP2)过表达对膀胱癌T24细胞的生物学功能和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法对照组为转染pcDNA3空载体的T24细胞, 过表达组为转染CYFIP2过表达载体的T24细胞。采用逆转录酶定量聚合酶链式反应和Western Blot检测CYFIP2 mRNA和蛋白的表达, CCK-8检测CYFIP2过表达对T24细胞增殖的影响, Transwell检测CYFIP2过表达对T24细胞迁移和侵袭的影响, 并通过Western Blot检测CYFIP2过表达对T24细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果与对照组相比, 过表达组CYFIP2 mRNA和蛋白的表达水平均升高(均P<0.001), 细胞增殖、迁移和侵袭能力均减弱(均P<0.01)。CYFIP2过表达的T24细胞中β-catenin、c-Myc和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的蛋白表达均下调(均P<0.05), 而p-β-catenin的蛋白水平增加(P<0.05)。结论 CYFIP2过表达能够抑制T24细胞增...     

瑞马唑仑调节Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨瑞马唑仑(REM)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:体外培养人胃癌细胞系SGC7901,分为对照组、REM低(80μM)、中(160μM)、高(320μM)浓度组(REM-L、M、H组)和REM(320μM)+Wnt/β-catenin信号通路激活剂氯化锂(LiCl, 20mM)组(REM+LiCl组),采用MTT法、克隆形成实验分别检测各组SGC7901细胞增殖活力和克隆形成能力,Transwell实验检测各组SGC7901细胞迁移、侵袭能力,Western Blotting检测各组SGC7901细胞中Wnt1、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果:与对照组比较,REM-L、M、H组SGC7901细胞增殖活力、克隆形成能力、迁移和侵袭能力及细胞中c-Myc、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、Wnt1、β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.01);而与REM-H组比较,REM+LiCl组SGC7901细胞上述指标显著升高(P<0.01)。结论:REM可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵...     

低氧微环境对非小细胞肺癌细胞系A549细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨低氧对肺癌细胞系A549增殖和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法将体外培养的非小细胞肺癌细胞系A549分别置于常氧和低氧环境下刺激24 h,采用CCK8法检测细胞的增殖能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;Real time-PCR和Western blot法检测细胞中Wnt/β-catenin mRNA和蛋白的表达水平;并进一步使用β-catenin特异性siRNA阻断其表达,并检测。结果体外低氧微环境可显著促进肺癌细胞系A549的增殖和侵袭,并可激活Wnt/β-catenin信号通路;而抑制Wnt/β-catenin信号通路则能有效抑制低氧介导的肺癌细胞增殖与侵袭。结论低氧微环境通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进非小细胞肺癌细胞系A549的增殖和侵袭转移。     

TIPE2过表达调控Wnt/β-catenin抑制胃癌细胞增殖、迁移和EMT北大核心CSCD

目的:探究肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样因子2(TIPE2)是否通过抑制Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌(GC)细胞增殖、迁移和上皮-间质转化(EMT)。方法:qRT-PCR和Western blot检测不同细胞中TIPE2 mRNA和蛋白表达。体外培养MKN45细胞,依次分为:Control组(不做任何处理)、AD-EV组(转染AD-EV)、AD-TIPE2组(转染AD-TIPE2)、LiCl组(Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl处理)、AD-TIPE2+LiCl组(转染AD-TIPE2后LiCl处理)。MTT和集落形成实验检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移;Western blot检测细胞TIPE2、E-cadherin、N-cadherin、Wnt2、β-catenin和Twist蛋白表达;免疫荧光染色检测细胞TIPE2、E-cadherin及N-cadherin表达。结果:GC细胞株中TIPE2表达显著下调,且在MKN45细胞中表达最低。与AD-EV组相比,AD-TIPE2组MKN45细胞增殖活力、集落形成数、迁移细胞数及N-cadherin、TIPE2、Wnt2、β-catenin、Twist、c-Myc和CyclinD1蛋白表达均显著降低,TIPE2和E-cadherin表达显著增高(P<0.05);与AD-TIPE2组相比,AD-TIPE2+LiCl组MKN45细胞增殖活力、集落形成数、迁移细胞数及N-cadherin、TIPE2、Wnt2、β-catenin、Twist、c-Myc和CyclinD1蛋白表达均显著升高,TIPE2和E-cadherin表达显著降低(P<0.05);与LiCl组相比,AD-TIPE2+LiCl组MKN45细胞增殖活力、集落形成数、迁移细胞数及N-cadherin、TIPE2、Wnt2、β-catenin、Twist、c-Myc和CyclinD1蛋白表达均显著降低,TIPE2和E-cadherin表达显著升高(P<0.05)。结论:上调TIPE2可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制GC细胞增殖、迁移和EMT。     

