通过HIT_(8a)和HIT_(8b)两个单克隆抗体鉴定发现CD_8抗原有不同的表位

用间接免疫荧光法、免疫组化技术鉴定了HIT_(8a)和HIT_(8b)两个单克隆抗体(单抗)对各种正常组织、细胞系和各种白血病患者细胞的反应性,证明其反应模式与CD8单抗相似。HIT_(8a)、HIT_(8b)识别的胸腺细胞上抗原分子量分别为 59和60KD(未还原),也与CD8近似。然而,竞争抑制试验显示,9个国际命名的 CD8单抗中只有5个可以完全抑制 HIT_(8a)、HIT_(8b)-FITC与靶细胞结合,4个无作用。证实HIT_(8a)和 HIT_(8b)是 CD8样抗体,识别同一抗原位点。但也揭示 CD8抗原有不同表位。本文对此进行了讨论。     

《现代临床医学生物工程学杂志》主题索引2002年(1,2,3,4期)总目录

(按汉语拼音字母顺序排列 )Ｆ分子生物学、基因、遗传小儿肾病综合征血管紧张素Ｉ转换酶基因多态性研究　 (万根平等 ) 8(1) :1广州地区小儿无症状乙肝病毒携带者的基因型研究　 (朱　冰等 ) 8(1) :3ＣＤ34 抗原表达和Ｐ ｇｐ高表达与急性白血病预后的关系　 (庞　缨等 ) 8(1) :5何首乌对脑细胞Ｂｃｌ- 2基因表达的影响实验性研究　 (姚谦明等 ) 8(2 ) :83脑细胞Ｂｃｌ- 2基因的表达　 (姚谦明等 ) 8(2 ) :87假两性畸形临床 -细胞遗传学分析　 (李莉平等 ) 8(2 ) :12 8疾病微生物基因组学　 (ＣＭＢＥ编辑部 ) 8(2 ) :15 3不同类型的ＨＢｓ…     

胰腺实性—假乳头状肿瘤8例临床病理学分析

目的探讨胰腺实性-假乳头状肿瘤(solid-pseudopapillary tumor of pancreas,SPTP)的临床病理学特点、诊断和鉴别诊断、治疗及其预后。方法对8例SPTP患者的临床、病理学特点及免疫组化结果进行研究,并复习相关文献。结果 8例均为女性,年龄19～38岁,平均28岁。肿块直径3～15 cm。镜下肿瘤由乳头区和囊实区混合组成,瘤细胞围绕纤维血管轴心形成特征性假乳头结构。免疫表型:CK(3/8)、vimentin(8/8)、NSE(8/8)、CD56(8/8)、ER(0/8)、PR(5/8)、α-AT(8/8)、CgA(1/8)、Syn(8/8)、E-cadherin(0/8)、β-连环蛋白(8/8)和cyclinD1的核阳性率均大于40%。随访6例患者17～131个月,均无肿瘤复发及转移,并存活至今。结论 SPTP是一种好发于年轻女性,具有低度恶性潜能的少见胰腺肿瘤,其病理形态特征和免疫组化标记对SPTP的诊断和鉴别诊断具有重要价值。     

