神经酰胺介导粒细胞凋亡机理初探

目的 观察神经酰胺对ＨＬ－６０及中性粒细胞（ＰＭＮ）凋亡产生的影响,探讨其在粒细胞发生过程中可能的调节作用。方法：采用ＤＮＡ凝胶电泳,流式细胞术,光镜及ＲＴ－ＰＣＲ等技术对细胞进行凋亡鉴定及相关基因ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｍＲＮＡ表达分析。结果 神经酰胺（ｃ２－ｃｅｒａｍｉｄｅ）肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）及长春新碱（Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）均可不同程度地诱导ＨＬ－６０及成熟ＰＭＮ产生凋亡,ＣＰＫ激活     

胶质瘤bcd—2基因表达水平与其细胞增殖和凋亡关系的研究

目的 探讨胶质瘤细胞ｂｃｌ－２基因表达水平与肿瘤恶性程度、细胞增殖活性及凋亡程度的关系。方法 以６９例不同级别的人胶质瘤组织为研究对象,用原位杂交及免疫组化染色ＡＢＣ法分别检测ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ、ｂｃｌ－２蛋白和增殖细胞核抗原（细胞增殖活性标记物）的表达,并用３’末标记法做原位细胞凋亡检测。结果 ６４例（９２．８％）表达ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ,６０例（８７．０％）表达ｂｃｌ－２蛋白,两者的表达水平呈正     

bcl—2癌基因反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸诱导HL60细胞凋亡

目的 不同浓度ｂｃｌ－２癌基因反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸９ＡＳ－ＰＳ－ＯＤＮ,ＡＳＰＯ）对ＨＬ６０细胞凋亡的诱导作用。方法 ＡＳＰＯ与ＨＬ６０细胞共培养后,用吖啶橙（ＡＯ）染色法,流式细胞仪ＤＮＡ倍体分析,电镜观察、ＤＮＡ片段电沪等方法进行观察。结果 ＡＳＰＯ组与正义组比较能特异诱导ＨＬ６０细胞的凋亡,且于培养２４５小时即可出现,此时ＡＳＰＯ５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ浓度各组的凋亡率分别为：（９．７     

人类bcl-2基因在小鼠NIH/3T3细胞中的作用观察

本实验探讨了人类ｂｃｌ－２基因对小鼠ＮＩＨ／３Ｔ３细胞增殖和存活能力的影响。结果表明，人类ｂｃｌ－２基因转染对正常培养条件下的细胞的增殖和存活能力无明显影响，但能增加细胞对血清撤退和ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＳ）两种致凋亡因素的抵抗作用。这一研究丰富了ｂｃｌ－２基因调控细胞凋亡的资料，并为深入研究奠定了基础     

bcl—2基因反义核酸对白血病细胞药物敏感性的影响

目的：探讨ｂｃｌ－２基因反义核酸对白血病细胞药物敏感性的影响。方法：应用细胞培养，免疫标记及流式细胞仪技术，检测了ｂｃ１－２基因反义寡脱氧核糖核苷酸（ＡＳＯＤＮ）和阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）对白血病Ｋ５６２和ＨＬ－６０细胞作用和ｂｃｌ－２基因表达。结果：Ａｒａ－Ｃ（１０μｍｏｌ／Ｌ）与ｂｃｌ－２ＡＳＯＤＮ同时作用比单独用Ａｒａ－Ｃ或Ａｒａ－Ｃ与正义寡脱氧核糖核苷酸（ＳＯＤＮ）细胞存活率显著减少（Ｐ＜０００１），并且流式细胞仪检测显示ｂｃｌ－２ＡＳＯＤＮ使ｂｃｌ－２蛋白阳性率降低。结论：ｂｃｌ－２基因反义寡核苷酸能抑制该基因表达，提高白血病细胞对Ａｒａ－Ｃ的敏感性     

反义bcl-2 DNA促进裸鼠荷人鼻咽癌细胞株CNE2-baxα凋亡

目的：在裸鼠活体水平上观察ｂｃｌ－２反义寡聚核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｉｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ,ＡＳＯＮ）对鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２－ｂａｘα凋亡的影响。方法;ＤＮＡ合成仪合成２２ｎｔ ＡＳＯＮ片段,ＲＴ－ＰＣＲ检测ｂｃｌ－２表达,电镜观察细胞凋亡。结果;反义ｂｃｌ－２ ＤＮＡ片段局部注射ＣＮＥ２－ｂａｘα致瘤组织,ＲＴ－ＰＣＲ检测肿瘤组织中ｂｃｌ－２表达被封闭,电镜观察视野下可见     

