赫赛汀诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡并增强其对化疗的敏感性

目的:研究赫赛汀单独或联合阿霉素(adriamycin,ADR)、顺铂(cisplatin,DDP)及紫杉醇(paclitaxel,PTX)对子宫内膜癌细胞凋亡和化疗敏感性的影响,为临床应用赫赛汀治疗子宫内膜癌提供理论依据。方法:MTT法检测赫赛汀、ADR、DDP及PTX处理子宫内膜癌Ishikawa细胞的IC50。进一步应用1/2IC50量的赫赛汀与各1/2IC50量的ADR、DDP及PTX药物联合,流式细胞术检测细胞周期与凋亡变化。结果:赫赛汀抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞生长,引起细胞G1期阻滞,诱导细胞凋亡。子宫内膜癌Ishikawa细胞应用赫赛汀、ADR、DDP及PTX的IC50分别为57.12mg/L、0.572μmol/L、67.4μmol/L和719.5nmol/L,赫赛汀联合化疗后显著提高各组化疗药的杀伤效果,诱导细胞凋亡,与单纯化疗组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:赫赛汀诱导子宫内膜癌细胞凋亡,并提高子宫内膜癌细胞株对化疗的敏感性。     

光动力疗法对子宫内膜癌Ishikawa细胞系细胞周期和凋亡的影响

目的 探讨光动力疗法(PDT)对子宫内膜癌Ishikawa细胞系细胞周期及凋亡的影响.方法 以四甲基吡啶卟啉(TMPyP)为光敏剂的PDT处理Ishikawa细胞,显微镜观察细胞形态;细胞计数试剂盒CCK-8检测细胞的存活率;流式细胞术检测细胞周期;使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞的凋亡;蛋白免疫印迹法检测Bcl-2、NF-κB P65及磷酸化NF-κB P65的表达.结果 PDT可以改变Ishikawa细胞的形态,降低细胞存活率(P＜0.05),并与光敏剂TMPyP的浓度和激光能量密度有关;PDT引起细胞S期阻滞(P＜0.05),诱导Ishikawa细胞发生凋亡(P＜0.05),降低Bcl-2蛋白的表达和NF-κB P65的磷酸化水平(P＜0.05).结论 PDT可能通过下调Bcl-2、NF-κB的活性引起Ishikawa细胞S期阻滞和细胞凋亡.     

丹参酮ⅡA增强顺铂抗子宫内膜癌Ishikawa细胞的作用

目的 探讨丹参酮ⅡA增强顺铂抗子宫内膜癌Ishikawa细胞的作用及其分子机制.方法 体外培养并取对数生长期子宫内膜癌Ishikawa细胞,设空白对照组、丹参酮ⅡA组(10 μg/ml)组、顺铂(10 μg/ml)组和联合干预组[丹参酮ⅡA(10 μg/ml)+顺铂(10 μg/ml)].采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力,Western blotting实验检测各组细胞的Caspase-3蛋白表达情况.结果 空白对照组、丹参酮ⅡA组、顺铂组、联合干预组细胞增殖活性分别为2.46±0.06、1.92±0.04、1.61±0.06、0.38±0.03,联合干预组细胞增殖活性低于顺铂组,差异有统计学意义(P＜0.05);而4组细胞在48h时的划痕愈合率分别为(0.93±0.01)％、(0.26±0.07)％、(0.43±0.06)％、(-0.01±0.00)％,与其他各组比较,联合干预组细胞的愈合率最低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合干预组Cleaved-Caspase-3蛋白表达量高于顺铂组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 丹参酮ⅡA具有增强子宫内膜癌Ishikawa细胞顺铂化疗效果的潜在作用,其机制可能与抑制细胞迁移及调节Caspase-3凋亡相关蛋白表达有关.     

肉桂醛对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡与侵袭的影响

目的 探讨肉桂醛对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡与侵袭的影响及可能机制.方法 将培养的Ishikawa细胞分为空白对照组与肉桂醛组(3.75、7.50、15.00μg/ml).不同浓度肉桂醛干预24h后,MTT实验检测Ishikawa细胞增殖能力变化;平板克隆实验检测细胞克隆形成率;流式细胞术分析Ishika...     

依托咪酯对子宫内膜癌细胞增殖抑制和凋亡的影响

目的 探究依托咪酯对子宫内膜癌细胞增殖抑制和凋亡的影响.方法 实验分为对照组、依托咪酯高剂量组、依托咪酯中剂量组、依托咪酯低剂量组,继续培养细胞48 h进行实验.细胞计数试剂盒8(CCK-8)细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期情况;蛋白质免疫印迹检测细胞中剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved Cas...     

