用PCR法探讨EB病毒与胃癌的关系

胃癌组织中ＥＢ病毒的检出率因地区而异。为调查黑龙江地区胃癌ＥＢ病毒核酸的存在情况，我们用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）法特异笥扩增本地区经临床病理确诊的胃癌组织中ＥＢ病毒ＥＢＮＡ１基因区域，结果２９例标本中有６例检出ＥＢ病毒ＤＮＡ，且胃癌病理类型均是胃腺癌，提示本地区胃癌特别是胃腺腺的发生与ＥＢ病毒感染密切相关。     

鼻咽肌上皮细胞癌的临床病理特点及与EB病毒的关系

【目的】 分析鼻咽肌上皮细胞癌的临床及病理特征以及其与EB病毒的关系｡【方法】 对12例鼻咽肌上皮细胞癌进行临床､病理及随访观察,EBERS原位杂交及免疫组织化学标记｡【结果】 12例鼻咽肌上皮细胞癌患者中,男性患者7例,女性患者5例,男女比1.4:1;年龄24 ~ 65岁,中位年龄46岁｡影像学资料都显示鼻咽部有明显的结节状肿物,肌上皮细胞的标记:S-100､SMA､P63､CK14及上皮标记:CK､CKL､CKH在12例肌上皮细胞癌中表达有差异,但是所有的肌上皮细胞癌恒定表达至少一项肌上皮细胞和上皮细胞标记｡12例鼻咽肌上皮细胞癌EBERS 原位杂交结果均为阴性｡【讨论】 肌上皮细胞癌是一种低度恶性的肿瘤,发生在鼻咽部极少见,其病理形态虽然复杂多变,但也有其特征性的形态特征,免疫组织化学及EBERS 原位杂交有助于其诊断,在治疗上采用手术切除的基础上进行联合放射及化学治疗将有效地控制肿瘤的复发及转移｡     

胃小弯全切术在远端胃癌根治术中的应用

目的探讨胃小弯全切术在远端胃癌根治术中的应用。方法将120例远端胃癌（进展期胃癌）患者随机分为两组,分别行胃小弯全切根治术（A组）和传统根治术（B组）,并对治疗结果进行对比。结果术后1年生存率,A、B两组分别为89．2％,76.5％,术后2年生存率,A组为79．4％,B组为62．3％,差异均有显著性意义（P〈0.05）。A组60例患者共清除1597枚淋巴结,平均每例清除26．6枚,B组共清除960枚淋巴结,平均每例清除16．0枚,差异有显著性意义（P〈0．05）。术后并发反流性胃炎、倾倒综合征、吻合口漏A组分别为6．5％,3．3％,1．7％,B组分别为6．8％,4．7％,3．3％（P〉0．05）;术后吻合口复发率A、B两组分别为1．6％,8.3％（P〈0．05）;术后A组无切缘癌细胞残留,B组4例（6．7％）有切缘癌细胞残留（P〈0．05）。结论根治性胃小弯全切除术可以较彻底地清除转移的淋巴结,降低切缘癌细胞残留,降低复发率,提高患者生存率。     

人胃癌及胃间质细胞肿瘤Epstein-Barr病毒的检测

目的 探讨Epstein-Barr病毒感染对人类胃肿瘤发生，分化程度及淋巴结转移的影响。方法 取冰冻组织及石蜡切片提取DNA，用PCR方法扩增EBV-DNABamHI-W片段，阳性者提示有EBV感染，分析EBV阳性胃肿瘤的分化程度，淋巴细胞浸润和淋巴转移情况。结果 109例胃癌中共有18例检出EBV-DNA（阳性率为16.5%)，3例胃间质细胞肿瘤中有1例EBV-DNA阳性（阳性率为33.3%)。EBV阳性胃肿瘤分化程度低，淋巴结转移率低（r=-0.176,P=0.031)。富于淋巴细胞浸润，结论 EB病毒感染可能参与胃肿瘤的发生。Epstein-Barr病毒感染与淋巴结转移率呈负相关。     

胃癌EB病毒编码小RNA的原位杂交研究

目的 探讨非洲淋巴细胞瘤病毒编码小ＲＮＡ（ＥＢＥＲ－１）在胃癌中表达及与组织学类型的关系。方法 应用ＥＢＥＲ－１的原位分子杂交技术对１００例胃癌进行检测。结果 １００例 胃癌中有２例ＥＢＥＲ－１呈阳性表达,其中１例为管状腺癌,１例为低分子化腺癌。２例均有淋巴细胞浸润倾向,与组织学类型无关。结论 ＥＢ病毒相关胃癌占胃癌的比率（２％）低于日本（７％～１１％）和北美（１６％）。     

