四妙勇安汤含药血清对巨噬细胞TLR4/MyD88信号通路及其下游炎症因子的影响

目的研究四妙勇安汤含药血清对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)信号通路及TNF-α、IL-6等炎症因子表达的影响,初步探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法采用大、中、小剂量四妙勇安汤水煎剂灌胃干预清洁级SD大鼠,制备含药血清;经MTT法观察含药血清对细胞增殖的影响后,选择剂量浓度为20%的含药血清干预体外培养的经LPS活化的巨噬细胞,采用ELISA法检测细胞上清液中TNF-α及IL-6含量;荧光定量PCR及Westernblot法检测细胞TLR4、MyD88的mRNA及蛋白的表达变化。结果用LPS刺激细胞后,引起TLR4、MyD88、TNF-α及IL-6的高表达,与正常血清对照组相比,差异具有统计学意义(P0.01);而用四妙勇安汤含药血清干预后,能显著抑制各项指标的高表达,与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论四妙勇安汤含药血清能够有效抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,其机制可能与调控TLR4/MyD88信号转导通路有关,这可能是该方防治动脉粥样硬化及免疫炎症性疾病作用的机制之一。     

贞芪扶正胶囊介导TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制慢性湿疹小鼠炎症反应

目的 探讨贞芪扶正胶囊对慢性湿疹小鼠炎症反应的抑制作用.方法 SPF级C57BL/6小鼠30只,按随机数字表法随机分为对照组(control组)、模型组(CAD组)与贞芪扶正胶囊组(ZQFZ组).观察各组小鼠双耳肿胀程度、双耳变应评分;HE染色观察病灶处皮肤病理学变化;ELISA法检测血清炎性因子TNF-α、IL-6及...     

CIRBP/TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在妊娠期糖尿病中的研究进展

妊娠期糖尿病（GDM）患病人数呈逐年上升趋势,增加不良妊娠结局的发生率,对孕妇及其后代的健康产生不良影响,给社会造成较大的负担。但GDM发病机制尚未完全阐明,现有研究认为胰岛素抵抗是其发病的基础,机体炎症反应被认为与胰岛素抵抗发生发展密切相关。CIRBP/TLR4/MyD88/NF-κB信号通路是目前已知的重要炎症通路,其通过影响机体炎症因子释放诱导机体炎症反应发生,进而使机体发生胰岛素抵抗。故本文对CIRBP/TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在妊娠期糖尿病的作用相关研究进行综述,以期为临床防治GDM提供新视角和新靶点。     

雷帕霉素减轻大鼠脑缺血再灌注损伤与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关性

目的观察雷帕霉素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调节。方法 SD大鼠30只,随机分为三组,每组十只,分别为:假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注损伤组(I/R组)和雷帕霉素预处理组(RAP组)。HE染色观察脑组织病理改变,TUNEL检测脑组织凋亡,ELISA检测脑损伤标志物和炎症因子的变化,Western blot检测脑组织TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达。结果雷帕霉素改善缺血再灌注造成的脑组织损伤,改善脑组织损伤造成的细胞凋亡,降低缺血再灌注损伤脑组织脑损伤标志物及炎症因子水平,雷帕霉素降低缺血再灌注损伤脑组织TLR4信号通路相关蛋白表达。结论雷帕霉素减轻大鼠脑缺血再灌注损伤与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。     

氯沙坦调节 TLR4/NF-κB 信号通路对肾血管性高血压大鼠左心室重构的保护作用

目的:探讨氯沙坦对肾血管性高血压大鼠左心室重构的干预机制。方法:将45只SD大鼠随机分为3组,空白对照组(Sham)、模型对照组(RVH)和氯沙坦(LOS)干预组(RVH+LOS),每组各15只。模型对照组和干预组用双肾双夹方法构建大鼠肾血管性高血压(RVH)模型,干预组每天给予氯沙坦(5、10、20 mg∕kg)灌胃治疗,空白对照组和模型对照组给予等量生理盐水灌胃,连续治疗4周。结束后用彩色多普勒超声波诊断仪评价心功能;记录大鼠体质量后处死大鼠,取出心脏,分别称量各组大鼠的心脏(HW)、心室(VW)和左心室重量(LVW),并计算左心室/体质量指数(LVW/BW);Masson染色评估各组大鼠心肌胶原容积分数(CVF);ELISA平行测定各组大鼠血浆中CRP、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10含量水平;免疫组化检测心肌组织TLR4及NF-κB的表达情况。结果:与Sham组相比,RVH组左室舒张末期内径(LVEDD)及收缩末期内径(LVESD)显著增加(P<0.05),左室短轴缩短率(LVFS)和射血分数(EF)显著降低(P<0.05);与RVH组相比,RVH+L...     

