过氧化物还原酶3在胚胎停育患者绒毛及蜕膜组织中的表达变化

目的探讨过氧化物还原酶3（PRX3）在胚胎停育患者绒毛及蜕膜组织中的表达变化。方法选取因胚胎停育实施人工流产的患者60例作为胚胎停育组,同期因意外怀孕要求终止妊娠的非胚胎停育患者60例作为对照组。人工流产术后,均无菌操作留取两组患者的绒毛及蜕膜组织。采用实时定量PCR法检测绒毛及蜕膜中PRX3mRNA表达水平。采用Westernblot法检测绒毛及蜕膜中PRX3蛋白表达水平。结果胚胎停育组患者绒毛及蜕膜组织中PRX3mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论胚胎停育患者存在氧化应激状态,PRX3在绒毛及蜕膜组织中具有重要的抗氧化功能。     

TLR4在胚胎停育蜕膜组织中的表达及其意义

目的 了解TLR4在人早孕及胚胎停育蜕膜组织中的表达差异.方法 选取64例早孕妇女作为研究对象,健康早孕人工流产32例为对照组(A组),胚胎停育(稽留流产)32例,分别留取其宫蜕膜组织.根据其HE病理切片,将胚胎停育者再分成炎症组(B组)及蜕变组(C组)各16例,应用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)及免疫印记( Western-Blot,WB)检测TLR4蛋白在蜕膜组织中表达部位及定量差异.结果 TLR4在3组绒毛及蜕膜的合体滋养细胞、细胞滋养细胞、毛细血管内皮细胞的胞浆、蜕膜细胞呈不同程度的阳性染色.胚胎停育炎症组的蜕膜组织TLR4表达高于早孕对照组,蜕变组蜕膜组织TLR4表达低于对照组.结论 TLR4表达在稽留流产发病中具重要作用,母体蜕膜组织TLR4蛋白的平衡对早孕妊娠维持起重要作用.     

胚胎停止发育患者绒毛中细胞凋亡的表达意义

目的研究胚胎停止发育患者绒毛及蜕膜组织中细胞凋亡与细胞增殖的表达和临床意义。方法收集孕3个月以内胚胎停止发育患者绒毛、蜕膜组织和正常早孕绒毛、蜕膜组织各30例。用DNA末端缺口标记技术检测绒毛和蜕膜组织中的凋亡细胞,用免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原。结果①胚胎停止发育患者的绒毛及蜕膜组织中PCNA的阳性表达显著减少,与正常早孕对照组比较有显著性差异（P〈0．01）。②胚胎停止发育患者的绒毛及蜕膜组织内细胞凋亡指数显著增加,与正常早孕对照组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论正常早孕和胚胎停止发育患者绒毛、蜕膜组织内均可见到PCNA阳性表达与凋亡细胞,细胞的增殖和凋亡的平衡与维持妊娠密切相关,平衡失调可能是引起胚胎停止发育的主要病理过程。     

MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究

目的  通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126（miR-126）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法  收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果  ①两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。②胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。③胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论  ①胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。②VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。

     

E-钙粘蛋白在胚胎停育患者绒毛和蜕膜中的差异性表达

目的:探讨E-钙粘蛋白(E-Cad)与胚胎停育的关系。方法:选取胚胎停止发育妇女为实验组,同期正常早孕自愿要求流产的妇女为对照组,分别留取其绒毛和蜕膜组织标本,采用荧光实时定量PCR(Real time-PCR)对标本E-Cad mRNA转录水平进行分析。结果:在绒毛标本中,E-Cad在实验组中mRNA表达水平(0.875±0.07)显著高于对照组(0.337±0.11);在蜕膜标本中,实验组E-Cad mRNA的表达水平(0.927±0.12)显著高于对照组(0.512±0.08)。结论:E-Cad的差异表达可能参与了胚胎停育的发生及发展,蜕膜和绒毛组织中E-Cad的高表达可能是导致早期胚胎停育的原因之一。     

