柚皮素对心肌缺血/再灌注损伤大鼠PI3K/AKT信号通路和内质网应激及其相关凋亡通路的影响

目的:观察柚皮素对缺血/再灌注(I/R)大鼠心脏损伤的影响,并探讨柚皮素的作用是否涉及PI3K/AKT信号通路和内质网应激及其相关凋亡通路.方法:48只SD大鼠按随机数字表法分成假手术组(sham组)、模型组(I/R组)、柚皮素处理组(NAR组)和柚皮素处理+LY294002组(NL组).结扎大鼠冠状动脉左前降支30 ...     

柚皮素减轻重症急性胰腺炎小鼠心肌损伤

目的探讨小鼠重症急性胰腺炎(SAP)相关性心肌损害的发生机制和柚皮素的保护作用。方法将小鼠随机分为:对照组(control组)、模型组(SAP组)和柚皮素干预组(Nar组),每组12只。应用L-精氨酸(8%,4 mg/kg,p H=7. 0,间隔1h腹腔注射2次)制备小鼠SAP模型,Nar(200 mg/kg)溶于0. 5%CMC-Na中制备混悬液,在首次注射L-精氨酸后0、24和48 h腹腔注射。试剂盒检测血浆c Tn I、CK-MB及LDH浓度。实时荧光定量PCR和Western blot检测心脏组织NLRP3、caspase-1、ASC、IL-1βmRNA及蛋白表达。结果与对照组比较,SAP组小鼠胰腺组织水肿、腺泡细胞坏死、大量炎性反应细胞浸润。心肌细胞肿胀、部分细胞崩解、心肌纤维结构消失,并有较多炎性反应细胞浸润。血浆CK-MB、LDH及c Tn I水平明显升高(P0. 05),心肌NLRP3、caspase-1、ASC及IL-1βmRNA和蛋白表达显著增高(P0. 05)。柚皮素干预可以降低SAP小鼠血浆淀粉酶和脂肪酶水平、减轻胰腺组织损伤和心肌组织损伤,降低血浆CK-MB、LDH及CTn I水平(P0. 01),下调心肌组织NLRP3、caspase-1、ASC及IL-1βmRNA (P0. 01)和蛋白表达(P0. 05)。结论柚皮素可能通过抑制心脏中NLRP3炎性小体激活保护SAP相关的心肌损伤。     

柚皮素对多囊卵巢综合征模型大鼠的卵巢保护及激素调节作用

目的 探究柚皮素对多囊卵巢综合征模型大鼠的卵巢保护及激素调节作用。方法 32只雌性SD大鼠分成4组：对照组、柚皮素组、PCOS组和PCOS+柚皮素组（n=8）。大鼠皮下注射脱氢表雄酮（6 mg/100 g·d）以诱导PCOS模型，向柚皮素组和PCOS+柚皮素组大鼠注射20mg/kg的柚皮素，持续15天。检测血清中雌二醇、黄体酮、睾丸激素和脱氢表雄酮水平；检测卵巢组织病理学形态和发情周期的改变；检测卵巢组织中炎性因子水平及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、p75NTR和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果 柚皮素可以显著降低PCOS大鼠血清中雌二醇和睾丸激素水平，并增加黄体酮和脱氢表雄酮的水平；改善卵巢损伤和发情周期；降低卵巢中白细胞介素-1β(IL-1β)，卵巢中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)并增加白细胞介素-10(IL-10)的水平；降低卵巢组织中Cleaved Caspase9、p75NTR和p-NF-κB的表达水平。结论 柚皮素通过抑制NF-κB通路对多囊卵巢综合征大鼠发挥卵巢保护及激素调节作用。     