儿童EB病毒相关疾病的诊疗进展

儿童EB病毒（EBV）感染相关疾病是一组临床表现多变、发病机制复杂的疾病,除常见的传染性单核细胞增多症外,还有慢性活动性EBV感染、EBV感染相关噬血细胞淋巴组织细胞增生症、X-连锁淋巴细胞增殖综合征及EBV相关性肿瘤疾病等,其中部分疾病起病急、进展快、症状重、预后差.随着对EBV感染相关疾病研究的不断深入,与其相关的疑难、危重疾病将得到有效地预防和治疗.     

重视儿童非肿瘤性EB病毒感染疾病的研究

Epstain-Barr病毒(Epstain-Barr virus,EBV)是一种重要的肿瘤相关病毒,成人感染率超过90%。EB病毒与鼻咽癌、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤、胃癌、移植后淋巴增生症等多种肿瘤的发生密切相关。本文介绍了EB病毒感染的实验室诊断方法及其临床应用,重点介绍了儿童常见非肿瘤性EB病毒感染疾病(传染性单核细胞增多症、慢性活动性EB病毒感染、EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症)的临床特征、诊断指南及需要进一步研究的问题。     

儿童EB病毒相关性噬血淋巴组织细胞增生症的病毒学特征

目的了解儿童EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)相关性嗜血淋巴组织细胞增生症(EBV-associated hemophagocyticlymphohistiocytosis,EBV-HLH)的血清学EB病毒抗体和病毒复制水平等病毒学特征。方法对26例嗜血淋巴组织细胞增生症(HLH)和23例原发性EBV感染所致的传染性单核细胞增多症(EBV-associated,infectious mononucleosis,EBV-IM),用荧光定量PCR检测患者血清中EBV-DNA拷贝数,同时用间接免疫荧光法检测4项EBV抗体,包括:抗EBV衣壳抗原(capsid antigen,CA)IgG(EBV-CA-IgG)抗体、抗EBV衣壳抗原IgM(EBV-CA-IgM)抗体、抗EBV早期抗原(early antigen,EA)IgG(EBV-EA-IgG)抗体、抗EBV核抗原(nuclear antigen,NA)IgG(EBV-NA-IgG)抗体。结果7例HLH患者血清中EBV-DNA检测阳性,被诊断为EBV-HLH。EBV-HLH患者血清中EBV-DNA拷贝数均值为(4.586±0.107)×107/mL。从4项EBV抗体结果分析,原发感染3例(抗EBV-NA-IgG抗体阴性),既往感染或再激活4例(抗EBV-NA-IgG抗体阳性)。7例EBV-HLH患者中有3例EBV-CA-IgM阳性。23例EBV-IM患者血清中EBV-DNA检测均阳性,拷贝数均值为(6.865±0.305)×103/mL。EBV-HLH患者血清中EBV-DNA拷贝数显著高于EBV-IM患者血清中EBV-DNA拷贝数,二者比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论EBV-HLH可以发生在EBV感染的不同时期,EBV-HLH患者血清中EBV-DNA拷贝数显著高于IM患者,外周血中EBV-DNA荧光定量PCR检测在EBV-HLH的病因诊断中比血清学抗体检测更具价值。     

鼻咽癌中EB病毒启动子Qp的突变及其功能学研究

【目的】 探讨鼻咽癌细胞中启动EB病毒核抗原1(EBNA1蛋白)表达的EB病毒Q启动子(Qp)的变异特征,比较有第62 225位点(g→a)和第62 422位点(g→c)两个点突变的Qp与原型Qp(B95.8型)的功能学差异及其生物学意义&#65377;【方法】 采用PCR的方法扩增29例鼻咽癌组织石蜡标本和14例健康成人外周血标本(总共43例)中的Qp序列,PCR产物测序后分析其突变情况,统计学分析Qp中的点突变与鼻咽癌的相关性&#65377;把突变型和原型Qp分别克隆到荧光素酶报告基因载体上,检测相对光强度(RLU),比较突变型与原型Qp启动转录的活性&#65377;使用染色质免疫共沉淀(ChIP)实验来比较突变型和原型Qp与Sp1蛋白的亲和力&#65377; 【结果】 通过PCR扩增和测序实验,证实Qp的突变与鼻咽癌有密切的相关性(P = 0.0395,< 0.05)&#65377;突变型Qp启动转录的活性明显高于原型(RLU之比约为2.5:1,P < 0.05),并且突变型Qp与Sp1的亲和力较原型Qp增强约1.52倍&#65377;【结论】 在鼻咽癌组织中,突变型Qp可能通过增强与Sp1亲和力的机制,使其启动转录的活性明显增强&#65377;Qp特定位点的突变在EB病毒对鼻咽上皮细胞的感染和转化过程中可能起了重要的作用&#65377;     