穿心莲内酯对骨肉瘤143B细胞的抑制作用及其机制

目的:探究穿心莲内脂(AG)对人骨肉瘤143B细胞的抑制作用及其潜在的机制。方法:体外培养人骨肉瘤143B细胞,使用不同浓度(0~20μmol/L)的AG处理143B细胞,分别用结晶紫染色、MTT法和集落形成实验来检测AG对143B细胞增殖的影响。划痕愈合实验检测骨肉瘤143B细胞的迁移能力。Transwell小室实验检测骨肉瘤143B细胞的侵袭能力。Hoechst 33258染色实验和流式细胞术检测AG对骨肉瘤细胞凋亡的影响。不同浓度AG处理后,使用Western blot检测骨肉瘤细胞增殖、迁移侵袭和凋亡相关蛋白的水平。应用Western blot进一步检测Wnt信号通路中的β-catenin及其相关分子c-Myc的表达量。结果:与空白组相比,AG处理组中143B骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显受到抑制(P<0.05),且呈浓度依赖性。迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶9(MMP-9)、波形蛋白(vimentin)和Snail蛋白的水平均下调(均P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达量升高,凋亡相关蛋白caspase-3的蛋白水平下降而cleaved caspase-3的蛋白水平升高,同时Wnt信号通路相关蛋白β-catenin和c-Myc的表达水平均明显下调(P<0.01)。结论:穿心莲内酯可能通过抑制Wnt信号通路的活性,从而达到抑制人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移和侵袭能力,并且促进其凋亡。     

八正汤加减通过Wnt/β-catenin通路抑制肾癌细胞的增殖与侵袭

目的 探讨八正汤加减对肾癌细胞增殖与侵袭的影响及其作用机制。方法 将人肾癌细胞系786-O设为对照组与八正汤加减组,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用划痕实验与Transwell侵袭实验测定细胞迁移和侵袭情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测Bax、C-caspase-3、E-cadherin、Ncadherin、vimentin、Wnt3a、GSK3β、p-GSK3β、p-β-catenin和β-catenin的表达。结果 八正汤加减能够抑制786-O细胞的增殖、迁移与侵袭,促进786-O细胞的凋亡,上调786-O细胞Bax、C-caspase-3、E-cadherin与p-β-catenin蛋白的表达,下调786-O细胞N-cadherin、vimentin、Wnt3a、p-GSK3β和β-catenin蛋白的表达。结论 八正汤加减通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制786-O细胞增殖、侵袭和转移,促进细胞凋亡。     

miR-7-5p和miR-152-3p联合调控Wnt/β-catenin通路对乳腺癌细胞上皮-间质转化及化疗耐药的影响

目的探讨miR-7-5p和miR-152-3p协同抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)进程及紫杉醇耐药的分子机制。方法采用生物信息学软件预测miR-7-5p和miR-152-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因检测两者与TCF4的靶向关系;Western blot法检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键调控因子β-catenin及TCF4蛋白的表达;在转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics基础上给予Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl处理后,Western blot法检测MCF-7/TAX细胞中β-catenin、TCF4和EMT相关蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达,Transwell小室实验检测MCF-7/TAX细胞侵袭和迁移能力;MTT实验检测激活Wnt/β-catenin信号通路对MCF-7/TAX细胞紫杉醇耐药性的影响。结果 TCF4 3′UTR区域存在能够与miR-7-5p及miR-152-3p互补的结合位点;转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics后可使TCF4野生型(TCF4-WT)报告基因载体的荧光素酶活性较NC组明显降低(P0.05)。Western blot结果显示,与NC组相比,转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics后各组紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞中β-catenin和TCF4蛋白的表达水平明显降低(P0.05),且两者共同转染后MCF-7/TAX细胞中β-catenin和TCF4蛋白的表达水平较miR-7-5p组或miR-152-3p组进一步降低(P0.05)。Western blot结果显示,LiCl处理后MCF-7/TAX细胞中β-catenin、TCF4和vimentin蛋白表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P0.05)。Transwell小室结果显示,LiCl处理后MCF-7/TAX细胞侵袭和迁移能力明显增强(P0.05)。MTT结果显示,不同浓度紫杉醇作用下,miR-7-5p+LiCl组细胞增殖活力较miR-7-5p组明显升高;同时miR-152-3p+LiCl组和miR-7-5p/152-3p+LiCl组细胞的增殖活力较NC组均明显升高(P0.05)。结论 TCF4是miR-7-5p和miR-152-3p的共同靶标。miR-7-5p和miR-152-3p可共同抑制MCF-7/TAX细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活化。     

