黄芪甲苷对IgA肾病大鼠脾免疫细胞的影响

目的探讨黄芪甲苷(AS)对IgA肾病(IgAN)大鼠脾免疫细胞和肾功能的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、IgAN组、AS低剂量组和高剂量组(n=10)。免疫组化和体视学方法测脾CD3~+、CD4~+T细胞和CD20~+B细胞数密度,免疫荧光法测肾IgA沉积,全自动生化分析仪测24h尿蛋白,显微镜下镜检尿红细胞数。结果与对照组比,IgAN组脾淋巴细胞数密度升高,肾IgA沉积明显,出现血尿、蛋白尿。AS两组与IgAN组比,淋巴细胞数密度下降,肾IgA减少,血尿、蛋白尿减轻。结论 AS有效下调IgAN大鼠脾免疫功能亢进,减轻症状。     

大黄酸对IgA肾病Peyer结T细胞亚群的调节作用

目的探讨Peyer结T细胞亚群失衡在IgA肾病(IgAN)发病机制中的作用及大黄酸对其的调节作用。方法采用牛血清白蛋白+LPS+CCl4法建立IgA肾病大鼠模型。将32只SD雄性大鼠随机分成对照组、IgA肾病模型组、大黄酸预防组和大黄酸治疗组。10周末采用免疫荧光检测肾小球IgA沉积,ELISA方法检测血清中Th1类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4含量。用流式细胞术测定各组Peyer结CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞、γδT细胞亚群和IgA+B细胞(IgA+B220+)的比例。结果和对照组相比,模型组中Th2类细胞因子IL-4含量增加而Th1类细胞因子IFN-γ的含量降低(P均0.05);模型组中CD4+T细胞、CD4+/CD8+、IgA+B220+B细胞比例升高(P均0.05);模型组中γδT细胞亚群的比例增加,CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞的比例降低,但差异均无统计学意义(P0.05)。大黄酸预防组和大黄酸治疗组均可减少IL-4含量、CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+比例和IgA+B220+B细胞比例,并提高IFN-γ的含量。结论 Peyer结Th细胞亚群失衡在IgAN发病机制中起到一定的作用,而大黄酸对Peyer结T细胞亚群平衡具有调节作用。     

基于C1GALT1/Cosmc通路研究雷公藤多苷对IgA肾病大鼠肠道菌群及免疫功能的影响

目的:基于核心1β1,3-半乳糖基转移酶(C1GALT1)及其伴侣蛋白Cosmc(C1GALT1/Cosmc通路研究雷公藤多苷(TWM)对IgA肾病(IgAN)大鼠肠道菌群及免疫功能的影响。方法:构建IgAN大鼠模型,随机分为模型组(IgAN组)、地塞米松(Dex)组和TWM组,另设正常饲养大鼠为正常对照(NC)组。采用全自动生化分析仪测定各组大鼠血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿总蛋白量(UTP)及24 h尿红细胞数;ELISA法检测各组大鼠血清IgA1水平及血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、B细胞活化因子(Baff)和白细胞介素17(IL-17)水平;蚕豆凝集素亲和ELISA法检测半乳糖缺乏IgA1(Gd-IgA1)水平;选择性细菌培养基培养肠道菌落;流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Treg)占CD4⁺T细胞比例(简称Treg比例);Western blot法检测肠黏膜组织C1GALT1和Cosmc的蛋白表达。结果:与NC组比较,IgAN组大鼠24 h UT...     