柚皮素通过PI3K/Akt通路拮抗血小板聚集的体外研究

目的:探讨柚皮素拮抗二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集的作用及机制。方法:采用血小板聚集仪观察不同浓度柚皮素对ADP诱导的大鼠血小板聚集的影响。采用荧光显微镜观察柚皮素对血小板在固化纤维蛋白原上扩展功能的影响。采用Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)表达及蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平。结果:柚皮素能剂量依赖性地抑制ADP诱导的体外血小板聚集,其半数抑制浓度(IC_(50))值为(132.1±31.7)μmol/L。柚皮素灌胃给药,对ADP诱导的大鼠体内血小板聚集也有明显的抑制作用。柚皮素还能显著抑制血小板在固化纤维蛋白原上的扩展。Western blot结果显示,柚皮素能明显抑制ADP刺激的PI3K表达和Akt磷酸化同时,PI3K广谱抑制剂LY294002能增强柚皮素对Akt磷酸化的抑制作用。结论:柚皮素可能通过抑制血小板PI3K/Akt信号通路发挥抗血小板聚集的作用。     

柚皮素通过抑制NF-κB-iNOS/COX-2通路减轻小鼠糖尿病肝损伤

目的：探讨核因子(NF-κB)-诱导型一氧化氮合酶(i NOS)/环加氧酶2(COX-2)信号通路在柚皮素治疗减轻小鼠糖尿病肝损伤中的作用。方法：将昆明小鼠分为正常对照组、糖尿病肝损伤模型组、低剂量(25 mg·kg^-1·d^-1，灌胃)柚皮素治疗组及高剂量(75 mg·kg^-1·d^-1，灌胃)柚皮素治疗组，每组10只。长期高能量饮食联合多次小剂量链脲菌素(STZ;40 mg·kg^-1·d^-1×5 d，腹腔注射)建立小鼠糖尿病肝损伤模型。HE染色观察肝脏形态学变化；生化试剂盒检测小鼠血脂及肝功能改变；每周监测空腹血糖(FBG)水平；q RT-PCR检测肝脏NF-κB、iNOS和COX-2的mRNA表达；Western blot法检测肝脏NF-κB、iNOS和COX-2蛋白表达。结果：给予STZ 7 d，小鼠FBG水平持续高于11.1 mmol/L,4周后肝脏病理变化及肝功能检测提示出现肝损伤。再过4周(即实验结束时)，模型组小鼠肝细胞内可见脂肪变性，还伴有炎...     

腺苷A_(2A)受体拮抗剂SCH58261减轻胎兔缺氧缺血性脑损伤

目的:研究腺苷A_(2A)受体拮抗剂SCH58261减轻成熟胎兔缺氧缺血性脑损伤的作用。方法:选择孕29 d的普通级新西兰孕白兔随机分为假手术组(SO组)、缺氧缺血组(HI组)、SCH58261 0.04 mg/kg剂量组、SCH58261 0.12 mg/kg剂量组和药物溶剂组(DMSO组)。制备胎兔缺氧缺血性脑损伤模型,孕兔均在术后24 h行剖宫产,将存活新生兔置入已提前预热为35℃的婴儿暖箱内保暖。记录新生兔的一般状况;评估存活新生兔神经行为学改变;利用质谱法测孕兔血清、新生兔血清及脑组织的SCH58261浓度;采用real-time PCR检测新生兔脑组织皮质、海马和纹状体区Bcl-2和Bax的mRNA表达;利用Western blot实验检测新生兔脑组织皮质、海马和纹状体区p-P38 MAPK的蛋白水平。结果:新生兔血清和脑组织中均能检测到SCH58261的存在。与HI组比较,SCH0.04 mg/kg组和SCH 0.12 mg/kg组新生兔脑皮质、海马和纹状体区Bcl-2的mRNA表达均增加(P0.05),而Bax的mRNA的表达均减少(P0.05)。将p-P38 MAPK在新生兔脑皮质、海马和纹状体区的表达水平进行比较,SCH0.04 mg/kg组和SCH 0.12 mg/kg组的P38 MAPK磷酸化水平均低于HI组(P0.05),且SCH 0.12 mg/kg组与SCH 0.04 mg/kg组相比稍降低(P0.05)。结论:腺苷A_(2A)受体拮抗剂SCH58261可能通过阻断腺苷A_(2A)受体,抑制神经元P38 MAPK的磷酸化,进一步抑制脑细胞凋亡而减轻宫内缺氧缺血性脑损伤。     

