小檗碱调节翼状胬肉成纤维细胞增殖能力的机制研究

目的:探讨小檗碱对体外培养翼状胬肉成纤维细胞增殖能力的影响及可能的作用机制。方法:通过对手术获取的翼状胬肉组织进行培养,获取翼状胬肉成纤维细胞。采用不同终浓度(0、20、40、80μmol/L)小檗碱对细胞进行诱导,检测小檗碱诱导后翼状胬肉成纤维细胞凋亡水平、线粒体膜电位和凋亡相关因子mRNA与蛋白表达水平变化。结果:小檗碱能够以剂量依赖的方式提高体外培养翼状胬肉成纤维细胞线粒体去极化水平、细胞凋亡比率、促凋亡基因Bax和Bad mRNA与蛋白的表达水平,降低Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平。结论:小檗碱可能通过提高体外培养翼状胬肉细胞线粒体去极化水平诱导胬肉细胞发生凋亡。     

翼状胬肉组织中CD34、AC133、STRO-1、C—KIT的表达

目的评估源白骨髓的干细胞与翼状胬肉发病的相关性,探寻翼状胬肉的发病机制。方法选择翼状胬肉头部达到瞳孔缘的病例12例（12眼）,其中男6例,女6例;年龄51～66岁;原发性翼状胬肉8例,复发性翼状胬肉4例,均长于鼻侧。对照组材料来自同一眼球、距翼状胬肉边缘约10mm的正常球结膜组织。采用EnVision免疫组织化学法检测骨髓干细胞标志物来源的CD34、AC133、STRO-1、C-KIT的表达。结果光镜下可见翼状胬肉组织中有大量带有骨髓干细胞或祖细胞阳性标志物来源的细胞,翼状胬肉组织头部阳性表达更强。4种阳性细胞的分布及细胞形态类似。C—KIT阳性表达细胞聚集于翼状胬肉上皮基底组织和基质组织。上皮基底部阳性细胞呈圆形或椭圆形,而在基质组织中呈纺锤形且主要分布于血管周围。CD34阳性表达细胞主要分布于翼状胬肉组织上皮基底层,在血管内皮也有阳性表达,类似于C—KIT,但比C—KIT上皮层组织阳性细胞少。细胞形态在上皮基底部呈圆形或椭圆形。AC133阳性表达细胞主要分布于上皮层,基质和血管内皮中也有阳性表达,形态类似CD34和C-KIT。STRO-1阳性表达细胞的分布不同,主要见于基质层,阳性细胞形态呈纺锤形,而上皮层中未见表达。各种因子的表达在原发性和复发性翼状胬肉间无明显差别。对照组切片中标志物的表达均呈阴性。结论带有源白骨髓干细胞阳性标志物的细胞在翼状胬肉的发病和术后复发过程中可能起重要作用。     

翼状胬肉组织中ATP结合盒转运蛋白B5的表达变化及意义

背景 角膜缘干细胞(LSCs)缺乏可引起多种眼表疾病,如翼状胬肉等.ATP结合盒转运蛋白B5(ABCB5)是新发现的特异性LSCs标志物,研究ABCB5在翼状胬肉组织中的表达变化对于翼状胬肉的防治具有重要的临床意义. 目的 研究ABCB5在翼状胬肉组织中的表达变化,探讨其在翼状胬肉发生和发展中的作用.方法 收集2015年1-11月在解放军474医院行原发性翼状胬肉切除术的手术标本37例,同期收集年龄匹配的行斜视矫正术和视网膜脱离复位术患者的正常结膜组织22例.采用免疫组织化学法检测ABCB5在翼状胬肉组织标本中的表达和定位,分别采用Western blot和实时荧光定量PCR法检测翼状胬肉标本中ABCB5蛋白及其mRNA的相对表达量,并与正常结膜标本进行比较. 结果 ABCB5蛋白表达于所有22例正常结膜复层扁平细胞的细胞质和细胞核中,以基底层细胞中表达更为明显,呈现明显极性.在37例翼状胬肉标本中,可见ABCB5阳性表达者34例,占91.89％,ABCB5表达阴性者3例,占8.11％.正常结膜组和翼状胬肉组ABCB5蛋白相对表达量分别为0.90±0.31和0.59±0.41,ABCB5 mRNA表达量分别为1.01±0.26和0.65±0.32,翼状胬肉组ABCB5蛋白和mRNA的相对表达量均明显低于正常结膜组,差异均有统计学意义(t=-0.266,P=0.011;t=-4.560,P=0.000). 结论 LSCs标志物ABCB5的表达下调提示LSCs的减少和缺失与翼状胬肉的发生和发展有关,提示ABCB5检测可能作为翼状胬肉发生和发展、术后复发及疗效评估的观察指标之一,也可能成为翼状胬肉的治疗靶点.     