川芎嗪抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减轻子宫内膜异位症大鼠炎症反应北大核心CSCD

目的探讨川芎嗪抑制Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路减轻子宫内膜异位症(EMs)大鼠炎症反应的作用。方法自体子宫移植法构建EMs大鼠模型,随机分为EMs组、川芎嗪(低、中、高)剂量组、阳性药物组,每组各12只;进行假手术的12只大鼠作为假手术组。游标卡尺测定异位病灶体积,HE染色检测异位内膜组织病理学改变,ELISA检测血清性激素及炎症因子水平,qRT-PCR、Western blot、免疫荧光染色分别检测异位内膜组织中炎症因子mRNA表达、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白表达及NF-κB p65入核情况。结果与假手术组比较,EMs组大鼠异位内膜组织出现明显病理损伤,血清雌二醇(E2)、孕激素(P)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6水平及异位内膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA、总蛋白TLR4、MyD88、p-NF-κB p65和核蛋白NF-κB p65表达水平升高,血清促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)含量降低(P<0.05),同时NF-κB p65蛋白大量入核;与EMs组比较,川芎嗪(低、中、高)剂量组和阳性药物组可缓解EMs模型大鼠的上述改变并降低异位病灶体积,且川芎嗪高剂量组和阳性药物组对EMs大鼠的作用效果较好且相近。结论川芎嗪可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路激活减轻EMs大鼠炎症反应。     

基于IL-6/STAT3信号通路观察姜黄素对炎症相关性结直肠癌的影响

目的:基于白细胞介素-6(IL-6)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路观察姜黄素(CUR)对炎症相关性结直肠癌(CAC)的影响.方法:取30只SD大鼠给予葡聚糖硫酸钠(DSS)造模,并随机分为模型(Model)组、CUR低剂量(Low dose)组和CUR高剂量(High dose)组,另取10只大鼠始终...     

肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤

目的探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体4/髓样分化因子88(TLR-4/My D88)信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用。方法 30只成年SD大鼠行经口气管插管,给予40 m L/kg潮气量通气240 min,建立呼吸机相关性肺损伤模型,机械通气结束后,使用4℃PBS经气管导管缓慢注入并回收支气管肺泡灌洗液(BALF),提纯肺泡巨噬细胞。收集并培养肺泡巨噬细胞,随机分为3组:PBS刺激组(CON组);TNF-α刺激联合PBS组(STI组);TNF-α刺激联合抗TLR4单克隆抗体(m Ab)干预组(ANT组);每组8个样本。CON组细胞用PBS结合2 h后,继续用PBS培养16 h;STI组细胞用PBS结合2 h后,采用20 ng/m L TNF-α培养16 h;ANT组细胞用PBS液及TLR4 m Ab结合2 h后,用20 ng/m L TNF-α培养16 h。ELISA检测各组上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的表达;反转录PCR检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、髓样分化因子88(My D88)、核因子κB(NF-κB)的mRNA表达,Western blot法检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、My D88、NF-κB的蛋白表达。结果与CON组比较,STI组及ANT组细胞培养上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显增高;STI组肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、My D88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平明显增高;ANT组肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、My D88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平无明显变化。与STI组比较,ANT组细胞培养上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显降低;肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、My D88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平明显下调。3组TLR9 mRNA与蛋白表达水平相近。结论炎症因子刺激可调节TLR4、My D88、NF-κB分泌增加,肺泡巨噬细胞TLR4-My D88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤。     