白术多糖通过调控线粒体凋亡途径诱导人子宫内膜癌RL95-2细胞凋亡

目的:探讨白术多糖(PAM)对人子宫内膜癌RL95-2细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:预实验选取梯度浓度(0、7.5、15、30、60、120、240 mg/ml)的PAM作用于RL95-2细胞,MTT比色法检测细胞增殖活性,Bliss法计算24 h、48 h和72 h的半数抑制浓度(IC50)。正式实验中将RL95-2细胞分为空白对照组和不同浓度(15、30、60 mg/ml)PAM处理组。共培养48 h后,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化;Western blot检测细胞线粒体和细胞质中细胞色素C(Cyt C)蛋白水平差异;分光光度法检测细胞中半胱天冬酶9(Caspase9)活性;Western blot检测线粒体凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax和cleaved-Caspase3)表达水平。结果:PAM可降低RL95-2细胞的增殖率,与药物浓度和作用时间有关。与空白对照组相比,PAM处理组细胞凋亡率显著增加(均P<0.01);线粒体膜电位及Cyt C蛋白表达显著降低(均P<0.05),但细胞质中Cyt C蛋白表达显著增加(P<0.01);细胞中Caspase9活性显著增强(均P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(均P<0.05),而Bax和cleaved-Caspase3蛋白水平显著提高(均P<0.01)。结论:白术多糖可能通过激活线粒体凋亡途径促进RL95-2细胞凋亡。     

紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学行为的影响及可能机制

目的 探讨紫草素对子宫内膜癌lshikawa细胞增殖、凋亡与侵袭的影响及可能机制.方法 将培养的Ishikawa细胞分为空白对照组与紫草素组(10、20、40pmol/L).不同浓度紫草素干预48h后,MTT实验检测Ishikawa细胞增殖能力变化;流式细胞术分析Ishikawa细胞的凋亡变化.40μmol/L紫草素处...     

MALAT1对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA MALAT1对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制.方法 以子宫内膜癌RL95-2细胞为研究对象,采用慢病毒载体敲低和过表达MALAT1,利用实时荧光定量PCR检测敲低及过表达效率,通过CCK-8、流式细胞术检测敲低及过表达MALAT1后对RL95-2细胞增殖和凋亡的影响.采用免疫印迹法...     

沉默miR-21对子宫内膜癌顺铂耐药细胞株Ishikawa/DDP的影响

目的:观察沉默miR-21对子宫内膜癌顺铂耐药细胞株Ishikawa/DDP的影响.方法:以Lipofectamine 2000介导miR-21抑制剂转染Ishikawa/DDP细胞株,同时设置阴性组和耐药组.采用反转录PCR检测miR-21、多药耐药基因MDR1、促凋亡基因Bax和抗凋亡基因Bcl-2的表达.采用蛋白印迹法检测多药耐药蛋白P-gp、促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.采用噻唑蓝比色法检测细胞对顺铂的敏感性.采用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果:与耐药组和阴性组比较,抑制剂组miR-21,MDR1和Bcl-2 mRNA表达显著下调(P＜0.0l),而Bax mRAN表达显著上调(P＜0.00l);抑制剂组P-gp和Bcl-2蛋白表达显著低下调(p＜0.05),而Bax蛋白表达显著上调(P＜0.001).与耐药组和阴性组比较,顺铂对抑制剂组的IC50值显著(P＜0.001);顺铂对抑制剂组细胞的诱导凋亡率显著增加(P＜0.00l).结论:沉默miR-21可显著提高Ishikawa/DDP细胞株对顺铂的敏感性,并促进细胞凋亡,其具体机制可能与下调MDR1,P-gp和Bcl-2表达,以及上调Bax表达有关.     

壳寡糖对子宫内膜癌细胞增殖迁移的影响及可能分子机制

目的 探讨壳寡糖对子宫内膜癌细胞增殖迁移的影响及可能分子机制.方法 将不同浓度的壳寡糖作用于子宫内膜癌HEC-1B细胞,通过CCK-8检测细胞的增殖情况;划痕实验检测细胞迁移情况;Western blot检测E-cadherin、Snail、MMP2和MMP9及AMPK/mTOR的蛋白表达.结果 1.25mg/ml的壳...     