柚皮素通过环核苷酸通路拮抗血小板聚集的体外研究

目的:探讨柚皮素拮抗二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集的作用机制。方法:采用ELISA检测柚皮素对ADP诱导的大鼠血小板内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平的影响。采用高效液相法检测柚皮素对血小板磷酸二酯酶(PDE)活性影响。采用Western blot检测柚皮素对ADP刺激的血小板内血管扩张刺激磷蛋白(VASP)磷酸化形式p-VASP(Ser157)、p-VASP(Ser239)的蛋白水平的影响。分别给予蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89、蛋白激酶G(PKG)抑制剂Rp-8-Br-PET-cGMPS和蛋白激酶C(PKC)抑制剂GF109203X预先孵育血小板后,再用柚皮素处理,然后给予ADP刺激,Western blot检测p-VASP(Ser239)蛋白水平。采用血小板聚集仪进一步观察PKA抑制剂、PKG抑制剂预先孵育血小板是否影响柚皮素对ADP诱导血小板聚集的抑制作用。结果:柚皮素剂量依赖性地升高ADP抑制的血小板内cGMP水平,而并不改变cAMP水平。柚皮素还能显著升高血小板PDE活性。Western blot结果显示,柚皮素可明显升高由ADP抑制的p-VASP(Ser239)水平,但不影响p-VASP(Ser157)的蛋白水平,预先孵育PKG或PKC抑制剂并不影响柚皮素对p-VASP(Ser239)蛋白表达的作用,而预先孵育PKA抑制剂后,则能抑制柚皮素对p-VASP(Ser239)蛋白表达的作用。PKA抑制剂能阻断柚皮素对血小板聚集的拮抗作用,而PKG抑制剂并不影响其作用。结论:柚皮素可能通过升高血小板内cGMP水平和激活PKA依赖的信号通路来介导VASP的磷酸化,从而发挥抗血小板聚集的作用。     

柚皮素对LPS致心肌细胞损伤炎症及氧化应激的保护作用

为探索柚皮素对LPS致心肌细胞损伤炎症及氧化应激的保护作用,以10μg/mL的LPS建立H9c2细胞损伤模型,并将细胞分为对照组、LPS组、柚皮素低剂量组(20μmol/L)、柚皮素中剂量组(40μmol/L)和柚皮素高剂量组(80μmol/L)。以CCK-8方法检测细胞活性;ELISA检测细胞肌酸激酶(creatine kinase, CK)、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase, LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平;FACS检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;PCR检测IL-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)、TNF-α、细胞间黏附分子(intercellular cell adhesion molecule,ICAM)、血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule,VCAM) mRNA的表达水平。结果显示,与...     

柚皮素增强抗人DR5单抗对人肝癌细胞系HepG2的凋亡作用

探讨柚皮素增强抗人DR5单克隆抗体对人肝癌细胞系HepG2的凋亡作用及可能机制。MTT法检测柚皮素及抗人DR5单抗对人肝癌细胞系HepG2的生长抑制作用;Annexin V/PI双染分析细胞凋亡;蛋白免疫印记检测Caspase 8的表达;流式细胞术检测HepG2细胞表面DR5的表达。结果显示,10 mg/L的mDRA-6作用于HepG2细胞12 h后细胞增殖抑制率为39%;10 mg/L的mDRA-6分别与200μmol/L、400μmol/L、800μmol/L柚皮素共同作用于HepG2细胞后细胞增殖抑制率分别增加至58%、79%、85%;Annexin V/PI双染及流式细胞术检测结果表明,2 mg/L的mDRA-6作用细胞12 h后细胞凋亡率为16%,2 mg/L的mDRA-6和400μmol/L柚皮素共同作用于HepG2细胞12 h后细胞凋亡率增加为63%;mDRA-6和柚皮素共同作用于HepG2细胞后,蛋白免疫印记结果显示Caspase 8的激活片段明显显现,流式细胞术检测HepG2细胞表面DR5的表达,其基础表达率为49%,400μmol/L柚皮素作用于HepG2细胞12后,HepG2细胞表面DR5的表达率增加为81%。实验显示柚皮素可增强抗人DR5单克隆抗体对人肝癌细胞系HepG2的凋亡作用,其可能机制为柚皮素诱导HepG2细胞表面DR5受体表达上调所致。     

粪菌移植对坏死性小肠结肠炎新生小鼠肠道菌Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的:探讨粪菌移植(FMT)对新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)小鼠肠道菌群及Th1/Th2细胞因子表达的影响.方法:将48只3日龄C57BL/6新生小鼠随机分为4组:对照组、NEC模型组、FMT预防组、FMT治疗组,每组12只.除对照组外,其余三组均采用缺氧+冷刺激+人工喂养方法连续刺激3 d建立NEC模型.对照组幼鼠...     