米非司酮对人绒毛和蜕膜内纤维粘连蛋白表达的影响

目的观察米非司酮终止早孕后,绒毛和蜕膜内纤维粘连蛋白（FN）的表达情况。方法宫内早孕要求终止妊娠且孕龄〈49d的妇女,分为药物完全流产组（n=15）、药物不全流产组（n=15）和对照组（手术流产组,n=15）。两药物流产组取服药（米非司酮配伍米索前列醇）第3天排出的绒毛和蜕膜组织,对照组取负压吸引出的绒毛和蜕膜组织。采用免疫组化法测定绒毛和蜕膜组织中FN的表达。结果对照组绒毛和蜕膜FN的阳性表达率明显高于两药物流产组（P〈0．017）;其中,不完全流产组绒毛和蜕膜组织中FN的阳性表达率高于完全流产组（P〈0．017）。结论米非司酮可通过降低早孕妇女绒毛和蜕膜中FN的表达,改变胚胎宫内发育的内环境,在细胞外基质水平发挥抗早孕的作用。     

VEGF在早期自然流产患者血清及绒毛组织中的表达及临床意义

目的观察孕早期自然流产患者血管内皮生长因子(VEGF)在血清及绒毛组织中的表达水平,探讨VEGF与妊娠关系。方法选择孕早期自然流产患者25例为观察组,正常早期妊娠妇女25例为对照组,应用ELISA法检测血清VEGF含量,采用免疫组织化学方法测定各组孕妇绒毛组织VEGF的表达。结果正常早孕组与孕早期胚胎停育患者血清及绒毛VEGF表达比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 VEGF表达异常与复发性流产具有相关性,其表达水平升高可能是导致孕早期胚胎停育的原因之一。     

稽留流产患者绒毛组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达及意义

目的:探讨稽留流产绒毛组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及临床意义。方法:经B超及β-hCG动态监测证实为稽留流产患者30例,选取同期经B超证实为活胎,因非意愿妊娠在门诊要求行人工流产的早孕妇女30例为对照组。采用免疫组织化学方法比较两组绒毛组织中HIF-1α的表达。结果:HIF-1α的表达主要位于绒毛滋养细胞胞浆和胞核;与正常早孕妇女绒毛组织相比较,稽留流产绒毛组织中HIF-1α的阳性表达明显低于对照组(P<0.01)。结论:HIF-1α在绒毛组织中的低表达可能与胚胎停育相关。     

米非司酮对早孕绒毛蜕膜组织细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨米非司酮对早孕绒毛蜕膜组织细胞增殖及凋亡的影响。方法选取2012年6月-2013年12月该院收治的自愿采用米非司酮药物流产的早孕妇女48例作为研究组,同期在自愿进行人工吸宫流产的早孕妇女50例作为对照组,比较分析两组患者绒毛蜕膜组织中Bcl-2、Bax、Fas、Survivin蛋白表达情况及细胞增殖指数和凋亡指数。结果与对照组相比,研究组患者绒毛蜕膜组织中Bax、Fas以及Survivin蛋白的阳性表达明显提高(P<0.05),而两组Bcl-2蛋白的阳性表达变化不明显(P>0.05)。与对照组相比,研究组患者绒毛蜕膜凋亡指数均明显提高(P<0.05),两组绒毛蜕膜的增殖指数变化不明显(P>0.05)。讨论米非司酮抗早孕机制可能是通过对基因Bax、Fas以及Survivin蛋白表达的调控,以达到诱导早孕绒毛蜕膜组织细胞凋亡,从而起到抗早孕的临床作用。     

Stathmin在早期自然流产组织中的表达

目的探讨细胞周期调节蛋白Stathmin与早期自然流产发生的相关性。方法选择早期自然流产和早孕人工流产患者的绒毛和蜕膜组织各30例,采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)和免疫组织化学法检测两组患者绒毛和蜕膜组织中Stathmin的表达。结果 Stathmin主要表达于胎盘绒毛和子宫蜕膜组织的细胞浆中,Stathmin在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达均显著低于早孕人工流产患者,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Stathmin可能与早期自然流产的发生相关。     