YY1在子宫内膜癌中表达及其对癌细胞侵袭和迁移能力的影响

目的 探讨YY1在子宫内膜癌(EC)中表达及其对癌细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 以2017年7月至2020年7月期间在本院收集的105例EC患者的癌组织及距离癌组织3 cm处的105例癌旁组织为研究对象,免疫组织化学检测组织中YY1蛋白的表达;以人子宫内膜上皮细胞ESC及人EC细胞HEC-1A、Ishikawa、EN...     

TRIP13促进子宫内膜癌增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制

目的:探讨甲状腺激素受体因子13(Thyroid hormone receptor interactor 13,TRIP13)对子宫内膜癌(Endometrial carcinoma,EC)增殖、迁移和侵袭的影响及调控机制.方法:分析TRIP13 在子宫内膜癌中的表达模式;通过慢病毒敲减和质粒过表达调控子宫内膜癌细胞中 TRIP13 的表达量;通过 CCK-8、Transwell 迁移及侵袭实验观察TRIP13 对子宫内膜癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;通过Western blot技术检测TRIP13 表达水平的变化,并研究其对PI3K/Akt信号通路蛋白的影响.结果:癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)分析发现,子宫内膜癌组织中TRIP13 的表达水平显著高于正常子宫内膜组织(P＜0.05);TRIP13 的高表达与子宫内膜癌患者的低生存率呈显著正相关(P＜0.05).TRIP13 过表达可促进子宫内膜癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力(P＜0.05),并上调 p-PI3K、p-Akt 的表达(P＜0.05),而下调 TRIP13 后则可逆转上述结果.结论:TRIP13 通过调控PI3K/Akt信号通路促进子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭.     

沉默α-catulin基因对子宫内膜癌lshikawa细胞生物学行为的影响

目的利用siRNA沉默子宫内膜癌lshikawa细胞中α-catulin基因的表达,探讨其对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡与侵袭的影响。方法将培养的Ishikawa细胞分为pGCsi-α-catulin组、pGCsi-NC组与空白对照组(未加入任何试剂的细胞组)。构建α-catulin siRNA的表达载体,并转染Ishikawa细胞。Western blot方法检测转染前后Ishikawa细胞中α-catulin蛋白的表达;MTT实验检测细胞生长抑制率,流式细胞技术分析转染前后Ishikawa细胞的凋亡变化,Transwell实验检测转染前后Ishikawa细胞侵袭能力的变化。结果与pGCsi-NC组与空白对照组相比,pGCsi-α-catulin组Ishikawa细胞中α-catulin蛋白表达水平显著降低,Ishikawa细胞的增殖能力明显降低,凋亡率明显升高,侵袭能力明显减弱(P<0.05)。结论α-catulin可成为治疗子宫内膜癌细胞的靶点。     

沉默α-catulin基因对子宫内膜癌lshikawa细胞生物学行为的影响

目的利用siRNA沉默子宫内膜癌lshikawa细胞中α-catulin基因的表达,探讨其对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡与侵袭的影响。方法将培养的Ishikawa细胞分为pGCsi-α-catulin组、pGCsi-NC组与空白对照组(未加入任何试剂的细胞组)。构建α-catulin siRNA的表达载体,并转染Ishikawa细胞。Western blot方法检测转染前后Ishikawa细胞中α-catulin蛋白的表达;MTT实验检测细胞生长抑制率,流式细胞技术分析转染前后Ishikawa细胞的凋亡变化,Transwell实验检测转染前后Ishikawa细胞侵袭能力的变化。结果与pGCsi-NC组与空白对照组相比,pGCsi-α-catulin组Ishikawa细胞中α-catulin蛋白表达水平显著降低,Ishikawa细胞的增殖能力明显降低,凋亡率明显升高,侵袭能力明显减弱(P<0.05)。结论α-catulin可成为治疗子宫内膜癌细胞的靶点。     