基质细胞衍生因子及其受体CXCR4在翼状胬肉的异常表达

目的探讨基质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4在翼状胬肉的表达及意义。方法用免疫组织化学染色方法对4例正常人结膜组织、11例初发性翼状胬肉和9例复发性翼状胬肉组织中SDF-1/CXCR4蛋白的表达进行检测。结果在正常结膜组织中SDF-1/CXCR4仅表达于基底部上皮细胞;胬肉组织中有17例,全层上皮细胞均有SDF-1/CXCR4的表达,胬肉基质层中浸润的炎性细胞、血管内皮细胞均有CXCR4的蛋白表达;3例初发性翼状胬肉表达方式与正常结膜相似。结论翼状胬肉组织SDF-1及其受体CXCR4蛋白表达增加;上皮细胞分泌的SDF-1通过与其受体CXCR4的相互作用可能参与了翼状胬肉的血管形成和炎性细胞浸润。     

β-catenin在翼状胬肉成纤维细胞中的表达

目的:β-catenin在正常的细胞粘附和wnt信号通路中发挥重要功能,本文探讨其在翼状胬肉组织及成纤维细胞中的表达及TGF-β1对其的影响。方法:通过组织块培养获取正常球结膜和翼状胬肉成纤维细胞并传至第4代,用10μg/LTGF-β1作用于细胞。抗β-catenin抗体对体内取出组织和培养的细胞行免疫组化染色;免疫印迹法检测培养成纤维细胞中β-catenin的表达情况。结果:免疫组化显示翼状胬肉成纤维细胞中β-catenin阳性着色强于正常结膜成纤维细胞。β-catenin在胬肉组织中较多,且多分布于上皮下纤维血管组织,上皮染色较少。体外培养见翼状胬肉成纤维细胞的生长较正常结膜成纤维细胞快、增殖能力强。免疫印迹法显示在翼状胬肉成纤维细胞蛋白中β-catenin的特异性阳性条带灰度值高于正常球结膜成纤维细胞蛋白。TGF-β1能促进翼状胬肉成纤维细胞中的β-catenin蛋白表达。结论:β-catenin在翼状胬肉组织及其成纤维细胞中的表达增高,提示β-catenin与翼状胬肉的发病有关。     

Bcl-2、Bax、Ki67在原发性翼状胬肉组织中的表达研究

目的：观察Bcl-2、Bax、Ki67在原发性翼状胬肉和正常球结膜组织中的表达。

方法：将手术切除的原发性翼状胬肉和正常球结膜组织进行固定、石蜡包埋、切片,利用免疫组织化学染色方法分析Bcl-2(B细胞淋巴瘤-2)、Bax(与Bcl-2相关的X蛋白)、Ki67(细胞核相关抗原)在其中的表达情况。

结果：Bcl-2、Bax、Ki67在原发性翼状胬肉组织中的阳性表达率分别为14.73%、7.00%、12.73%,在正常球结膜组织阳性表达率分别为4.00%、6.00%、0,其中Bcl-2、Ki67在原发性翼状胬肉组织头部上皮中的表达明显高于颈部和体部。