柚皮素通过ROS/P38-MAPK信号通路调控肺癌A549细胞增殖及凋亡

目的:探讨柚皮素调控A549细胞增殖及凋亡的分子机制.方法:培养A549细胞,通过CCK-8法检测不同浓度的柚皮素(0、30、60、90、120 μmol/L)对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测各组细胞凋亡及ROS含量;WST-8法检测SOD活性以及硫代巴比妥酸法(TBA检测法)检测MDA含量;Western b...     

柚皮素通过抑制TGF-β1/smad信号传导通路缓解糖尿病肾病大鼠肾损伤

目的探讨柚皮素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其对TGF-β1/smad信号传导通路的影响。方法将糖尿病肾病模型大鼠随机分为糖尿病肾病组和糖尿病肾病+柚皮素组,用药治疗6周。检测大鼠24 h尿蛋白定量、肌酐清除率和肾脏指数;HE染色观察肾组织形态和检测肾小球面积;实时荧光定量PCR检测Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白、TGF-β1、Smad2和Smad7 mRNA的表达;Western blot检测Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白、TGF-β1、smad7、总smad2和磷酸化smad2蛋白。结果糖尿病肾病组大鼠24 h尿蛋白(P0.01)和肾脏指数(P0.01)显著升高,肌酐清除率明显下降(P0.01),肾小球明显肥大(P0.05),Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白的mRNA水平和蛋白表达量均升高,TGF-β1和磷酸化smad2蛋白的表达量均升高,smad7蛋白表达量降低;经柚皮素50 mg/kg治疗后能明显降低糖尿病肾病大鼠的24 h尿蛋白(P0.01)和肾脏指数(P0.05),提高肌酐清除率(P0.05),减轻肾小球肥大(P0.05),Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白的mRNA水平和蛋白表达量降低,TGF-β1和磷酸化smad2蛋白的表达量均降低,smad7蛋白表达量升高。结论柚皮素可能通过调控糖尿病肾病肾组织TGF-β1/smad信号通路表达,减轻肾脏病理损害。     

紫草素调节新生小鼠缺氧诱导的肺损伤和肺泡巨噬细胞中M1/M2型极化及炎性因子水平

目的 探究紫草素对新生小鼠缺氧诱导的肺损伤和肺泡巨噬细胞中M1/M2型极化及炎性因子水平的影响.方法 建立新生小鼠缺氧诱导的肺损伤模型,将小鼠随机分为5组:Sham组、Hypoxia组、Hypoxia+ALK 2.5 mg/kg组、Hypoxia+ALK5 mg/kg组和Hypoxia+ALK 10 mg/kg组进行后...     