CD4~+T淋巴细胞Kv1.3通道在大鼠动脉粥样硬化中的作用

目的:探讨大鼠动脉粥样硬化(AS)模型中CD4+T淋巴细胞电压门控钾通道(Kv)Kv1.3的表达、功能及其在AS中的作用。方法:采用高脂饮食法建立大鼠动脉粥样硬化模型,流式细胞术分析淋巴细胞的比例,采用免疫磁珠法分离CD4+T淋巴细胞,研究脾组织CD4+T淋巴细胞Kv1.3mRNA表达、细胞内钙离子浓度及细胞因子分泌的变化。结果:(1)AS组脾组织CD4+T淋巴细胞占总T淋巴细胞比例较对照组明显升高(74.93%±2.15%vs67.80%±2.54%,P0.05)。(2)经刀豆蛋白A(ConA)刺激,AS组T淋巴细胞增殖程度明显高于对照组(1.1321±0.1750vs0.7971±0.0955,P0.05)。(3)AS组脾组织CD4+T淋巴细胞在ConA刺激状态下胞内钙离子浓度明显高于对照组(H=82,P0.05)。(4)AS组脾组织CD4+T淋巴细胞在刺激48h后较刺激24h后细胞因子(IL-2,TNF-α)分泌显著增加。(5)AS组脾组织CD4+T淋巴细胞Kv1.3mRNA表达明显高于对照组(3.670±1.579vs1)。结论:AS组脾组织CD4+T淋巴细胞比例高于对照组,CD4+T淋巴细胞Kv1.3mRNA表达增多,提示高表达Kv1.3的CD4+T淋巴细胞可能在AS的发生发展中发挥重要的作用。     

IgA肾病扁桃体HEV的CD3+、CD20+细胞及FasL、ICAM-1表达

目的:探讨FasL、ICAM-1 在慢性扁桃体炎(RT)扁桃体和IgA肾病扁桃体高内皮小静脉 (HEV)的表达及意义.方法:观察12例IgA肾病(IgAN)及18例慢性扁桃体炎(RT)扁桃体HEV的形态及数量.免疫组化技术测定HEV中CD3+T淋巴细胞、CD20+B淋巴细胞数量,定量分析FasL及ICAM-1在两种扁桃体HEV内皮细胞的表达状态.结果:IgAN组HEV中的ICAM-1的表达为(0.4355±0.002),HEVs数为(92.45±8.90),而RT组分别为(0.2395±0.0104)和(72.72±9.56),(P<0.05).IgAN组HEV的FasL表达为(0.227±0.0120),明显高于RT组(0.153±0.0102) (P<0.05);IgAN组HEV中的T淋巴细胞数(20.98±9.17),也明显高于RT组(9.72±7.63).IgAN和RT扁桃体HEV中B淋巴细胞数分别为(38.34±4.46)和(38.12±7.42),(P>0.05).结论:扁桃体HEV数量增多和淋巴细胞聚集反映IgAN患者外周血活化淋巴细胞的变化,扁桃体HEV凋亡活动增强以及淋巴细胞跨血管迁移功能增强可导致IgAN形成和发展.     

Analysis of the changes of renal tissue in the rat model of IgA nephropathy

目的 探讨IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾小体、肾小囊、肾小球和近端肾小管病理变化.方法 将20只SD雌性大鼠随机分成2组,即对照组和IgAN组(n=10).用免疫荧光、HE染色和体视学方法,测出2组动物肾小体、肾小囊和肾小球体密度、球囊体积比、肾小体数密度、肾小体和肾小球长径、近端肾小管管腔和管壁面积及其比值,比较其差异.结果 IgA免疫荧光染色,IgAN组皮质部见较强绿色荧光.与对照组比,IgAN组肾小体体密度增大,肾小囊体密度增大,肾小球体密度减小,球囊比减小,肾小体数密度变化差异无显著性,肾小体长径增大,肾小球长径减小,近端肾小管管腔面积减小,管壁面积增大,腔壁比减小.结论 IgAN大鼠肾小体和肾小囊增大,肾小球减小,近曲小管细胞体积增大,管腔变小.     