结论：Bcl-2、Ki67在原发性翼状胬肉组织中呈高表达,且在胬肉头部表达最高,在正常球结膜组织中呈低表达; Bax在原发性翼状胬肉和正常球结膜组织中表达无明显差异,提示细胞凋亡失衡和异常增殖可能是原发性翼状胬肉发生发展的机制之一。     

医用生物蛋白胶在翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术中的应用

目的:探讨医用生物蛋白胶(biomedical fibrin glue,BFG)在翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术中应用的临床意义。方法:收集2009-06/2010-12我院门诊翼状胬肉患者59例60眼,分为两组,使用生物蛋白胶组34眼和未使用蛋白胶对照组26眼,均行翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术,观察手术时间、术后结膜植片贴附情况,球结膜充血以及患者不适症状。结果:生物蛋白胶组手术时间(13.6±3.5min)明显短于对照组(22.3±5.2min),术后2wk内(拆线前),生物蛋白胶组术眼疼痛、异物感和流泪等局部刺激症状均显著轻于对照组,两组术后均未发生植片移位并发症。生物蛋白胶组术后干细胞移植片贴附紧密,对照组有5眼(19%)植片贴附差,出现结膜后退,巩膜外露。生物蛋白胶组植片愈合良好,局部无明显结膜瘢痕形成;对照组均出现不同程度的缝线刺激性结膜瘢痕。术后6mo随访期内两组均未见翼状胬肉复发。结论:医用生物蛋白胶在翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植手术中的应用可以缩短结膜伤口愈合的时间,促进角膜缘干细胞结膜植片贴附,使用中未见致敏反应的产生。     

CD44、SOX9、MMP9、Vimentin在翼状胬肉中的表达及其意义

目的 研究CD44、SOX9、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase,MMP9)及波形蛋白(Vimentin)在原发性翼状胬肉组织中的表达及其意义.方法 对25例原发性胬肉组织和5例正常结膜组织的组织切片用CD44、SOX9、MMP9及Vimentin蛋白的抗体进行免疫组织化学染色,观察上述蛋白在翼状胬肉组织和正常结膜组织组织内的表达,对结膜上皮内CD44和SOX9染色阳性的细胞进行计数,并比较翼状胬肉组织与正常结膜组织内的细胞阳性率.结果 HE染色结果显示,正常结膜和翼状胬肉组织均由上皮层和固有层组成;正常结膜的上皮层次较少,固有层含有少量血管;翼状胬肉的上皮细胞层次明显增多,固有层内含有密集分布的血管.免疫组织化学染色阳性细胞计数的统计学数据表明,正常结膜组织内CD44阳性细胞率为15％±3％,翼状胬肉组织内为70％±15％;正常结膜组织内SOX9阳性细胞率为17％±4％,翼状胬肉组织内为75％±13％;两组的细胞阳性率差异均有显著统计学意义(均为P＜0.001).MMP9及Vimentin阳性细胞广泛分布于翼状胬肉组织的上皮及上皮下基质层内,在正常结膜组织内阳性细胞呈散在分布,翼状胬肉组织的免疫组织化学染色强度高于正常结膜组织.结论 CD44、SOX9、MMP9及Vimentin在翼状胬肉组织中高表达,可能在翼状胬肉的发生、发展中起着重要作用.     

二种手术方法治疗翼状胬肉疗效分析

目的 比较翼状胬肉切除联合生物羊膜移植与翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植对原发性翼状胬肉的治疗效果.方法 翼状胬肉患者186例190眼.分为A、B二组,A组60眼翼状胬肉切除联合生物羊膜移植术;B组130眼翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术.术后随访6-24个月,观察翼状胬肉复发率.结果 A组60眼中9眼复发,复发率15.0％; B组 130眼中7眼复发,复发率5.38％,x2=4.922,P=0.03,差异有统计学意义.结论 在防止胬肉复发方面,角膜缘干细胞移植组优于生物羊膜移植组.     