柚皮素通过miR-22抑制NLRP3炎症小体并减轻溃疡性结肠炎大鼠模型肠屏障损伤

目的:探究柚皮素通过调控微小RNA-22(miR-22)的表达,对溃疡性结肠炎(UC)大鼠NLRP3炎症小体的影响以及对肠屏障的保护作用。方法:将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组、低剂量柚皮素组、高剂量柚皮素组和柚皮素+miR-22 antagomiR组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠使用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导UC大鼠模型,并给予药物处理。观察大鼠体重变化和粪便稠度等情况,评估疾病活动性指数(DAI);检测血清中促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)水平;HE染色观察肠组织病理学变化;透射电子显微镜观察肠上皮细胞;RT-qPCR技术检测肠组织中miR-22水平;Western blot法检测肠组织中紧密连接相关蛋白ZO-1、occludin和claudin-1表达水平;双萤光素酶报告基因实验检测miR-22与NLRP3靶向关系。结果:对照组大鼠肠组织结构正常;模型组大鼠肠组织黏膜结构破坏严重,有大量炎症细胞浸润,屏障受损,细胞间隙增宽;低、高剂量柚皮素组大鼠肠组织损伤减轻;柚皮素+miR-22 antagomiR组大鼠肠组织损伤较高剂量柚皮素组明显加重,炎症细胞浸润增加。与对照组相比,模型组大鼠DAI、肠黏膜损伤肉眼评分、IL-1β水平及NLRP3蛋白表达水平显著升高(P0.05),miR-22水平及ZO-1、occludin和claudin-1蛋白表达水平显著降低(P0.05);与模型组相比,低、高剂量柚皮素组大鼠DAI、肠黏膜损伤肉眼评分、IL-1β水平及NLRP3蛋白表达水平显著降低(P0.05),miR-22水平及ZO-1、occludin和claudin-1蛋白表达水平显著升高(P0.05);与高剂量柚皮素组相比,柚皮素+miR-22 antagomiR组大鼠DAI、肠黏膜损伤肉眼评分、IL-1β水平及NLRP3蛋白表达水平显著升高(P0.05),miR-22水平及ZO-1、occludin和claudin-1蛋白表达水平显著降低(P0.05)。结论:柚皮素通过上调miR-22水平,抑制NLRP3炎症小体活化,发挥对UC大鼠肠屏障的保护作用。     

柚皮苷-壳聚糖/羟基磷灰石复合支架修复大鼠颅骨缺损

背景:骨碎补的有效成分柚皮苷具有补肝肾强筋骨的传统功效,能增加骨痂厚度,提高骨折愈合质量。目的:探究载中药骨碎补有效成分柚皮苷壳聚糖/羟基磷灰石复合支架的骨传导和骨诱导性能。方法:将一定钙磷比的羟基磷灰石前体液与含柚皮苷的壳聚糖溶液在碱性条件下原位结晶、冷冻干燥,获得柚皮苷-壳聚糖/羟基磷灰石多孔支架。将15只成年SD大鼠随机分成空白组(n=5)、对照组(n=5)和实验组(n=5),建立直径5 mm颅骨骨缺损模型,空白组未填充生物材料,对照组填充壳聚糖/羟基磷灰石支架,实验组填充柚皮苷-壳聚糖/羟基磷灰石复合支架。术后4周取材,CT扫描观察颅骨修复情况,苏木精-伊红染色观察颅骨修复的形态学,骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子免疫组化染色后观察缺损区域局部成骨活性因子的表达。结果与结论:(1)CT扫描显示,空白组大鼠颅骨未见明显骨生成,仅在缺损边缘可见少量新生骨;对照组于缺损孔隙可见新生骨形成,新生骨较少;实验组骨缺损修复良好,新生骨组织与缺损孔隙周围颅骨密度相似,大面积新生骨广泛填充了缺损孔隙。(2)苏木精-伊红染色显示,空白组缺损区填充以稀薄的疏松网状纤维组织,可见大量炎性反应病灶,...     

不同剂量花姜酮对大鼠重症急性胰腺炎的影响

目的:探讨花姜酮( Zerumbone)静脉给药对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)的治疗作用。方法:雄性Wistar大鼠50只,随机分为5组:假手术组(SO组)、SAP模型组(SAP组)、5mg/kg花姜酮预处理组(5mg/kg花姜酮组)、10mg/kg花姜酮预处理组(10mg/kg花姜酮组)、20 mg/kg花姜酮预处理组(20mg/kg花姜酮组)。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。SO组、SAP组造模前30 min股静脉注射10%二甲基亚砜(DMSO)(2ml/kg),余三组注射等量10%DMSO溶解的等体积、不同浓度花姜酮。术后12h心脏取血检测各组血清淀粉酶(AMY),谷氨酸氨基转移酶(ALT),血肌酐(Cr)浓度变化,并观察胰腺组织病理学改变。结果:与SAP组比较,5 mg/kg花姜酮组AMY和胰腺病理评分没有改变,ALT和Cr有改善(P0.05);10mg/kg花姜酮组上述指标较SAP组显著降低(P0.05);20mg/kg花姜酮组AMY、Cr和胰腺组织病理学评分较SAP组显著降低(P0.05),但ALT与SAP组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:花姜酮治疗大鼠SAP,以10 mg/kg静脉注射比较安全、有效。     

圣草酚通过激活Nrf2/HO-1通路减轻大鼠缺氧缺血性脑损伤

目的:探讨圣草酚(eriodictyol)在大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的作用及机制.方法:50只幼龄Wistar大鼠分为健康对照组、模型(HIBD)组、HIBD+eriodictyol 1 mg/kg组和HIBD+eriodictyol 2 mg/kg组和HIBD+eriodictyol 4 mg/kg组,每组...     