早期自然流产患者PAF－R及VEGF表达水平的研究

目的：探讨早期自然流产患者蜕膜绒毛组织中血小板活化因子受体（PAF—R）与血管内皮生长因子（VEGF）的表达水平。方法：将2008年1月至2009年12月期间在广东省深圳市龙岗区第二人民医院妇产科收治的60例患者分为3组：稽留流产组（I组）、先兆流产（Ⅱ组）、正常早孕组（Ⅲ组）,每组各20例。采用积分光度法及免疫组织化学法对3组患者蜕膜绒毛组织中PAF．R、VEGF的表达情况进行分析。结果：（1）PAF-R、VEGF在3组患者蜕膜绒毛组织中的表达均呈阳性。（2）PAF-R、VEGF表达水平：I组〈Ⅱ组〈Ⅲ组（均P〈0．05）。结论：PAF-R、VEGF表达降低普遍存在于早期自然流产患者中,PAF—R、VEGF表达的降低可能是导致早期自然流产的重要因素。     

巨噬细胞移动抑制因子mRNA在早期自然流产者蜕膜组织中的表达

目的研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)mRNA在早期自然流产者蜕膜组织中的表达,并探讨其与早期自然流产的关系。方法选择2010年11月至2012年1月深圳市罗湖区人民医院收治的自然流产者40例(自然流产组),同期选择要求进行人工流产的健康早孕妇女40例(正常妊娠组)。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测蜕膜组织中MIF mRNA的表达水平,并进行比较。结果自然流产组蜕膜组织MIF mRNA相对定量表达为1.19±0.25,显著低于正常妊娠组1.33±0.27,两组比较差异有统计学意义(t=2.502,P<0.01)。结论 MIF mRNA在早期自然流产患者蜕膜组织中表达水平下降,说明其可能在早期自然流产的发生、发展中起重要作用。     

不明原因早期自然流产蜕膜组织中肿瘤坏死因子受体1的表达

目的 :探讨肿瘤坏死因子受体Ⅰ (tumornecrosisfac torreceptor 1,TNFR1)在蜕膜中的表达及其与不明原因自然流产的关系 .方法 :采用免疫组化方法 ,对 31例妊娠 6～ 10wk不明原因早期自然流产患者 (流产组 )和 30例同期妊娠的健康妇女 (对照组 )蜕膜组织中TNFR1的表达进行定位和半定量检测 .结果 :流产组蜕膜腺体上皮、间质和血管内皮细胞TNFR1表达率分别为 77.4 % ,93.5 %和 6 7.7% ,对照组分别为 96 .7% ,70 .0 %和 2 3.3% .腺体上皮细胞TNFR1表达率在 2组之间无显著性差异 (P =0 .0 5 2 9) ,流产组蜕膜间质及血管内皮细胞TNFR1表达率均高于对照组 ,均有显著性差异(P =0 .0 2 17,P =0 .0 0 0 8) ;蜕膜腺体上皮细胞TNFR1阳性表达强度低于对照组 ,有显著性差异 (P <0 .0 1) ,其间质TN FR1表达强度高于对照组 ,有显著性差异 (P <0 .0 1) .血管内皮细胞TNFR1阳性表达强度在 2组之间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) .结论 :TNFR1在蜕膜间质及血管内皮细胞中表达水平的升高及其在腺体上皮细胞中表达水平的下降 ,可能与不明原因早期自然流产有关     