鼻咽癌病人多项免疫功能及EB病毒PCR检测的综合研究

为进一步了解ＥＢ病毒与鼻咽癌的关系,全面综合调查鼻咽癌病人的免疫功能,应用ＰＣＲ方法检测鼻咽病人组织块ＥＢ病毒ＤＮＡ,并对处国咽癌病人血清中ＥＢ病毒（ＥＢＶ－ＶＣＡ／ＩｇＡ）抗体、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、脂质过氧化物降解产物（ＭＤＡ）及数种微量元素含量进行测定。结果：从鼻咽癌病人鼻咽部活检组织中成功地检测出ＥＢ病毒ＤＮＡ片断。进一步证实了ＥＢ病毒与鼻咽癌的发生有密切关系。并对鼻咽癌病人血清Ｖ     

EB病毒重组Rta蛋白在胃癌组织中表达的研究

目的研究EB病毒Rta蛋白在胃癌组织中的表达情况,研究裂解期EB病毒与胃癌的关系。方法采用免疫组织化学方法,应用Rta多克隆抗体检测30例手术切除胃癌组织及其相应癌旁组织中EB病毒BRLF1基因产物Rta蛋白的表达水平与分布情况。结果30例胃癌组织中发现6例R ta蛋白表达阳性,阳性率为20%,相应癌旁组织均为阴性,p=0.031,有显著性差异;Rta蛋白表达阳性率男性多于女性,p=0.024;与病人年龄、病理组织学类型及发生部位之间无明显关系,p=0.196-0.896。结论EB病毒的裂解感染状态与胃癌的发生具有一定相关性,裂解感染期EBV可能在胃癌的发病中起了一定作用。     

Lymphoepithelioma-like carcinoma of the submandibular salivary gland: a case report

Carcinoma of the salivary gland is an uncommon disease, accounting for less than 1% of all head and neck malignant neoplasm.1 Lymphoepthelioma is a malignant tumor of epithelial origin showing varying amounts of reactive lymphocytic infiltrate.Lymphoepithelioma-like carcinoma (LELC) constitutes a significant proportion of salivary gland carcinoma in Chinese and Eskimo populations and is related to Epstein-Barr virus infection.2,3 Carcinoma of the salivary gland has a propensity for early lymphatic metastasis, and thus a swelling of cervical lymph nodes is occasionally the sole initial symptom.It is very vital to consider a multimodality approach including surgery, radiotherapy and chemotherapy for the treatment in the locally advanced disease.     

RNA干扰沉默STAT3基因对胃癌细胞侵袭力的影响

目的观察瞬时转染信号传导与转录激活因子3（STAT3）小干扰RNA（siRNA）后对人胃癌细胞SGC-7901侵袭力的影响,探讨干扰STAT3后降低胃癌细胞侵袭力的机制。方法以人胃癌细胞系SGC-7901为研究对象,培养瞬时转染特异性siRNA的SGC-7901细胞系,通过RT-PCR、免疫细胞化学、Transwell体外侵袭实验等检测该siRNA对SGC-7901细胞STAT3及MMP-9基因表达和对细胞侵袭转移能力的影响。结果STAT3 siRNA转染SGC-7901细胞48 h后,STAT3 mRNA水平下降了73.04%,MMP-9 mRNA水平下降了57.2%;Transwell体外侵袭实验显示,STAT3 siRNA组能显著抑制SGC-7901的侵袭力（P〈0.01）。结论应用siRNA技术能有效抑制SGC-7901STAT3基因的表达,进而可能通过抑制MMP-9基因的表达,降低细胞的侵袭力,为以STAT3为靶向的胃癌基因治疗提供了新的思路和方法。     