新鲜羊膜与生物羊膜治疗翼状胬肉的比较研究

目的采用新鲜羊膜和生物羊膜治疗翼状胬肉,评价其疗效。方法60例（60眼）翼状胬肉应用新鲜羊膜移植治疗;60例（60眼）应用生物羊膜移植治疗。结果新鲜羊膜组60眼羊膜均成活,翼状胬肉复发率为0;生物羊膜组60眼羊膜有2眼部分融解,翼状胬肉复发率为3．33％。结论新鲜羊膜和生物羊膜均可以有效重建眼表,降低翼状胬肉的复发率。     

Strabisme Alternant - Etude clinique - traitement

The author defines motor and sensory alternation: the term alternation should not be used in isolation, it should always be accompanied by the name of the parameter concerned. Sensory alternation is always found together with motor alternation but the reverse is not true.The examining criteria for a diagnosis of sensory alternation are given, sensory alternation must not be confused with alternating inhibition. Working from clinical observations of cases of motor alternating strabismus, the author selects 2 types of binocular sensory relations which allow one to differentiate between:- cases of primary alternating strabismus- cases of secondary alternating strabismusThese forms will develop in different ways; in both cases a cure is possible providing that the right treatment is prescribed and once prescribed carefully followed, etc. It is always a case of serious forms of strabismus whose developmental period is spread over several years.According to the authors, the frequency of cases of true primary strabismus is from 1–3%, the frequency of cases of secondary alternating strabismus varies according to the type of therapy practised on cases of monocular strabismus with amblyopia. These latter will become cases of alternating strabismus under the influence of certain types of therapy carried out over several years (penalization, rocking, alternated occlusion, etc...).Experimental data on kittens confirm clinical data; kittens placed in abnormal environments during the sensitive period will show modification in the distribution of cortical cells and the absence of binocular cells (either because the excitation of the two eyes was not simultaneous, or not identical: artificial strabismus, occlusion, opaque glasses). This disturbances become irreversible after a certain period of exposure (a function of age, length of exposure, etc...).It is thus necessary to bear in mind: 1) the iatrogenic risks of certain orthoptic treatments, 2) the necessity for a binocular form of treatment as soon as possible, as once a certain stage is passed, cortical plasticity diminishes and the elaboration of normal binocular relations becomes impossible.

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Effects of Adenosine Agonists on Intraocular Pressure and Aqueous Humor Dynamics in Cynomolgus Monkeys

The effects of single or multiple topical doses of the relatively selective A₁adenosine receptor agonists (R)-phenylisopropyladenosine (R-PIA) and N⁶-cyclohexyladenosine (CHA) on intraocular pressure (IOP), aqueous humor flow (AHF) and outflow facility were investigated in ocular normotensive cynomolgus monkeys. IOP and AHF were determined, under ketamine anesthesia, by Goldmann applanation tonometry and fluorophotometry, respectively. Total outflow facility was determined by anterior chamber perfusion under pentobarbital anesthesia. A single unilateral topical application of R-PIA (20–250 μg) or CHA (20–500 μg) produced ocular hypertension (maximum rise=4.9 or 3.5 mmHg) within 30 min, followed by ocular hypotension (maximum fall=2.1 or 3.6 mmHg) from 2–6 hr. The relatively selective adenosine A₂antagonist 3,7-dimethyl-1-propargylxanthine (DMPX, 320 μg) inhibited the early hypertension, without influencing the hypotension. Neither 100 μg R-PIA nor 500 μg CHA clearly altered AHF. Total outflow facility was increased by 71% 3 hr after 100 μg R-PIA. In conclusion, the early ocular hypertension produced by topical adenosine agonists in cynomolgus monkeys is associated with the activation of adenosine A₂receptors, while the subsequent hypotension appears to be mediated by adenosine A₁receptors and results primarily from increased outflow facility.