不明原因早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中Bcl-2和Fas蛋白的表达

目的探讨Bcl-2和FAS蛋白在人不明原因早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化SABC法和图像分析检测Bcl-2和FAS蛋白在孕5~9周绒毛和蜕膜组织中的分布和变化规律。结果 Bcl-2和Fas蛋白均主要分布于绒毛合体滋养层、细胞滋养层和蜕膜细胞的胞质内。Bcl-2蛋白在正常妊娠组的水平显著高于自然流产组（P（0.05）,Fas蛋白在自然流产组的水平显著高于正常妊娠组（P（0.05）。结论 Bcl-2和FAS蛋白在人不明原因早期自然流产过程中可能发挥重要作用。     

组织蛋白酶B和L在早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达

目的 观察组织蛋白酶B（cathepsin B，CB）和L（cathepsin L，CL）在人早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达．探讨它们在胚胎着床及发育过程中的作用。方法 研究组包括：正常早期妊娠行人工流产者30例、早期自然流产者25例、正常分泌期子宫内膜lO例和葡萄胎15例。应用免疫组织化学法检测CB和CL的表达。结果 CB、CL主要阳性表达于正常早期妊娠滋养层细胞和蜕膜细胞：CB在正常分泌期内膜．正常早期妊娠蜕膜、自然流产蜕膜中的阳性率表达分别为10％（1／10）、83.3％（25／30）、32．0％（8／25）；CL则分别为0、63.3％（19／30）、32．0％（8／25）；CB和CL在3组间的表达有显著性差异（P〈0．05）。CB在早期妊娠绒毛、自然流产绒毛、葡萄胎组织中表达强阳性率分别为10．0％（3／30）、0.66．7％（10／15）；CL则分别为26．7％（8／30）、4．0％（1／25）、80．0％（12／15）。CB和CL在3组间的表达有显著性差异（P〈0．05）。结论 CB和CL在正常和异常妊娠蜕膜和绒毛中的表达差异提示它们胚胎着床过程中可能起着很重要的作用。     

组织蛋白酶B和L在早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达

目的 观察组织蛋白酶B(cathepsinB,CB)和L(cathepsinL,CL)在人早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达,探讨它们在胚胎着床及发育过程中的作用。方法 研究组包括:正常早期妊娠行人工流产者30例、早期自然流产者25例、正常分泌期子宫内膜10例和葡萄胎15例。应用免疫组织化学法检测CB和CL的表达。结果 CB、CL主要阳性表达于正常早期妊娠滋养层细胞和蜕膜细胞。CB在正常分泌期内膜、正常早期妊娠蜕膜、自然流产蜕膜中的阳性率表达分别为10%(1/10)、83.3%(25/30)、32.0%(8/25);CL则分别为0、63.3%(19/30)、32.0%(8/25);CB和CL在3组间的表达有显著性差异(P<0.05)。CB在早期妊娠绒毛、自然流产绒毛、葡萄胎组织中表达强阳性率分别为10.0%(3/30)、0、66.7%(10/15);CL则分别为26.7%(8/30)、4.0%(1/25)、80.0%(12/15)。CB和CL在3组间的表达有显著性差异(P<0.05)。结论 CB和CL在正常和异常妊娠蜕膜和绒毛中的表达差异提示它们胚胎着床过程中可能起着很重要的作用。     

诱导性共刺激分子表达与原因不明复发性流产的相关性研究

目的 探讨诱导性共刺激分子(EOS)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系.方法 采集10例诊断为难免流产的URSA患者(URSA组)和10例正常早孕妇女(正常对照组)的部分蜕膜组织和外周血,采用流式细胞术检测蜕膜组织和外周血CD3+和CD4+T细胞中ICOS的表达;Real-Time PCR检测蜕膜组织中ICOS mRNA的表达情况.结果 URSA组蜕膜组织中ICOS+ CD3+T淋巴细胞亚群所占百分比为(0.612±0.693)％,显著高于正常对照组的(0.056±0.103)％,差异有统计学意义(P＜0.001).URSA组外周血ICOS+ CD4+T淋巴细胞亚群所占百分比为(1.943±0.762)％,显著高于正常对照组的(0.221±0.127)％,差异有统计学意义(P＜0.001).URSA组蜕膜组织中ICOS mRNA的相对表达量较正常对照组显著升高[(9.875±1.464)vs(2.701±1.737)],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 蜕膜组织中ICOS的表达异常与URSA的发病具有密切关系.     