大肠癌和腺瘤中的细胞凋亡及其调控基因表达

目的通过观察结、直肠腺癌和腺瘤中的细胞凋亡及其调控基因ｐ５３、ｂｃｌ－２的表达状态，探讨细胞凋亡及其调控基因在大肠上皮恶性转化进程的不同阶段中的作用。方法利用ＤＮＡ缺口末端标记技术和ｐ５３、ｂｃｌ－２蛋白免疫组化染色，原位观察３２例大肠绒毛状腺瘤和３３例大肠乳头状腺癌中的凋亡细胞和ｐ５３、ｂｃｌ－２蛋白阳性表达细胞的密度与分布，以１５例非肿瘤大肠粘膜做为对照。结果腺瘤和腺癌中的凋亡细胞密度均显著高于非肿瘤粘膜（Ｐ＜０．０１）；腺瘤高于腺癌（Ｐ＜０．０１）。ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白的表达率和表达强度，腺癌和腺瘤高于非肿瘤粘膜（Ｐ＜０．０１），腺癌的表达强度也高于腺瘤（Ｐ＜０．０５）。腺瘤中ｂｃｌ－２蛋白表达阳性组的凋亡细胞密度显著低于ｂｃｌ－２阴性组（Ｐ＜０．０１）。结论细胞凋亡调控异常在大肠癌发病中可能起重要作用。ｂｃｌ－２蛋白在腺瘤和腺癌中均可抑制细胞凋亡，而突变型ｐ５３蛋白可能仅在腺癌中起抑制细胞凋亡的作用。     

维生素A对胸腺凋亡有关基因的影响

为观察营养缺乏及补充维生素Ａ（ＶＡ）对胸腺细胞凋亡有关基因的影响，采用原位杂交及免疫组化的方法观察了胸腺组织ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ，Ｆａｓ及Ｂａｘ蛋白的表达。结果表明营养缺乏的大鼠胸腺细胞ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显降低，而Ｆａｓ及Ｂａｘ蛋白的表达则明显增强；补充ＶＡ后大鼠胸腺ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显增强，Ｂａｘ蛋白的表达明显降低，而Ｆａｓ蛋白的表达无明显变化。本结果表明：营养缺乏时胸腺细胞凋亡增加导致免疫功能降低，补充ＶＡ可抑制细胞凋亡，可能是通过促进ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达，抑制Ｂａｘ蛋白的表达而起作用     

食管癌变过程中p53、c-myc、bcl-2表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨食管癌变过程中肿瘤抑制基因ｐ５３和癌基因ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２的变化及其与细胞凋亡的关系。方法：采用免疫组化法（ＡＢＣ）检测２７９例食管粘膜活检组织中ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２的表达以及细胞凋亡的变化。结果：从食管正常上皮到基底细胞增生、间变和癌，ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２免疫阳性表达率及细胞凋亡发生率和细胞凋亡指数（ＡＩ）均呈升高趋势，而且在同一阶段病变，ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ阳性表达时凋亡指数高于其阴性表达，而ｂｃｌ－２阳性表达时凋亡指数低于其阴性表达。结论：在食管癌变过程中可能有多种肿瘤抑制基因和癌基因参与，细胞凋亡在食管癌变过程中可能有重要的生物学意义。     

凋亡相关基因产物Fas抗原及bcl-2蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达

目的：了解Ｆａｓ 抗原及ｂｃｌ２ 蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法：用流式细胞技术对１４ 例乳头状甲状腺癌,１６例甲状腺腺瘤及３２ 例结节性甲状腺肿组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达进行检测。结果：上述３ 组织中均测到Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白。３ 种组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白表达没有统计学差异（Ｆ＝２．７８,Ｐ＞０．０５;Ｆ＝２．５６,Ｐ＞０．０５）。乳头状甲状腺癌组织Ｆａｓ 抗原表达与ｂｃｌ２ 蛋白表达有明显相关性（ｒ＝０．６４６,Ｐ＜０．０５）,其他两种组织中Ｆａｓ 抗原与ｂｃｌ２ 表达均无相关性（ Ｐ＞０－０５）。结论：上述３ 种组织中均有Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达,均参与了甲状腺肿瘤组织中细胞凋亡的调节。细胞凋亡异常与乳头状甲状腺癌的发生有密切关系。     