大鼠IgA肾病模型肾脏变化分析

目的探讨IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾小体、肾小囊、肾小球和近端肾小管病理变化。方法将20只SD雌性大鼠随机分成2组,即对照组和IgAN组(n=10)。用免疫荧光、HE染色和体视学方法,测出2组动物肾小体、肾小囊和肾小球体密度、球囊体积比、肾小体数密度、肾小体和肾小球长径、近端肾小管管腔和管壁面积及其比值,比较其差异。结果IgA免疫荧光染色,IgAN组皮质部见较强绿色荧光。与对照组比,IgAN组肾小体体密度增大,肾小囊体密度增大,肾小球体密度减小,球囊比减小,肾小体数密度变化差异无显著性,肾小体长径增大,肾小球长径减小,近端肾小管管腔面积减小,管壁面积增大,腔壁比减小。结论 IgAN大鼠肾小体和肾小囊增大,肾小球减小,近曲小管细胞体积增大,管腔变小。     

益生菌缓解环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下

目的:探索益生菌对环磷酰胺(CTX)所致小鼠免疫功能低下的影响。方法:24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、CTX组和益生菌+CTX组,每组8只。对照组和CTX组小鼠灌胃给予生理盐水[0.2 ml/(只·d)],益生菌+CTX组[灌胃益生菌(0.75 g,0.2 ml,75亿菌落形成单位活菌/(只·d)],连续给药20 d,第15天开始除正常组外其余2组小鼠连续3 d腹腔注射CTX 50 mg/(kg·d)。第21天处死小鼠,检测血常规,计算胸腺及脾脏指数;MTT法检测T细胞及B细胞增殖指数;流式细胞术检测脾细胞中CD4~+、CD8~+T细胞百分率及CD4/CD8,脾细胞凋亡率。结果:CTX组各检测指标均显著低于正常组(P0.05),脾细胞凋亡增多(P0.05);益生菌+CTX组的白细胞数、血小板数、胸腺指数、T细胞增殖指数、CD4~+ T细胞、CD8~+ T细胞百分率及CD4/CD8均高于CTX组(P0.05),脾细胞凋亡率降低(P0.05);与对照组相比,益生菌+CTX组的血小板数、脾脏指数、T淋巴细胞增殖指数、CD4~+ T细胞、CD8~+ T细胞百分率及CD4/CD8和脾淋巴细胞凋亡率差异无统计学意义(P0.05)。结论:益生菌可以显著增强CTX所致免疫低下小鼠的免疫功能。     

负向调节树突状细胞对心脏移植大鼠调节性T细胞的影响

目的:探讨受者树突状细胞(DC)与体外光化学法(PUVA)处理的供者脾淋巴细胞共培养,对心脏移植受者CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及移植心存活时间的影响。方法:以DA大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,SD大鼠为无关供者,建立大鼠腹部异位心脏移植模型。分离正常的供者脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的供者脾淋巴细胞(PU-VA-SP)。在体外将DA大鼠PUVA-SP或SP与受者骨髓来源的DC共同培养,收集经上述处理后受者DC,流式细胞术(FCM)检测其表面分子CD80、CD86以及OX6的表达状况。根据受者术前静脉输注的成分将实验动物随机分为3组:①Control组:单纯输注PBS,n=7;②SPDC组:输注加载供者SP的受者大鼠DC,n=8;③PUVA-SPDC组:输注加载PUVA处理的供者SP的受者大鼠DC,n=8。移植术前7d,经外周静脉给受者输注与PUVA-SP共培养后的DC(PUVA-SPDC组)、正常受者DC(DC组)或只输注PBS(Control组),移植术后观察受者移植物的存活时间,检测受者外周血中CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞的比例及其Foxp3表达状况。过继转移PUVA-SPDC组受者大鼠的T细胞后,检测正常LEW大鼠对供者抗原或无关抗原的DTH反应。结果:受者DC与供者未经处理的脾淋巴细胞(SP)混合培养后,其表面分子CD80、CD86以及OX6的表达分别为16.6%±0.72%、36.5%±0.87%及65.6%±1.45%,明显高于未处理DC组(3.53%±0.27%、13.0%±0.57%及27.7%±1.23%)(P0.01);而受者DC与PUVA处理过的供者脾淋巴细胞(PUVA-SP)混合培养后,其表面分子的表达仍保持较低的水平,CD80、CD86以及OX6的表达分别为3.9%±0.12%、13.4%±0.59%及28.0%±1.73%,与未经任何处理的受者DC无统计学差异(P0.05)。移植术后,PUVA-SPDC组受者,外周血CD4+CD25+T、CD4+CD25highT细胞占CD4+T的比例分别是18.97%和3.81%,明显高于输注DC组(4.40%和0.81%)和Control组(3.11%和0.09%)的大鼠(P0.01)。PUVA-SPDC组大鼠外周血CD4+CD25+T细胞中Foxp3表达率为29%±1.73%,CD4+CD25highT细胞中Foxp3阳性率高达95%±1.67%,均明显高于对照组(12%±0.58%和19.3%±2.03%)及DC(16.3%±0.88%和52.0%±1.73%)组(P0.01)。PUVA-SPDC组大鼠移植心存活时间为(27.3±0.98)d,与Control组(6.7±0.29)d及DC组(11.0±0.32)d相比,明显延长(P0.01)。过继转移实验显示,接受PUVA-SPDC组受者T细胞的正常LEW大鼠对DA大鼠抗原的刺激呈特异性免疫低应答状态。结论:PUVA-SPDC能够在移植受者体内诱生CD4+CD25+Foxp3+Treg,同时诱导抗原特异性免疫低反应,进而延长异基因移植物的存活时间。     

运动对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响研究

目的:探讨运动对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响。方法:将24只健康雄性SD大鼠随机分为三组:对照组、30 min运动组、60 min运动组;MTT、流式细胞术分别检测各组大鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力及T细胞亚群变化。结果:与对照组相比,30 min运动组大鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力增强(P<0.05),CD4+T细胞百分数及CD4+/CD8+比例升高(P<0.05),CD8+T细胞百分数无显著改变(P>0.05);60 min运动组大鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力、CD4+T细胞百分数、CD8+T细胞百分数及CD4+/CD8+比例显著改变(P>0.05)。结论:中小强度运动有助于增强机体细胞免疫功能,可能与适当运动能够加快脾脏T淋巴细胞增殖及改善CD4+/CD8+T细胞亚群相关。     

CD200 与CD4+ CD25+ CD127low Treg 在强直性脊柱炎中的意义

目的:研究强直性脊柱炎(AS)患者外周血淋巴细胞中CD200的表达水平,分析CD200及Treg与IL-6、SAA的相关性,探讨CD200与AS免疫功能的关系以及诊断效能,为辅助AS的诊断、免疫评估提供帮助。方法:从74例AS患者和50例健康志愿者中收集外周血。流式细胞术检测淋巴细胞亚群、Treg的百分率及CD200的表达率,并用ELISA法检测血清中CD200的浓度,上转发光法测定IL-6的浓度,胶乳免疫比浊法测定SAA的浓度。结果:与对照组相比,AS活动组CD4~+T细胞、CD19~+B细胞的百分率均增高(P0.05),CD8~+T细胞、Treg的百分率均减低(P0.05),CD3~+T细胞的百分率无明显差异;稳定组CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD19~+B细胞、Treg的百分率与对照组均无显著差异。与对照组比较,活动组(CD3~+、CD4~+、CD8~+)T细胞中CD200的表达率和血清中CD200的浓度以及稳定组(CD3~+、CD4~+)T细胞中CD200的表达率和血清中CD200的浓度均减低(P0.05);而稳定组CD8~+T细胞、CD19~+B细胞中CD200的表达率及活动组CD19~+B细胞中CD200的表达率无显著差异。与对照组比较,活动组血清中IL-6、SAA的浓度明显升高(P0.05);而稳定组IL-6的浓度轻度升高(P0.05),SAA的浓度无差异。活动组CD3~+T淋巴细胞中CD200的表达率与Treg呈正相关,与IL-6呈负相关,但与SAA不相关;Treg的百分率与IL-6负相关,与SAA不相关。CD200对AS的诊断优于Treg、SAA,而与IL-6的诊断效能相当。结论:AS活动期患者存在淋巴细胞亚群紊乱,CD200和Treg的表达率降低,两者可能参与了AS的发病,为辅助AS的诊断和免疫功能的判断提供理论依据。     

微囊化异种坐骨神经组织移植对脊髓损伤大鼠T淋巴细胞亚群的影响及行为学观察

目的观察移植微囊化兔坐骨神经组织对脊髓损伤大鼠外周血中T淋巴细胞亚群的影响及后肢运动功能恢复情况。方法88只成年Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为微囊组、细胞悬液组和正常对照组。于术后第1、3、7、14、28d,运用流式细胞仪检测大鼠外周血中T淋巴细胞亚群变化及通过BBB评分法进行后肢运动功能评价。结果细胞悬液组大鼠外周血中CD4+T细胞数于术后第3、7、14和28d较正常对照组有升高,于术后第7、14和28d较微囊组有明显升高;该组大鼠外周血中CD8+T细胞数于术后第7、14和28d较正常对照组和微囊组有升高。而术后微囊组各时相CD4+T细胞数与CD8+T细胞数较正常对照组均无明显变化。术后第14及28d时,微囊组大鼠后肢BBB评分高于细胞悬液组。结论微囊化异种坐骨神经组织移植可以有效地阻止大鼠CD4+T细胞和CD8+T细胞的激活和增值,并能促进后肢运动功能恢复。     

加味玉屏风散对创伤应激小鼠CD4+CD25+调节性T细胞影响的实验研究

目的观察创伤应激状态下及口服加味玉屏风散(玉屏风散加党参)后对小鼠CD4+CD25+Tr细胞影响.方法采用小鼠截肢应激模型,将50只BALB/c小鼠随机分为5组正常对照组(A)、应激对照组(B)、应激+加味玉屏风散高(C)、中(D)、低(E)剂量组.采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾细胞悬液中CD4+CD25-T、CD4-CD25+T、CD4+CD25+Tr的细胞数.结果创伤后72h小鼠外周血及脾细胞悬液中CD4+CD25+Tr细胞比例明显升高(P<0.01),CD4+CD25-T细胞、CD4-CD25+T细胞比例明显降低(P<0.01);给予加味玉屏风散后各组小鼠外周血及脾细胞悬液中CD4+CD25+Tr细胞比例明显降低(P<0.01),CD4+CD25-T细胞、CD4-CD25+T细胞比例明显升高(P<0.01);其中C组与A组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论创伤后小鼠CD4+CD25+Tr表达增强,加味玉屏风散可有效抑制其表达.     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+ CD25high CD127low 、CD8+ CD28- 调节性 T 细胞水平变化及临床意义

目的:探讨CD4~+CD25~(high)CD127~(low)、CD8~+CD28~-调节性T细胞(Treg)在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的表达及临床意义。方法:选取2017年9月～2019年3月于我院初次就诊的AS患者77例(非活动期47例、活动期30例)及健康对照者59例。流式细胞术(FCM)检测外周血CD4~+CD25~(high)CD127~(low)、CD8~+CD28~-Treg比例,流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)检测血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、IL-17A水平,分析Treg细胞与AS疾病活动度和临床炎症活动指标的相关性。结果:AS活动组CD4~+CD25~(high)CD127~(low)Treg细胞比例低于AS非活动组和正常对照组(P0.05,P0.01);AS活动组和非活动组CD8~+CD28~-Treg细胞比例较健康对照组显著降低(P0.01)。AS活动组CD8~+CD28~+Tc细胞比例和CD8~+CD28~+/CD8~+CD28~-明显高于AS非活动组和健康对照组,且AS非活动组CD8~+CD28~+/CD8~+CD28~-高于健康对照组(P0.05)。与健康对照组相比,AS活动组和AS非活动组血清IL-6、TNF-α、IL-17A水平显著升高,且AS活动组血清IL-6、IL-17A水平显著高于AS非活动组(P0.05);3组志愿者IL-2水平差异无统计学意义(P0.05)。AS活动组血清IFN-γ水平显著高于AS非活动组和健康对照组(P0.05,P0.01),但AS非活动组与健康对照组差异无统计学意义(P0.05)。AS患者CD4~+CD25~(high)CD127~(low)Treg细胞比例与BASDAI、ESR、Hs-CRP呈负相关(r=0.654、0.517、0.577,P0.01)。CD8~+CD28~+Tc细胞比例及CD8~+CD28~+/CD8~+CD28~-与BASDAI呈正相关(r=0.276、0.246,P0.05)。结论:降低AS患者外周血CD4~+CD25~(high)CD127~(low)和CD8~+CD28~-Treg细胞比例、提高炎症细胞因子水平可能在AS疾病发生发展中起重要作用。     

CD28超抗体对大鼠闭塞性气管病的治疗作用

目的:研究CD28超抗体对在体扩增调节性T细胞的效果及对大鼠闭塞性气管病的影响.方法:采用大鼠同种异体异位气管移植模型.治疗组受体移植当天经腹腔注射CD28特异性单克隆超抗体JJ316 (0.5 mg);对照组注射同型抗体mIgG (0.5 mg).于术后第7天采用流式细胞仪检测颈部淋巴结单个核细胞中CD4~+CD25~+ T细胞和CD4~+Foxp3~+ T细胞的比率;第21天取出移植气管进行病理形态学检查.结果:术后第7天CD28超抗体治疗组大鼠的颈部淋巴结中CD4~+CD25~+ T细胞及CD4~+Foxp3~+ T细胞的比率(8.5%±3.4%,11.5%±2.7%)均显著高于mIgG对照组(1.8%±1.9%,3.2%±2.1%) (P<0.05);第21天CD28超抗体治疗组较mIgG对照组气管闭塞及上皮损伤程度明显减轻.结论:CD28超抗体可靶向扩增调节性T 细胞,减轻了大鼠闭塞性气管病的管腔闭塞.     

强直性脊柱炎患者HLA-B27和免疫指标检测的临床意义

目的:探讨HLA-B27和免疫指标在强直性脊柱炎(AS)患者的临床意义.方法:采用流式细胞术检测147例AS患者、95例正常对照者的HLA-B27、CD3 T、CD4 T、CD8 T、CD19 B,用免疫比浊法检测IgA、IgG和IgM.结果:AS患者HLA-B27、CD3 T、CD4 T淋巴细胞的百分率及CD4 /CD8 的比值、血清IgA、IgG均明显高于正常对照组(P＜0.01);CD8 T淋巴细胞的百分率低于正常对照组(P＜0.05);CD19 B淋巴细胞的百分率高于正常对照组(P＜0.05);IgM与正常对照组相比无显著性差异.结论:HLA-B27、CD3 T、CD4 T与AS密切相关,提示,HLA-B27与CD3 T、CD4 T、CD4 /CD8 的比值可作为AS辅助诊断指标.     

日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj14-3-3)疫苗免疫BALB/c小鼠诱导免疫应答的动态检测

目的 研究日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌(Bb) (pGEX-Sjl4-3-3)疫苗免疫小鼠后其免疫应答的动态变化.方法 将重组疫苗分别采用口服灌胃和鼻内接种免疫BALB/c小鼠,分别于免疫后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周ELISA法测小鼠血清中IgG及其亚类、IgE和IgA及脾细胞培养液中IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平;MTT法测定脾细胞增殖;流式细胞仪检测脾细胞凋亡率及CD4+和CD8+T细胞亚群百分率.结果 口服组血清IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgE和IgA水平分别在免疫后8、6、6、4、8、10和6周达峰值.脾淋巴细胞增殖和凋亡水平均在免疫后4周达峰值;CD4+T细胞于8周达峰值,CD8+T细胞于14周达峰值.IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别于8、8、6和4周达峰值.鼻内接种组血清IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgE和IgA分别于4、6、4、4、8、10和8周达峰值.脾淋巴细胞增殖及凋亡水平也均在4周达峰值;CD4+T细胞于8周达峰值,CD8+T细胞于4周达峰值.IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别于2、2、4和4周达峰值.口服及鼻腔内接种是两种较好的免疫途径,且后者优于前者.结论 该疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答.     