绒毛组织mTNFR1的表达与不明原因早期自然流产的关系

目的:探讨早孕绒毛组织中肿瘤坏死因子受体1(mTNFR1)的表达水平及其与不明原因早期自然流产的关系。方法:采用免疫组化技术,对31例妊娠6～10周不明原因早期自然流产患者(流产组)和30例同期妊娠的健康妇女(对照组)绒毛组织中mTNFR1的表达进行定位和半定量检测。结果:流产组绒毛间质、血管内皮、细胞滋养层及合体滋养层细胞mTNFR1表达率分别为100.0%(31/31)、80.7%(25/31)、100.0%(31/31)和90.3%(28/31),对照组分别为75.0%(18/24)、58.3%(14/24)、100.0%(30/30)和95.8%(23/24)。流产组绒毛间质mTNFR1阳性表达率明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.01)。比较mTNFR1在两组各细胞亚群中表达强度的差异,发现流产组绒毛间质细胞的TNFR1的表达强度也明显高于对照组,差异具有显著性意义(P<0.001);流产组绒毛血管内皮细胞、合体滋养细胞和细胞滋养细胞mTNFR1的表达强度虽有增强,但与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:流产组绒毛间质细胞mTNFR1阳性表达水平升高,可能导致绒毛组织间质细胞功能发生改变或损害,破坏母胎界面免疫平衡状态,与不明原因早期自然流产的发生可能有关。     

绒毛滋养细胞染色体分析及临床应用

目的建立绒毛滋养细胞染色体核型分析方法,用于探讨早孕期自然流产的病因。方法通过体外细胞培养获取较多的绒毛滋养细胞中期分裂相,制备染色体片进行核型分析,观察早孕期流产绒毛滋养细胞染色体畸形的发生率。结果成功建立了滋养细胞染色体核型分析方法,58．3％（21／36）的早孕期自然流产患者滋养细胞染色体异常。结论开展流产绒毛滋养细胞染色体核型分析,对于明确早孕期自然流产病因具有重要的临床价值。     

IL-17A、NF-κB与PR在不明原因早期自然流产蜕膜组织中的表达及意义

目的探讨白细胞介素17A（IL-17A）、核因子κB（NF-κB）、孕激素受体（PR）与自然流产的关系。方法随机选取30例早期自然流产患者作为流产组,30例正常早孕人工流产孕妇为对照组。酶联免疫吸附法（ELISA法）检测蜕膜组织中IL-17A、NF-κB与PR蛋白的表达;免疫组化法检测IL-17A、NF-κB与PR在蜕膜组织中的表达,对其进行定位、半定量分析,并对其之间的相互关系进行分析。结果①流产组蜕膜组织中IL-17A和NF-κB蛋白表达水平高于对照组,PR蛋白表达水平低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。②流产组胞质中IL-17A的表达高于对照组（P〈0．05）;流产组核内NF-κB的表达高于对照组（P〈0．05）,胞质中NF-κB的表达低于对照组（P〈0．05）;流产组胞质中和核内PR的表达低于对照组（P〈0．05）。③胞质中IL-17A与胞核中NF-κB呈正相关（r=0．500,P〈0．05）,与胞质中NF-κB呈负相关（r=-0．499,P〈0．05）;核内NF-κB与核内PR呈负相关（r=-0．513,P〈0．05）,核内NF-κB和与胞质内PR呈负相关（r=-0．511,P〈0．05）。结论蜕膜组织中IL-17A表达增强可能与不明原因早期自然流产有关。蜕膜组织中IL-17A的活化可增加NF-κB表达,进而减少PR表达并减弱其功能,可能是其发病机制之一。