宫颈癌细胞增殖及凋亡与bcl-2表达的研究

本研究旨在探求宫颈癌变中细胞增殖和细胞凋亡的变化规律,以及凋亡出现频率与ｂｃｌ－２癌蛋白的关系。结果发现宫颈癌组织的增殖指数（ＰＩ）和凋亡指数（ＡＩ）明显高于正常宫颈组织和宫颈不典型增生组织（Ｐ＜０．０１）,而ＡＩ／ＰＩ显著低于两者（Ｐ＜０．０１）。ｂｃｌ－２癌蛋白常见于正常宫颈上皮和不典型增生上皮的基底细胞层,宫颈癌组织中其表达随临床期别升高呈下降趋势,ｂｃｌ－２阳性组的ＡＩ与阴性组无显著差异。证实宫颈癌变是细胞无限增殖,凋亡异常被抑制的结果。ｂｃｌ－２是宫颈癌变的早期特征,但不是调节细胞凋亡的唯一因素     

人甲状腺髓样癌内凋亡细胞检测和bcl-2、p53及Ki-67的免疫组化研究

目的：检测甲状腺髓样癌内凋亡细胞、ｂｃｌ－２、ｐ５３和Ｋｉ－６７，探讨其与患者的预后关系。方法：在２１例甲状腺髓样癌内，用ＤＮＡ末端标记方法检测凋亡细胞和用免疫组织化学技术检测ｂｃｌ－２、ｐ５３及Ｋｉ－６７的表达。结果：在２１例甲状腺髓样癌标本中，凋亡细胞ｂｃｌ－２、ｐ５３和Ｋｉ－６７的检出率分别为８１％，１００％，６２％和７１％。ｂｃｌ－２阳性物质位于肿瘤细胞的胞浆内，少数病例则位于膜上。ｐ５３蛋白阳性主要位于胞核内，少数病例也同时见于胞浆内。Ｋｉ－６７抗原主要位于肿瘤细胞核内。本研究结果表明，ｂｃｌ－２和肿瘤细胞凋亡之间有密切关系（Ｐ＜０．０１）。ｂｃｌ－２阳性细胞检出率较高的病例，凋亡细胞检出率则较低；反之，凋亡细胞检出率则较高。ｐ５３和Ｋｉ－６７阳性细胞检出率和细胞凋亡无相关性（Ｐ＞０．０５）。结论：ｂｃｌ－２具有抑制细胞凋亡的作用。上述各因素检测结果与患者存活率无统计学意义。ｂｃｌ－２肿瘤蛋白在甲状腺髓样癌中高表达，可作为该肿瘤的一个新的标记物，对预后的判断可能也有一定的意义     

鼻咽癌组织中bcl-2、bax和p53的表达及其与瘤细胞凋亡的关系

目的：了解鼻咽癌组织中瘤细胞ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达及其与瘤细胞凋亡指数（ａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｅｘ,ＡＩ）的关系。方法：对３８例未经治疗的鼻咽癌组织,应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测瘤细胞ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达;末端标记细胞死亡检测法（ＴＵＮＥＬ）计算癌细胞的凋亡指数。结果：（１）３７例（９７４％）中有９０％左右的瘤细胞呈ｂｃｌ２过表达;（２）３８例（１００％）中有７０％左右的瘤细胞过表达ｂａｘ;（３）２９例（７６３％）呈ｐ５３过表达;（４）３８例活检组织的平均ＡＩ为２６０２±２６４２／ＨＰＦ;（５）ＡＩ与ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达无相关性。结论：（１）本组大多数鼻咽癌组织的绝大部分瘤细胞均呈ｂｃｌ２和ｂａｘ高表达;（２）由于ｂｃｌ２和ｂａｘ的表达已在高水平达到相对平衡,因此在大多数人体鼻咽癌中它们可能并不起到介导瘤细胞凋亡的主导作用;（３）鼻咽癌组织中过表达的ｐ５３蛋白可能已失去了调节ｂｃｌ２和ｂａｘ的表达进而影响细胞凋亡的功能。     

细胞凋亡调控因素有关基因的研究

抑制细胞凋亡的基因主要是Ｂｃｌ－２基因和Ｂｃｌ－２相关基因（Ｂｃｌ－ＸＬ，ＭＣＬ－１），其编码的蛋白质能抑制细胞凋亡和延长细胞寿命，其抑细胞凋亡作用以Ｂｃｌ－２最为重要。促进细胞凋亡基因或因素较多，主要有Ｂｃｌ－２相关基因（Ｂａｘ，Ｂｃｌ－Ｘｓ）、ｐ５３肿瘤抑制基因、ｃ－ｍｙｃ原癌基因、ＴＧＦ－β、Ｆａｓ抗原及其配体，其中Ｂａｘ基因、ｐ５３基因与Ｂｃｌ－２基因在细胞凋亡的调控作用方面密切相关     