DNA修复基因和EB病毒的交互作用与鼻咽癌易感性初步研究

【目的】探讨在鼻咽癌群体中DNA修复基因与EB病毒的交互作用。【方法】选取广东地区以广东话为主要语言的人群建立匹配的鼻咽癌病例和健康对照（病例/对照=755/755）,收集其临床流行病学资料、采集外周血样并进行EB病毒抗体检测和SNP基因型分型。利用决策森林方法,分析DNA修复通路104个基因中768个SNP位点和EB病毒在鼻咽癌中的交互作用。【结果】MDC1、ATM、GTF2H4、MLH1、RAD51L1、XPC、GTF2H1与EB病毒的交互作用达到Bonferroni多重检验校正的显著性水准（0.05）。P 值分别为7.62×10-5 、8.20×10-5、8.55×10-5、1.60×10-4、1.80×10-4、2.20×10-4、和2.42×10-4;其鼻咽癌患病风险比OR (95%CI)分别为15.97(4.17-61.11)、11.32(7.22-25.45)、15.94(4.17-64.01)、5.38(4.88-6.74)、151.47(53.79-380.39)、40.92(15.09-112.67)和142.38(53.38-377.5)。进一步生物信息学基因网络分析表明,这些基因可能通过影响EB病毒DNA复制过程等多种直接或间接的方式,改变广东人群鼻咽癌的易感性。【结论】EB病毒与修复基因的交互作用可能是鼻咽癌的另一重要的易感性机制。     

云南省部分HIV感染者唾液EBV检出率分析

目的探讨HIV感染者唾液EB病毒存在情况及其与免疫抑制的关系.方法采用横断面研究,利用巢氏PCR方法对245例HIV感染者和30例健康对照者唾液EBV DNA的存在情况进行检测,并分析检出率与CD4淋巴细胞计数的关系.结果 HIV感染者和健康对照人群唾液EBV检出率分别为82.0%与30.0%,二者有统计学差异(P<0.05);CD4淋巴细胞计数小于200、200～400和大于400个/μL的患者唾液EBV检出率分别为93.0%、75.8%和45.7%,3组间检出率有显著差异(P<0.05);但是否使用高效抗逆转录病毒治疗对唾液EBV的检出率无明显影响.结论 HIV感染者唾液中EB病毒检出率高,与免疫指标CD4淋巴细胞计数水平有关.     

单克隆抗体MGd_1、MG_7对胃癌和相关病变中相应抗原的表达

以 ABC 法研究胃癌和相关病变中,胃癌单克隆抗体相应抗原的特征和分布。MGd_1抗原在胃癌阳性率最高,早期胃癌阳性率为80%,进展期胃癌为90%;而胃癌相关病变阳性率较低,癌旁胃粘膜阳性率为45%,胃溃疡边缘异型增生为20%。MG_7抗原在非癌组织中阳性率最低,对胃癌特异性高。MGd_1和 MG_7联合使用,进展期胃癌阳性率达95%,正常粘膜均为阴性。提示单克隆抗体检查对胃癌的诊断和“高危”癌前状态的确定有所帮助。     

A Severe Case of Reye's Syndrome with Multiorgan Dysfunction after Epstein-Barr Virus Infection

A 20-month-old male infant with multiorgan dysfunction after Epstein-Barr virus (EBV) infection developed Reye's syndrome. He also suffered from acute liver failure, life-threatening cerebral edema, severe disseminated intravascular coagulation (DIC), and myocardial involvement. EBV infection aggravated the progress of Reye's syndrome, leading to death despite full supportive and symptomatic therapy. This critical case suggested that pediatricians should pay attention to multiorgan involvement of severe EBV infection.     

Relationship Between Effect of ~(60)Co Radiotherapy on Nasopharyngeal Carcinoma and EB Virus Capsid Antigen-lmmunoglobulin A Antibody Level

By using immunofluorescent cytochemical method,EB-VCA-IgA antibody levelswere studied in 35 cases of nasopharyngeal carcinoma.It was found that VCA-IgAantibody level declined with the improvement of the patient's condition and rose up withthe worsening of the disease in most cases.It is indicated that the change of EB-VCA-IgAantibody level might be used as an objective indication for the determination of ~(60)Coradiotherapy effect.     

EB病毒LMP1基因和蛋白在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达及与预后的关系

目的从蛋白和DNA两个水平初步检测成都地区结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤中LMP1的表达,并探讨与预后的关系。方法应用免疫组化和PCR技术检测67例结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤LMPl的表达,并应用Kaplan—Meier曲线分别比较LMP1蛋白和LMP1DNA阳性表达组与阴性表达组的生存率。结果LMP1蛋白阳性表达10例(14．93％),LMP1DNA阳性表达56例(83．58％),LMP1总检出率83．58％。LMP1蛋白(P=0．678)和LMP1DNA(P=0．943)表达均与预后无明显关系。结论LMP1与成都地区结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤关系密切;结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤中LMP1蛋白水平和DNA水平表达不一致;LMP1的表达与预后无明显关系。