程氏蠲痹汤加减方降低佐剂性关节炎大鼠外周血T细胞cAMP水平和CD4~+/CD8~+T细胞比值

目的探讨程氏蠲痹汤加减方(CJBD)对佐剂性关节炎(AA)大鼠T淋巴细胞中的环腺苷酸(c AMP)水平和CD4~+/CD8~+T细胞比值的影响。方法将成年雄性SD大鼠分为正常对照组、AA组、CJBD组和雷公藤多苷片(TGT)组。用吹风冷水和Freund完全佐剂制备大鼠风寒湿痹AA模型,对照组给予生理盐水灌胃,其他组分别给予对应药品,持续7 d。各组大鼠经眼眶取血,分离外周血单个核细胞(PBMC),利用免疫磁珠分选技术分选T淋巴细胞,应用c AMP检测试剂盒检测各组T淋巴细胞的c AMP水平,用流式细胞术检测各组大鼠外周血T细胞中的CD4~+和CD8~+T细胞数,计算CD4~+/CD8~+T细胞比值。结果与正常对照组比较,CJBD组大鼠T淋巴细胞的c AMP表达水平显著降低,TGT组的c AMP含量与正常对照组无显著性差异;CJBD组的CD4~+/CD8~+T细胞比值显著降低。结论 CJBD可降低AA大鼠T淋巴细胞c AMP的水平和CD4~+/CD8~+T细胞比值。     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+调节性T细胞的变化及意义

目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血中CD4+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的表达、功能及意义.方法 采用流式细胞术检测78例AS患者和50例健康志愿者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)和NK细胞,采用ELISA法检测血清中β型转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平.从患者外周血单个核细胞中磁珠分选出CD4+CD25+ Treg细胞,混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture, MLC)分析其免疫抑制功能.结果 AS活动期患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg占CD4+ T淋巴细胞的百分比为(4.36±1.21)%,MLC中CD4+CD25+ Treg抑制同种异体T淋巴细胞增殖功能低下,与其Treg分泌TGF-β减少相关,CD4+ Treg含量及功能均低于健康志愿者(P<0.05).AS患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg水平与TGF-β呈正相关,与TNF-α呈负相关.结论 AS患者外周血中Treg表达水平低,且存在功能缺陷,导致体内诱导免疫耐受机能不足,可能参与AS免疫发病.     

索拉非尼对大鼠佐剂性关节炎的抑制作用

目的探讨索拉非尼对大鼠佐剂性关节炎(AA)的抑制作用。方法 36只雄性SD大鼠均分为6组,除正常组外,其余各组大鼠均制备AA模型。足容积法检测AA大鼠继发侧足爪容积;流式细胞术检测外周血CD4~+及CD8~+T细胞亚群的变化;免疫组织化学链霉卵白素-过氧化物酶法(SP)检测滑膜组织微血管密度(MVD)的改变。结果与模型组相比,索拉非尼组大鼠足爪容积下降,滑膜组织MVD减小,其中索拉非尼(20、40mg/kg)组可使外周血CD4~+T细胞比例降低,CD8~+T细胞比例增加,差异均有统计学意义(P0.05)。结论索拉非尼具有抑制大鼠AA效应,该作用可能与索拉非尼引起AA大鼠外周血CD4~+,CD8~+T细胞亚群的偏移以及降低滑膜组织MVD有关。