P53结合位点对人 NOD8 基因的调控

目的: 探讨P53结合位点在 NOD8 基因调控中的作用。方法: 利用生物信息学方法,我们发现人与黑猩猩的 NOD8 基因核心启动子区域相似位置含有P53结合位点;以人基因组DNA为模板, PCR扩增含有人 NOD8 基因序列,构建含有/缺失人P53结合位点的 NOD8 基因启动子驱动的、表达绿色荧光蛋白-NOD8融合蛋白的质粒p NOD8 (760 bp)-EGFP- NOD8 和mp NOD8 (750 bp)-EGFP- NOD8 ;将构建的重组质粒经阳离子聚合物JetPei^TM介导瞬时转染HEK293细胞中,并加入不同浓度的P53抑制剂pifithrin alpha(PFT-α)处理HEK293细胞,用RT-PCR和Westren blotting 方法检测NOD8 mRNA和蛋白的表达;此外,用p NOD8 (760 bp)-EGFP质粒转染HEK293细胞,利用染色质免疫共沉淀法(ChIP)观察P53是否与 NOD8 启动子结合。结果: 经酶切鉴定和序列测定证实重组质粒构建成功。ChIP实验证实P53能与 NOD8 启动子结合。 p NOD8 (760 bp)-EGFP- NOD8 转染组中NOD8 mRNA的表达显著高于pEGFP-C2转染组(P＜0.05),并且NOD8 mRNA 在缺失人P53结合位点的mp NOD8 (750 bp)-EGFP- NOD8 转染组中的表达明显降低(P＜0.01);同时发现加入 PFT-α的p NOD8 (760 bp)-EGFP- NOD8 转染组NOD8 mRNA的表达显著下降,并呈剂量依赖关系,其中90 μmol/L PFT-α 对NOD8 mRNA表达的抑制作用最为显著(P＜0.01)。与mRNA检测结果一致的是p NOD8 (760 bp)-EGFP- NOD8 转染组NOD8蛋白的表达量显著高于对照组pEGFP-C2; 而mp NOD8 (750 bp)-EGFP- NOD8 转染组NOD8蛋白的表达量明显低于p NOD8 (760 bp)-EGFP- NOD8 转染组和加入 PFT-α的p NOD8 (760 bp)-EGFP- NOD8 转染组(P＜0.01)。结论: P53结合位点在 NOD8 基因调控中起着重要的作用,并且P53结合位点与 NOD8 基因之间可能存在正反馈调节。     

2003年总目录

白领人士的心理问题及自我调 适(12)4 育儿教子卜、,如何对付孩子的“恶作剧”(1)7户‘成长中的“挣扎’,(1)8 诚信培养在家长(1)9 儿子的攻击性行为(2)7 教儿子行善(2)8 你的方法适合孩子吗?(2)10 冷漠是伤子之刀(3)7 蒙尘的电子琴(3)8 礼让是一种美德(3)10 她不再“哗众取宠”了(4)7 从8岁男孩自杀说起(4)8 莫要“锯掉”孩子的责任感(4)10 让独生子女不“独”(5)7 “望、闻、问、切”说家教(5)8 家庭“三陪”何时休(5)10 人生的金钥匙—自信(5)11 慎选榜样慎重比较(6)18 重视孩子的心理需要(6)19 剥豆(7)6 无声的爱抚(7)7 在家庭中体验快…     

应用四环素调控系统建立可调控抗恶性疟原虫DNA疫苗的初步研究

目的 :应用四环素 (tetracycline,Tet)可调控系统建立可调控的抗恶性疟原虫的DNA疫苗。方法 :首先构建恶性疟原虫顶端膜抗原 1(AMA 1)基因和转录激活因子 (tTA或rtTA)基因的真核表达质粒pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA) ,并大量制备这两种质粒及表达转录抑制子 (tTS)的质粒pUHS6 1。以pTL 8/AMA 1、pTL 8/AMA 1(rtTA)和pTL 8/AMA 1(rtTA)加pUHS6 1/tTS免疫小鼠后 ,用四环素类似物强力霉素 (doxcycline ,dox)诱导或抑制上述DNA载体内AMA 1的表达 ,并分离小鼠血清检测针对AMA 1抗体的表达情况。结果 :①构建了真核表达质粒pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA) ;②pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA)在没有被诱导表达时 (仅基础表达 ) ,可诱导明显的免疫应答。在以pTL 8/AMA 1(rtTA)与含tTS的pUHS6 1共同免疫后 ,可极大地降低其免疫应答。应用dox诱导pTL 8/AMA 1(rtTA)中的AMA 1基因表达后 ,可明显引起免疫应答。结论 :pTL 8/AMA 1(rtTA)附加pUHS6 1构成了可调节的DNA免疫系统。该系统的建立将对进一步深入研究DNA疫苗的免疫机制和调控基因表达 ,减少不良免疫反应以及进行可精确调控的基因治疗打下一定的基础     