miR-200b通过促进NKD2调节子宫内膜癌细胞EMT及对子宫内膜癌侵袭和迁移能力的影响

目的 探讨miR-200b通过促进NKD2调节子宫内膜癌细胞EMT及对子宫内膜癌侵袭和迁移能力的影响。方法 采用qRT-PCR检测组织中miR-200b和NKD2的表达,免疫组化染色检测组织中NKD2的阳性表达,Transwell实验检测细胞侵袭,细胞划痕实验检测细胞迁移,Westernblot检测EMT相关蛋白及NKD2表达,NKD2过表达载体构建,检测EMT相关蛋白及NKD2表达。结果 子宫内膜腺癌组织中miR-200b和NKD2的表达均低于癌旁组织（P<0.001）;子宫内膜腺癌组织中NKD2的阳性率明显高于癌旁组织（P<0.001）;miR-200b模拟物组中HEC-1A细胞的侵袭数量和迁移能力较阴性对照组相比明显降低（P<0.001）,miR-200b抑制组中HEC-1A细胞的侵袭数量和迁移能力较阴性对照组相比显著升高（P<0.001）;miR-200b模拟物组中E-cadherin和NKD2蛋白水平明显高于阴性对照组（P<0.001）,miR-200b模拟物组中N-cadherin和Snail蛋白水平明显低于阴性对照组（P<0.001）;...     

下调YAP1基因对子宫内膜癌顺铂耐药细胞的影响及机制探究

目的 观察下调YAP1基因对子宫内膜癌顺铂耐药细胞的影响。方法 子宫内膜癌顺铂耐药细胞株Ishikawa/DDP分为Ishikawa/DDP-siRNA-YAP1组（转染siRNA-YAP1的细胞）、阴性对照组（转染siRNA-NC的细胞）和空白对照组（未经转染的细胞）,MTT法及癌细胞单克隆形成数目检测细胞增殖,Transwell小室检测侵袭,划痕检测迁移,AnnexinV-FITC/PI双染法检测凋亡,免疫荧光检测自噬现象,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和自噬相关蛋白LC3β、p62。结果 24 h、48 h、72 h,Ishikawa/DDP-siRNA-YAP1组OD值明显低于阴性对照组和空白对照组（P<0.05）,细胞克隆数明显少于阴性对照组和空白对照组（P<0.05）;细胞迁移率明显低于阴性对照组和空白对照组（P<0.05）;细胞侵袭数明显少于阴性对照组和空白对照组（P<0.05）;免疫荧光结果显示与阴性对照组和空白对照组比较,Ishikawa/DDP-siRNA-YAP1组绿色、红色以及黄色光点明显减少,即自噬小体堆积明...     

上调RAI2表达抑制人子宫内膜癌细胞系HEC-1-A和KLE迁移与侵袭

目的 检测上调维甲酸诱导基因2(retinoic acid-induced 2,RAI2)表达对子宫内膜癌细胞系迁移、侵袭能力的影响。方法 选取子宫内膜癌细胞系HEC-1-A和KLE为研究对象,划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。免疫荧光实验、Western blot检测RAI2、E-cadherin、vimentin的蛋白表达。结果 子宫内膜癌细胞系HEC-1-A和KLE中RAI2表达水平上调后,LV-RAI2组子宫内膜癌细胞迁移与侵袭能力减弱(P<0.05),RAI2、E-cadherin表达水平升高,vimentin表达水平降低(P<0.05)。结论 上调RAI2表达可能通过上皮间质转化调控抑制子宫内膜癌细胞迁移与侵袭能力。     

FABP4表达上调促进人子宫内膜癌细胞系HEC-1-A增殖和迁移

目的 探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在子宫内膜癌中的表达及其对子宫内膜癌细胞系HEC-1-A增殖、迁移及侵袭的影响。方法 RT-qPCR检测子宫内膜癌组织及癌旁组织FABP4 mRNA的表达水平,分析FABP4表达与子宫内膜癌临床病理特征的相关性。将HEC-1-A细胞分为对照组、FABP4阴性对照(si-NC)组和干扰FABP4(si-FABP4)组。RT-qPCR检测HEC-1-A细胞FABP4 mRNA的表达;MTT法检测HEC-1-A细胞增殖;Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭;免疫印迹法检测HEC-1-A细胞FABP4、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白的表达。结果 子宫内膜癌组织中FABP4 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);FABP4表达与肿瘤TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05);干扰FABP4表达可显著抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移与侵袭能力。结论 FABP4在子宫内膜癌中表达上调,干扰FABP4表达可抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

miR-28-3p通过调控Notch表达影响子宫内膜癌细胞的增殖和凋亡

目的:探讨微小RNA-128-3p(miR-128-3p)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:培养人子宫内膜血管内皮细胞hEEC和EC细胞系HEC-1A、Ishikawa和AN3CA,RT-qPCR检测细胞中miR-128-3p和Notch1 mRNA表达水平,Western blot法检测细胞中...