XAV939抑制人神经母细胞瘤细胞的增殖

目的探讨小分子抑制剂XAV939对人神经母细胞瘤(NB)细胞系SH-SY5Y细胞的抗增殖和诱导凋亡的作用,及其可能机制。方法采用MTT法检测XAV939对SH-SY5Y细胞活力的抑制作用,并确定最佳作用浓度。然后采用Annexin V-FITC法检测XAV939处理后早期凋亡细胞百分比,Hoechst33342染色法观察凋亡细胞核形态,克隆形成实验检测细胞体外增殖能力的变化。Western blotting检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin信号通路的关键蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2的变化。结果 MTT结果显示,1μmol/L XAV939作用24h后,SH-SY5Y细胞增殖的抑制率有明显上升。XAV939处理后48h及72h,凋亡细胞百分比显著高于对照组,且细胞呈现出不同程度的凋亡形态。此外,XAV939可显著降低SH-SY5Y细胞的体外克隆形成率,降低Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin,Cyclin D1和c-Myc及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论 XAV939可能部分通过抑制Wnt/β-catenin信号通路而抑制SH-SY5Y细胞的增殖。     

Wnt/β-catenin信号通路在低氧促进骨肉瘤细胞体外增殖和侵袭中的作用

目的探讨缺氧条件下,Wnt/β-catenin信号通路在骨肉瘤细胞增殖和侵袭中的作用和机制。方法分别在常氧(21%O_2)和缺氧(1%O_2)环境下培养骨肉瘤SaOS-2细胞系24 h,采用CCK-8法检测细胞在缺氧环境下的增殖能力变化,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Real time-PCR和Western blot法检测细胞中Wnt/β-catenin mRNA和蛋白的表达水平,进一步使用β-catenin特异性siRNA阻断其表达并检测。结果缺氧可明显促进骨肉瘤SaOS-2细胞的增殖以及体外侵袭能力的增强,同时上调Wnt/β-catenin mRNA和蛋白表达水平。靶向沉默Wnt/β-catenin之后,缺氧失去了对骨肉瘤SaOS-2细胞增殖和侵袭的诱导作用。结论缺氧条件下,骨肉瘤SaOS-2细胞系中的Wnt/β-catenin信号通路显著激活,从而促进细胞的异常增殖与侵袭能力增强。     

姜黄素抑制Wnt信号通路增加胃癌细胞对顺铂的敏感性

目的 探讨姜黄素增强胃癌细胞对顺铂化疗敏感性的作用以及Wnt/β-catenin信号通路的调控机制。方法 姜黄素、顺铂单独或联合干预多耐药细胞株BGC-823/5-Fu,并将细胞分为对照组、姜黄素干预组、顺铂干预组、联合干预组。MTT试验及集落形成试验检测各组细胞增殖能力和克隆成瘤能力; Transwell小室试验检测各组细胞迁移能力。Western blot检测各组细胞E-cadherin、Vimentin蛋白及Wnt信号通路相关蛋白表达。结果 干预后72 h,联合干预组OD值低于对照组、姜黄素干预组、顺铂干预组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。联合干预组集落形成数、穿膜细胞数均少于姜黄素干预组、顺铂干预组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。联合干预组Wnt2及β-catenin蛋白表达低于姜黄素干预组、顺铂干预组; GSK3β蛋白表达高于姜黄素干预组、顺铂干预组,差异均有统计学意义(P 0. 05);联合干预组Vimentin蛋白表达低于姜黄素干预组(P 0. 05),与顺铂干预组比较,差异无统计学意义(P 0. 05);联合干预组E-cadherin蛋白表达与姜黄素干预组和顺铂干预组比较,差异无统计学意义(P 0. 05)。结论 姜黄素下调Wnt/β-catenin信号通路,增强胃癌细胞对顺铂的敏感性,抑制胃癌细胞上皮间质转化。     