Caspase-8在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨不同级别胶质瘤中Caspase-8表达情况并分析与胶质瘤分级关系。方法:选我院2012-2014年经病理证实的40例人脑胶质瘤组织标本和20例正常脑组织对照标本,其中低级别胶质瘤(low-grade gliomas,LGG)24例,高级别胶质瘤(high-grade gliomas,HGG)16例。采用免疫组化法检测脑组织中Caspase-8的表达。结果:在低级别胶质瘤(Ⅰ-Ⅱ级)和高级别胶质瘤(Ⅲ~Ⅳ级)中,Caspase-8的阳性率分别为83.3%(20/24)和50.0%(8/16)。胶质瘤病理分级越高,Caspase-8的阳性率越低(χ~2=9.114,P=0.001)。胶质瘤的恶性程度与Caspase-8的表达呈负相关(γ_s=-0.417,P0.01)结论:胶质瘤细恶性程度与Caspase-8的表达呈负相关。     

糖尿病心肌病患者血清8-羟基脱氧鸟苷酸水平检测结果分析

目的:探讨DNA氧化损伤标志物—血清8-羟基脱氧鸟苷酸(8-Hydroxy-Guanin)水平变化及其与糖尿病心肌病(Diabetic cardiomyopathy,DC)发生、发展的关系。方法:检测101例DC患者(DC组)、73例2型糖尿病(T2DM)患者(DM组)和40例体检正常者(Control组)血清8-Hydroxy-Guanin水平并进行比较;根据左心室扩大程度不同,将DC患者分为左心室轻度扩大组、中度扩大组和重度扩大组,比较三组患者8-Hydroxy-Guanin水平差异;根据左心室射血分数不同,将DC患者分为单纯舒张功能不全组和舒张功能不全+收缩功能不全组,比较其8-Hydroxy-Guanin水平差异。结果:(1)DC组患者8-Hydroxy-Guanin水平明显高于DM组及Control(P<0.05,P<0.01)。(2)DC组左心室中度扩大组和重度扩大组患者血清8-Hydroxy-Guanin水平均明显高于左心室轻度扩大组(P<0.05)。(3)DC心脏收缩功能不全+舒张功能不全组患者8-Hydroxy-Guanin水平明显高于仅有单纯舒张功能不全组,两组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:8-Hydroxy-Guanin可能参与DC发病过程。     

TRIM8在高糖高脂诱导的小鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的:探讨含三基序蛋白8(TRIM8)对高糖高脂(HGHF)诱导的小鼠心肌细胞(MCMs)凋亡的影响及机制。方法:将MCMs分为正常糖(NG)组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L)、高糖(HG)组(葡萄糖浓度为33 mmol/L)、高脂(HF)组(软脂酸钠浓度为300μmol/L)和HGHF组(葡萄糖浓度为33 mmol/L,软脂酸钠浓度为300μmol/L);用siRNA沉默MCMs中TRIM8的表达后,再将MCMs分为对照(control)组(仅给予转染试剂)、Scra-siRNA/PBS组(转染scrambled siRNA)、TRIM8-siRNA/PBS组(转染TRIM8特异性siRNA)、Scra-siRNA/HGHF组和TRIM8-siRNA/HGHF组;为探索TRIM8在HGHF诱导的MCMs损伤中的可能作用机制,将MCMs分为HGHF/DMSO组、HGHF+TRIM8-siRNA+DMSO(HGHF+Ts/DMSO)组、HGHF/ML385组和HGHF+TRIM8-siRNA+ML385(HGHF+Ts/ML385)组。采用流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;流式细胞术及DHE染色法检测心肌细胞活性氧簇(ROS)的水平;qPCR及Western blot检测TRIM8、核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)、血红素加氧酶1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO-1)的表达水平。结果:HGHF可增加MCMs中TRIM8的表达,同时减少Nrf2及其下游基因GCLC、HO-1和NQO-1的表达(P<0.05)。进一步研究发现,与Scra-siRNA/HGHF组相比,TRIM8-siRNA/HGHF组ROS含量和MCMs凋亡率降低(P<0.05),相应的,抗氧化分子Nrf2及其下游基因GCLC、HO-1和NQO-1的表达增高。与此相反,在此基础上加用Nrf2抑制剂ML385能够部分逆转下调TRIM8对HGHF诱导MCMs凋亡的抑制作用(P<0.05)。结论:TRIM8能够通过调节Nrf2抗氧化途径加剧HGHF诱导的小鼠心肌细胞凋亡。     

脑脊液IL-2、IL-8测定在中枢神经系统感染诊断中的意义

为观察白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-8(IL-8)在中枢神经系统(CNS)疾病诊断和鉴别诊断中的意义,我们对56例脑膜炎患者急性期脑脊液(CSF)中IL2、IL-8水平进行了检测,现将结果报告如下.     

几种恶性血液病的红细胞可变形性

应用激光衍射法测定急性白血病(AML和ALL)8例,慢性白血病(CML)9例及非何杰金淋巴瘤(NHL)8     

PLTP 在香烟诱导HBECs 合成IL-8 中的作用

目的:研究磷脂转运蛋白(PLTP)对香烟诱导人支气管上皮细胞(HBECs)合成白介素8(IL-8)的影响。方法:Wistar 大鼠连续3 d 被动吸烟,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木精-伊红(HE)染色,免疫组织化学法(IHC)检测蛋白表达;体外培养HBECs,不同浓度烟草提取物(CSE)刺激;PLTP siRNA 干扰后,进行CSE 刺激。MTT 法检测细胞增殖,同时检测IL-8 含量及PLTP 表达。结果:烟熏组BALF 白细胞计数以及分类计数较对照组均明显升高(P<0.01),IHC 显示烟熏组PLTP 和IL-8 蛋白表达高于对照组;高浓度CSE(2%、4%)抑制HBECs 增殖(P<0.001);不同浓度的CSE 作用24 h 后,IL-8mRNA 及蛋白表达量增加,而PLTP 蛋白表达量下降,并且IL-8 蛋白分泌呈现时间依赖性;PLTP siRNA 处理后,IL-8 表达量明显升高(P<0.001)。结论:PLTP 基因缺失促进香烟诱导HBECs 合成IL-8。     

肝细胞癌8号染色体微卫星变异及其与临床病理特征的关系

目的　探讨肝细胞癌 (HCC)微卫星变异的特点及其与临床病理表现的相关性。方法采用毛细管电泳DNA分析系统 ,对 5 6例HCC中 8号染色体上 10个微卫星的杂合子丢失 (LOH)、微卫星不稳定性 (MSI)和等位基因失衡 (AI) 3种变异特征进行检测。结果　 5 6例HCC在 8号染色体上 10个基因位点发生LOH的总频率为 6 6 1% (37/ 5 6 ) ,LOH以D8S2 6 1最高为 5 3 5 % (2 3/ 4 3) ,其次为D8S172 1(5 2 5 % )和D8S1771(5 2 5 % )。D8S2 77基因位点 ,血清HBsAg阳性患者的LOH频率显著高于HBsAg阴性者 (P <0 0 1) ,D8S2 6 1、D8S2 98和D8S1733基因位点 ,血清HBsAg阴性患者的LOH频率显著高于HBsAg阳性者 (P <0 0 1) ;D8S2 98和D8S1771基因位点 ,直径 >3cm肿瘤的LOH率明显高于≤ 3cm组 (P <0 0 5和P <0 0 1) ;在D8S172 1基因位点 ,无包膜或包膜不完整的肿瘤的LOH显著高于包膜完整的肿瘤 (P <0 0 1) ;D8S2 98和D8S1771基因位点 ,肝内转移者的LOH明显高于无肝内转移者 (P <0 0 5 )。MSI的频率为 12 5 % (7/ 5 6 ) ,AI的频率为 19 6 % (11/ 5 6 )。结论HCC在 8号染色体上存在广泛的微卫星变异 ,其中LOH方式在HCC的发生和发展过程中起重要作用 ,MSI的作用次之。特定基因位点的LOH与临床和病理学参数有一定的相关性     