柚皮素通过下调Akt/mTOR信号通路抑制TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化

目的：基于网络药理学分析和转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾NRK-49F细胞模型探究温阳振衰颗粒的药物成分柚皮素通过蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路发挥抗纤维化作用的潜在机制。方法：网络药理学分析温阳振衰颗粒治疗肾纤维化的关键成分和作用靶点。Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测柚皮素对NRK-49F细胞的毒性作用，以及对TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化的影响。观察NRK-49F细胞形态变化；qRT-PCR实验检测NRK-49F细胞中纤维化相关因子I型胶原（Col I）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和纤连蛋白（FN）的mRNA表达；Western blot实验检测NRK-49F细胞中Col I、α-SMA、FN、Akt和mTOR的蛋白表达。结果：网络药理学的结果表明，温阳振衰颗粒的关键成分柚皮素可通过作用于Akt等靶点治疗肾纤维化。CCK-8实验结果显示，0～50μmol/L的柚皮素对NRK-49F细胞无明显毒性作用。50μmol/L的柚皮素可抑制TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化和增殖（P&...     

熊果苷调节Gas6/Axl信号通路对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的神经保护作用

目的 研究熊果苷通过调节Gas6/Axl信号通路对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠神经保护的作用。方法 采用Rice-Vannucci法构建HIBD新生大鼠模型,并将造模成功的48只新生大鼠随机分为Model组、低剂量熊果苷组（50 mg/kg）、高剂量熊果苷组（100 mg/kg）、高剂量熊果苷+Anticancer agent 109组（100 mg/kg+3.00 mg/kg Gas6/Axl抑制剂）;再选12只新生大鼠作为NC组。平衡木法对各组大鼠进行行为学评估;苏木精-伊红（H-E）染色检测大鼠脑组织病理损伤;TTC染色法检测脑梗死面积;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、脑源性神经营养因子（BDNF）的表达;Western blot检测大鼠海马组织中Gas6、磷酸化Axl(p-Axl)、Axl蛋白表达。结果 与Model组比较,低剂量熊果苷组和高剂量熊果苷组大鼠行为学评分降低,脑组织结构较正常,大鼠脑梗死面积减少,血清中IL-6、MDA表达减少,SOD、BDNF表达增加,Gas6、Axl蛋白表达增多,p-Axl...     

柚皮苷抑制大鼠心肌缺血/再灌注损伤诱导的细胞焦亡

目的:观察柚皮苷是否减轻心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)及其与细胞焦亡的关系。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术(sham)组、模型(MI/RI)组和低、中、高剂量(10、50和100 mg/kg)柚皮苷组。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min后再灌注2 h建立MI/RI模型。伊文思蓝-氯化三苯基四氮唑(TTC)复染检测心肌梗死面积,HE染色和Masson染色分析梗死病理变化,紫外分光光度法检测血清心肌损伤标志物和内源性抗氧化剂活性,ELISA法检测血清炎症因子和心肌组织丙二醛(MDA)含量。Western blot检测含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)和gasdermin D(GSDMD)的蛋白表达。结果:与sham组相比,MI/RI组血清心肌损伤标志物活性显著升高,炎症因子和心肌组织MDA含量显著增加,心肌梗死面积、心肌细胞破裂和细胞坏死显著增加,内源性抗氧化剂活性显著降低,心肌组织ASC、caspase-1、NLRP3和GSDMD蛋白表达显著增加(P0.05)。与MI/RI组相比,柚皮苷各组上述变化均明显减轻。结论:柚皮苷可减轻MI/RI,其机制可能与抑制MI/RI诱导的细胞焦亡有关。