长链非编码RNA LINP1对肝癌细胞增殖、侵袭转移的影响

目的探究长链非编码RNA LINP1在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞增殖及侵袭转移能力的影响。方法使用qRT-PCR方法检测60例肝癌组织以及癌旁组织、肝癌细胞株及正常肝细胞中LINP1的表达情况。si-LINP1转染肝癌细胞敲低LINP1表达;CCK-8实验检测si-LINP1对肝癌细胞增殖影响;Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和cyclinD1表达。结果 LINP1在肝癌组织中的表达水平高于癌旁组织,肝癌细胞高于正常肝细胞系Lo2(P0.05);敲低LINP1抑制肝癌细胞增殖及侵袭转移,抑制Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和cyclinD1表达(P0.05)。结论敲低LINP1抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和转移与抑制Wnt/β-catenin信号通路相关。     

五味子乙素通过Wnt/β-catenin信号通路调节人胰腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭

目的 研究五味子乙素对人胰腺癌细胞Panc-1细胞增殖,凋亡和侵袭的调控作用及对Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 不同、浓度的五味子乙素(12、24、48μg/ml)处理胰腺癌Panc-1细胞后,采用CCK8法检测Panc-1细胞增殖变化,Transwell法检测细胞侵袭情况,流式细胞术检测细胞凋亡的变化...     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨丙泊酚调控miR-219-5p抑制肝癌细胞增殖、侵袭的作用机制

目的：探讨丙泊酚调控mi R-219-5p抑制肝癌细胞增殖、侵袭的作用机制。方法：体外培养人肝癌细胞株Huh7，分为空白组、2、5、10μg/ml丙泊酚组和丙泊酚+干扰mi R-219-5p组；PCR检测细胞mi R-219-5p表达；MTT检测丙泊酚对肝癌细胞的增殖抑制作用；Transwell检测细胞侵袭能力；划痕实验检测细胞迁移率；Western blot检测β-catenin、c-Myc蛋白含量。结果：与空白组相比，不同浓度丙泊酚组mi R-219-5p表达升高，细胞增殖被抑制，侵袭能力减弱，迁移率降低，β-catenin、c-Myc蛋白表达降低，且呈浓度依赖性（P<0.05）；与丙泊酚各组比较，丙泊酚+干扰mi R-219-5p组增殖抑制能力减弱，侵袭能力增强，迁移率升高，β-catenin、c-Myc蛋白含量升高（P<0.05）。结论：丙泊酚可通过上调mi R-219-5p表达抑制肝癌细胞增殖和侵袭，其机制可能为调控Wnt/β-catenin信号通路。     

RNA 干扰抑制BAG-1 基因表达对皮肤鳞状细胞癌增殖及凋亡的影响研究

目的:探讨抑制BAG-1(Bcl-2-associated athanogene-1)基因表达对皮肤鳞状细胞癌增殖及凋亡的影响。方法:采用LipofectamineTM2000 将BAG-1 的siRNA 转染皮肤鳞状细胞癌A431,转染后48 h,RT-PCR 检测BAG-1 的mRNA 表达,Western blot 检测BAG-1 的蛋白表达;CCK8 和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况;Western blot 检测B 细胞淋巴瘤/ 白血病-2(Bcl-2)家族促凋亡蛋白Bcl-2 相关X 蛋白(Bax)及Wnt/β-catenin 信号通路β-连环蛋白(β-catenin)、Survivin 的蛋白表达;ELISA 试剂盒检测白介素6 (IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果:与空白组和阴性对照组比较,转染BAG-1 的siRNA 可明显抑制BAG-1 在转录和翻译水平上的表达;与空白组较,BAG-1-siRNA 组细胞增殖显著降低,细胞凋亡率显著增加,Bax 蛋白表达上调, β-catenin、Survivin 蛋白表达下调,IL-6、VEGF 含量均显著降低(P<0.05)。结论:BAG-1 表达沉默可降低皮肤鳞状细胞癌增殖,促进细胞凋亡,上调Bax 及下调Wnt/ β-catenin 信号通路表达,降低IL-6、VEGF 因子的分泌。     

5-FU通过靶向Wnt/β-catenin信号通路对结直肠癌干细胞活性的影响

目的 基于Wnt/β-catenin信号通路探讨5-氟尿嘧啶（5-FU）对结直肠癌干细胞（CRC-CSC）活性的影响。方法 流式细胞术分选CD133标记的CRC-CSC,以不同浓度5-FU(6.25、12.50、25.00μmol/L)处理细胞,对照组以等体积培养液处理。药物作用48 h后,CCK-8法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞凋亡,平板克隆实验和球形成实验检测细胞克隆能力及悬浮球形成能力,蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路表达。结果 与对照组比较,高剂量5-FU处理后CRC-CSC细胞增殖能力（24 h、48 h两组分别为0.31±0.03vs. 0.53±0.05;0.37±0.03 vs. 0.61±0.05）和迁移能力（24 h、48 h两组分别为9.63±0.72 vs. 38.69±0.88;16.21±1.17 vs.58.69±1.32）显著增加（P<0.05）,细胞凋亡率（24 h、48 h两组分别为46.91±0.94 vs. 18.46±0.88;55.22±1.24 vs. 28.42±1.18）显著降低（P&...     

Zeste基因增强子同源物2通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响脑胶质瘤细胞凋亡

目的:探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)通过调控Wnt/β-catenin信号通路对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法:以RT-q PCR和Western blot检测胶质瘤U87、H4和U251细胞及正常人脑星形细胞(NHA)中EZH2的表达水平。在H4细胞中转染EZH2 siRNA和siRNA control,MTT测定细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡,分光光度计法检测caspase-3的活性,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白β-连环蛋白(β-catenin)和下游靶分子c-Myc的蛋白表达。用Wnt/β-catenin信号通路激活剂处理转染EZH2 siRNA的H4细胞,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定β-catenin和c-Myc的表达。结果:胶质瘤U87、H4和U251细胞中EZH2的mRNA和蛋白水平均明显高于NHA(P0.05),并且H4细胞中EZH2 mRNA和蛋白水平高于U87和U251细胞(P0.05)。EZH2 siRNA可以明显下调H4细胞中EZH2的mRNA和蛋白水平。EZH2表达下调后的H4细胞从48 h开始细胞活力降低,并且细胞凋亡率也明显升高,细胞中caspase-3活性也明显升高(P0.05),同时EZH2表达下调还可以抑制β-catenin和c-Myc的表达。Wnt/β-catenin信号通路的激活剂可以减少EZH2诱导的H4细胞凋亡,降低细胞中caspase-3的活性。结论:EZH2在脑胶质瘤细胞中过度表达,下调其表达可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活而诱导胶质瘤细胞凋亡。     

氯化锂对人滑膜成纤维细胞增殖影响

目的:研究Wnt/β-catenin通路激活剂氯化锂(LiCl)对成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响。方法:收集关节创伤患者行关节腔镜或关节置换术膝关节滑膜标本3例,采用酶消化法进行关节滑膜FLS的原代细胞培养,应用LiCl对细胞进行刺激,应用MTT法检测关节创伤患者FLS细胞增殖的改变。结果:MTT法检测显示,10 mmol/L LiCl刺激后,关节FLS的吸光度较非刺激状态下增高,差异显著(P0.05)。20-40 mmol/L LiCl抑制FLS细胞增殖(P0.05)。结论:低浓度LiCl可能通过激活Wnt/β-catenin通路促进关节创伤患者FLS细胞增殖,高浓度LiCl抑制FLS细胞增殖。     

人参皂苷Rh2下调Wnt/β-catenin信号通路调控SHG44细胞的增殖和凋亡

目的研究人参皂苷Rh2(GS-Rh2)下调Wnt/β-catenin信号通路调控SHG44细胞的增殖和凋亡。方法体外培养SHG44细胞,以5、10、20、40、80μg/m L的GS-Rh2作用24 h和48 h,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,RT-PCR检测细胞Wnt-1,β-catenin m RNA表达的变化,Western blot检测GS-Rh2对SHG44细胞Wnt-1、β-catenin蛋白表达的变化。结果与空白对照组比较,5、10、20、40、80μg/m L GS-Rh2作用24 h和48 h时,SHG44细胞增殖抑制率依次升高(P0.05),SHG44细胞总凋亡率依次增大(P0.05);与空白对照组比较,5、10、20、40、80μg/m L GS-Rh2作用24 h和48 h时,SHG44细胞Wnt-1、β-catenin m RNA和蛋白水平依次降低(P0.05)。结论 GS-Rh2具有一定的抗肿瘤活性,可抑制SHG44细胞增殖、诱导其凋亡,且具有剂量依赖性,其作用机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。