利用SCID小鼠模型和流式细胞术体内评估血小板制品质量

目的建立一种血小板制品体内质量评价的动物实验方法。方法用带有超细针头的胰导素注射器将人血小板经尾静脉注入BALB／c、FVB、SCID小鼠体内，于30min及2、4、6、8、12和24h采集小鼠全血，肝素抗凝，用CD61-PE标记后，流式细胞术计数人血小板，以30min的人血小板计数为100％，计算人血小板的存活率。结果新鲜人血小板在SCID小鼠体内的存活时间与BALB／c、FVB相比明显延长，其输注4h血小板存活率：BALB／c为29．9％±6．5％（n=8）、FVB为28．1％±5．5％（n=8）、SCID为68．6％±8．1％（n=10）；推算半寿期（T1／2）分别为2．5、2、8h。由化学药物及不正确储存所致损伤的血小板在SCID小鼠体内的存活时间明显缩短。结论利用流式细胞术分析人血小板在SCID小鼠模型中的存活率可以评价血小板制品体内质量。     

应用流式细胞术从孕妇外周血分选胎儿有核红细胞并进行DYS14基因扩增与检测

目的 从孕妇外周血分选胎儿有核红细胞，对DYS基因进行扩增，并对扩增准确率进行分析。方法 应用流式细胞术(flow cytometry，FCM)从孕妇外周血分选胎儿有核红细胞(Nucleated red blood cells，NRBCs)，应用套式PCR特异性扩增DYSl4基因，琼脂糖凝胶电泳检测。结果 30例受检中：共有男婴18例，有核红细胞组DYSl4基因的检出率为50．0％(9／18)。结论 NRBCs分选技术的建立使非创伤性产前基因诊断成为可能，但如何进一步改进方法提高分选率，确保诊断的灵敏性，降低漏诊率，仍是需要进一步解决和完善的问题。     

流式细胞术检测非小细胞肺癌外周血循环内皮细胞方法初探

目的探索流式细胞术单种CD分子（CD146）标记法和三种CD分子（CD45CD31CD146）标记法对非小细胞肺癌外周血循环内皮细胞（circulating endothelial cells,CECs）检测效果的影响。方法采用流式细胞术单种CD146和三种CD分子标记法检测60例非小细胞肺癌患者及20例健康人外周血CECs。结果流式细胞术单种CD146和三种CD分子标记法对非小细胞肺癌患者和健康人外周血循环内皮细胞检测成功,两种方法显示肺癌患者外周血CECs均高于健康对照,差异有统计学意义（P〈0.05）。两种方法测定CECs的结果呈正相关,有统计学意义（r=0.834,P〈0.01）。精密度试验显示三种CD分子标记循环内皮细胞法优于单种CD146标记法。结论单种CD146和三种CD分子标记非小细胞肺癌患者和健康人外周血细胞均可经流式细胞术用于测定CECs,三种CD分子标记循环内皮细胞法优于单种CD146标记法。     

流式细胞术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的方法研究

目的探讨cydin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的可行性、科学性和优越性，为肿瘤的细胞周期分析提供科学有效的技术支持。方法运用cydin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白的表达。并与传统的免疫组织化学切片法进行比较。结果流式细胞术可以准确地对细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达进行定性、定量、定位的分析，较为系统地反映了细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达特性和肿瘤的生物学特性。结论Cyclin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质分析技术和共聚焦显微镜技术是一种科学有效的检测临床实体瘤细胞周期破坏特性的技术和方法。     

应用流式细胞术对自身免疫性溶血性贫血患者自身抗体掩盖下血型同种抗体检测的研究

目的 在自身免疫性溶血性贫血(自免溶贫)患者血样的检测中,自身抗体往往易被同种抗体掩盖,本研究试图通过对流式细胞术与传统血清学方法的比较研究,分析两者对自身抗体中混合同种抗体的检测能力差异,为自免溶贫患者输血前检测提供更敏感可靠的方法.方法 随机选择使用5例人源抗-D及4例抗-E分别与经验证不具血型特异性的自身抗体按比...     

Secondary Flow in Peripheral Vascular Prosthetic Grafts Using Vector Doppler Imaging

Prosthetic grafts are used for the treatment of peripheral arterial disease. Re-stenosis in the distal anastomosis of these grafts is a common reason for graft occlusion. The role of local hemodynamics in development of neo-intimal hyperplasia is well known. A new graft design has been proposed for the induction of optimized spiral flow in the host vessel. The secondary flow motions induced by this graft were compared with those of a control device. Both types of grafts were connected with vessel mimic and positioned in ultrasound flow phantoms with identical geometry. Constant flow rates were applied. Data collected in the cross-sectional view distal from the graft outflow and dual-beam vector Doppler was applied to create 2-D velocity maps. A single-spiral flow pattern was found for the flow-modified graft, and double or triple spirals for the control graft. In-plane maximum velocity was greater for the flow-modified graft than for the control device.     

应用微量淋巴细胞毒与流式细胞仪检测HLA-B27的比较

目的 :探讨不同 HL A- B2 7检测方法之间的差异及各自的优缺点 ,为临床检验提供参考。方法 :分别采用微量淋巴细胞毒法及流式细胞仪法检测 134例血标本的 HL A- B2 7抗原 ,将两者结果进行比较分析。结果 :两种检测方法结果符合率为 94 .8%。微量淋巴细胞毒法检测强直性脊柱炎者 HL A- B2 7阳性率为 89.5 % ,对照组阳性率 11.0 % ,符合国内外大样本调查结果。结论 :两种检测方法均准确可靠 ,适合于有条件的医院开展。     

恶性肿瘤患者化疗前后细胞免疫功能的监测

应用流式细胞仪对恶性肿瘤患者化疗前后进行Ｔ细胞亚群和自然杀伤（ＮＫ）细胞活性的检测，结果发现恶性肿瘤患者的ＣＤ３＾－、ＣＤ４＾－细胞、ＮＫ细胞活性和ＣＤ４＾－／ＣＤ８＾－细胞比值明显低于对照组，而ＣＤ８＾－和细胞高于对照组。化疗后各检测指标有升有降，其中多数患者ＮＫ细胞活性明显升高ＣＤ３＾－、ＣＤ４＾－细胞同步减少者较负步增多者有较高的感染率。流式细胞术对恶性肿瘤患者免疫功能的监测，具有快速，灵敏     

中等护士专业增设护理写作课初探

目前我国中等护士专业学校的课程设置中仍然未设有专门的护理写作课，使培养出来的护士缺乏护理工作需要的专业应用写作能力。为此，作者提出构想：在中等护士专业课程设置中增设专门的护理写作课，使语文教学跳出旧的类似于普通中学的教学模式，更贴近专业。这样做不仅可以使教学内容更具有护理特色，而且可为护生毕业后的临床护理写作奠定基础。     

应用流式细胞术对胃癌及癌前病变中p53蛋白表达的研究

方法：应用流式细胞术对胃癌及癌前病变中ｐ５３蛋白表达水平进行定量分析。结果：正常胃粘膜中ｐ５３蛋白表达水平（ＦＩ值）为０．５８７±０．０７５，浅表胃炎为０．８７１±０．０２０，肠化为１．０４３±０．０７２，不典型增生为１．１９４±０．０６５（轻度０．９８６±０．０６９，中度１．１４７±０．０９１，重度１．４８６±０．０９５），胃癌为１．８５１±０．０９６。正常胃粘膜与浅表胃炎无统计学差异，肠化及不典型增生ｐ５３蛋白表达水平显著高于浅表胃炎及正常粘膜（Ｐ＜０．０２５，Ｐ＜０．０１），胃癌显著高于肠化及不典型增生（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．００１）。在不典型增生中，重度与胃癌ｐ５３蛋白表达水平较接近（Ｐ＞０．０５），但与中度却有极显著差异（Ｐ＜０．００１）。各病变中ｐ５３蛋白表达阳性数随病变程度的加重而增高。结论：ＤＮＡ倍体分析表明胃癌、不典型增生病变中异倍体明显增多，且异倍体病变细胞增殖活性增高，ｐ５３蛋白阳性表达率增高。     

多发性骨髓瘤流式细胞术免疫表型及微量残留病研究

目的 探讨MM细胞免疫表型特征及MRD检测的临床意义.方法 应用多参数流式细胞术检测16名健康对照者和172例MM患者的免疫表型.32例MM患者缓解后作MRD分析,同时进行跟踪随访,分析MRD阳性和阴性对MM患者的复发率和无病生存时间是否存在影响.结果 流式细胞术检测结果显示,16名健康对照者正常浆细胞CD38、CD 138、CD19、CD45均阳性,172例MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型为CD+38 172例(100.0%)、CD+138172例(100.0%)、CD-19 167例(97.1%)、CD+56 152例(88.4%)、CD-45 166例(96.5%),骨髓瘤细胞具有显著的特征性表型,即CD+38、CD+138、CD+56、CD-19、CD-45.32例MM患者缓解后进行MRD检测,其中14例MRD阴性,18例MRD阳性.随访2～16个月后,MRD阴性组4例复发(28.6%),MRD阳性组13例复发(72.2%),两组复发率比较,差异有统计学意义(χ2=6.03,P＜0.05).MRD阴性组累积无病生存时间中位数16.23(10.37～21.62)个月,明显长于MRD阳性组的10.07(3.79～16.20)个月,两组比较差异有统计学意义(χ2=7.53,P＜0.05).结论 MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型特征是CD+38、CD+138、CD1-19、CD-45、CD+56.多发性骨髓瘤MRD检测可以作为临床预后的参考指标.

Abstract：

Objective To investigate the characteristics of immunophenotyping and clinical significance of MRD analysis in MM patients. Methods Multi-parameter flow cytometry was applied to analyze the immunophenotyping of malignant plasma cells from 172 MM patients, and normal plasma cells from 16 healthy individuals. MRD was analyzed in 32 MM patients with remission. Meanwhile, the effects of MRD status on the disease relapse and patient disease free survival ( DFS ) time was evaluated by following up patients. Results The immunophenotyping of normal plasma cells were CD38, CD138, CD19 and CD45 positive, while the predominant phenotype of MM cells were CD+38( 100.0% ), CD+138( 100.0% ), CD-19 ( 167/172, 97. 1% ), CD+56( 152/172, 88.4% ) and CD-45( 166/172, 96. 5% ). The characteristic markers for MM cells were CD+38, CD-138, CD-19, CD-45 and CD+56. MRD analysis revealed that, among 32 MM patients with remission, 14 patients were MRD negative and 18 patients were MRD positive. During follow-up of 2 to 16 months, the relapse rate in MRD negative patients was significantly lower ( 4/14, 28.6% ) than that of MRD positive patients ( 13/18, 72. 2% ;χ2 =6. 03, P ＜0. 05 ). Furthermore, the DFS time was significantly longer in MRD negative patients[ 16. 23( 10. 37-21.62 )months ] than that of the MRD positive patients [ 10. 07( 3. 79-16. 20 )months,χ2 =7. 53,P ＜0. 05 ]. Conclusions CD+38, CD+138, CD-19, CD-45 and CD+56 are the characteristic markers of MM cells compared to those of the normal plasma cells. MRD analysis is a valuable prognostic factor for MM patients.     

流式细胞术应用于Kidd血型Jka抗原检测的建立

目的:建立流式细胞术鉴定Kidd血型Jka抗原的实验方法,并验证其准确性。方法:随机选取96(人)份无偿献血者血液样本,将红细胞与IgG性质抗-Jka混合孵育,随后结合荧光素Alexa Fluor 647标记的羊抗人IgG二抗,采用流式细胞术检测样本红细胞表面Jka抗原。通过流式细胞术获得每个样品的荧光直方图。利用血清学凝集试验比较衡量流式细胞术检测Jka抗原强度的准确性,利用PCR-SSP与基因测序分型验证流式细胞术检测Jka抗原阴阳性的正确性。结果:流式细胞术对于红细胞Jka抗原强度的检测与血清学鉴定结果相一致,血清学凝集强度越高,流式细胞术检测荧光强度也越高,Jka抗原强度也越高。流式细胞术检测灵敏度优于血清学方法,Jka抗原阳性包括弱阳性样本与阴性样本的荧光强度差别很大,极易区分。全部样本流式细胞术检测结果与基因分型结果完全一致,证实了流式细胞术的准确性。结论:成功建立了流式细胞术鉴定红细胞Kidd血型Jka抗原的方法,灵敏度优于传统的血清学方法,可以准确区分不同强度的Jka血型抗原。     