电离辐射与细胞凋亡

电离辐射所致细胞死亡的主要形式为细胞凋亡。细胞凋亡的基因调控机制精密而复杂,Ｐ５３、ｂｃｌ－２家族、Ｆａｓ系统、ｃ－ｍｙｃ、Ｐ３４ｃｄｃ２、ｃａｓｐａｓｅｓ等均参与辐射性细胞凋亡的调控。细胞凋亡是细胞内一系列凋亡蛋白酶激活的级联反应和细胞表面死亡接受外部信号调节的结果。辐射性细胞凋亡的滞后期因细胞种类而异,线性能量传递（ＬＥＴ）及辐射剂量影响细胞凋亡率。     

鼻咽癌组织中bcl—2,bax和p53的表达及其与瘤细胞？…

目的;了解鼻咽癌细胞中瘤细胞ｂｃｌ－２、ｂａｘ和ｐ５３的表达及其与瘤细胞凋亡指数的关系。方法：对３８例未经治疗的鼻咽癌组织,应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测瘤ｂｃｌ－２、ｂａｘ和ｐ５３的表达;末端标记细胞死亡检测法（ＴＵＮＥＬ）计算癌细胞的凋亡指数。结果：（１）３７例（９７．４％）中有９０％左右的瘤细胞呈ｂｃｌ－２过表达;（２）３８例（１００％）中有７０％左右的瘤细胞过表达ｂａｘ;（３）２９例（７６．３     

bcl－2终止apoptosis的机理

ｂｃｌ－２终止ａｐｏｐｔｏｓｉｓ的机理［英］／ＡｎｄｒｅｗＨＷ…／／Ｎａｔｕｒｅ，－１９９４，３６９．－２７２～２７３ｂｃｌ－２基因家族相互作用，从而决定了机体细胞的存亡。ｂｃＬ－２基因是抑制ａｐｏｐｔｏｓｉｓ（以下简写为ＡＰＯ）基因家族的原型，从滤...     

人神经母细胞瘤中bcl-2基因表达与肿瘤细胞凋亡间的关系及p16基因的表达

目的探讨人神经母细胞瘤中ｂｃｌ－２基因表达状况及与细胞凋亡的关系，以及ｐ１６基因的表达况状。方法应用原位杂交和免疫组化技术检测神经母细胞瘤中ｂｃｌ－２及ｐ１６两种基因的表达，并采用凋亡细胞原位检测方法对神经母细胞瘤组织切片中凋亡细胞数进行检测。结果原位杂交检测发现，２０例人神经母细胞瘤中，ｂｃｌ－２和ｐ１６基因表达阳性率均为９５％；免疫组化检测发现ｂｃｌ－２和ｐ１６蛋白表达阳性率均为１００％。χ２检验表明两种方法检测阳性率差异无显著性。凋亡细胞原位检测结果显示，肿瘤组织凋亡细胞数量随ｂｃｌ－２基因表达增强而减少。结论人神经母细胞瘤中ｂｃｌ－２基因有较普遍的表达，直接影响神经母细胞瘤中凋亡细胞的数量，ｐ１６基因未见明确的表达缺失。     

重症烧伤大鼠早期外周血单个核细胞凋亡的实验研究

目的：探讨烧伤后早期外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）凋亡的发生、变化规律及ｂｃｌ－２蛋白表达的变化。方法：应用流式细胞仪、ＤＮＡ凝胶电泳等手段观察烧伤大鼠ＰＢＭＣ凋亡发生的动力学变化、ｂｃｌ－２蛋白的表达及烧伤血清对细胞凋亡的影响。结果：烧伤后６ｈ起,ＰＢＭＣ凋亡率明显增加,随时间的推延呈增高趋势,此时ｂｃｌ－２蛋白表达下调;烧伤血清可以诱导单核细胞株Ｒａｗ２６４．７凋亡。结论：ＰＢＭＣ凋亡在严重烧伤的免疫功能紊乱方面起重要作用,而ｂｃｌ－２基因下调可能是重症烧伤早期ＰＢＭＣ细胞凋亡的分子机制之一;烧伤血清含有（或缺乏）某种物质,可以介导细胞凋亡。     

高温对神经细胞凋亡及bcl—2及bax表达的影响

通过神经细胞原代培养并给予高温刺激,应用ＴＵＮＥＬ检测、免疫细胞化学和图像分析技术,研究了高温对神经神经调亡及凋亡相关基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ表达状况的影响。结果方法可在原位检测单个凋亡细胞,且较敏感,高温处使细胞凋亡数明显增加,ｂｃｌ－２、ｂａｘ出现异常表达。表明高温可诱发圾代培养神经细胞凋亡,ｂｃｌ－２、ｂａｘ发挥作用。