基于TLR4 / NF-κB 信号通路探讨通痹胶囊对胶原诱导型关节炎治疗机制的研究

目的:基于TLR4/NF-κB信号通路研究通痹胶囊对胶原诱导型关节炎(CIA)的治疗机制。方法:48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、雷公藤组(0. 01 g/kg)和通痹胶囊低(0. 075 g/kg)、中(0. 150 g/kg)、高(0. 300 g/kg)剂量组,每组8只;使用牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂(CFA)建立大鼠CIA模型;采用HE染色观察滑膜组织病理情况,ELISA检测大鼠血清中白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blot检测滑膜组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和核因子κB(NF-κB)蛋白表达水平。结果:与正常大鼠相比,模型大鼠关节肿胀度均显著升高,通痹胶囊治疗后关节肿胀度显著降低,模型组滑膜组织增生明显,炎症细胞浸润,关节软骨破坏,通痹胶囊治疗明显改善滑膜组织的增生,降低炎症细胞的浸润;模型组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平和滑膜组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白水平显著升高,通痹胶囊处理后显著降低血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平和滑膜组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达;与通痹胶囊高剂量组相比,TLR4激动剂处理显著提高血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平和滑膜组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达。结论:通痹胶囊可以通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,降低炎性反应,显著改善CIA症状。     

五味子乙素通过抑制 TLR4/NF-κB 信号通路减轻 PD 小鼠炎症反应及 DA能神经元凋亡

目的：探讨五味子乙素（Sch B）对帕金森病（PD）模型小鼠炎症反应及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法：30只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组和Sch B组,10只/组。腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）建立PD模型,Sch B组小鼠给予Sch B灌胃14 d。步态实验观察各组小鼠行为学表现;免疫荧光染色检测小鼠黑质区酪氨酸羟化酶（TH）荧光强度;ELISA法测定黑质区IL-1β、IL-6和TNF-α水平;Western blot检测黑质区TH、Bcl-2、Bax、TLR4和p-NF-κB p65表达。结果：与正常组相比,模型组小鼠左前爪步幅显著减小,后爪步宽明显增大,中脑黑质中TH荧光强度显著减弱、表达量减少,IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显升高,Bcl-2与Bax蛋白表达比值显著减少,TLR4和p-NF-κB p65表达明显增加。与模型组相比,Sch B组小鼠的步幅明显增大、步宽显著减小,中脑黑质TH荧光强度增强、表达量增加,IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显降低,同时Bcl-2与Bax蛋白表达比值显著增加,TLR4和...     

诺米林通过抑制TLR4 / NF-κB 炎症通路减轻克雷伯菌老年肺炎大鼠模型炎症反应

目的:探索诺米林(Nomilin)对克雷伯菌(Klebsiella)老年肺炎大鼠炎症反应的影响。方法:克雷伯菌感染诱导肺炎模型。大鼠随机分为5组:健康对照组(Ctrl),克雷伯菌肺炎模型组,诺米林(10、25、50 mg/kg BW)治疗组。苏木素-伊红(HE)染色观察肺部组织病变。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)染色检测肺部组织细胞凋亡。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肺部组织白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平。流式细胞仪检测外周血CD14阳性细胞比例。蛋白印迹检测肺部组织CD14、TLR4、NF-κB P65和p-P65的蛋白水平。结果:诺米林可改善克雷伯菌老年肺炎大鼠肺部组织病变。克雷伯菌显著诱导老年大鼠肺脏组织细胞凋亡,而诺米林可剂量依赖性地抑制克雷伯菌诱导的肺脏细胞凋亡(P0. 01)。克雷伯菌显著提高老年大鼠炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α水平,而诺米林可有效抑制克雷伯菌诱导的炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α水平的升高(P0. 01)。克雷伯菌显著提高老年大鼠外周血中CD14阳性细胞数比例,诺米林可有效抑制克雷伯菌诱导的外周血中CD14阳性细胞数比例的上升(P0. 01),且呈剂量依赖性。克雷伯菌显著提高老年大鼠CD14和TLR4表达及p-P65/P65蛋白比值,诺米林可有效抑制克雷伯菌诱导的CD14和TLR4表达及p-P65/P65蛋白比值的升高(P0. 01),且呈剂量依赖性。结论:诺米林可通过抑制TLR4/NF-κB炎症通路的活化缓解克雷伯菌老年肺炎大鼠肺部组织病变、细胞凋亡及炎症反应。     