多参数流式细胞术分析415例成人和儿童B-ALL白血病相关免疫表型

为了探讨FCM在微量残留病（MRD）检测中的意义，利用4—6组4色抗体组合，以CD45／SSC设门法对273例成人和142例儿童B系急性淋巴细胞白血病（B—ALL）患者进行了多参数流式细胞术（FCM）免疫分型检测和白血病相关免疫表型（leukemia associated immunophenotyping，LAIP）分析。结果表明：根据CD34和CD10的表达特点，可将B—ALL患者分为Ⅰ型（CD34^＋CD10^-）；Ⅱ型（CD34^＋CD10^＋）；Ⅲ型（CD34-CD10^＋）；Ⅳ型（CD34^-CD10^-）。Ⅰ型和Ⅱ型患者LAIP的阳性比例分别为100％和92％，但Ⅲ型患者LAIP阳性率只有79．2％，显著低于Ⅰ型和Ⅱ型患者。总体B—ALL患者LAIP的检出率为90％，成人与儿童组无明显差异。而利用CD34／CD10／CD19／CD45一组抗体，LAIP检出率达到77．6％。结论：90％成人和儿童B-ALL白血病患者具有LAIP，因此对这类患者适宜用多参数流式细胞术进行MRD监测。     

流式细胞术检测肿瘤患者红细胞CD35表达与红细胞黏附功能相关性研究

目的 探讨红细胞CD35表达数量与红细胞免疫黏附肿瘤细胞活性相关性,研究恶性肿瘤患者红细胞CD35表达数量及免疫黏附功能的变化规律.方法 选择原发性肺癌40例,胃癌32例,结肠癌36例及40例健康人血标本,用流式细胞术（FCM）检测红细胞CD35几何平均荧光强度（CMFI）;EAC花环试验检测红细胞免疫黏附肿瘤细胞花环率.结果 肺癌、胃癌、结肠癌组较正常对照组红细胞黏附肝癌细胞BEL-7402花环率下降,t值分别为3.069、3.429、3.056,P值分别为0.004,0.002、0.004,差异有统计学意义（P＜0.01）;肺癌、胃癌、结肠癌组间花环率比较,F=0.844,P=0.433,差异无统计学意义（P＞0.05）.肺癌、胃癌、结肠癌组较正常对照组红细胞CD35 GMFI降低,t值分别为3.392、2.767、3.635,P值分别为0.002、0.009、0.001,差异有统计学意义（P＜0.01）;肺癌、胃癌、结肠癌组间红细胞CD35 GMFI比较,F=0.717,P=0.491,差异无统计学意义（P＞0.05）.肺癌、胃癌、结肠癌、正常对照组红细胞黏附肿瘤花环率与其红细胞CD35 GMFI呈正相关,相关系数分别为0.628、0.859、0.636、0.887,P值分别为0,000、0.000、0.000、0.000,有统计学意义（P＜0.01）.结论 肺癌、胃癌、结肠癌组红细胞黏附功能下降;肺癌、胃癌、结肠癌组红细胞CD35表达降低;肺癌、胃癌、结肠癌、正常对照组红细胞黏附肿瘤花环率与其细胞CD35 GMFI呈正相关;流式细胞术（FCM）检测红细胞CD35的表达是一种准确、快速、高效的肿瘤患者红细胞免疫功能检测方法.     

骨髓增生异常综合征患者Th1/Th2细胞平衡改变的临床意义

目的：探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血CD4^＋、CD8^＋细胞亚群平衡的改变，以及与活化T细胞之间关系的临床意义。方法：选择14例难治性贫血患者（RA）和1例难治性贫血伴原始细胞增多患者（RAEB）的外周血，在PMA、Ionomycin、Monensin存在的条件下体外培养，进行细胞膜表面抗原和细胞内因子染色，并用流式细胞仪计数外周血表达CD3^＋ CD8^-IFN-γ^＋细胞（Th1）、CD3^＋CD8^-IL-4^＋细胞（Th2）、CD3^＋CD8^＋IF-γ^＋细胞（Tcl）、CD3^＋CD8^＋IL-4^＋细胞（Tc2）的百分率。结果与活化T细胞之间关系做相关性分析。结果：MDS组患者Th1细胞高于正常对照组（P〈0．05），体内的Th细胞向Th1细胞漂移，产生过多的造血抑制因子如IFN-γ，TNF-β等。Th2，Tc1，Tc2细胞与正常对照组相比无显著差异（P〉0．05）；CD4^＋CD45RO^＋细胞的百分率和Th1细胞的百分率呈正相关，相关系数为r=0．573（P〈0．05），CD4^＋CIN5RA^＋细胞的百分率和Th1细胞的百分率呈负相关，相关系数为r=-0．509（P=0．05），而和Th2，Tc1，Tc2的百分率无明显的相关性（P〉0．05）。结论：MDS患者存在有Th1／Th2细胞因子网络的失衡以及过多的造血抑制因子，且这些因子主要来源于T淋巴细胞。