白细胞介素-8、白细胞介素-15水平与毛细支气管炎患儿严重程度的关系

目的:分析白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-15(IL-15)水平与呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿严重程度的关系。方法:选取2016-01-2018-01本院治疗的100例RSV毛细支气管炎患儿,根据临床病情严重程度,分为三组(轻度组35例、中度组41例、重度组24例)。同期招募健康儿童为对照组21例。测定入组患儿及对照组外周血单核细胞(PBMC)的IL-8 mRNA及IL-15 mRNA水平及血清中的IL-8及IL-15水平,采用小儿危重病例评分法(PCIS)对患儿进行评分,并比较组间差异。结果:轻度、中度、重度各组患儿PBMC的IL-8 mRNA、IL-15 mRNA及血清IL-8、IL-15水平均高于对照组(P0.01)。中度组患儿的IL-8 mRNA和IL-15 mRNA水平高于轻度组和重度组(P0.01),重度组患儿PBMCs的IL-8 mRNA、IL-15 mRNA水平和PCIS评分高于轻度组(P0.01);重度组患儿的血清IL-8、IL-15水平和PCIS评分高于轻度组和中度组患儿(P0.01),中度组患儿的血清IL-8、IL-15水平和PCIS评分高于轻度组患儿(P0.01)。IL-8和IL-15与PCIS评分呈正相关(r=0.842,0.952,P0.05)。结论:IL-15及IL-8可能参与了小儿RSV毛细支气管炎的疾病进展。     

ARMc8在非小细胞肺癌的表达及意义

目的探讨ARM重复蛋白8(ARMc8)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,分析其与临床病理学特点及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测153例NSCLC中ARMc8的表达和定位,Western blot检测ARMc8在正常支气管上皮细胞HBE和肺癌细胞A549、H1299和SPC中的表达情况。结果 NSCLC和癌旁肺组织中2ARMc8的阳性率分别为70.59%(108/153)和12.42%(19/153),两组相比具有显著性差异(χ=106.612,0.001)。ARMc8在肺癌细胞中的表达水平显著高于HBE细胞(0.01);ARMc8的高表达与患者的TNM分期(=0.021),淋巴结转移(=0.002)和预后(0.001)密切相关;COX分析表明ARMc8阳性表达是影响NSCLC患者预后的独立危险因素(=0.014和=0.015)。结论 ARMc8促进NSCLC恶性进展和不良预后,是潜在的治疗靶点和预后判定指标。     

血清IL-8、hsCRP和TNF-α水平与冠心病患者冠脉病变相关性的研究

目的:观察血清炎症因子白细胞介素-8(IL-8)、超敏C反应蛋白(hsCRP)和TNF-α与冠状动脉病变的关系。方法:入选经选择性冠状动脉造影(CAG)确诊为冠心病的患者106例(冠心病组),另选择同期健康体检人群为正常对照组(n=100)。用酶联免疫吸咐法(ELISA)检测血清IL-8、散射光比浊法测定hsCRP和放射免役法检测TNF-α的水平。用改良的Gensini评分评价冠心病患者冠脉病变程度。结果:冠心病组血清IL-8、hsCRP和TNF-α水平明显高于正常对照组(P0.05)。随着Gensini评分增加,IL-8、hsCRP和TNF-α水平逐渐升高(趋势P0.05)。Pearson相关分析显示,冠心病组Gensini评分与IL-8(P0.05)、hsCRP(P0.05)和TNF-α(P0.05)呈正相关。结论:冠心病患者冠脉病变程度与血清炎症因子IL-8、hsCRP和TNF-α水平相关。     

S100A8作为非小细胞肺癌免疫检查点抑制剂治疗疗效预测指标的研究

目的探讨S100A8作为非小细胞肺癌(NSCLC)免疫检查点抑制剂(ICIs)治疗疗效预测指标的可行性与潜在机制。方法采用在线数据库,分析NSCLC肿瘤组织和正常肺组织中S100A8 mRNA、蛋白的表达情况以及S100A8 mRNA水平与NSCLC患者生存情况的关系。采用生物信息学分析法分析S100A8与肿瘤组织中免疫抑制性细胞、免疫抑制性分子、缺氧和血管生成的相关性。采用Kaplan-Meier对数秩检验分析血浆S100A8水平与接受ICIs治疗的NSCLC患者无进展生存期(PFS)的关系。结果肿瘤组织中,S100A8 mRNA和蛋白水平均高于正常肺组织(P=0.006 1)。S100A8 mRNA水平升高提示NSCLC患者生存预后差(P<0.000 1)。S100A8 mRNA水平越高,髓源性免疫抑制细胞(MDSC)(P<0.000 1)、调节性T细胞(Treg)(P<0.000 1)、M2型巨噬细胞(P<0.000 1)浸润的越多,IL-10生成的越多(P<0.000 1)且缺氧(P<0.000 1)和血管生成(P=0.007 4)越严重。生存曲线显示血浆S100A8水平升高提示接受ICIs治疗的NSCLC患者无进展生存期受损(P<0.05),且S100A8是PFS的独立影响因素(P<0.05)。结论 S100A8升高提示NSCLC患者处于免疫抑制状态,且接受ICIs治疗时PFS减短,S100A8具有作为NSCLC患者ICIs治疗疗效预测指标的可能性。     

HHT对鼻咽癌细胞caspase-8蛋白和mRNA表达的影响

为探讨高三尖杉酯碱 (homoharringtonine,HHT)对鼻咽癌细胞CNE 2Z的caspase 8蛋白和mRNA表达的影响 ,分别用HHT 0 (对照 )、0 12 5、0 2 5、0 5和 1mg/L处理CNE 2Z细胞 8h ,采用Westernblot分析caspase 8的蛋白表达变化 ,半定量RT PCR检测caspase 8mRNA的表达改变。结果显示 :随HHT处理浓度的增加 ,caspase 8酶原 (32ku)的表达水平具有统计学意义的降低 (P <0 0 1) ,而caspase 8mRNA的表达水平具有统计学意义的增高 (P <0 0 1) ,当HHT浓度为1mg/L时出现活性裂解片段 (2 0ku)。结果提示 :HHT可使caspase 8酶原裂解 ,浓度依赖性地下调caspase 8酶原的蛋白表达和上调caspase 8mRNA的表达 ,HHT处理CNE 2Z细胞可能有caspase 8的活化     

调控USP8基因抑制神经炎症

<正>目的:探讨调控泛素特异性修饰酶8(USP8)的表达对小胶质细胞活化的影响。方法:采用脂多糖(LPS)诱导BV2小鼠小胶质细胞为活化的细胞模型,分别应用分子生物学技术构建pG CMV/IRES/EGFP-USP8载体研究上调USP8基因和RNA干扰技术研究干扰USP8基因对LPS诱导BV2小胶质细胞一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)的含量、一氧化氮合酶(iN OS)和     

抗rHuIL-8单克隆抗体的制备和初步鉴定

本文以单核细胞衍生的基因重组人IL-8(MIL-8)为免疫原,经常规免疫、融合、克隆化制备了6株抗MIL-8的单克隆抗体(2G2、4E1、4C3、4D7、5C9、5A4)。其中5株(除4D7)对MIL-8的嗜中性粒细胞趋化活性具有中和作用,6株单抗均与内皮细胞衍生的重组人IL-8(EIL-8)具有交叉反应,但与表达IL-8的载体菌裂解液均无交叉反应。