薯蓣皂苷对糖尿病肾病大鼠TLR4/NF-κB/TNF-α 通路及肾间质淋巴细胞浸润的影响

目的：探究薯蓣皂苷对糖尿病肾病（DN）大鼠TLR4/NF-κB/TNF-α通路及肾间质淋巴细胞浸润的影响。方法：通过喂养高脂高糖饲料8周后腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素的方法,建立DN大鼠模型,随机分为模型组、薯蓣皂苷低（10 mg/kg）、中（20 mg/kg）、高（40 mg/kg）剂量组、二甲双胍（140 mg/kg）组,每组12只大鼠,另取12只SD大鼠使用普通饲料喂养8周后腹腔注射等量生理盐水,设为对照组。经药物分组处理后,测定大鼠血糖、24 h尿蛋白含量和肾功能指标[血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）]水平;HE染色检测大鼠肾组织病理改变;免疫组织化学染色检测大鼠肾组织间质中浸润的LFA-1阳性细胞比例;ELISA检测大鼠血清炎症因子（TNF-α、IL-8）水平;Western blot检测大鼠肾组织TLR4/NF-κB/TNF-α通路相关蛋白表达。结果：与对照组相比,模型组大鼠肾组织充血、水肿,肾小球皱缩严重,系膜基质增生,间质可见明显炎症淋巴细胞浸润,显示明显病理损伤,血糖、24 h尿蛋白含量、Scr、BUN、TNF-α及IL-8水平、LFA-1阳性细胞比例、肾...     

上皮细胞来源的外泌体通过TLR/MyD88信号通路促进BCG诱导的巨噬细胞的炎症反应

目的探究上皮细胞来源的外泌体在BCG(卡介苗)感染巨噬细胞产生炎性反应中的调控作用。方法本研究通过试剂盒提取经BCG感染及未感染的人正常上皮细胞中的外泌体并对其进行鉴定;将用染料标记的外泌体与巨噬细胞共孵育观察与巨噬细胞的作用过程;ELISA方法检测外泌体刺激后巨噬细胞上清中炎性因子IL-6、IL-1β的含量;蛋白免疫印迹法检测巨噬细胞中TLR2、TLR4、TLR6、MyD88、NF-κВ及TRAF6蛋白的表达。结果纯化获得的外泌体在电镜下呈茶托状,大小在30～100 nm;并表达外泌体的表面分子标志CD9、HSP70;DIR红色染料标记的外泌体被巨噬细胞吞噬进入胞内;经外泌体刺激能够显著增加巨噬细胞分泌的炎性因子IL-6、IL-1β(P<0.001);且与BCG单独处理组比较,无论BCG预处理上皮细胞或未处理的外泌体都能进一步升高BCG诱导的巨噬细胞分泌炎性因子水平(P<0.05);同时TLR信号TLR2、TLR4、TLR6以及MyD88、NF-κВ、TRAF6蛋白在巨噬细胞受外泌体刺激后表达均显著上调(P<0.05)。结论上皮细胞来源的外泌体通过激活TLR/MyD...     

干扰素-γ水平影响系统性红斑狼疮小鼠体TLR9/MyD88/NF-κB p65信号通路的初步研究

目的 探究干扰素-γ(IFN-γ)水平对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠体内Toll样受体9/髓样分化因子88/核因子κB亚基p65(TLR9/MyD88/NF-κB p65)信号通路的影响.方法 将30只SLE MRL/lpr小鼠随机分为模型组、空质粒组和IFN-γ siRNA组,空质粒组和IFN-γsiRNA组采用活体...     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路观察维生素D3对大鼠炎症性肠病的改善作用

目的 基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子κB（TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路观察维生素D3（VD₃ ）对大鼠炎症性肠病（IBD）的改善作用。方法 选取32只大鼠随机分为对照组（Control组）、模型组（Model组）、低浓度VD₃ 组（VD₃ low组）、高浓度VD₃ 组（VD₃ high组）。采用3%右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）建立大鼠IBD模型,分别给予不同浓度VD₃ 干预。造模结束后计算大鼠疾病活动指数（DAI）得分并测量结肠长度;行HE染色及结肠组织病理学评分;qRT-PCR、Western blot及免疫组化检测TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平;ELISA检测血清促炎因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）、抗炎因子白介素10（IL-10）含量。结果 与Control组相比,Model组DAI评分、TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRN...